全 文 ：书云南大学学报(自然科学版)，2015，37(1):134～ 139 DOI:10．7540 / j．ynu．20140364
Journal of Yunnan University
鬼箭锦鸡儿细胞毒活性成分研究
*
杨新洲1，吕静南1，徐 婵1，林亲雄1，杨 静1，汪 超1，宋 萍2
(1．中南民族大学 药学院，湖北 武汉 430074;2．青海民族大学 科技处，青海 西宁 810007)
摘要:运用中压柱色谱和高效制备液相色谱方法对藏药鬼箭锦鸡儿的化学成分进行分离纯化，利用现代波
谱技术鉴定所分离化合物的结构，并对所得到的化合物进行体外抗肝癌活性测试．从鬼箭锦鸡儿乙醇提取物中
分离得到 8个单体化合物，分别鉴定为 6，7，3－三羟基－4－甲氧基异黄酮(1)、3，7－二羟基－4－甲氧基黄酮
(2)、3－甲氧基－4，9－二羟基紫檀素(3)、7，3－二羟基－5－甲氧基异黄酮(4)、6，7－二羟基－4－甲氧基异黄酮
(5)、3，9－二甲氧基－8－羟基紫檀素(6)、3，9－二甲氧基－4－羟基紫檀素(7)和 3－甲氧基－4－羟基高丽槐素(8)，
所有的化合物均为首次从该植物中分离得到．采用 MTT法对化合物 1～ 8进行体外抗肝癌活性测试，结果显示
所有的化合物对 2个肝癌细胞株 HepG2和 Hep3B均有抑制作用，它们的 IC50值范围为 22．5～104．7 μg /mL．
关键词:鬼箭锦鸡儿;细胞毒活性;化学成分;黄酮
中图分类号:Ｒ 284．1 文献标志码:A 文章编号:0258－7971(2015)01－0134－06
鬼箭锦鸡儿(Caragana jubata (pall)Poir．) ，藏药名为“作毛兴”，属于豆科锦鸡儿属植物多年生小灌
木，它是传统藏药中使用历史最悠久的品种之一，主要分布我国西北部，如青海、西藏、四川、甘肃、宁夏、新
疆和内蒙古等省区［1－2］．藏医用其根茎入药，内服活血散淤，消炎止痛，排内脏淤血，破血、降压，用以治疗多
血症、高血压及月经不调、乳房发炎等;外用消毒散肿，生肌止痛，治疗疖疮痈疽等［2］．现代药理研究表明其
提取物或所含的化学成分具有抗微生物、降血压、抗自由基氧化、抗癌、抗病毒等活性［3］．在我们前期对鬼
箭锦鸡儿的化学成分研究中发现该药材主要含有异黄酮类、黄酮类和有机酸类成分，如高丽槐素［4］、3－甲
氧基高丽槐素［4］、3－甲氧基－9－羟基紫檀烷［4］、3，9－二甲氧基紫檀烷［4］、3－甲氧基－4，9－二羟基紫檀烷［5］、
(－)高丽槐素－3－O－6－O－丙烯酰基－β－D－吡喃半乳糖苷［6］、(－)高丽槐素－3－O－6－O－乙酰基－β－D－吡
喃葡萄糖苷［6］、(－)高丽槐素－3－O－β－D－吡喃葡萄糖苷［6］、(－)高丽槐素－3－O－β－D－吡喃半乳糖苷［6］、芒
柄花素［7］、野靛黄素［7］、芦丁［8］、黄耆苷［8］、苯甲酸［8］、4－甲氧基苯甲酸［7］、4－羟基苯甲酸［8］等．
为了更好地利用和开发这一民族药用资源，我们对鬼箭锦鸡儿的化学成分进行了进一步的系统分离
和纯化，得到 8个单体化合物，分别为 6，7，3－三羟基－4－甲氧基异黄酮(1)、3，7－二羟基－4－甲氧基黄酮
(2)、3－甲氧基－4，9－二羟基紫檀素(3)、7，3－二羟基－5－甲氧基异黄酮(4)、6，7－二羟基－4－甲氧基异黄
酮(5)、3，9－二甲氧基－8－羟基紫檀素(6)、3，9－二甲氧基－4－羟基紫檀素(7)、3－甲氧基－4－羟基高丽槐素
(8)，化合物 1～8均为首次从该植物中分得．采用 MTT法对化合物 1～8进行体外细胞毒活性测试，结果显
示化合物 1 ～ 8 对 2 个肝癌细胞株 HepG2 和 Hep3B 均有一定的抑制作用，IC50值范围为 22． 5 ～
104．7 μg /mL;其中紫檀素骨架化合物 3、6 ～ 8 显示较强的细胞毒活性，它们对 HepG2 和 Hep3B 肝癌细胞
株的 IC50值范围为 22．5～57．3 μg /mL．
* 收稿日期:2014－07－12
基金项目:青海省自然科学基金(2012－Z－904) ;国家自然科学基金(81102798);武汉市青年晨光计划(2013070104010028) ;国家科
技支撑计划(2012BAI27B06)．
