全 文 ：第 30卷 第 5期
2009年　 10月 河 南 科 技 大 学 学 报 :自 然 科 学 版JournalofHenanUniversityofScienceandTechnology:NaturalScience
Vol.30 No.5
Oct. 2009
基金项目:河南省重大科技攻关项目(62000168)
作者简介:王新胜(1978-),男 ,河南开封人 ,讲师.
收稿日期:2009-06-24
文章编号:1672-6871(2009)05-0067-03
伏牛山区野葛与粉葛药材质量综合研究
王新胜1 ,吴艳芳 2 ,张延萍 1 ,牛睿祺 1 ,时清亮 1
(1.河南科技大学 化工与制药学院 , 河南 洛阳 471003;2.新乡医学院 药学院 ,河南 新乡 453003)
摘要:以《中国药典》法测定野葛(Puerarialobata(Willd)Ohwi)与粉葛(PuerariathomsoniBehth)药材的水分 、
总灰分 、浸出物 、有害重金属含量 , 紫外分光光度法测定总黄酮含量 , HPLC法测定葛根素和大豆苷元含量 , 研
究了伏牛山区野葛与粉葛药材质量。结果表明 ,伏牛山区野葛与粉葛药材的水分 、灰分含量均达到《中国药
典》标准;野葛与粉葛药材的水浸出物 、醇浸出物分别为 42.11%, 31.82%和 33.24%, 27.52%;有害重金属含
量符合《药用植物及制剂外经贸绿色行业标准》的规定;总黄酮含量分别为 16.5%和 5.4%;葛根素和大豆苷
元分别为 4.0%, 1.6%和 0.035%, 0.038%。
关键词:野葛与粉葛;总黄酮;葛根素;大豆苷元;紫外分光光度法
中图分类号:R284.2 文献标识码:A
0　前言
葛根为中国常用药材 , 2005年版 《中国药典》中收录了豆科植物野葛 Puerarialobata(Wild.)Ohwi
或粉葛(甘葛藤)PuerariathomsoniBehth的干燥根 [ 1] 。现代研究证实 ,葛根中的主要有效成分为葛根
素 、大豆苷 、大豆苷元等异黄酮类化合物 ,具有抗炎解热 、扩张冠状动脉血管 、降低血脂血压 、抗肿瘤及清
除氧自由基等方面的功效 [ 2-5] 。伏牛山区被誉为河南省药用植物的 “天然药库 ”[ 6] 。经调查伏牛山区
葛根年产量在 498万 t以上 ,为进一步开发和利用该地区葛根的药用价值 ,本文对葛根药材的质量进行
了全面综合研究 ,进一步为该药材的合理应用提供依据 。
1　材料与仪器
葛根药材采自伏牛山区栾川县境内 ,经新乡医学院药学院药用与生药学教研室鉴定为野葛和粉葛
的根。葛根素对照品由北京化工大学提供 ,大豆苷元购自中国药品生物制品检定所 ,批号:200101。甲
醇为色谱纯 , 水为重蒸水 ,其它试剂为分析纯 。 600-2487型高效液相色谱仪(美国 Waters公司),
KQ3200B型超声清洗仪(昆山市超声仪器有限公司), BS224S电子天平(赛多利斯科学仪器北京有限公
司), SHZ-C型循环水使用多功能真空泵(巩义市英峪豫华仪器厂), 7521紫外 -可见分光光度计(上海精
密仪器厂), 3200型原子吸收分光光度计(上海分析仪器厂)。
2　方法与结果
水分 、灰分 、酸不溶灰分及浸出物含量测定 [ 1]结果见表 1。
重金属含量测定 [ 1]结果见表 2。
表 1　葛根药材水分 、总灰分及浸出物测定结果　%
样品 水分 总灰分 水浸出物 醇浸出物
野葛 8.82 6.35 42.11 33.24
粉葛 9.34 5.62 31.82 27.52
　　　　表 2　葛根中重金属测定结果 μg/g
样品 砷 铅 镉 汞
