全 文 ：青牛胆化学成分的研究＊＊
王世平 , 吴艳俊 , 李　玲 , 张金娟 , 吴　君
(贵阳医学院机能学实验室 , 贵州贵阳　 550004)
[摘　要 ] 目的:对青牛胆的化学成分进行研究。方法:应用硅胶 、SephadexLH-20、RP-18柱色谱进行分离 、纯
化 , 根据理化常数和光谱分析鉴定结构。 结果:从青牛胆中分离出 5个化合物 , 经鉴定为:20β-羟基蜕皮素
(Ⅰ )、金果榄苷(Ⅱ)、非洲防己碱(Ⅲ)、尖防己碱(Ⅳ)、药根碱(Ⅴ)。结论:化合物 Ⅴ为首次从该植物中分离
得到。
[关键词 ] 色谱法 ,薄层;青牛胆;化学成分
[中图分类号 ] R284.1　　 [文献标识码 ] A　　 [文章编号 ] 1000-2707(2011)01-0009-02
AStudyonChemicalConstituentsofTinosporasagitata
WANGShiping, WUYanjun, LILing, ZHANGJinjuan, WUJun
(DepartmentofFunctionalLaboratory, GuiyangMedicalColege, Guiyang550004 , Guizhou, China)
[ Abstract] Objective:TostudythechemicalconstituentsofTinosporasagitata.Methods:Various
chromatographictechniquesincludingsilicagel, SephadexLH-20, andRP-18trabeculumwereusedto
isolatetheconstituentsofT.sagitata, andtheirstructureswereidentifiedbyspectralandchemical
methods.Result:FivecompoundswereisolatedfromT.sagitata, andtheirstructureswereidentified
as20β-hydroxy-ecdysone(Ⅰ), tinoside(Ⅱ), columbamine(Ⅲ), acutumine(Ⅳ), andjatrorrhiz-
ine(Ⅴ).Conclusion:ThisisthefirstreportthatcompoundⅤbeingisolatedfromT.sagitata.
[ Keywords] chromatogrphy, thinlayer;T.sagitata;chemicalconstituents
　　防己科青牛胆属是一个相对较大的常绿缠绕
藤本属 ,全属约 30余种 ,主要分布在东半球热带及
亚热带地区 ,我国有 6个种 2个变种 ,集中分布在
西南和南部各省区 [ 1] 。该属植物的块根常作为中
药入药。青牛胆为防己科青牛胆属植物青牛胆
(Tinosporasagitata)的干燥块根 ,有清热解毒 、消
肿镇痛之功效。内服用于治疗各种炎症 ,如咽喉肿
痛 、扁桃体炎 、急性胃肠炎 、菌痢 、痈肿疔疖等;外用
有浸膏 、磨汁涂搽或研末调搽 ,用以治疗静脉炎 、毒
蛇咬伤等症 。主产于广西 、江西 、湖北 、湖南等地 ,
是常用中药 [ 2] 。其化学成分报道较少 ,此次从青
牛胆块根中分离得到 5个化合物 ,其中化合物Ⅴ为
首次从该植物中分离得到 。
1　材料与方法
1.1　设备
熔点仪 (四川大学科仪厂生产的 WC-1熔点
仪 ,温度未校正);核磁共振波谱仪(美国瓦里安公
司 NOVA400MHz超导核磁共振波谱仪);质谱仪(
MSVGAutospec-3000 , EI-MS用 70 eV);薄层层析
硅胶和柱层层析硅胶均为青岛海洋化工厂产品 。
青牛胆药材购于贵阳市花果园药材市场 ,经贵阳医
学院王晓丽教授鉴定为防己科青牛胆属青牛胆 。
波谱数据由贵州大学精细化工研究开发中心金林
红教授提供 。
1.2　提取与分离
青牛胆干燥块根 20 kg,粉碎后以甲醇回流提
取 4次 ,每次 3h,总提取液浓缩得浸膏 ,以蒸馏水
溶解后分别用石油醚 、乙酸乙酯及正丁醇萃取 。其
中乙酸乙酯部分(309 g)经硅胶(200 ～ 300目)柱
层析 ,氯仿-甲醇(100∶0 ～ 0∶100)梯度洗脱 ,得到 5
个流分。C流分经薄层正相硅胶 、RP-18及 Sepha-
dexLH-20柱色谱分离 ,分别用石油醚-丙酮(100∶
9
第 36卷　第 1期