作者简介:杨新洲(1977－) ，男，湖北人，博士，副教授，主要从事基于天然来源的光导化合物发现研究．
通信作者:宋 萍(1965－ )，女，山东人，教授，主要从事藏药资源品质和应用基础方面的研究．E－mail:yxzyxz01@ 163．com．
图 1 化合物 1～ 8的化学结构
Fig．1 Chemical structures of 8 compounds
1 实 验
1．1 仪器与试剂 熔点:Kofler 显微熔点仪(温度未校正) ;紫外光谱:Shimadzu UV－250型紫外光谱仪;质
谱:Finnigan MAT－95型质谱仪，Q－TOF Micro LC－MS－MS质谱仪;核磁共振波谱:Bruker DＲX－500 MHz核
磁共振仪;中压色谱制备系统:Alga 公司;Waters 2535 制备型高效液相色谱仪:2998 二极管阵列检测器，
2707自动进样器;Thermo Betasil C18半制备柱(150 mm ×22 mm，5 μm) ;活性测试用显微镜:Olympus
B202型;酶标仪:Spectra Max 340PC型;薄层色谱硅胶和柱色谱硅胶:烟台江友硅胶开发有限公司;MCI树
脂(CHP－20P) :日本三菱化学公司;HPLC级甲醇和乙腈:Merck;细胞株:肝癌细胞株 HepG2 和 Hep3B 及
人胚肾成纤维细胞株 HEK－293(American Type Culture Collection，Ｒockville，MD，USA)．
1．2 植物材料 鬼箭锦鸡儿(Caragana jubata (pall)Poir．)的根于 2009 年 7 月采于青海省玉树藏族自治
州玉树县，经青海藏药研究所多杰研究员鉴定，药材标本(编号 20090723C)存放于青海民族大学化学与生
命科学学院标本馆．
1．3 抗肝癌活性测试［9－10］ 取对数生长期 HepG2、Hep3B、HEK－293三种细胞株，调节细胞浓度为 5×104
mL－1，每孔 0．2 mL接种至 96孔培养板，继续培养 24 h后，每孔分别添加由含 10%小牛血清 ＲPMI 1640 液
配制成的待测样品 0．1 mL，使样品质量浓度分别为 10、20、40、100、200 μg /mL继续培养;每个质量浓度一
式 3孔，同时设不加测试样品的实验对照和不加样品和细胞的空白对照．培养 24、48、72 h 后，分别换液 1
次，培养 72 h后，加入 5 mg /mL的 MTT 20 μL继续培养 4 h后，吸弃培养液，每孔加入 0．15 mL DMSO，振摇
30 min，充分溶解细胞内生成的紫色甲臜结晶，于 550 nm下测定每孔 A值．生长抑制率=［1－(实验组 A值－
空白组 A值)/(对照组 A值－空白组 A值)］×100%．按文献［9－10］计算半数抑制浓度(IC50)．
1．4 提取与分离 干燥的鬼箭锦鸡儿根茎粉末 500 g，用 80%乙醇渗滤提取 3次，每次 3 d，合并提取液，减
压回收得 46．3 g浸膏．取 40 g乙醇提取物，加入甲醇 500 mL加热溶解，加入聚酰胺(0．054 ～ 0．077 mm)120
g，减压蒸干，常压聚酰胺柱层析(0．054～0．077 mm，1 000 g)进行分离，采用 10%、30%、50%、70%、95%乙醇
水溶液进行梯度洗脱，得 5 个洗脱部位 Fr．1 ～ Fr．5．取 Fr．4 部位 15．8 g，中压硅胶柱层析(0．038 5 ～ 0．054
mm，450 g)进行分离，采用二氯甲烷－甲醇(体积比 20 ∶ 1→1 ∶ 2，含 0．05%甲酸)梯度洗脱，TLC 检测合并
相应的洗脱液，减压回收得 6个组分 Fr．4．1～ Fr．4．6．Fr．4．4组分 3．6 g 溶解于 40 mL甲醇，用 80 g 聚酰胺吸
附色素，用纯甲醇洗脱，减压浓缩得 1．8 g 淡黄色粉末;该粉末溶解于 5．0 mL 甲醇－DMSO(体积比 70% ∶
30%)混合溶剂，采用制备型高效液相 5 次直接进样进行分离，采用混合流动相(水－甲醇体积比 75% ∶
25%→0% ∶ 100%，40 min，流速 10．0 mL /min，其中两相分别含 0．1%甲酸)梯度洗脱，得到化合物 1(20．5
