全 文 ：第 2期
年 4月
中 国 医 学 科 学 院 学 报
A C TA A CA E DM I A E M E DI CI NA E S I I NCA E
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2
A P r i l
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19 86
第皿脑室注射乙酚胆碱和毒扁豆碱对
猫肾上腺髓质释放儿茶酚胺的影响
张冀民 杨静霞
(基础医学研究所注理室 , 北京 )
提要 第 l 脑室注射 A C h 或毒扁豆碱均可使猫产生升压反应 。 A C h使 肾土腺髓质释放N E和
E减少 , 而毒扁豆碱则使释放 N E选择性升高 , 释放 N E增加可被脑室预给 M受体阻断荆阿托品所
阻断 . 表明 A Ch与毒扁豆碱对肾上腺髓质释放 C A的作用不同 , 并讨论 了可能的机制 .
关键饲 乙酞胆碱 毒扁豆碱 肾上腺髓质 儿茶酚胺 猫
兴奋 中枢胆碱能神经原 可以引起升压反应 , 此升压反应有交感神经参与 〔 ,~ 4〕, 但此时肾
上腺髓质释放儿茶酚胺 ( C A ) 是否发生改变 , 意见分岐 。 有报告采用测定血浆C A , ’肾上腺
去髓质或去神经支配等推测 肾上腺髓质释放 C A 的变化〔5~ 7〕 , 皆缺乏直接测定的证据 。 本实验
采用直接测定肾上腺静脉血去甲肾上腺素 ( N E ) 和肾上腺素 ( E )含量的方法探讨中枢胆减
能效应对肾上腺释放 C A 的影响 。
材 料 与 方 法
用体重 2~ 4公斤成年猫 48 只 , 氯醛糖 6 o m g / k g和乌拉坦 0 . 6 9 k/ g混 合溶 液 腹 腔 麻醉 ,
参照 S in d e r 〔“ 〕的定位图谱 , 将注射套管插到第 l 脑室前下部 , 座 标 为 A 1 2 . 3一 1 2 . 6 , L o,
H一 `。 以脑脊液从套管溢出作为插到位的标志 。 左股动脉插管连接水银检压计和记纹鼓连续
描记动脉血压 。 左股静脉插管用于输液 。 左 肾上腺腰静脉插管 , 全身肝素化后阻断左肾上腺
静脉 , 使肾上腺静脉血从插管 流出 , 加入一半 中分子右旋糖醉或生理盐水后经电子微量泵和
37
O
C恒温水浴 , 以比肾上腺静脉血流出速度快 5滴 / 分的速度从股静脉重新输入体内 。 动物 体
温维持在 37 . 5士 l ’ C 。 第 1 脑室对照注射用等量人 工脑脊液 ( C S F ) ,脑室注射药物均用 C S F
配制 , p H调到7 。 注射药物的剂量和体积为 : 氯 化 乙 酞 胆 碱 ( A C h ) 1 0 。卜: g八 O川 ,硫 酸 阿 托 品
2 0协g / l叩 l , 柳酸毒扁豆碱 20 一 ; 。。。 : / 1。一 2 。州 。 母次注射药物前后各收集一份肾上腺静脉血
样品 ,取血量 2~ 3m l 。 血样品 中N E和 E含量用灸光法测定 。 呱 `。 〕实验结果 进行统计学分析 。
实 验 结 果
一 、 第 1 脑室注射 A C h对肾上腺髓质释放 C A的影响
12 只猫第 1 脑室注射 A C h后 , 肾上腺释放 N E和 E显著减少 : N E减少 2 . 1士 。 . sn g / k g /
m i n (
n = 一2 , P < 0 . 0 5 ) ; E减少 、 . 0 士 。 , 3 n : / k g /m i n ( n = 1 2 , P < 0 . 0 1 ) ( l咐图 ) 。 注 射
A C h后血压升高 , 3~ 5分钟达峰 值 , 10 分钟左 右恢复到注射前水平 。 平均升压 5 . 4 士 } . t m nt H g
本义于 , 9 8 5年 7月 20 日收到
中 国 医 学 科 学 院 学 报 仑卷
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6 r 猫第 皿脑室注射 AC卜对肾上腺释放 N E和 E的影响
。线代表注射前对照血样中 C A水平
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(
n 一 , 2 , P < 0 . 0 . ) 。 血压变化与肾上腺释放 N E或 E 间未见相关关系 。
9只猫肾上腺去神经支配后 , ’肾上腺释放N E和 E速度锐减 。 第 1 脑室注射 A c h后亦未见
明显改变 。 6只猫静脉注射酚妥拉明 0 . 5 ~ l m g / k g 后 , 第 1 庙室注射 A C h的升压反应被 阻 断 ,
但 N E和 E的释放仍显著减少 : N E减少 2 . 4士 0 . sn g / k g / m in ( n = 6 , P < 。 . 0 5 ) ; E减少 5 . 7土
1
.
