全 文 ：药物定性定量研究
△西藏藏医学院校级科研项目:藏边大黄的基础研究
作者简介:顿珠次仁，西藏藏医学院实验标本中心副主任，藏族，
联系方式:13658982597，电子邮箱:duncila@ 21 cn． com
紫外可见分光光度法测定藏药藏边大黄中游离蒽醌和结合蒽醌含量△
顿珠次仁 多 吉 严志宏 刘 青 达 瓦 罗 珍
(西藏藏医学院实验标本中心，西藏 拉萨 850000)
摘 要:目的:建立紫外可见分光光度法测定藏边大黄中游离蒽醌和结合蒽醌总量的方法。方法:以大黄素为对照品，醋酸
镁甲醇溶液作为显色剂，在 512nm处测定蒽醌含量。游离蒽醌的测定是用三氯甲烷直接提取游离蒽醌，显色后比色测定。
总蒽醌是先以乙醇提取总的蒽醌类化合物，然后水解成游离型蒽醌，再以游离蒽醌测定方法测之。结果:标准曲线回归方
程 Y =35． 8X + 0． 0272，对照品在 6． 2 － 18． 1μg·mL －1范围内，吸光度与浓度呈良好的线性关系(r = 0． 9994) ，平均加样回收
率为 99． 80%(ＲSD = 2． 94%)。结论:该方法简便准确，重复性好，可作为藏边大黄中游离蒽醌和结合蒽醌总量的测定。
关键词:分光光度法;藏边大黄;蒽醌
中图分类号:Ｒ291． 4 文献标识码:A 文章编号:1006 － 6810(2014)03 － 0055 － 02
藏边大黄系蓼科大黄属波叶组植物 Ｒheum emodi Wall
的根与根茎，主要分布在西藏、青海、四川及云南等省，多为
野生，西藏部分地区有种植。其根及根茎的藏名叫曲扎，藏
医、蒙医用于治疗胃肠炎、肾炎，外用止血、治疮、消炎、愈伤
口等;大黄供应紧张时，也曾调往各省区作大黄使用。《藏
药志》载:藏边大黄，味酸，苦，性寒，能排出毒家、腑热和培
根病。藏边大黄含有丰富的蒽醌类化合物，如大黄素、大黄
素甲醚和大黄酚等［1］，其具有明显的抗菌消炎、免疫调节、
抗衰老以及抗肿瘤等作用［2］。蒽醌类化合物在藏边大黄
药材中以结合态和游离态两种形式存在。本文采用紫外分
光光度法，以醋酸镁的甲醇溶液为显色剂，通过比色测定藏
边大黄中蒽醌类成分的含量［3 － 4］，为进一步开发藏边大
黄资源提供参考，也可为制订其质量指标提供方法依据。
1 仪器及试药
UV －2100 紫外可见分光光度计(郑州南北仪器设备
有限公司) ;CPA224S 电子分析天平(赛多利斯) ;醋酸镁
(Mg(Ac)2)、乙醇、乙醚、三氯甲烷、甲醇为分析纯(廊坊鹏
彩精细化工有限公司) ，大黄素标准品购自中国生物制品
检定所;藏边大黄于 2013 年 7 月采于西藏拉萨市堆龙德庆
县楚布河上游山坡(海拔 4300 米) ，经西藏藏医学院实验
标本中心多吉教授鉴定为 Ｒheum emodi Wall。
2 样品的制备和测定方法
2． 1 对照品溶液的制备:取大黄素对照品精密称量，加 0．
5%醋酸镁甲醇溶液定容配制成 6． 132、8． 063、9． 988、12．
036、13． 993、16． 077、18． 12μg·mL －1的对照品溶液。
2． 2 样品溶液的制备:①号供试品溶液，精密称量约 0． 5g
样品(过 60 目)粉末，用索氏提取器三氯甲烷回流提取至
提取液无色，浓缩提取液并转移至 50mL容量瓶中，加三氯
甲烷至刻度，备用。②号供试品溶液，精密称量约 0． 5g 样
品(过 60 目)粉末，用索氏提取器 95%乙醇回流提取至提