mg，tＲ = 24．1 min)，2(16．3 mg，tＲ = 27．7 min)，3(43．6 mg，tＲ = 33．5 min)．Fr．4．2组分 4．5 g经 Sephadex LH－20
柱层析分离(2．5 cm×150 cm) ，TLC检测合并得 3个组分 Fr．4．2．1～ Fr．4．2．3;Fr．4．2．3组分 2．0 g溶解于 3．5
mL甲醇－DMSO混合溶剂(体积比 50% ∶ 50%) ，采用制备型高效液相直接进样进行分离，采用混合流动
相(甲醇－水体积比 70% ∶ 30%→0% ∶ 100%，60 min，流速 9．0 mL /min，其中两相分别含 0．1%甲酸)梯度洗
脱，得到化合物 4(41．9 mg，tＲ = 36．5 min) ，5(25．2 mg，tＲ = 38．3 min)．Fr．3 部位 8．7 g 采用中压硅胶柱层析
531第 1期 杨新洲等:鬼箭锦鸡儿细胞毒活性成分研究
(0．0385～0．054 mm，350 g)进行分离，采用二氯甲烷－甲醇(体积比 40 ∶ 1→1 ∶ 2，含 0．05%甲酸)梯度洗
脱，TLC检测合并相应的洗脱液，减压回收得 4个组分 Fr．3．1～ Fr．3．4．Fr．3．2组分中析出 0．8 g白色粉末，用
10 mL丙酮重结晶，过滤得化合物 8(350 mg)．Fr．3．3 组分 2．6 g 溶解于 30 mL 甲醇，用 50 g 聚酰胺吸附色
素，用纯甲醇洗脱，减压浓缩得 1．5 g 淡黄色粉末;该粉末溶解于 3．0 mL甲醇－DMSO(体积比 30% ∶ 70%)
混合溶剂，采用制备型高效液相 5 次直接进样进行分离，采用混合流动相(水－甲醇体积比 70% ∶ 30%→
0 ∶ 100%，50 min，流速 10．0 mL /min，其中两相分别含 0．1%甲酸)梯度洗脱，得到化合物 6(24．5 mg，tＲ =
34．7 min)，7(13．6 mg，tＲ = 37．8 min)．
2 结构鉴定
6，7，3－三羟基－4－甲氧基异黄酮(1) :淡黄色粉末(CH3OH) ;UV(CH3OH)λmax:217，264，315 nm;ES-
IMS m/z:323［M+Na］+，301［M+H］+;1H NMＲ(DMSO－d6，500 MHz)δ:8．13(1H，s，H－2)，7．43(1H，s，H－
5) ，6．91(1H，s，H－8) ，7．45(1H，d，J = 2．2 Hz，H－2) ，7．17(1H，dd，J = 8．7，2．2 Hz，H－6) ，7．02(1H，d，J =
8．7 Hz，H－5) ，3．85(3H，s，4－OCH3);
13C NMＲ(DMSO－d6，125 MHz)δ:154．5(C－2)，125．8(C－3) ，174．7
(C－4) ，107．3(C－5) ，147．6(C－6) ，155．2(C－7) ，103．8(C－8) ，154．1(C－9) ，118．1(C－10) ，126．2(C－1) ，
116．5(C－2) ，147．1(C－3) ，148．3(C－4) ，115．8(C－5) ，120．3(C－6) ，56．8(4－OCH3)．其波谱数据与文
献报道的化合物一致［11］，故鉴定化合物 1为 6，7，3－三羟基－4－甲氧基异黄酮(6，7，3－trihydroxy－4－me-
thoxyisoflavone)．
3，7－二羟基－4－甲氧基黄酮(2):淡黄色粉末(CH3CH2OH);UV(CH3OH)λmax:217，258，314 nm;ES-
IMS:m/z 307［M+Na］+，285［M+H］+;1H NMＲ(DMSO－d6，500 MHz)δ:7．61(1H，d，J = 8．7 Hz，H－5)，7．01
(1H，dd，J= 8．7，2．1 Hz，H－6) ，6．96(1H，d，J= 2．1 Hz，H－8) ，7．79(2H，d，J= 8．5 Hz，H－2，6) ，6．86(2H，d，
J = 8．5 Hz，H－3，5) ，3．83(3H，s，4－OCH3) ;
13C NMＲ(DMSO－d6，125 MHz)δ:145．4(C－2) ，139．4(C－3) ，