s n g / k g /
, n i n (
n = 6
,
P < G
.
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。
二 、 第 1 脑室注射毒扁豆碱对肾上腺位质释放 C A的影响
比只猫第班脑室注射毒扁豆碱后 , ’肾上腺释放 N E 增加 3 . 6上 o . g n g / k g / m in ( n 一 12 , P
< 0
.
05 )
. 而 肾上腺 E释放变化没有显著差别 。 血 压平 均升 高 1 2 . 8士 2 . 2 m m H g ( n 一 1 2 ,
< 0
.
0 1 )
, 血压波形与注射 A C h相似 ( 附表 ) 。
9例动物第 1 恼室预先注射阿托品可 以阻断毒扁豆碱的升压和 N E释放 , 而 阿托品本身对
肾上腺释放 N E 、 E及血压均无显著影响 。
附表 第 盆脑室注射毒扁豆碱 20 ~ 1 0 0 “ g 对肾上腺N E 、 E释放和血压的影响
T a b ! 。 T h o i ,、 f lu e ,、 e e o f i n j e e t i o n o f Ph y s o s t i g m in e 2 0一 1 0 0群 9 i n t o th e t h i r d
v e n t r i e l e o r一 B P a n d N E , E r e le a , e f r o m a d r e n a l m e d u ll a
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B e f o r e A f t e r B
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、 0 3 . 5士 5 . 5 * * .
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讨 论
拟喧械药遨过增加交感神经系统活动产生加压反应 〔 ,一 。。。 但肾上腺髓质是否参与这一 反
应一直存在争议〔“~ ’ , , `〕。 本实验表明毒扁豆碱或 A C h第 1 嘀室注射可产生升压反应 ,但对肾
上腺 N E和 E释放作用不同 。 前者可使猫肾上腺释放 N E 显著增加 , 且可被第 1 脑室预给阿托
品所阻断 , 提示这种作用是由中枢 M受体介导 ; 后者导致肾上腺释放 N E和 E减少 , 静脉注射
酚妥拉明和肾上腺去神经支配的结果表明这种释放抑制效应并非 由于血压升高反射性抑制所
引起 , 需经 内脏大神经实现 。
值得注意的是为什么 A C h和毒扁豆碱对肾上腺 C A 释放的作用相反 。 近年来的研究表明 ,
中枢至少存在三种 A C h受体 : M兴奋型 、 N兴奋型和 M抑制型 。 间脑和中脑存在抑制型 M 受
体 〔` 2 〕。 中枢很可能像外周一样存在非突触受体 〔 ` 3〕 。 基于 以上事实 ,我们推测毒扁豆碱与A C h
对肾 上腺 C A 释放影响的差别可能是 由于第 1 脑室周围控制肾上腺 C A 释放 的 神 经原 具 有
较多突触外 A C h受体 , 而终止于这些神经原的胆碱能突触相对较少 . 这些突触外受体属抑制
之 期 第 l脑室注射乙吼胆碱和毒扁豆碱对猫肾上腺髓质释放儿茶酚胺 ·的影响
型 。 外源性胆碱能激动剂易于作用于这些神经原 。 而胆碱酷酶胆抑制剂毒扁豆碱则主要作用
于突触部位 ,使释放的 A C h破坏减少 ,对突触外胆碱能受体的作用远较胆碱能激动剂为弱 , 主
要兴奋的是 M兴奋 型受体 。 另外 , 局部 A C h浓度也可能是 影响因素之一 。 中枢M兴奋型受体
更敏感 , 而 M剂制型受体数量多 , 大剂 量胆碱能激动剂常常使 M抑制型受体活动占优势 〔 ’们 。
第 l 脑室注射 A C h对血压和肾上腺 C A 释放的不同作用表明 , 交感神经中枢存在机能 分
化 。 A C h对血管运动 中枢和肾上腺髓质控制 中枢的作用不 同 , 造成两者活动的分离 。 L an d s b e -
r g等〔 ` 5 〕曾发现低血糖抑制交感神经活动 ,但 肾上腺髓质 C A 释放增加 ,认为不同植物性效应器
官 受各 白植物神经 中枢控制 我们给猫第 皿脑室注射A C h的结果也支持这一论点 。
( 木久得到黄醒亚副研究员审阅 , 特此 致谢 )
参 考 文 献
巴. o z a w a H 月 n d U e m a t s u r : e e n t r a l l y m e d i a t e d e a r d i o v a s e u l a r e f f e e t s o f i n t r a e i s t e r n a l a p P l i c a t i o n o f e a r -
