全 文 ：2012 年 2 月第 14 卷第 1 期
February 2012，Vol. 14，No. 1
湖北中医药大学学报
Journal of Hubei University of Chinese Medicine
作者简介:张宝徽(1979 － ) ，男，湖北中医药大学药学院讲师，研究方向:中药新制剂、新剂型。
鸡眼草属两种植物中总黄酮的含量测定
张宝徽1，李芳芳2，周牡娜2，方念伯1
(1． 湖北中医药大学中药资源与中药复方省部共建教育部重点实验室，湖北 武汉 430065;
2． 湖北中医药大学药学院，湖北 武汉 430065)
摘要:目的 测定鸡眼草属两种植物鸡眼草和长萼鸡眼草中总黄酮的含量。方法 采用分光光度法，以芦丁为对
照品，并利用 NaNO2 － Al (NO3)3 － NaOH显色方法，对鸡眼草属几种植物中的总黄酮含量进行测定。结果 在最大吸
收波长 510 nm处芦丁测定的线性方程是 Y =0． 0124X － 0． 0087，r = 0． 9994 (n = 6) ，测得的平均回收率为 99． 6% (n =
6) ，RSD = 1． 09%。结论 该方法的测定结果准确可靠、快速、重复性好，适用于鸡眼草属植物中总黄酮的含量测定。
关键词:鸡眼草属;总黄酮;含量测定
中图分类号:R284． 1 文献标识码:A 文章编号:1008-987X(2012)01-0033-03
DOI:10. 3969 / j. issn. 1008 － 987x. 2012. 01. 13
Determination of Contents of Total Flavonoids from Different Harvest Time
in Kummerowia Striata(Thunb)Schindl
ZHANG Baohui1，LI Fangfang2，ZHOU Muna2，FANG Nianbai1
(1． Province and Ministry Established Ministry Key Laboratory of Resource and Complex Perscriptionin Traditional Chinese Medicine，
Hubei University of Chinese Medicine，Wuhan 430065;2． College of Pharmacy，Hubei University of Chinese Medicine ，Wuhan 430065)
Abstracts:Objective To develop a quantitative method for the determination of total flavonoids in two Kummerowia plant Kummerowia
striata (Thunb．)Schindl． and Kummerowia stipulacea (Maxim．)Makino． Method Using rutin as a standard substance，spectrophotometer
method and the colour method of sodium nitrite － aluminium nitrate － sodium hydroxide were used to determine the total flavonoid content in
two Kummerowia plant． Result The calibration curve of rutin at 510nm was A = 0． 0124C － 0． 0087，r = 0． 9994 (n = 6) ，and the average
recovery was 99． 6% (n = 6)with RSD of 1． 09% ． Conclusion This method is reliable，accurate，quick and reproducible． It can be used
as a quality control method to determine the content of total flavonoids in Kummerowia plant．
Key words:Kummerowia Schindl．;total flavonoids;determination
豆科(Leguminosae)鸡眼草属植物，有鸡眼草(Kummerowia
striata (Thunb．)Schindl．)和长萼鸡眼草(Kummerowia stipulacea
(Maxim．)Makino．)2 种植物，在中国、西伯利亚、日本和朝鲜分
布广泛，是一种药食两用植物。我国民间常将两种植物干燥地
上部分混合用药，统称鸡眼草，又名人字草、掐不齐、斑珠科、公
母草、牛黄黄、红花草等［1］。
鸡眼草，始载于《救荒本草》，历代本草多有转载，为一年生
或多年生豆科植物鸡眼草和长萼鸡眼草的全草。夏秋采收，洗净
切细晒干，亦可鲜用，主治胃肠炎、痢疾、肝炎、夜盲症，泌尿系统
感染、跌打损伤、疗疮疖肿［2 －3］，水煎液用于治疗婴幼儿腹泻、肠
炎等，收到了较好的疗效
［4 －7］。该药资源丰富，使用经济方便，服
用安全，疗效确切，未见明显毒副作用发生，各级医院均可使用。