174．6(C－4) ，127．9(C－5) ，114．9(C－6) ，162．5(C－7) ，103．3(C－8) ，154．6(C－9) ，118．5(C－10) ，124．1(C－
1) ，127．8(C－2) ，114．6(C－3) ，163．2(C－4) ，114．6(C－5) ，127．8(C－6) ，55．7(4－OCH3)．其波谱数据
与文献报道的化合物一致［12］，故鉴定化合物 2 为 3，7－二羟基－4 －甲氧基黄酮(3，7－dihydroxy－4 －me-
thoxyflavonone)．
3－甲氧基－4，9－二羟基紫檀素(3) :无定型粉末(丙酮) ;UV(CH3OH)λmax:279，286，312 nm;ESIMS m/
z:309［M+Na］+，287［M+H］+，285［M－H］– －;1H NMＲ(CH3OH－d4，500 MHz)δ:7．45(1H，d，J = 8．7 Hz，H－
1)，6．77(1H，d，J = 8．7 Hz，H－2) ，6．98(1H，d，J = 8．5 Hz，H－7) ，6．69(1H，dd，J = 8．5，2．5 Hz，H－8) ，6．48
(1H，d，J = 2．5 Hz，H－10) ，5．51(1H，d，J = 6．7 Hz，H－11a) ，4．23(1H，dd，J = 10．2，4．3 Hz，H－6α) ，3．62
(1H，t，J = 10．2 Hz，H－6β) ，3．55(1H，m，H－6a) ，3．83(3H，s，3－OCH3);
13C NMＲ(CH3OH－d4，125 MHz)δ:
123．7(C－1)，107．4(C－2) ，153．1(C－3) ，135．2(C－4) ，146．2(C－5) ，67．4(C－6) ，40．5(C－6a) ，119．2(C－
6b) ，126．0(C－7) ，108．2(C－8) ，161．8(C－9) ，99．6(C－10) ，159．4(C－10a) ，78．9(C－11a) ，115．2(C－11b) ，
57．2(3－OCH3)．其波谱数据与文献报道的化合物数据一致
［13］，故鉴定化合物 3 为 3－甲氧基－4，9－二羟基
紫檀素(3－methoxy－4，9－dihydroxy pterocarpan)．
7，3－二羟基－5－甲氧基异黄酮(4) :淡黄色针状结晶(CH3OH)，m．p．208 ～ 210 ℃;UV(CH3OH)λmax:
216，262，311 nm;ESIMS m/z:307［M+Na］+，285［M+H］+，283［M－H］–;1H NMＲ(DMSO－d6，500 MHz)δ:
8．16(1H，s，H－2)，8．05(1H，d，J= 8．6 Hz，H－5) ，6．94(1H，dd，J= 8．6，2．1 Hz，H－6) ，6．87(1H，d，J = 2．1 Hz，
H－8) ，7．02(1H，br．s，H－6) ，6．79(1H，br．s，H－2) ，6．77(1H，br．s，H－4) ，3．89(3H，s，5－OCH3) ;
13C NMＲ
(DMSO－d6，125 MHz)δ:154．6(C－2)，126．5(C－3) ，178．2(C－4) ，128．3(C－5) ，116．6(C－6) ，164．5(C－7) ，
103．3(C－8) ，159．8(C－9) ，118．1(C－10) ，126．1(C－1) ，112．7(C－2) ，147．7(C－3) ，117．5(C－4) ，149．6
(C－5) ，121．6(C－6) ，56．7(5－OCH3)．其波谱数据与文献报道的化合物一致
［14］，故鉴定化合物 4 为 7，3
－二羟基－5－甲氧基异黄酮(7，3－dihydroxy－5－methoxyisoflavone)．
631 云南大学学报(自然科学版) http:/ /www．yndxxb．ynu．edu．cn 第 37卷
6，7－二羟基－4－甲氧基异黄酮(5) :淡黄色针晶(丙酮) ，m．p．249～251 ℃;UV(CH3OH)λmax:216，261，