取液无色，浓缩提取液并转移至 100mL 容量瓶中，加 95%
乙醇至刻度。准确量取 10mL 溶液置 100mL 圆底烧瓶中．
加热挥去乙醇，加入 30mL 硫酸溶液(2． 5moL·L －1)加热
回流 1． 5h，待冷却后加三氯甲烷 20mL，加热回流 2h，待冷
却后置分液漏斗中，用三氯甲烷清洗圆底烧瓶，并入分液漏
斗，分离油层和水层，水层继续用少量三氯甲烷洗涤 4 次并
人油层，然后用少量蒸馏水洗涤数次至水层为中性为止，油
层置 50mL容量瓶中，加三氯甲烷稀释置刻度，摇匀，备用。
2． 3 测定方法:从①号和②号供试品溶液中分别量取等量
的 2mL至 10mL容量瓶中，自然挥去三氯甲烷，各加入 0．
5%Mg(Ac)2 甲醇溶液并稀释至刻度，用紫外可见分光光
度计以甲醇为空白，在最大吸收波长处分别测定吸光度 A1
和 A2(0． 5%Mg(Ac)2，) ，依标准曲线计算 C1 和 C2。(C1
为游离蒽醌含量，C2 为总蒽醌含量，结合蒽醌含量 =总蒽
醌含量一游离蒽醌含量)
2． 4 最大吸收波长选择:取对照品大黄素标准溶液(9．
988μg·mL －1) ，在 200 ～ 800nm波长范围内测定其吸光度，
可知溶液的最大吸收波长为 512nm，与文献报道相吻合。
2． 5 线性关系考察:取对照品溶液适量，加 0． 5% Mg(Ac)
2 制成浓度分别为 6． 132、8． 063、9． 988、12． 036、13． 993、
16． 077、18． 12μg·mL －1的对照品溶液。以 0． 5% Mg(Ac)2
为空白，测定各溶液在 512nm波长处的吸光度 A，并以浓度
C(μg·mL －1)为横坐标，吸光度 A 为纵坐标，绘制标准曲
线。回归方程为:Y = 35． 8X + 0． 0272(r = 0． 9994)。结果
表明，大黄素的醋酸镁络合物在 6． 2 － 18． 1μg·mL －1范围
内有良好的线性关系，标准曲线见图 1。
552014 年 3 月第 3 期 中国民族医药杂志
DOI:10.16041/j.cnki.cn15-1175.2014.03.037
图 1 对照品标准曲线
2． 6 精密度试验:取大黄素加醋酸镁甲醇对照品溶液
(16． 077μg·mL －1) ，在 512nm 波长处测定吸光度，ＲSD =
0． 21%(n = 5)。结果证明此方法精密度很好。
2． 7 稳定性试验:取大黄素加醋酸镁甲醇对照品溶液
(16． 077μg·mL －1) ，分别于 0、2、4、6、8、10、12、14h 测定
512nm吸光度，ＲSD = 0． 34010，证明此方法稳定性较好。
2． 8 重复性试验:取藏边大黄药材的样品 12 份(每份约
0． 5g) ，按“2． 2”方法制备并测定供试品溶液。结果，游离
蒽醌平均含量为 0． 652%(ＲSD = 1． 52%，n = 6) ，总蒽醌平
均含量为 5． 38%(ＲSD = 2． 83%，n = 6)。
2． 9 总蒽醌加样回收率试验:精密称取 3 份总蒽醌含量已
知的藏边大黄药材(总蒽醌含量为 5． 43%) ，每份约 0． 3g，
另精密称定对照品大黄素 0． 84mg、11． 38mg和 15． 69mg，将
此 3 份对照品分别加入 3 份样品中，按“2． 2”项下②号供
试品溶液制备方法制备并测定。计算加样回收率。结果显