文献报道从鸡眼草全草中分离出多种黄酮类成分
［8］
，为更
好地开发利用鸡眼草资源，本实验以芦丁为标准品，采用亚硝酸
钠 －硝酸铝比色法测定了鸡眼草属两种植物中总黄酮的含量，
建立了稳定可靠且重现性好的测定方法，为科学开发利用鸡眼
草药材提供了可靠依据。
1 材料
1． 1 仪器
紫外分光光度仪(日立 U2001，日本) ;KH － 400KDB 型超
声波清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司) ;Mettler － Tole-
doAG285 型分析天平;SC － 101 型鼓风电热恒温干燥箱(上海市
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仪器试验总厂) ;QE － 250g 型高速中药粉碎机(武义县屹立公
具有限公司) ;艾柯纯水器。
1． 2 试药
鸡眼草药材采于湖北中医药大学黄家湖校区，经湖北中医
药大学陈科力教授鉴定为豆科鸡眼草属植物鸡眼草和长萼鸡
眼草的干燥地上部分，标本保存于湖北中医药大学药学院的植
物样本库中。芦丁对照品，购自中国药品生物制品检定所，批
号:100080 － 200707，供 UV 法测定，含量为 92． 5%。所用试剂
均为分析纯。
2 方法与结果
2． 1 溶液的制备
2． 1． 1 对照品溶液的制备:精密称取芦丁对照品 7． 15 mg，置
25 mL量瓶中，加 70%乙醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得
0． 286 mg /mL的芦丁标准液。
2． 1． 2 供试品溶液的制备:分别取鸡眼草和长萼鸡眼草样品各
约 0． 5 g，精密称定，置锥形瓶中，加 40 mL 70%乙醇溶液超声处
理 30 min，抽滤，用 70%乙醇溶液分 3 次洗涤滤渣，每次 5 mL，
合并滤液及洗液，水浴蒸干，残渣用 70%乙醇溶液适量使溶解
并定量转移至 10 mL量瓶中，加 70%乙醇溶液至刻度，摇匀，作
为供试品溶液。
2． 2 最大吸收波长的确定
用移液管精密吸取芦丁标准品溶液 1． 0 mL 置于 25 mL 容
量瓶中，先加入 5%的亚硝酸钠溶液 1． 0 mL，摇匀后放置 5 min，
加入 10%的硝酸铝溶液 1． 0 mL，摇匀后放置 5 min，再加入 4%
的氢氧化钠溶液 10． 0 mL，加 70%的乙醇至刻度，混匀，静置 15
min，以上述不加芦丁标准液的混合液为空白参照，在 400 nm －
600 nm 波长范围内扫描，选择吸收度值最大时的波长 510 nm
为芦丁标准品的最大特征吸收波长。
2． 3 标准曲线的绘制［9］
精密吸取对照品溶液 1、2、3、4、5、6 mL 分别置 25 mL 量瓶
中，照“2． 2”方法，混匀，静置 15 min，在510 nm处测定各个标准
品溶液的吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准
曲线，见图 1。
图 1 标准曲线
回归方程为 Y =0． 0124X － 0． 0087，r = 0． 9994，结果表明芦
丁在 11． 44 － 68． 64 mg /L呈良好的线性关系。
2． 4 稳定性试验
分别取鸡眼草供试品溶液各 1 mL，按 2． 2 项下方法操作，
对同一显色后的供试液每隔一段时间测定 1 次吸收度，结果吸
光度在 1h内无明显差异，RSD = 1． 29% (n = 6) ，表明显色后的
供试液在 1h内稳定性良好。
2． 5 精密度试验
精密吸取对照品溶液 3 mL 共 6 份，分别置于 25 mL 量瓶
中，按 2． 2 项下方法操作，测定吸光度，结果 RSD = 1． 46%，表明
本方法精密度良好。
2． 6 重复性试验
按供试品溶液的制备方法，对同一批药材，同时制备 6 份样
品供试品溶液，分别精密吸取 1． 0 mL，置于 25 mL容量瓶中，照
“2． 2”项下显色，混匀，在 510 nm 处测定吸光度，RSD = 1． 66%
(n = 6) ，说明本方法重复性良好。
2． 7 回收率试验
在鸡眼草药材粉末中，定量加入芦丁对照品，按样品含量测
定项下方法制备，显色，测定吸光度，计算回收率，结果见表 1。
表 1 加样回收率结果 (n = 6)
称样量
(g)
样品中
含量
(mg)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均值
(%)
RSD
(%)
0． 4991 18． 42 18． 55 36． 47 98． 6
0． 5013 18． 50 18． 38 36． 58 99． 2
0． 5008 18． 48 18． 31 37． 23 101． 2
0． 4989 18． 41 18． 52 36． 53 98． 9
0． 5009 18． 48 18． 29 36． 34 98． 8
0． 4993 18． 42 18． 34 36． 98 100． 6
99． 6 1． 09
由表 1 结果可知，样品的平均回收率为 99． 6%且 RSD小于
2% ，故认为用上述方法测定鸡眼草中总黄酮含量完全可行。
2． 8 药材含量测定