310 nm;ESIMS m/z:569［2M+H］+，285［M+H］+，283［M－H］–;1H NMＲ(DMSO－d6，500 MHz)δ:10．35(1H，
s，7－OH)，9．76(1H，s，6－OH) ，8．28(1H，s，H－2) ，7．51(2H，d，J = 8．5 Hz，H－2，6) ，7．37(1H，s，H－5) ，
6．97(2H，d，J = 8．5 Hz，H－3，5) ，6．89(1H，s，H－8) ，3．81(3H，s，4 －OCH3);
13 C NMＲ(DMSO－d6，125
MHz)δ:154．2(C－2)，125．5(C－3) ，175．1(C－4) ，108．5(C－5) ，145．3(C－6) ，153．8(C－7) ，103．4(C－8) ，
152．7(C－9) ，117．7(C－10) ，123．8(C－1) ，130．6(C－2) ，114．7(C－3) ，160．2(C－4) ，114．7(C－5) ，130．6
(C－6) ，56．2(4－OCH3)．其波谱数据与文献报道的化合物一致
［15］，故鉴定化合物 5为 6，7－二羟基－4－甲
氧基异黄酮(6，7－dihydroxy－4－methoxyisoflavone)．
3，9－二甲氧基－8－羟基紫檀素(6):白色粉末(CH3OH);UV(CH3CH2OH)λmax:215，285，312 nm;ES-
IMS m/z 601［2M+H］+，323［M+Na］+，299［M－H］–;1H NMＲ(DMSO－d6，500 MHz)δ:7．41(1H，d，J = 8．7
Hz，H－1)，6．72(1H，dd，J = 8．7，2．5 Hz，H－2) ，6．47(1H，d，J = 2．5 Hz，H－4) ，6．82(1H，s，H－7) ，6．44(1H，
s，H－10) ，5．50(1H，d，J = 6．5 Hz，H－11a) ，4．25(1H，dd，J = 10．8，4．6 Hz，H－6α) ，3．64(1H，t，J = 10．8 Hz，H
－6β) ，3．53(1H，m，H－6a) ，3．79(3H，s，9－OCH3)，3．83(3H，s，3－OCH3);
13C NMＲ(DMSO－d6，125 MHz)δ:
131．6(C－1)，110．5(C－2) ，161．7(C－3) ，109．2(C－4) ，156．2(C－5) ，66．8(C－6) ，40．4(C－6a) ，118．3(C－
6b) ，101．7(C－7) ，140．1(C－8) ，147．2(C－9) ，94．8(C－10) ，152．7(C－10a) ，78．4(C－11a) ，113．6(C－11b) ，
55．7(3－OCH3)，56．3(9－OCH3)．其波谱数据与文献报道的化合物一致
［16］，故鉴定化合物 6 为 3，9－二甲氧
基－8－羟基紫檀素(3，9－dimethoxy－8－hydroxy pterocarpan)．
3，9－二甲氧基－4－羟基紫檀素(7) :无定形白色粉末(CH3OH);UV(CH3OH)λmax:214，282，311 nm;
ESIMS:m/z 623［2M+Na］+，301［M+H］+，299［M － H］－;1H NMＲ(DMSO－d6，500 MHz)δ:7．19(1H，d，J =
8．5 Hz，H－7)，7．04(1H，d，J= 8．4 Hz，H－1) ，6．72(1H，d，J = 8．4 Hz，H－2) ，6．53(1H，dd，J = 8．5，1．9 Hz，H－
8) ，6．41(1H，d，J= 1．9 Hz，H－10) ，5．54(1H，d，J = 7．3 Hz，H－11a) ，4．35(1H，dd，J = 10．7，4．5 Hz，H－6α) ，
3．61(1H，t，J = 10．7 Hz，H－6β) ，3．62(1H，m，H－6a) ，3．87(3H，s，3－OCH3)，3．77(3H，s，9－OCH3);
13C NMＲ
(DMSO－d6，125 MHz)δ:122．6(C－1)，107．4(C－2) ，150．2(C－3) ，135．2(C－4) ，145．8(C－5) ，68．0(C－6) ，