示，平均加样回收率为 99． 8%(ＲSD = 2． 94%)。
3 样品测定
取藏边大黄药材粉末(过 60 目)4 份(每份约 0． 5g) ，
按照“2． 2”项下方法制备供试品溶液，两份测定游离蒽醌，
两份测定总蒽醌，测定吸光度，根据标准曲线计算样品中蒽
醌含量，结果见表 1。平均结合蒽醌含量 =平均总蒽醌含
量一平均游离蒽醌含量 = 4． 732%)。
表 1 藏边大黄样品当中游离蒽醌和总蒽醌的测定结果表
成分
取样量
(g)
吸光度
(A)
测定浓度
(mg． mL －1)
含量
(%)
平均含量
(%)
样品中游离 0． 5012 0． 516 0． 01367 0． 685% 0． 663%
蒽醌含量 0． 5167 0． 502 0． 01327 0． 642%
样品中总蒽 0． 5122 0． 4179 0． 0108 5． 32% 5． 395%
醌含量 0． 5046 0． 422 0． 01104 5． 47%
4 讨论紫外可见分光光度法测定蒽醌含量常用两种方法，
分别是碱液法和醋酸镁法，碱液法蒽醌一般在 0． 5h吸光度
最大，th后出现缓慢衰减;醋酸镁法在 1． 5h 内吸光度比较
稳定，同时醋酸镁法较碱液法简便、稳定性高、重复性好。
参考文献
［1］刘兵，杨静，王署． 藏边大黄的化学成分研究［J］． 华西
药学杂志，2007，22(1) :033 － 035．
［2］李军林，王志斌，李家实，藏边大黄降血糖作用的研究
［J］．中药材，1997，20(5) :249 － 250．
［3］姚桂根，孙小萍，马星航，等．用醋酸镁一甲醇比色法测
定何首乌及其制剂中蒽醌类成分的含量［J］．中草药，
1983，14(6) :15 － 18．
［4］高言明，陈海云，吴小宇． 醋酸镁一甲醇分光光度法测
定何首乌中蒽醌类化合物的含量［J］．微量元素与健康
研究，20104，(2) :41 － 42． 0
2012 年 7 月 28 日收稿
高效液相色谱法测定复方沙棘颗粒中异鼠李素的含量
乌兴荣
(鄂尔多斯东胜医院，内蒙古 鄂尔多斯 017000)
摘 要:目的:建立蒙成药复方沙棘颗粒的含量测定方法。方法:用高效液相色谱法对处方中沙棘的异鼠李素进行定量分
析。采用 Eclipse XDB － C18(4． 6 × 250mm，5μm)柱、波长 368nm、流动相为甲醇:水(54:46)、流速 1mL /min、柱温:230C。结
果:异鼠李素在 4． 008 － 24． 048mg范围内呈线性关系(r = 0． 9997) ，平均回收率为 99． 27%(ＲSD = 1． 91%)。
关键词:复方沙棘颗粒;高效液相色谱法;异鼠李素;含量测
中图分类号:Ｒ291． 2 文献标识码:A 文章编号:1006 － 6810(2014)03 － 0056 － 02
复方沙棘颗粒由沙棘、香附子、甘草、栀子、红花、山楂、
川贝母、北沙参、木香、肉桂等 15 味药组成。具有止咳，化
痰，平喘，清热解毒等功效。主要用于急慢性支气管炎。有
良好的临床疗效，在蒙医临床上广为应用。但由于传统制
剂的特点，本制剂不易于储存，且没有控制该制剂质量的有
效方法。经现代提取工艺研制的新型复方沙棘颗粒，在保
留了其临床疗效的基础上，便于储存，便于服用。采用高效
液相色谱法对其有效成分异鼠李素进行测定［1 － 2］，为确保
65 中国民族医药杂志 2014 年 3 月第 3 期