2011年 2月 　　　 贵 阳 医 学 院 学 报JOURNALOFGUIYANGMEDICALCOLLEGE　　　Vol.36　No.12011.2
＊ ＊ [基金项目 ]国家自然科学基金资助项目(No.30471592)
0 ～ 0∶100)、水-甲醇(100∶100 ～ 0∶100)及甲醇洗
脱 。化合物 Ⅰ(62mg), Ⅱ(12mg), Ⅲ(33mg), Ⅳ
(10mg), Ⅴ(15mg)。
2　结构鉴定
化合物 Ⅰ , C27H44O7 ,白色晶体 , mp229 ～ 230
℃。1HNMR(400 MHz, CD3OD)δ:0.95 (3H, s,
CH3-18), 0.88(3H, s, CH3 -19), 1.19(3H, s, CH3-
21 ), 1.18(3H, s, CH3 -26), 1.18(3H, s, CH3-
27)。13CNMR(100 MHz, CD3OD)δ:37.3(C-1),
68.7(C-2), 68.5(C-3), 32.5(C-4), 50.5(C-5),
206.4(C-6), 122.1(C-7), 167.9(C-8), 35.1(C-
9), 39.2(C-10), 21.5(C-11), 32.5(C-12), 48.3
(C-13), 85.2(C-14)。以上数据与文献 [ 3, 4]一
致 , TLC与标准品对照一致 , 故鉴定为 20β -羟基
蜕皮素 。
化合物 Ⅱ , C26 H32 O11。白色粉末 , 1H NMR
(400 MHz, DMSO-d6)δ:5.18(1H, brs, H-1), 6.60
(1H, m, H-2), 6.72(1H, d, J=7.0Hz, H-3), 1.31
(1H, m, H-6a), 2.97(1H, t, J=9, H-8), 2.30(1H,
dd, J=11.0, 4.0Hz, H-11b), 6.60(1H, s, H-14),
7.66(1H, s, H-15), 7.70(1H, s, H-16), 0.90(3H,
s, 19-OCH3), 1.17(3H, s, 20-OCH3)。13CNMR(100
MHz, DMSO-d6)δ:72.4(C-1), 130.3(C-2), 131.5
(C-3), 86.0(C-4), 38.5(C-5), 25.0(C-6), 16.3
(C-7), 39.9(C-8), 35.1(C-9), 55.0(C-10), 45.6
(C-11), 68.8(C-12), 130.2(C-13), 110.1(C-14),
143.5(C-15), 140.2(C-16), 173.8(C-17), 171.2
(C-18), 25.5(C-19), 24.6(C-20), 100.1(C-1′),
74.0(C-2′), 76.4(C-3′), 70.2(C-4′), 76.9(C-
5′), 60.5(C-6′)。以上数据与文献 [ 5]一致 ,故鉴
定化合物为金果榄苷(Tinoside)。
化合物 Ⅲ , C20H20NO4 ,黄色针状晶体 , mp208
～ 210 ℃。1HNMR(400 MHz, CD3OD)δ:3.97(3H,
s, 3-OCH3), 4.11(3H, s, 9-OCH3), 4.21(3H, s, 10-
OCH3), 3.26(2H, t, J=6, 12 Hz, 5-H), 4.93(2H,
t, J=6.12 Hz, 6-H), 8.00(1H, d, J=9 Hz, 11-H),
8.10(1H, d, J=9 Hz, 12-H), 8.64(1H, s, 13-H),
9.75(1H, s, 8-H)。13 CNMR(100 MHz, DEPT,
CD3OD)δ:113.23(C-1), 148.32(C-2), 152.51(C-
3), 112.06(C-4), 128.61(C-4a), 27.87(C-5),
57.62(C-6), 146.36(C-8), 135.37(C-8a), 151.92
(C-9), 145.81(C-10), 124.47(C-11), 128.17(C-
12), 123.36(C-12a), 121.12(C-13), 140.7(C-
13a), 120.75(C-13b), 56.73(3-OCH3), 57.74(9-
OCH3), 62.59(10-OCH3)。以上数据与文献 [ 6]一
致 ,故鉴定化合物为非洲防己碱。
