全 文 ：No.8.2006
苣荬菜(SonchusbrachyotusDC.)异名荬菜、野苦
菜、苦葛菜,取麻菜,为菊科植物苣荬菜的全草[1]。
主要分布于我国东北、西北、华北等地,民间食用,
亦可作为药用。野生苣荬菜长期以来生长在地势较
高的田间地头或荒野上,近年来,由于苣荬菜的营
养成分和保健功能日益受到人们的重视,在各地已
开始进行人工棚栽。苣荬菜含有丰富的黄酮,脂肪
酸,氨基酸,蛋白质和微量元素。苣荬菜有很强的药
用保健价值,具有泻火、清热解毒、安神益气、补虚
止咳的功用,治菌痢、喉炎、虚咳嗽等症。近代研究
表明,苣荬菜的黄酮含量丰富,是抗氧化、抗衰老、
增强抵抗力的有效成分。本文采用超声波法从苣荬
菜中提取黄酮类化合物[3],建立了苣荬菜中黄酮的光
谱分析方法[4-5]并对棚栽与野生苣荬菜中黄酮进行了
分析对比。
1 !#$
1.1 %&’!()
KQ-250B型超声波清洗器:昆山市超声仪器有限
公司;TU-1201紫外可见分光光度计:北京普析通用
仪器有限责任公司;RE52CS型旋转蒸发仪:上海亚
荣生化仪器厂;HHS21-4型电热恒温水浴锅:上海医
*+’,-./0123
45678
9:;,=>?,@AB,CDE,FGH
(鞍山师范学院化学系,鞍山 114005)
IJ:采用超声波法提取棚栽与野生苣荬菜中黄酮类化合物并探讨出最佳提取条件,建立了苣
荬菜中黄酮化合物的光谱分析方法并对棚栽与野生苣荬菜中黄酮进行了分析。实验结果表明方
法的回收率为107%～109%,变异系数小于0.58%。棚栽与野生苣荬菜中黄酮的含量分别为
22.21mg/kg和20.64mg/kg。
LMN:苣荬菜;黄酮;光谱分析;超声波法
1O7PQ:O657.7 RSTUV:A RWXQ:1005-9989(2006)08-0257-02
Determinationoftotalflavonesfromchicorygrowthin
wildandplasticshed
WANGCui-yan,HOUDong-yan,HUIRui-hua,LIUXiao-yuan,LIXue-cheng
(DepartmentofChemistry,AnshanNormalUniversity,Anshan114005)
Abstract:Theultrasonicextractionmethodwasusedforextractingtotalflavonoidsfromchicorygrowthinwild
andplasticshed, theoptimum extractingconditionswasinvestigated. Theflavonoidsinchicorieswere
determinedbyspectrophotometry. Theresultsshowthattherecoveryis107%～109%andthecoeficientof
variationis0.58%.Thecontentsoftheflavonoidschicoriesgrowthinwildandplasticshedwere22.21mg/kg
and20.64mg/kgrespectively.
