全 文 ：3　讨论
　　在缺氧情况下 ,胞内依赖于 Ca2+的蛋白水解酶被激活 , 黄
嘌呤还原酶迅速转变为黄嘌呤氧化酶 ,细胞内 ATP分解为腺嘌
呤核苷 ,再由次黄嘌呤核苷至次黄嘌呤 , 并以次黄嘌呤为底物 ,
黄嘌呤氧化酶作为催化剂在有氧供应时能催化产生超氧阴离
子。在缺血期因氧耗竭而停滞的烷自由基使脂质过氧化物自
由基反应得以延续 , 进一步攻击不饱和脂肪酸 , 同时加之再灌
流带入的 Ca2+可提高黄嘌呤氧化酶活性 ,红细胞上的高价铁离
子可促进氧自由基迅速转变为羟自由基 , 二者再次重新激发自
由基连锁反应 ,最终加重缺血损伤。由于 SOD 酶活性的下降 ,
亚细胞成分和可溶性酶途径产生的自由基在缺血再灌时增多 ,
大量自由基诱发细胞及亚细胞膜脂质发生过氧化物反应 ,细胞
膜基本特征改变 ,蛋白失活 , 造成组织细胞损伤[ 7] 。 AS 能减少
缺血及缺血再灌后脑组织中 MDA 的生成 , 并表现出一定的量
效关系 ,同时能明显增加 GSH-Px 、XOD和 CAT 活性 , 增加氧自
由基的清除 ,而起到对脑组织的保护作用。
缺氧实验模型模拟缺血损伤的初步过程 , 可以用以检测药
物的抗缺血损伤的活性 ,H2O2 和 NO损伤模型可以模拟缺血损
伤中的具体过程。结果表明 , AS 对缺糖缺氧引起的神经细胞损
伤有明显的保护作用 , 表现为保护神经元和细胞结构完整性 ,
降低由缺氧引起的细胞死亡率 , 降低缺氧后脂质过氧化产物的
生成。AS 在浓度为 100、50 、25μg/ ml对 H2O2 所致神经细胞损
伤有明显的保护作用 , 可以明显降低由此而导致的细胞死亡
率。提示 AS 可以保护 H2O2 损伤所引起的细胞结构损伤 ,减轻
由细胞膜损伤导致的死亡。对于 NO 所致细胞死亡也有明显的
保护作用。
线粒体是细胞供能的主要场所 ,其通过氧化磷酸化过程不
断释放自由电子。正常情况下 , 这些自由电子可以迅速被氧化
酶系所破坏。缺血缺氧情况下 ,体内的氧化酶如 SOD等活性下
降 ,使所产生的氧离子不能迅速被清除 , 进而影响线粒体的呼
吸功能 ,使细胞受到损伤。实验结果表明 , AS 可以清除体外线
粒体自氧化系统及 FeSO 4/ Vit.C 系统中 MDA 的生成 , 且呈现
一定量效关系 ,表明药物对体外病理条件下引起的线粒体损伤
有明显的保护作用。
上述研究表明 , AS 对缺血再灌小鼠脑组织过氧化物的产生
具有明显的抑制作用 , 其作用的机制可能与保护神经元 , 抑制
线粒体自由基的产生有关。
参考文献
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草血竭抗肿瘤作用的实验研究
李文广　张小郁1　陈　晓2
(兰州医学院药理学教研室 , 　1 生理学教研室 , 　2第二附属医院普外科　兰州　730000)
　　提　要　目的:研究草血竭提取物的抗肿瘤作用。方法:体外实验采用台盼蓝拒染法和 M TT 法 ,体内实验采用小鼠移植性肿
瘤 S180和 HepA 模型。结果:草血竭体外抑制 K 562和 HL60 的 IC50为 26.2 ～ 36.7mg/ L , 1.6g/kg 对 S180和 HepA 抑制率分别为
47.3%和 52.9%。结论:草血竭在体内外均有抗肿瘤作用。
　　关键词　草血竭;抗肿瘤
　　前文报告了草血竭(polygonum paleaceum Wall)的镇痛抗炎
作用[ 1]及抗过氧化作用[ 2] ,本实验研究其抗肿瘤作用。
1　实验材料
1.1　试验药物　草血竭采自云南省丽江县 , 经醇提干燥后得
红色结晶。
1.2　试剂　新生小牛血清由本院血研所提供 , RPMI 1640 为
Gibco 产品 , 四氮唑(MTT 3-(4 , 5-dimethyithiazol-2-yl)-2 , 5-