化合物Ⅳ , C19H24ClNO6 ,淡黄色粉末 , mp:190
～ 192 ℃。 [ α] 25D-206(c=0.69, C5H5N)。1HNMR
(400 MHZ, C5D5N-d5)δ:5.01(1H, s, H-1), 5.59
(1H, s, H-3), 3.03(1H, d, J=15.6 Hz, H-5), 2.51
(1H, d, J=15.6 Hz, H-5), 2.61 ～ 2.66(2H, m, H-
14, H-15), 1.60 ～ 1.63(1H, m, H-14), 2.40 ～ 2.50
(1H, m, H-15)。13CNMR(100 MHZ, C5D5N-d5)δ:
70.7(C-1), 189.2(C-2), 105.7(C-3), 201.7(C-
4), 47.3(C-5), 193.2(C-6), 139.0(C-7), 159.9
(C-8), 41.6(C-9), 58.0(C-10), 68.4(C-11), 53.3
(C-12), 73.0(C-13), 38.6(C-14), 51.7(C-15),
59.0(2-OCH3), 60.3(7-OCH3), 60.6(8-OCH3),
36.4(NCH3)。以上数据与文献 [ 7]一致 ,鉴定化
合物为尖防己碱 。
化合物Ⅴ, C20H20NO4 ,棕黄色晶体 , mp213 ～
215℃。1HNMR(400 MHz, CDCl3)δ:9.74(1H, s,
H-8), 8.63(1H, s, H-13), 8.09(1H, d, J=7.2 Hz,
H-11), 7.98(1H, d, J=7.2 Hz, H-12), 7.55(1H,
s, H-1), 7.01(1H, s, H-4), 4.98(2H, t, J=6.0 Hz,
H-6), 3.98(2H, t, J=6.0 Hz, H-5)。13CNMR(100
MHz, CDCl3)δ:111.9(C-1), 120.6(C-1a), 148.3
(C-2), 152.5(C-3), 112.9(C-4), 128.6(C-4a),
27.8(C-5), 57.6(C-6), 146.3(C-8), 123.2(C-
8a), 151.9(C-9), 145.8(C-10), 124.4(C-11),
128.1(C-12), 135.0(C-12a), 121.1(C-13), 140.5
(C-13a), 56.7(3-OCH3 ), 57.7(9-OCH3 ), 62.6
(10-OCH3)。以上 NMR数据与文献 [ 8]一致 ,故
鉴定化合物为药根碱 。
3　讨论
青牛胆属青牛胆作为传统中药 ,可以用于治疗
咽喉肿痛 、痈疽等疾病 ,青牛胆还可促进溃疡的愈
合 ,并有体外抗炎 、抗菌的作用。青牛胆的主要化
学成分为二萜类化合物 、小檗碱型生物碱 、阿朴菲
类生物碱 、植物甾醇等。本研究对青牛胆的成分进
行了进一步的探索与研究 ,分离得到 5个化合物 ,
为青牛胆的活性研究奠定了一定基础。
(下转第 14页)
10
贵 阳 医 学 院 学 报　 36卷　
(1)与 5 d组比较 P<0.01
图 2　不同发育阶段家兔 NPY阳性细胞平均灰度值
Fig.2　Comparisonofmeangraydegrees
ofNPYpositivecelsatdiferenttime
pointsofpostnataldevelopment
有着密切关系。研究显示 ,中枢内给予 NPY, 通过
抑制 GnRH释放使大鼠的性成熟明显延迟。雌性
大鼠静脉滴注特异性 Y1拮抗剂 BIBP3226, 使垂
体 LH浓度显著增加 ,从而加快动物发育过程 ,提
示内源性 NPY对发育的启动具有抑制作用 [ 11] 。
ChoiY等[ 12]研究发现 NPY可有效增强 GDNF诱
导中肾管发育分化形成输尿管芽的作用 。综上所
述 , NPY在家兔直肠不同发育阶段的表达变化提
示 NPY参与了家兔直肠的发育及功能建立的调节
过程。
4　参考文献
[ 1] AnithaM, ChandrasekharanB, SalgadoJR, etal.Glial-
derivedneurotrophicfactormodulatesentericneuronalsur-
vivalandproliferationthroughneuropeptideY[ J] .Gas-
troenterology, 2006(4):1164-1178.
