全 文 ：药物分析杂志 ,
云南粗茎秦芜不同采收期 种环烯醚菇普类成分的测定
曹晓燕 ,王命之
陕西师范大学药用资源与天然药物化学教育部重点实验室 ,西北濒危药材资源开发国家工程实验室 ,西安 戊巧
摘要 目的 采用高效液相色谱法 ,测定云南粗茎秦芜不同采收期根中龙胆苦昔 、马钱酸 、樟牙菜苦昔和璋牙菜昔 种环烯醚
菇昔的含量 。方法 采用 。巧 , 卜 色谱柱 ,以甲醇一 磷酸水液梯度洗脱 ,流速 ·
一 ,检测波长 。结果 龙胆苦昔的含量远远高于其他 种环烯醚枯昔的含量 ,可作为药材质量评价的重要依据 。无
论是 年生还是 年生的栽培秦芜 , 月份龙胆苦昔的含量均为最高值 。结论 确定 年生秦芫的最佳采收期为 月份 ,而
年生秦芜的最佳采收期为 月份 。
关健词 粗茎秦芫 龙胆苦昔 马钱酸 璋牙菜苦昔 璋牙菜昔 采收期
中图分类号 文献标识码 文章编号 一 一 一
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粗 茎秦芜 倪
为龙胆科 龙胆属多年生草本
植物 ,多野生于海拔 一 的高寒山区 、林缘
草地 、荒坡或疏林下 ,其干燥的根是中国药典所收载
的 “秦芜 ”药材之一 ,别称牛尾秦芫 、牛尾芫 、萝 卜秦
芜 、萝 卜芜 、滇秦芜 、大秦芫等 ,具有祛风湿 、清湿热 、
止痹痛之功效 ,主治风湿痹痛 、筋脉拘挛 、骨节酸痛 、
日哺潮热 、小儿疮积发热等症川 。现代研究表明 ,
秦芜中主要含有以龙胆苦昔为代表的环烯醚菇昔类
活性成分 ,具有抗炎 、镇痛 、保肝 、抗氧化等多种药理
作用 〔〕。关于龙胆科植物中龙胆苦昔 、马钱酸 、璋
牙菜苦昔和璋牙菜昔 种环烯醚枯昔含量的同时测
定已有相关报道 , 〕,但粗茎秦芜中 中含量的测
定尚未见报道 。
随着对秦芫研究与开发的深人 ,秦芜的需求量
日益增加 ,其野生资源受到严重破坏 ,成为国家重点
保护的野生药材之一 ,而开展人工栽培是确保秦芫
资源可持续利用的重要策略之一 。本研究以云南省
大面积栽培的粗茎秦芫为研究对象 ,采用 法
首次考察了不同生长年限和不同采收期粗茎秦芜中
龙胆苦昔 、马钱酸 、璋牙菜苦昔和璋牙菜昔 种环烯
醚菇昔的含量变化 ,以期为该地区粗茎秦芫的合理
利用和采收提供理论参考 。
仪器与材料
一 高效液相色谱仪 包括
自动进样器 ,紫外检测器 , 色谱工作站
通讯作者 介 一 ` · ·
药物分析杂志 外 ,
勺
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等 一 超纯水仪 公司
旋转蒸发仪 上海亚荣生化仪器厂
型超声波清洗器 昆山市超声仪器有限公司 。
甲醇 飞世尔科技 ,色谱纯 磷酸 天津市化学
试剂三厂 ,分析纯 所用水为超纯水。
对照品龙胆苦昔 批号 一 和璋
牙菜苦昔 批号 一 购自中国药品生物
制品检定所 ,马钱酸和璋牙菜昔购自北京中西化玻
有限公司 ,纯度均大于 。
不同采收期的样品于 年 月一 月采自
云南丽江玉龙县秦芜种植基地 ,海拔 ,经陕
西师范大学植物学教研室鉴定为粗茎秦芜 倪
的根 。
方法与结果
溶液制备
对照品溶液 分别精密称取对照品龙胆苦
昔 、马钱酸 、璋牙菜苦昔和璋牙菜昔适量 ,用甲醇分
别配成龙胆苦昔 · 一 、马钱酸 ·
一 、璋牙菜苦昔 · 一 、璋牙菜昔
· 一`的单一成分溶液 , 卜 滤膜过滤后作为
对照品溶液 。
供试品溶液 样品晾干后打成粉末 ,过
目筛 ,分别精密称取 ,置 具塞锥形瓶中 ,
准确加人甲醇 ,称定重量 , ℃超声 ,
提取 ,用甲醇补足重量 ,摇匀 、放置 ,
上清液经 卜 微孔滤膜过滤 ,即得供试品溶
液 。
· 色谱条件 色谱柱
, 林 流动相 甲醇一 磷酸水溶液梯
度洗脱 一 ,甲醇 。 流速
· 一 检测波长 柱温 ℃进样量
卜 。在上述色谱条件下 ,对照品及样品色谱图见
图 。马钱酸 、璋牙菜苦昔 、龙胆苦昔和璋牙菜昔保
留时间分别为 , , , 理论
塔板数按龙胆苦昔峰计为 各色谱峰之间的分
离度均大于 。
线性关系考察 分别精密吸取 “ ”项下
制备的马钱酸和璋牙菜苦昔对照品溶液 , , , ,
林 ,龙胆苦昔对照品溶液 , , , , , , , ,
林 ,璋牙菜昔对照品溶液 , , , , ,
卜 ,在上述色谱条件下依次进样 ,以峰面积为纵坐
标 ,进样量为横坐标 ,计算龙胆苦昔 、马钱酸 、璋牙菜
苦昔 、璋牙菜昔回归方程分别为
图 对照品 及样品 , 年生 月采收 色谱图
脚 之
,
马钱酸 璋牙菜苦着 面 龙胆苦昔
罗 璋牙菜昔
线性范围分别为 一巧 , 一 , 一 ,
一 卜 。
精密度试验 取龙胆苦昔对照品溶液 ,在上述
色谱条件下连续进样 次 ,求得龙胆苦昔峰面积积
分值的 为 ,表明仪器的精密度良好 。