dipheny lterazoiiumbromide)、SDS 试剂为 Sigma公司产品。
1.3　靶细胞　K562细胞株及 IL-60 细胞株由本院血研所传代
保株 ,用含 10%小牛血清 , 1×106 IU/ L青霉素和 100mg/ L链霉
素的 RPMI 1640 培养液 ,在 37℃5%CO 2 及饱和湿度的恒温箱
中悬浮培养 ,每 2 ～ 3天传代一次。小鼠移植性肿瘤S180和Hep-
A 引自甘肃省医学科学院。
1.4　动物　昆明种小鼠 , 体重 18～ 22g ,雌雄各半 , 由兰州医学
院动物房提供。
1.5　方法
1.5.1　活细胞计数法　对数生长期肿瘤细胞用培养液制成 2
×105/ml的细胞悬液 ,等量接种于 96 孔培养板 , 每孔 0.2ml , 同
时加入不同浓度的药液或溶媒(5%DMSO), 常规培养 24 小时
取出 ,台盼蓝染色 , 显微镜下计拒染活细胞数 , 计算相对抑制率
(IR%), 每组设四个平行样本。
1.5.2　MTT 比色法　将肿瘤细胞 0.1ml(2×105ml)接种于 96
31中药药理与临床 2001;17(6)
DOI :10.13412/j.cnki.zyy l.2001.06.018
孔培养板 , 加入不同浓度的药液或溶媒(5%DMSO), 调零孔加
等量完全培养液 ,每组设四个平行样本 , 在 37℃5%CO2 及饱和
湿度的孵箱中悬浮培养 24 小时 , 每孔加入M TT 10μl , 继续培养
4 小时 , 再加入 10%SDS 100μl终止反应 ,过夜 , 用DG3022 酶联
免疫检测仪(第四军医大学国营华东电子管厂产品)测定各孔
在 570nm 波长的 A 值 , 取 4 孔 A 值求平均值 , 计算抑制率
(IR%)。
1.5.3　体内抑瘤实验　无菌抽取腹水型 S180 、HepA 瘤液 ,用生
理盐水稀释成 1×108/ L细胞悬液 , 于小鼠左前肢腋窝皮下接种
瘤细胞 0.2ml。整个过程无菌操作 , 且在半小时内完成。接瘤
次日 ,随机分 4 组 ,灌胃给药连续 10 天 , 停药次日处死 , 剖取瘤
块称重 ,计算抑制率。
2　结果
2.1　草血竭对 K 562细胞生长的抑制作用　表 1 、表 2 活细胞计
数法和 MTT 法结果表明 , 草血竭对 K562 细胞的生长有显著的
抑制作用 , 抑制率与浓度呈正相关 , IC50 分别为 26.2 和
36.7mg/ L 。
　　表 1　草血竭对 K562细胞的抑制作用( x ±s , n=4)
药物(mg/ L) 活细胞计数(×104 个/ml) I R%
0 40.0±9.4
6.25 33.3±2.1 16.9
12.5 30.0±10.9 25.0
25 19.5±2.4＊＊ 51.3
50 13.3±3.6＊＊ 66.9
　　与对照组比 ＊＊P<0.01(下同)
2.2　草血竭对 HL-60 细胞生长的抑制作用　表 2MTT 比色法
结果表明 ,草血竭对HL-60 细胞的生长有显著的抑制作用 , 抑制
率与浓度呈正相关。当处理时间为 24 小时 , IC50为 30.1mg/ L。
2.3　草血竭对小鼠移植性肿瘤 S180和 HepA 的影响　表 3 结
果 ,草血竭体内对小鼠移植性肿瘤 S180和 HepA 均有明显的抑
制作用 , 0.4 ～ 1.6g/ kg 对 S180的抑制率为 18.2%～ 47.3%, 对
HepA 的抑制率为 18.6%～ 52.93%。
　　表 2　草血竭对 K562细胞的抑制作用( x ±s , n=4)
药　物
(mg/ L)
HL60
OD570nm　 IR%　
K562
OD 570nm　 I R%　
0 0.81±0.04 0.98±0.06