野葛 0.2762 未检出 0.376 0.128
粉葛 0.3167 未检出 0.350 0.115
2.1　葛根中总黄酮含量检测
(1)标准曲线的绘制及线性关系的考察
DOI :10.15926/j.cnki.issn1672-6871.2009.05.020
　　精密称取葛根素对照品 5.1 mg,以甲醇溶解并定容至 25 mL容量瓶中 ,配制成浓度为 0.20 4 mg/
mL的对照品溶液。分别精密吸取该溶液 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0 mL于已标号的 10mL容量瓶中 ,加甲
醇至 1 mL,并用蒸馏水定容 。 1 mL甲醇加蒸馏水定容至 10 mL做空白对照 ,于 250 nm处测定吸光
度 [ 7] 。以浓度 C(mg/mL)为横坐标 , 吸光度 A为纵坐进行回归分析 , 得回归方程 A=61.373C +
0.040 4, r=0.999 8,表明葛根素在 0.004 08 ～ 0.020 4mg/mL的浓度范围内 ,吸光度与其呈良好的线性
关系。
(2)供试品溶液的制备
分别称取野葛和粉葛适量各三份置于 50mL容量瓶中(同时另取样按 《中国药典 》I部附录 Ⅸ H第
一法测定水分),加入 30%甲醇定容至 50 mL。超声提取条件为:温度 40℃,频率 70 Hz,时间 30 min。
超声提取后静置 ,补足散失重量 。精密量取 10 mL提取液离心 ,取上清液作为供试品溶液。
(3)总黄酮含量测定
表 3　野葛与粉葛总黄酮含量(n=3)
药材 野葛 粉葛
总黄酮含量 /% 16.5 5.4
表 4　梯度洗脱条件
t/min 25 55 60
甲醇 /% 20 65 20
水 /% 80 35 80
吸取供试品适量 ,测定吸光光度值 ,以标准曲线法求算含
量(扣除水分),计算结果见表 3。
2.2　葛根中葛根素和大豆苷元的含量检测
(1)色谱柱:SunFireC18, 5μm, 150mm×4.6mm;流动相:
水 -甲醇梯度洗脱 ,梯度洗脱条件见表 4;检测波长:250 nm;
流速 1.0 mL/min柱温:35℃。
(2)标准曲线的绘制及其线性范围的考察。精密称定葛
根素 3.5 mg及大豆苷元 3.3mg于 10mL容量瓶中 ,用甲醇溶
解并定容。分别吸取上述对照品溶液 2, 4, 6, 8 , 10μL进样 ,按
上述色谱条件注入色谱仪 ,以峰面积值对对照品进样量进行线性分析得回归方程 。葛根素:A=3E+
06m-108 181, r=0.999 8,线性范围 0.7 ～ 3.5 μg。大豆苷元:A=5E+06m+150 200, r=0.999 4 ,线
性范围 0.66 ～ 3.3 μg。
(3)精密度试验。精密吸取对照品溶液 10μL,重复进样 6次 ,测峰面积积分值 ,分别算出葛根素及
大豆苷元的峰面积积分值之平均值为 1 078 2511, 16 646 210,其 RSD分别为 1.6%, 1.9%。
(4)稳定性试验。精密吸取葛根素及大豆苷元对照品混合液 10 μL,分别在 0, 1, 4, 6, 8 h进行测
定 ,结果峰面积积分值的平均值为 1 078 246, 16 643 987 , RSD分别为 1.9%, 2.2%,表明 8 h内葛根素
和大豆苷元稳定性良好。
(5)重复性试验。对同一批样品(野葛)称取 5份测定 ,其峰面积积分值的平均值为 20 459 029,
548 081, RSD分别为 1.4%, 0.9%(n=5)。
(6)回收率试验。精密称取野葛粉末 0.4g和粉葛粉末 0.3g(60目)各 3份 ,各加 0.5mg葛根素及