稳定性试验 取同一批样品 ,按 “ ”项下方
法制备供试品溶液 ,分别于 , , , , , 吸取
供试品溶液 林 ,进样分析并记录峰面积 ,龙胆苦
昔 、马钱酸 、璋牙菜苦昔 、璋牙菜昔峰面积 二
分别为 , , , ,表明供试品
溶液在 内稳定 。
重复性试验 取同一批样品 年生 月采
收 ,按 “ ”项下方法平行制备供试品溶液
份 ,依次进样 ,测得龙胆苦昔 、马钱酸 、璋牙菜苦昔 、
璋牙菜昔含量平均值 二 分别为 ,
, , 分别为 , ,
, 。
加样回收率试验 精密称取已知含量的样品
年生 月采收 ,共 份 ,每份分别准确加人
龙胆苦昔 , “ ”项下制备的马钱酸对照品
,璋牙菜苦昔对照品 ,璋牙菜昔对照品
,按 “ ”项下方法平行制备供试溶液 ,吸取供
试溶液 林 进样分析 ,计算回收率 。测得龙胆苦
昔 、马钱酸 、璋牙菜苦昔和璋牙菜昔的加样回收率
分别为 , , ,
, , , 。
样品测定 按样品溶液制备方法制备不同采收
期的样品溶液 ,按照上述色谱条件进样 ,测定峰面积 ,
按外标法计算 ,所测 种环烯醚菇昔的含量见表 。
药物分析杂志 , 一 一
表 粗茎秦芜不同采收期 种环烯醚菇昔的含
翻沈 沙加 〔油血 月 如 “肠 血 田, 垃
生长年限
玩 。
采收期
一
龙胆苦昔
罗 叩
马钱酸
山 。
瘴牙菜苦昔
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璋牙菜昔
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总量
习
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月 记
月
月
月
月
平均含量 拍
月
月
月
月
月
平均含量
结果与讨论
本实验考察了水 、甲醇 、 乙醇等不同提取溶
剂 ,超声 、回流等不同提取方式及提取时间对提取效
率的影响 ,结果表明 ,以甲醇超声 而 即可提取
完全 ,因此确定该提取方法 色谱流动相选择甲醇
水 、甲醇一 磷酸水 、甲醇一 乙酸水等体系
进行梯度洗脱 ,结果以甲醇一 磷酸水梯度洗脱
得到的色谱峰形较好 ,各色谱峰之间可达到良好的
分离效果 由于马钱酸 、璋牙菜苦昔 、龙胆苦昔 、璋牙
菜昔的最大紫外吸收波长分别为 , , ,
,故同时测定 种环烯迷菇昔时 ,波长确定为
,且在该条件下色谱峰的信息量大 ,故本实验所
采用的 测定方法不仅可同时用于 种环烯醚
菇昔含量的测定 ,还可用于秦芫特征图谱的研究 。
从表 可以看出 ,龙胆苦昔的含量远远高于其
他 种环烯醚菇昔 马钱酸 、璋牙菜苦昔和璋牙菜
昔 的含量 ,龙胆苦昔含量的变化趋势基本上与
种环烯醚菇昔总和的变化趋势一致 。在所测的
批不同生长年限和不同采收期的药材中 ,均是龙胆
苦昔的含量最高 ,璋牙菜昔的含量最低 且除了 年
生 月份采收的 批药材外 ,其他 批药材中 种
环烯醚菇昔的含量均为龙胆苦昔 马钱酸 璋牙菜
苦昔 璋牙菜昔 ,这与青海栽培的麻花秦芫中 种
环烯醚菇昔的含量高低 〔 是一致的。从粗茎秦芫
和麻花芫的 种环烯醚菇昔含量上看 ,粗茎秦芫中
龙胆苦昔 、马钱酸和璋牙菜苦昔的含量普遍略高于
麻花芫中的含量 ,但璋牙菜昔的含量却明显低于麻
花芫中的含量 ,相差 倍左右 。
从采收年限上看 , 年生的药材在龙胆苦昔含
量及 种环烯醚菇昔总和含量上略高于 年生药
材 ,但并不具有明显的优势 。无论是 年生还是
年生的栽培粗茎秦芜 , 月份龙胆苦昔的含量均为
最高值 。对于 年生的药材 ,龙胆苦昔 、马钱酸和璋
牙菜苦昔含量的变化趋势较为一致 ,均为 月
月 月 月 月 但对于 年生的药材 ,龙
胆苦昔 、马钱酸和璋牙菜苦昔 种成分含量的变化
趋势并不一致 ,其中 种环烯醚菇昔总和的变化趋
势为 月 月 月 月 月 。造成 年
生和 年生粗茎秦芜有效成分含量积累变化差异的
原因 ,推测可能是由于 年生的粗茎秦芫经历了开
花结实的阶段 ,而 年生的粗茎秦芜很少开花。因
此在采收的时候 ,可根据不同的生长年限确定不同
的采收期 ,即 年生的药材最佳采收期为 月份 ,而
年生药材最佳采收期为 月份 。
致谢 感谢云南丽江玉龙县新主村的杨杰武师傅在药材
收集方面所提供的帮助 。
参考文献
中国药典 的 一部
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生与栽培藏药麻花芜中 种环烯醚菇昔类成分的含量
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昔类成分含量的季节性变化 八恤￡尸八以双曰。曰 天然产物研究与
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