6.25 0.79±0.06 2.5 0.90±0.05 8.2
12.5 0.63±0.04＊＊ 22.2 0.68±0.04＊＊ 30.6
25 0.52±0.05＊＊ 35.8 0.60±0.05＊＊ 38.8
50 0.23±0.06＊＊ 71.6 0.42±0.03＊＊ 57.1
　　表 3　草血竭对小鼠移植性肿瘤的影响(n=10)
组别 剂量(g/ kg)
S180
瘤重(g) IR%
HepA
瘤重(g) I R%
对照组 1.65±0.61 1.72±0.84
草血竭 0.4 1.35±0.58 18.2 1.40±0.62 18.6
草血竭 0.8 1.29±0.54 21.8 1.16±0.66 32.6
草血竭 1.6 0.87±0.63＊＊ 47.3 0.81±0.56＊＊ 52.9
3　讨论
　　本文结果表明 , 草血竭在体内外均有一定的抗肿瘤作用 ,
体外对 K562 和 HL60 细胞的半数抑制浓度为 26.2 ～ 36.7mg/
L , 体内对 S180和 HepA 也有抑制作用 , 1.6g/ kg 的抑制率分别
为 47.3%和 52.9%。我们前文报道了草血竭有抗氧化作用 , 能
直接清除自由基 , 并能激活白细胞[ 2] , 这可能与其抗肿瘤作用
有关 ,其抗肿瘤作用的确切机理及应用前景有待深入研究。
参考文献
1　李文广 ,张小郁.草血竭镇痛抗炎作用的研究.中药药理与临床 ,
2001;17(2)∶19
2　李文广 ,田暄 ,钟惠民.草血竭醇提物体外抗脂质过氧化作用和对中
性白细胞功能的影响.中草药 , 1998;29(1)∶34～ 36
Experament study on antitumor effects of Polygonum paleaceum
Li Wenguang , Zhang Xiaoyu1 , Chen Xiao2
(Department of Pharmacology , Lanzhou Medical College , Lanzhou　730000)
　　Aim:To study the antitumor effects o f Polygonum paleaceum alcohol-ex tractiv e(PPE).Methods:T rypan blue dye exclusion and
M TT me thods w ere used in vitro , transplanted tumor of mice S180 and HepA w ere used in vivo.Results:IC50 of PPE on K562 and HL60
a t 24h were 26.2 and 36.7mg/ L respectively in vitro , and in vivo the inhibition rates of 1.6g/ kg PPE on S180 and HepA were 47.3% and
52.9%, respectively.Conclusion:PPE exerts antitumor activity.
Key words　Poly gonum paleaceum;antitumo r
海藻 、甘草及其不同比例配伍后的水提取物对实验性大鼠甲状腺肿的影响
丁选胜　　李　欧
(南京中医药大学海洋药物研究开发中心　南京　210029)
　　提　要　目的:观察海藻 、甘草及不同比例配伍后的水提取物对丙基硫氧嘧啶造大鼠甲状腺肿模型的影响。方法:大鼠灌服
丙基硫氧嘧啶 0.15g/kg 连续 10 天 , 同时分别灌服海藻 、甘草单煎液及不同比例合煎液或单煎后混合液。观察大鼠饮食 、饮水量 , 15
32 中药药理与临床 2001;17(6)
由江苏省教育厅自然科学基金资助项目编号 KJB360003