0.3mg大豆苷元 ,按样品测定项下的方法提取 ,按上述色谱条件测定 ,结果见表 5 , 6。
(7)供试品溶液的制备同(2)。
表 5　加样回收率实验结果(野葛)
检测指标 药材含量/mg
加入量
/mg
测得结果
/mg
回收率
/%
平均回收率
/% RSD/%
葛根素 1.6
0.5 1.650 1 100.2
0.5 1.650 8 101.6
0.5 1.650 9 101.8
101.2 0.86
大豆苷元 0.014
0.3 0.315 100.3
0.3 0.316 100.7
0.3 0.313 99.7
100.2 0.51
(8)葛根素和大豆苷元的
含量测定
分别吸取野葛和粉葛供
试品溶液 20 μL注入色谱仪 ,
测定样品中葛根素和大豆苷
元的峰面积积分值 ,标准曲线
法计算其含量 ,结果见表 7。
3　结果与讨论
中药材的品质决定了药品的质量 ,影响临床用药的疗效 ,只有药材好 ,生产出的药品才有好的疗效 ,
所以药材的质量研究有很重要的实际意义 。
·68· 河 南 科 技 大 学 学 报 :自 然 科 学 版 　　　　　　　　　　　　　2009年
第 5期 王新胜等:伏牛山区野葛与粉葛药材质量综合研究
表 6　加样回收率实验结果(粉葛)
检测指标 药材含量/mg
加入量
/mg
测得结果
/mg
回收率
/%
平均回收率
/% RSD/%
葛根素 0.48
0.5 0.981 100.2
0.5 0.979 99.8
0.5 0.976 99.6
99.7 0.50
大豆苷元 0.011 4
0.3 0.3115 100.0
0.3 0.310 8 99.8
0.3 0.311 2 99.9
99.9 0.12
　　水分和总灰分检查结
果证明野葛与粉葛药材中
其含量符合 《中国药典 》规
定 。总灰分检测结果均为
合格 ,说明没有其他无机物
污染和掺杂 。
《药用植物及制剂外
经贸绿色行业标准 》(WM/
T2— 2004)对药用植物原
料中的重金属及砷盐作了限量规定 ,其中砷(As)≤2.0×10-4%,汞(Hg)≤2.0×10-4%,铅(Pb)≤5.0
×10-4%,镉(Cd)≤3.0×10-4%。按此规定 ,伏牛山区野葛与粉葛药材有害重金属 As, Hg, Pb和 Cd含
量均不超标 ,详见表 2。
表 7　野葛和粉葛中葛根素及
大豆苷元的含量(n=3) %
药材 葛根素 大豆苷元
野葛 4.0 0.035
粉葛 1.6 0.038
药用主要有效成分 ,野葛与粉葛中总黄酮和葛根素含量均差
异较大 ,野葛约为粉葛的 3倍;大豆苷元含量相当 。因此 ,无论是
在药剂配方中 ,还是药品生产中 ,对野葛与粉葛都不能同等应用。
试验中进行了流动相考察 ,曾按照文献报道[ 8-10]进行试验 ,
发现葛根素峰和大豆苷元峰与其它成分并不能完全分离 ,通过优
化 ,最终选用本文的方法(见表 7)。
参考文献:
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·69·
· Ⅵ · JournalofHenanUniversityofScienceandTechnology:NaturalScience 2009
2008:Testmethodofgasconcrete), influencefactorsofshringkagewasstudyedbyexperiment.Aquiferous
rate, humidityandtemperatureareprimaryfactorsfordesiccationshrinkageofash-residueconcretebrickwork.