b a e h o l I n a n 。 。 t h e t i z o d r a t . J P n J P h a r m a e o l
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1 9 了。 ; 2 6 : 3 3 ,
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D i r n h u b e r p a n d C u l l u m b l n e H
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E f f e e t o f a n t i e h o l i n e s t e r a s e a g e n t s o n t l一e r a t l s b l o o d P r e s s u r气 B r J
P h a r m a e
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3
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T h o a e t主o n o f e s e r i n e o n t h e b l o o d P r e s s u r e o f t h e r a r . B r J p h a r m a 。 乏9 55 ; 空。 : 3 4 ,
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1 9 6 2 , 一 ; 2 0 1
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T h o e f f e e t o f o x o t r e m o r i n e o n b l o o d P r e s s u r e a n d P l a s m a e a t e e h
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L i f e s e l 工g 了9 ; 24 : 3 0 ]
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o n s e s a n d e a t e c h o l a m z n e r e l e a s e I n 6一 h y d r o x卜 d o p a m i n 卜 t r e a t e d r a t s . E u r J p il a r m a e o l . x o 7 2 ; 1 5 : 2 6 1
7
.
B r e z e n o f f H E
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C e l一 t r a l l y i n d u e e d P r e s s o r r e s P o n s e s t o i n t r a v e n o u s a n d z n t r a v e n t r i e u l a r Ph y s o s t i g m 一n e e v o -
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S e m z一 a u 之o m a t e d m 。 是h o d f o r t h e d i f f e r e n 七一 a 诬 d e t e r m 星n a t主。 n o f P l a s m a e a t e e h o j m 泛n e s . J
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n P a t h o l o g y
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1 9 6 8 ; 2 1 : 7 5 9
一0 . A n t o n A l l a n d S a y r e D F . A s t u d y o f t h e f a e t o r s a f f e e t i n g t h e a l u m i n i u m o x i d e t r i h y d r o x y i n d o 直e P r o c e -
d u r e f o r t h e a n a l y , l 、 o f e a t e e } l o l a rn l n o s
.