分别取鸡眼草与长萼鸡眼草药材粉末各约 0． 5 g，按照
“2． 1． 2”项下方法操作，制得样品溶液。取此溶液1 mL，按照
“2． 2 项”下方法操作，测定吸光度，计算总黄酮含量，结果见
表 2。
表 2 鸡眼草与长萼鸡眼草中总黄酮的含量 (%)
编号 品种 采摘日期 植物状态 总黄酮含量
1 鸡眼草 20100820 花前期 3． 33
2 鸡眼草 20100831 花蕾期 3． 29
3 鸡眼草 20100910 盛花期 2． 79
4 鸡眼草 20101002 果期 2． 97
5 长萼鸡眼草 20100820 花前期 2． 96
6 长萼鸡眼草 20100831 花蕾期 2． 88
7 长萼鸡眼草 20100910 盛花期 2． 43
8 长萼鸡眼草 20101002 果期 2． 56
9 长萼鸡眼草变种 20100831 花前期 1． 96
10 长萼鸡眼草变种 20100910 花蕾期 1． 81
11 长萼鸡眼草变种 20100920 盛花期 1． 43
12 长萼鸡眼草变种 20101002 果期 1． 49
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3 讨论
鸡眼草属植物在我国的许多地区都有广泛分布，资源丰
富，适应能力强，既可作为绿化的观赏植物，又有极高的药用和
食用价值。本实验建立了鸡眼草属两种植物中总黄酮的含量
测定方法，该方法简便、准确、可靠，适用于鸡眼草属植物中总黄
酮的含量测定。
采用本法对鸡眼草、长萼鸡眼草及其变种中总黄酮含量进行
检测，发现鸡眼草中总黄酮含量较高，不同品种、不同采收期鸡眼
草中总黄酮含量各不相同，鸡眼草 ＞长萼鸡眼草 ＞长萼鸡眼草变
种，花前期 ＞花蕾期 ＞盛花期 ＞果期。因此，用药过程中应将鸡
眼草和长萼鸡眼草分开使用，有利于鸡眼草制剂的质量控制鸡
眼草，药材最佳采收期应在 8 月中下旬的花前期或花蕾期。
文献报道［1］，鸡眼草属只有鸡眼草和长萼鸡眼草两种植
物，但笔者在样本采集过程中发现了长萼鸡眼草的一种新变
种，该变种总黄酮含量较低，但其植株较长萼鸡眼草高大许多，
且开花较晚(9 月中下旬始开花) ，其具体生药学性状特征有待
于进一步研究。
参考文献:
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民卫生出版社，1975:432．
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北中医杂志，2002，24(2) :26．
［6］ 孙洁，王晓菊，王燕，等． 鸡眼草治疗婴幼儿轮状病毒肠炎临床体
会［J］．中国中医急症，2009，18(9) :1520．
［7］ 孙洁，王燕，丁希伟．鸡眼草治疗婴幼儿迁延性慢性腹泻病疗效观
察［J］．现代中西医结合杂志，2010，19(5) :553 － 554．
［8］ 唐人九．人字草黄酮类化学成分研究［J］． 华西药学杂志，1996，11
(1) :5 － 10．
［9］ 中国药典一部［S］． 2005:246．
(收稿日期:2011-10-20 编辑:郑晓屏)
基金项目:东莞市科学技术局(东科［2010］111 号)。
作者简介:李娜(1986 －) ，女，湖北中医药大学 2009 级硕士研究生，研究方向:药物新剂型与生物药制剂学研究。
通讯作者:周爱军(1961 －) ，男，广州东莞，主任医师，研究方向:中医药临床研究，电子信箱:dgzhouaijun@ 163． com。
大青龙汤颗粒剂水煎液中总黄酮的含量测定
李娜1，黄鹤归2，叶晓川2，周爱军3，刘焱文2
(1．湖北中医药大学药学院 2009 级硕士研究生，湖北 武汉 430065;
2．湖北中医药大学中药资源与中药复方省部共建教育部重点实验室，湖北 武汉 430061;
3． 广东省东莞市沙田医院，广东 东莞 523981)
摘要:目的 建立大青龙汤颗粒剂中总黄酮的含量测定方法，为其质量控制提供依据。方法 以甘草苷为对照
品，采用紫外分光光度法测定总黄酮的含量。结果 大青龙汤总黄酮在 334 nm波长处有最大吸收，甘草苷在 2． 65 －
15． 94 μg /mL范围内线性关系良好，r = 0． 9997，平均加样回收率为 98． 93%，RSD = 2． 48%(n = 6)。结论 该方法简便
快速，重现性好，可作为制剂中总黄酮的含量测定方法。
关键词:大青龙汤;总黄酮;甘草苷;含量测定;分光光度法
中图分类号:R284． 1 文献标识码:A 文章编号:1008-987X(2012)01-0035-03
DOI:10. 3969 / j. issn. 1008 － 987x. 2012. 01. 14
Determine the Total Flavonoids in Daqinglong Granules
LI Na1，HUANG Hegui2，YE Xiaochuan2，ZHOU Aijun3，LIU Yanwen2
(1． Grade 2009 postgraduate student of Hubei University of Chinese Medicine，Wuhan 430061;2． Province and Ministry
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