Keywords:Ash-residueconcrete;New-typewalmaterials;Desiccationshrinkage
CLCnumber:TU502.4　　　　　Documentcode:A ArticleID:1672-6871(2009)05-0057-03
· AgricultureandBiology·
SelectivelyHydrolyticCleavagesofLysozymePromotedbyCuCl2 (60 )⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
JIANGJiang1 , KONGDe-Xian1 , CAIXiang-Yang1 , WUQiong-Jie1 , LIBi-Qiang2　(1.ColegeofLifeScience,
FujianAgriculture＆ ForestryUniversity, Fuzhou350002, China;2.UnionHospitalofFujianMedical
University, Fuzhou350001, China)
Abstract:Theselectivelyhydrolyticcleavagesofhenegg-whitelysozymewithCuCl2 wereinvestigatedbySDS-
PAGEelectrophoresis.ItwasshowedthatraisingthemolarrationsofCu2+ /lysozyme, incubationtemperature
andtimecansignificantlyincreasetheextentofcleavage, whereasthespecificityofthecleavageisreduced
whenthemolarratiosofCu2+ /lysozymearegreaterortheincubationtemperatureistoohigh.Thereisno
evidentchangeintheextentofcleavageinthediferentchemicalenvironments, manipulatedbyusingdiferent
bufers.Theselectivityofcleavageisrelativetothesecondarystructureofthelysozyme.
Keywords:Lysozyme;Cu(II);SDS-PAGEhydrolytic;Hydrolyticcleavage
CLCnumber:O657.63　　　　　Documentcode:A ArticleID:1672-6871(2009)05-0060-04
ApplicationofComputerSimulationinResearchingTractionEfectofPlantRootSystems
　 (64 )⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
XUHui-Jie, ZHAOYuan-Yuan　 (Economics＆ AdministrationColege, HenanUniversityofScience＆
Technology, Luoyang471003, China)
Abstract:Duetothedisadvantagesofpolemodelemployedintheresearchoftheoil-fixationefectofplant
rootsystems, acomputersimulationmodelofplantrootsystemswasdesignedwithdoublelistdynamicdata
structure.WithVC++6.0, acomputersimulationsystemforplantrootsystemswasbuilt.Thecomputerized
plantrootsystemsmodelnotonlydisplayedconfigurationofplantrootsystemsbutalsocariedoutsegemnents
dividinganddataoutput.Theresearchwithbamboorootastheexampleprovesthatthemethodexploredinthis
paperisofgoodvalidityandfeasibility.
Keywords:Tractionefect;Model;Doublelist;Datastructure
CLCnumber:TP391.9;S152.9　　　Documentcode:A ArticleID:1672-6871(2009)05-0064-03
QualityEvaluationofPuerariaLobata(Wild.)OhwiandPuerariaThomsoniBehth.From Funiu
Mountain (67 )⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
WANGXin-Sheng1 , WUYan-Fang2 , ZHANGYan-Ping1 , NIURui-Qi1 , SHIQing-Liang1 　(1.Chemical＆
PharmaceuticalColege, HenanUniversityofScience＆ Technology, Luoyang471003 , China;2.Pharmaceutical
Colege, XinxiangMedicalColege, Xinxiang453003, China)
Abstract:TostudythequalityofPuerarialobata(Wild.)OhwiandPuerariathomsoniBehth.fromFuniu
mountaininChina, thecontentsofwater, totalash, extrats, heavymetalsweredeterminedbymethodsin
ChinesePharmacopoeia.ThetotalflavonewasdeterminedbyUVspectrophotometry.ThecontentsofPuerarin
andDaidzebyultrasonicextractedweredeterminedandanalysedusingHPLCmethod.Theresultsshowedthe
contentsofwaterandtotalashareuptostandardsprescribedbyChinesePharmacopoeia.Thecontentsofwater
extractsandethanolextractswererespectively42.11%, 31.82% and33.24%, 27.52%.Thecontentofheavy
metalsaccordswiththestandardsprescribedbygreenstandardsofmedicinalplantsandpreparationsforforeign
tradeandeconomy.Thetotalflavoneswererespectively16.5% and5.4%.ThecontentsofPuerarinand
Daidzeinwererespectively4.0%, 1.6% and0.035%, 0.038%.
Keywords:Puerarialobata(Wild.)Ohwi;PuerariathomsoniBehth;Totalflavone;Puerarin;Daidze;UV
spectrophotometry
CLCnumber:R284.2　　　　　Documentcode:A ArticleID:1672-6871(2009)05-0067-03
· MathematicsandPhysics·
SimulationAlgorithmforNashGame (70 )⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