40．4(C－6a) ，120．5(C－6b) ，126．3(C－7) ，107．6(C－8) ，161．6(C－9) ，97．6(C－10) ，162．0(C－10a) ，79．8(C
－11a) ，115．2(C－11b) ，56．7(3－OCH3)，55．8(9－OCH3)．其波谱数据与文献报道的化合物一致
［17］，故鉴定
化合物 7为 3，9－二甲氧基－4－羟基紫檀素(3，9－dimethoxy－4－hydroxy pterocarpan)．
3－甲氧基－4－羟基高丽槐素(8) :无定形白色粉末(CH3OH);UV(CH3CH2OH)λmax:213，286，310 nm;
ESIMS m/z 337［M+Na］+，315［M+H］+，313［M－H］–;1H NMＲ(CDCl3，500 MHz)δ:7．05(1H，d，J= 8．7 Hz，H
－1)，6．67(1H，d，J = 8．7 Hz，H－2) ，6．72(1H，s，H－7) ，6．44(1H，s，H－10) ，5．95(1H，br． s，OCH2O)，5．92
(1H，br．s，OCH2O)，5．52(1H，d，J= 6．7 Hz，H－11a) ，4．32(1H，dd，J = 11．0，4．8 Hz，H－6α) ，3．68(1H，t，J =
11．0 Hz，H－6β) ，3．55(1H，m，H－6a) ，3．88(3H，s，3－OCH3);
13 C NMＲ(CDCl3，125 MHz)δ:121．8(C－1)，
105．9(C－2) ，149．7(C－3) ，134．1(C－4) ，147．2(C－5) ，67．2(C－6) ，40．3(C－6a) ，118．5(C－6b) ，104．8(C－
7) ，142．4(C－8) ，147．9(C－9) ，93．7(C－10) ，153．8(C－10a) ，78．2(C－11a) ，114．1(C－11b) ，56．5(3－
OCH3)，101．1(OCH2O)．其波谱数据与文献报道的化合物一致
［18］，故鉴定化合物 8 为 3－甲氧基－4－羟基
高丽槐素(3－methoxy－4－hydroxy maackiain)．
3 细胞毒活性结果
采用 MTT法测试从鬼箭锦鸡儿乙醇提取物中分离到的化合物 1 ～ 8 对 2 个肝癌细胞株 HepG2 和
Hep3B的细胞毒活性，人胚肾成纤维细胞株 HEK－293 被选取来评价 8 个化合物对人体正常细胞的毒性，
抗癌药 5－氟尿嘧啶(5－FU)作为阳性对照．活性测试结果(表 1)显示，所有分离到的 8 个化合物对 HepG2
和 Hep3B两个细胞株均显示一定的抗癌活性，而对 HEK293 细胞在 200 μg /mL 的浓度下未显示毒性，其
抗肝癌活性 IC50值范围在 22．5～104．7 μg /mL之间．在活性测试中，具有紫檀素母核的化合物 3、6 ～ 8 显示
731第 1期 杨新洲等:鬼箭锦鸡儿细胞毒活性成分研究
出比异黄酮和黄酮化合物 1～2、4～5更强的细胞毒活性，其 IC50值范围在 22．5 ～ 57．3 μg /mL 之间;其中化
合物 8显示最强的细胞毒活性，它们对 HepG2和 Hep3B肝癌细胞株的 IC50值分别为 22．5和 26．8 μg /mL．
表 1 化合物 1～ 8细胞毒活性测试结果(IC50，μg /mL;mean±SD，
n=3)
Tab．1 Cytotoxicactivity of compounds 1—8 from C．jubata (pall)Poir
化合物 HepG2 Hep3B HEK293
1 76．8±6．7 95．4±7．3 ＞200
2 87．8±5．7 104．7±5．6 ＞200
3 57．3±5．3 49．5±4．4 ＞200
4 62．2±4．8 70．9±5．2 ＞200
5 72．6±5．0 83．1±6．5 ＞200
6 42．4±3．7 34．6±2．9 ＞200
7 51．4±4．3 32．9±2．7 ＞200
8 22．5±1．9 26．8±2．1 ＞200
5－FUa 7．5±1．8 9．3±1．5 14．7±0．4
a 5－FU(5－氟尿嘧啶)作为阳性对照
4 结 论
从藏药鬼箭锦鸡儿乙醇提取物中分离到
8个黄酮类化学成分，分别属于异黄酮(1、4、