Keywords:chicory;totalflavonoids;spectrophotometry;ultrasonicextractionmethod
YZ[\:2006-04-16
]^_‘:王翠艳(1962-),女,副教授,主要从事有机分析及天然产物化学教学与研究工作。
分析检测
257
DOI:10.13684/j.cnki.spkj.2006.08.079
No.8.2006
疗器械五厂;ZHQ型旋片式真空泵中华牌加热器:巩
义市英峪仪器一厂。
槲皮素黄酮标准品:中国药品生物制品鉴定所,
准确称取槲皮素标准品10.8mg于50mL容量瓶中,并
以70%乙醇溶液定容至刻度,作为贮备液。
野生苣荬菜和棚栽苣荬菜均购于鞍山农贸市场。
样品的处理:新鲜的苣荬菜经洗净、晾干后置于60℃
恒温干燥箱中干燥12h,取出后粉碎过40目筛备用。
1.2 !#$%&’()*+,
分别称取野生苣荬菜和棚栽苣荬菜1g,以30mL
70%乙醇于50mL锥形瓶中,在40℃的水浴中超声提取
共提取3次,每次30min合并滤液旋转蒸发,分别称量
旋转蒸发前后的质量,得到提取质量,计算提取率
分别为78.69%和73.12%。
1.3 -./012345678196
1.3.1 紫外光谱吸收曲线的绘制及测定波长的确定
将1.2提取苣荬菜黄酮样品置于50mL容量瓶中,
分别加入70%乙醇定容。再从中吸取1mL至25mL容量
瓶中,定容至刻度。以70%乙醇溶液为参比液在200～
500nm范围内扫描,得到其吸收光谱,最大吸收波长
为256nm。从1.1槲皮素黄酮标准储备液中准确吸取
0.20mL于25mL容量瓶中,以70%乙醇溶液定容至刻
度。以70%乙醇溶液为参比液在200～500nm范围内扫
描,得到其吸收光谱,最大吸收波长为256nm。由以
上实验可知,超声波法提取苣荬菜黄酮可用槲皮素
做黄酮标准品,测定波长为256nm。
1.4 :;/0123
分别取0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL的
槲皮素标准储备液,注入25mL容量瓶中,以70%乙
醇溶液定容至刻度,以70%乙醇溶液为参比液在其波
长为λ=256nm分别测定其吸光度值并且给出A值,结
果见表1。
求得A与浓度关系的回归方程为:C=14.469A-
0.1047,相关系数r=0.9994,黄酮的浓度在3.456～
10.969μg/mL范围内,A与浓度C之间呈良好的线性关
系,可按标准曲线法进行定量分析。
2 <=>?@
2.1 !#$%&AB1CD
2.1.1 提取溶剂的选择 分别称取5份1g苣荬菜样品,
以30mL无水甲醇、乙醇、丙酮、和乙酸乙酯于50mL
锥形瓶中,在40℃的水浴中超声提取共提取3次,每
次30min合并滤液旋转蒸发,分别称量旋转蒸发前后
的质量,得到提取质量,计算提取率其结果可知甲醇
的提取率最高,但由于其毒性很大对人体有一定的
危害,考虑环保因素选择乙醇作为提取溶剂。
2.1.2 提取溶剂浓度的选择 分别称取5份1g苣荬菜
样品,以30mL无水乙醇、95%乙醇、90%乙醇、80%
乙醇、70%、65%乙醇为溶剂于50mL锥形瓶中,在
40℃的水浴中超声提取共提取3次,每次30min合并滤
液旋转蒸发,分别称量旋转蒸发前后的质量,得到提
取质量,计算提取率其结果可知70%乙醇的提取率最
高,选择70%乙醇作为提取溶剂。
2.1.3 提取温度的选择 分别称取6份1g苣荬菜样品,
以30mL70%的乙醇为溶剂,依次在0℃、10℃、20℃、
30℃、40℃、50℃的水浴中超声提取共提取3次,每
次30min合并滤液旋转蒸发,分别称量旋转蒸发前后
的质量,得到提取质量,计算提取率其结果可知40℃
水浴的提取率最高,选择40℃作为最佳提取温度。
2.1.4 提取时间的选择 分别称取5份1g苣荬菜样品,
以30mL的70%乙醇为溶剂于50mL锥形瓶中,在40℃
的水浴中分别超声提取10min、20min、30min、40min
超声提取共提取3次,分别合并滤液旋转蒸发,称量
旋转蒸发前后的质量,得到提取质量,计算提取率其
结果可知超声振荡30min的提取率最高,选择30min作
为最佳超声提取时间。
2.1.5 提取次数的的选择 分别称取5份1g苣荬菜样
品,以30mL的70%乙醇为溶剂于50mL锥形瓶中,在