J p h
a r m a e o l E x P T I , e r
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一1 . s t e w a r t G N a ,一 d R o 吕o f f J M . T b o a e t i o n o f d r u g s u P o n t h e o u t P u t o f e P i n e p h r i n e f r o m t h e a d r e n a l s v l l :
P 五y s o s t i g m 一。 e . J p 卜a r m 况 e o l E x P T h e r . 孟9 2 」 : 1 7 : 2 2 7
一2 . W a s t e d G J a l一 d Y a m a m u r . H I . A e e t y l e h o l i n e r e e e P t o r s . I n l ’ N e u r o t r a n 已m i t t e r R o e e P t o r s . p a r t Z 卜 B i o g e -
n i e A m l n e s ` ’ E d b y Y a m a m u r a , H l
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C l l a P m a n a n d H o l l P r e
s s一 9 5 一 ; 10 -
1 5
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A l e x a n d e r p a 刀 d B a e , Z M , A e e t y l c 五o l i J e : a n a P P r o a e b t o t h e m o l e e u ] a r m e e h a m i s m o f a e t i o n . p e r g a m o 。
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1 9了 考
一4 . K r s t i e M K . A f u r t h o r s t u d y o f t h e e a r d z o v a s e u l a r r e s p o n s e s t o e e n t r a j a d m l n i s t r a t i o n o f a e e t y l e 圣一。 又i n e i。
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.
N e u r ` , P h a r l n a e勺 l o g y . t 9 8 2 ; 2 1 : 1 5 1
1 6
.
R a P p a P o r t B
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E f f e e t s o f Z一 d e o x y一 D一 g l u e o s e o n 一卜。 e a r d 泛a o s y m P a t h e r l e n e r y 七 5 a n d t h e a d r e n a l m e -
d u l l a i n t卜, 1 r a t : 了u r士 h e : 户 v id e n e e f o , d z s s o e l a t i o u 。 葱 s y m F a t h e t一 e o e r v o 、 、 , v s t o m a n d a d r e n a 孟 m e d u 正l a r y
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E n d ( e r 一。 。 l o 6 y . `日8 2 ; ` 人。 : 6 o u
12 0 中 国 医 学 科 学 院 学 报 卷
In f l un e e e of T h ird V en t r icl e In l e et in o
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.
K e y w o r d s A e e t y l e h o l in e E , e r i n e A d r e n a l m e d u l la C a t e e h o la m i n e e a t
抗人胰岛素和绒毛膜促性腺激素单克隆
抗体的制备和初步应用
中国医学科学院内分泌中心采用不同的免疫方法及用不同分子量聚乙二 醇 作 为融合荆 、 将人胰岛素
( hI ) 和人绒毛膜促性激素 h( C G ) 免疫的 B AL B八小鼠脾细胞与 SZP /。小 鼠骨 髓瘤细胞融合 获 得 2 株分泌
抗 hI 和 巴株分泌抗 h C c 单.克隆抗体 ( M o Ab ) 的杂交瘤株。
他们已用上述 M o A b在国内首先建立了 IM 的 IR A (国外未见有报道 ) ; 2 . 血清如尿中hC C一步双位快速
E IL s A
; 3
. 正常胰岛 、 胰岛素瘤 、 葡萄胎和绒癌组织切片的免疫细胞化学染色 。
h c G一 E IL S A方法简单 , 可在 1 ~ 2小时内肉眼判断结果 , 其灵敏度 ( 25 mI U加he C )G 和特异性 (与 l oI U /
m e h I
J
H 无交叉 ) 与国外报道的或国外生产的试剂盒近似 . 妊娠试验的初步结果表明 , 此法比乳胶法更为
灵敏 ( 28 例怀孕36 ~ 40 天的 E L IS A的结果均为阳性 , 而乳胶法测定有 5例为假阴 性 ) 。 恶性葡萄胎和绒癌
各 1 1例 , 血清和尿中h C c 一 ELI S A与用 月一CG 抗血清的 RI A结果一致 , 而且均比用抗整分子bC c血清的RI A
更能确切反应临床情况 ` 此外 , 他们还首次在国内应用经基磷灰石柱层析法 直 接从腹 水中提取高纯度的
M c A b
. 此法较D E A一“ 纤维素简单 , 效果更佳 , 成其远比A蛋白一琼脂糖法低廉 , 应用范围也更广 .
经有关专家鉴定认为此项研究工作的科学性张 , 资料可靠 , 具有一定的 学术水平和实用价值 . 抗 hl
M
o
bA 的制备难度较大 , 至今国内外尚未见有报道 。 hc c M必 b的制备和初步应用属国内先进水平 , 可推
广应用临床实践和医学研尤 。
`协和医院科 研处 )