[ 2] 王沧海.消化系神经内分泌肿瘤的临床特点 [ J] .世界
华人消化杂志 , 2008(24):2788-2791.
[ 3] 范艳萍 ,石建华 , 项平.神经肽 Y结构和作用 [ J] .实用
全科医学 , 2007(6):537-538.
[ 4] 徐小冬,俞利平,尹洪萍 ,等.神经肽 Y在小鼠胃发育中的
表达及变化 [J] .世界华人消化杂志 , 2009(2):120-123.
[ 5] 石代泽 ,赵慧英 , 龙敏 ,等.发育过程中雌性鸵鸟脾脏中
神经肽 Y的分布与表达 [ J] .安徽农业科学 , 2007
(29):9263-9264.
[ 6] HerediaMdelP, DelgadoC.NeuropeptideYrapidlyen-
hances[ Ca2+] itransientsandCa2+sparksinadultrat
ventricularmyocytesthroughY1 receptorandPLCactiva-
tion[ J] .JMolCelCardiol, 2005(1):205-212.
[ 7] CoxHM.NeuropeptideYreceptors;antisecretorycontrol
ofintestinalepithelialfunction[ J] .AutonNeurosci, 2007
(1):76-85.
[ 8] 庞雪花,甘华田.神经肽 Y在免疫和溃疡性结肠炎发病中
的作用[ J] .世界华人消化杂志 , 2010(19):2013-2016.
[ 9] GodlewskiJ, akomyIM.Changesinvasoactiveintestinal
peptide, pituitaryadenylatecyclase-activatingpolypeptide
andneuropeptideY-ergicstructuresoftheentericnervous
systeminthecarcinomaofthehumanlargeintestine[ J] .
FoliaHistochemCytobiol, 2010(2):208-216.
[ 10] PangXH, LiTK, XieQ, etal.Ameliorationofdextran
sulfatesodium-inducedcolitisbyneuropeptideYanti-
senseoligodeoxynucleotide[ J] .IntJColorectalDis,
2010(9):1047-1053.
[ 11]崔毓桂 , 徐智策.神经肤 Y与发育的启动 [ J] .国外医
学计划生育分册 , 2002(20):111-114.
[ 12] ChoiY, TeeJB, GalegosTF, etal.NeuropeptideYfunc-
tionsasafacilitatorofGDNF-inducedbuddingoftheWolfi-
anduct[J] .Development, 2009(24):4213-4224.
(2010-12-14收稿 , 2011-01-12修回)
(上接第 10页)
4　参考文献
[ 1] FuLG, ChenTQ, LangKY.HigherPlantofChina[ M] .
QingDao:QingDaoPress, 2000:603-605.
[ 2] 王天志 ,杜蕾蕾 , 柏川.金果榄研究进展 [ J] .中药材 ,
2002(4):292-294.
[ 3] LinLB, FuXY, GuoYY, etal.Isolationandindentification
ofnon-alkaloidcompoundsfromTinosporahainanensis(Ⅲ)
[ J] .ChinTraditHerbalDrugs, 2001(1):12-13.
[ 4] MilerRW, KozlowskiJ, MikolajczakKL, etal.Phyto-
ecdysteroidsofDiploclisiaglaucescensseed[ J] .Planta
Medica, 1985(51):40-42.
[ 5] SongCQ, XuRS, XuYM.TheconstituentsinRadixTi-
nosporae[ J] .ActaChimicaSin, 1988 (10):1049-
10521.
[ 6] 郭幼莹 ,林连波.海南青牛胆化学成分的研究 [ J] .药学
学报 , 1998(5):350-353.
[ 7] YukihiroSugimoto, ShinobuInanaga, MasakoKato, et
al.Dechloroacutuminefromculturedrootsofmenisper-
mumdauricum[ J] .Phytochemistry, 1998(5):1293 -
1297.
[ 8] 吕光华.细梗十大功劳根的活性成分研究 [ J] .华西药
学杂志 , 1995 (4):202.
(2010-10-11收稿 , 2011-01-04修回)
14
贵 阳 医 学 院 学 报　 36卷