40℃的水浴中超声提取30min,分别超声提取1次、2
次、3次,称量旋转蒸发前后的质量,得到提取质量,
计算提取率其结果可知超声振荡3次的提取率最高,
选择3次作为最佳提取次数。
由2.1.1～2.1.5可知超声波法提取苣荬菜中黄酮最
佳提取条件为溶剂为70%乙醇,温度为40℃,提取时
间为30min,提取次数为3次。
2.2 E6FGH
用与1.4绘制吸收曲线配制相同的方法配制的样
品进行稳定性实验,结果表明样品放置3h以上,测得
其吸光度值不变。
2.3 I.J4K$LMN
根据前面确定的测试条件,按上述实验方法制备5
个不同浓度的样品,按标准加入标准物,在测定波长下
测定A,求得其平均回收率,标准偏差及变异系数,结
果分别列于表2和表3。由表2和表3可以看出本法的回
收率为99.6%～102.1%,变异系数小于0.18%,方法的
表1 A值与槲皮素黄酮浓度的关系
槲皮素黄酮浓度
(μg/mL)
3.45605.10406.91208.640010.9690
吸光度值A 0.25470.37760.47690.5984 0.7259
(下转第262页)
分析检测
258
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表2 方法精密度
编
号
取样浓度
(μg/mL)
9次测量值
(μg/mL)
平均值
(μg/mL)
标准偏差
(μg/mL)
变异系数
(%)
1 3.456 3.5458～3.6211 3.5812 0.021 0.58
2 5.184 5.3414～5.3776 5.3590 0.010 0.19
3 6.912 6.7681～6.7854 6.7780 0.006 0.09
4 8.640 8.5290～8.5781 8.5523 0.017 0.20
5 10.368 10.362～10.451910.3901 0.028 0.27
表3 方法回收率
野生苣荬菜
编号
加入前
(μg/mL)
加入量
(μg/mL)
理论值
(μg/mL)
实测值
(μg/mL)
回收率
(%)
1 3.7469 3.456 7.2029 7.8402 109
2 4.3778 3.456 7.8338 8.5029 108
3 5.0795 3.456 8.5355 9.1497 107
准确度与精密度均较高。
2.4 !#$
称取经1.1处理过的野生苣荬菜和棚栽苣荬菜样
品,按1.2实验方法制备样品溶液,按操作条件,在
测定波长λ=256nm处测其吸光度,分析结果野生苣荬
菜和棚栽苣荬菜黄酮含量分别为22.21mg/kg和
20.64mg/kg。
实验中将超声提取法与热回流法提取苣荬菜中
黄酮进行了对比,结果表明超声提取法优于热回流
法提取苣荬菜中黄酮。由于超声提取方法比热回流
法节省时间,且方法简便易行,是一种理想的提取
方法。
%&’(:
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(上接第258页)
方法检出限为0.2μg/mL。
2.6 *+,-.
将3个质量浓度水平的吡虫啉标准样品分别添加
于样品中,按照1.2进行样品处理后,每个试样重复
测试3次,回收率试验结果见表1。表1显示添加3个质
量浓度水平的吡虫啉标准样品的回收率在84.2%～
85.3%。
3 /0
采用该方法分析植物源食品中吡虫啉的残留不
仅操作简便,分析周期短,而且方法准确度高,色谱
分离效果好。主要结果为:(1)弗罗里硅土活化后立即
使用,不仅分析效果不受影响,而且分析周期大大
缩短;(2)洗脱液为丙酮,洗脱效率显著提高;(3)因吡虫
啉受热分解,故定容之前采用氮吹,可使检测方法
的准确度显著提高;(4)流动相组成为甲醇-乙腈-水
(10∶10∶80),色谱分离效果明显改善。
%&’(:
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SN/T1017.8-2004:1-4
表1 改进法的回收率(样品:市售玉米)
样品添加量(μg/kg) 回收率(%)
0.5 79.1 84.3 89.3
1 88.7 82.7 81.9
2 89.2 84.2 82.5
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
分析检测
262