5)，黄酮(2) ，紫檀素类(3、6 ～ 8) ，均为首次
从该药材中分离到．上述所有化合物对
HepG2和 Hep3B 两个细胞株均显示出一定
的细胞毒活性，其抗肝癌活性 IC50值范围在
22．5～ 104．7 μg /mL 之间，而对人胚肾成纤维
细胞株 HEK293在 200 μg /mL的高浓度下未
显示出毒性．具有紫檀素骨架的黄酮类成分
3、6～8比其他化合物显示出更强的细胞毒活
性，抗肝癌活性 IC50值范围在 22．5 ～ 57．3 μg /
mL之间．对民族药鬼箭锦鸡儿的系统化学成
分分离纯化及抗肝癌活性研究将为这个资源
丰富的民族药的开发和利用打下一定的基础．
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Cytotoxic chemical constituentsfrom Caragana jubata(pall)Poir．
YANG Xin-zhou1，LYU Jing-nan1，XU Chan1，LIN Qin-xiong1，YANG Jing1，WANG Chao1，SONG Ping2
(1．College of Pharmacy，South－Central University for Nationalities，Wuhan 430074，China;
2．Division of Science ＆ Technology，Qinghai University for Nationalities，Xining 810007，China)
Abstract:To discover new cytotoxic constituents from the traditional tibetan medicine－“Zuomaoxing”(roots
of Caragana jubata (pall)Poir．)，the isolation and purification of a methanolic extract was performed with medi-
um－pressure column chromatography and preparative HPLC． Eight pure compounds were obtained and their
structures were elucidated as 6，7，3 －trihydroxy－4 －methoxyisoflavone (1) ，3，7－dihydroxy－4 －methoxyfla-
vonone (2) ，3－methoxy－4，9－dihydroxy pterocarpan (3) ，7 3－dihydroxy－5－methoxyisoflavone (4) ，6 7－di-
hydroxy－4－methoxyisoflavone (5) ，3 9－dimethoxy－8－hydroxy pterocarpan (6) ，3，9－dimethoxy－4－hydroxy
pterocarpan (7)and 3－methoxy－4－hydroxy maackiain (8)based on detailed spectral analysis．All compounds
were isolated from the title plant for the first time．In vitro cytotoxic activity of compounds 1—8 were evaluated u-
sing MTT method，and the results showed that all compounds exhibited cytotoxic activity against HepG2 and
Hep3B cell lines with IC50 values ranging from 22．5 to 104．7 μg /mL．
Key words:Caragana jubata;cytotoxicity;chemical constituents;flavonoids
931第 1期 杨新洲等:鬼箭锦鸡儿细胞毒活性成分研究