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全萼秦艽与长梗秦艽的生药学研究



全 文 :2010 年 11 月第 17 卷第 11 期 中国中医药信息杂志 ·41·
全萼秦艽与长梗秦艽的生药学研究
顾成玉,赵志礼,吴靳荣,王峥涛
(上海中医药大学,上海 201203)
摘要:目的 对藏药解吉那保的两种原植物全萼秦艽 Gentiana lhassica Burk.与长梗秦艽 Gentiana waltonii
Burk.进行生药学研究,为该藏药的质量标准制定提供资料。方法 以粗茎秦艽为对照药材,应用形态学、薄层色谱法
及高效液相色谱法对其进行形状观察、定性鉴别及龙胆苦苷含量测定,色谱柱为 Ultimate ODS-3 C18 色谱柱(250 mm×
4.6 mm,5 µm),流动相:水-甲醇(7∶3),流速 1 mL/min,柱温 40℃,检测波长为 254 nm。结果 薄层色谱法专属性
强;全萼秦艽和长梗秦艽地上部分龙胆苦苷的含量高于地下部分。结论 可为藏药解吉那保的品种鉴定及质量标准
制定提供科学依据。
关键词:全萼秦艽;长梗秦艽;藏药;解吉那保;薄层色谱法;高效液相色谱法;龙胆苦苷
DOI:10.3969/j.issn.1005-5304.2010.11.017
中图分类号:R282.6 文献标识码:A 文章编号:1005-5304(2010)11-0041-03
Pharmacognostical Study on Gentiana lhassica Burk. and Gentiana waltonii Burk. GU Cheng-yu,
ZHAO Zhi-li, WU Jin-rong, et al (Shanghai University of Chinese Medicine, Shanghai 201203, China)
Abstract:Objective To provide basic data for the identification and quality control of Tibetan medicine
‘Jieji-Nabao’. Methods Gentiana lhassica Burk. and Gentiana waltonii Burk. were identified by TLC and
content of the gentiopicroside was determined by HPLC. The column of Ultimate ODS-3 C18 (250 mm×
4.6 mm, 5 µm) was used. The mobile phase was water-methanol (7∶3), at the flow rate of 1.0 mL/min, the
column temperature of 40 ℃, and peaks were detected at 254 nm. Results The characteristics of identification
by TLC were distinct and highly specific, and the contents of gentiopicroside in the aerial parts were higher
than in the subterranean parts. Conclusion The method can be used effectively for the quality control of
Tibetan Medicine ‘Jieji-Nabao’.
Key words:Gentiana lhassica Burk.;Gentiana waltonii Burk.;Tibetan Medicine;Jieji-Nabao;TLC;
HPLC;gentiopicroside
藏医常用药解吉那保主要用于治疗热性赤巴病等,赤巴病
是一类由于饮食不当、偏咸偏酸、饮食不洁、消化不良等原因
引起的肝胆类疾病[1]。据文献记载与笔者的实地调查,解吉那保品
种涉及龙胆科龙胆属秦艽组 5 种开蓝紫色花的植物:粗茎秦艽
Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.、小秦艽 G.dahurica
Fisch.、管花秦艽 G.siphonantha Maxim.ex Kusnez.、全萼
秦艽 G.lhassica Burk.和长梗秦艽 G.waltonii Burk.[2-3]。在
上述 5 种解吉那保的基源植物中,粗茎秦艽和小秦艽为《中华
人民共和国药典》(一部)收载品种。我们前期已对管花秦艽进
行了生药学研究[4];目前除了对长梗秦艽的化学成分有少量研
究报道外[5],尚未见到对全萼秦艽和长梗秦艽系统深入的生药
学研究工作。因此,笔者拟开展对全萼秦艽和长梗秦艽的生药
学研究,结合相关研究工作,以期为藏药解吉那保系统的质量
标准制定提供基础资料。
1 仪器与试药
Agilent 1100 系列高效液相色谱仪,包括在线脱气机;四
元泵;自动进样器;柱温箱;PDA 检测器;Agilent 在线工作
站。水为重蒸馏水,甲醇为色谱纯,其余试剂为分析纯。

基金项目:上海市教育委员会科研创新重点项目(09ZZ131)
通讯作者:赵志礼,E-mail:zhilzhao@sohu.com
龙胆苦苷由上海中药标准化研究中心提供(经测定,纯度
在 98%以上)。全部试验材料均为自采,经上海中医药大学赵志
礼教授鉴定;凭证标本存放于上海中医药大学中药学院药用植
物标本室,见表 1。
表 1 样品来源及凭证标本
原植物 产地 凭证标本
全萼秦艽G.lhassica Burk. 西藏拉萨 赵志礼2008XZ021
全萼秦艽G.lhassica Burk. 西藏拉萨 赵志礼2009XZ002
长梗秦艽G.waltonii Burk. 西藏林芝 赵志礼2007701
长梗秦艽G.waltonii Burk. 西藏拉萨 赵志礼2009XZ001
粗茎秦G.crassicaulis Duthie ex Burk. 云南德钦 赵志礼2008XR03
2 药材性状
全萼秦艽的根呈近圆柱形,由数个支根扭结而成。长 7~
12 cm,直径可达 0.7 cm。表面棕褐色,粗糙;质脆,易折断。
断面黄白色。长梗秦艽的根呈近圆柱形,由数个支根扭结而成。
长 10~25 cm,直径可达 1 cm。表面灰褐色,质稍软,易折断。
断面黄白色。
3 定性鉴别
3.1 对照品溶液的制备
精密称取龙胆苦苷适量,加甲醇制成浓度为 0.5 mg/mL 的
对照品溶液。
·42· Chinese Journal of Information on TCM Nov.2010 Vol.17 No.11
3.2 供试品溶液的制备
精密称取秦艽样品各0.5 g,加入 20 mL甲醇,超声30 min,
滤过,回收溶剂至干,残渣用氯仿萃取 3 次,合并氯仿液,回收
溶剂至干,加 1.5 mL 甲醇溶解,备用(氯仿部位)。将氯仿萃取
后的残渣用正丁醇萃取 3 次,合并正丁醇液,回收溶剂至干,加
1.5 mL 甲醇溶解,备用(正丁醇部位)。
3.3 薄层色谱鉴别
氯仿部位:长梗秦艽、全萼秦艽和粗茎秦艽供试品点样量
分别为 0.5、0.5、3.5 µL,带宽 6 mm,展距 8 cm,氯仿-正己烷
(10∶0.5)展开。显色剂为 10%硫酸乙醇,加热至显色,见图 1。
正丁醇部位:供试品点样量 3 µL,对照品溶液为 3.5 µL,
带宽 6 mm,展距 8 cm。用氯仿-甲醇-甲酸(7.5∶2.5∶0.12)
展开,等溶剂前沿至原点 1/2 板长时,停止展开;再用氯仿-甲
酸(10∶0.12)为展开剂,进行二次展开。显色剂为 10%硫酸乙
醇,加热至显色,结果见图 2。







可见光下检视 紫外灯(365 nm)下检视
注:3.上梗秦艽;1.全萼秦艽;5.粗茎秦艽
图 1 氯仿部位薄层色谱图







可见光下检视 紫外灯(365 nm)下检视
注:G.龙胆苦苷;3.上梗秦艽;1.全萼秦艽;5.粗茎秦艽
图 2 正丁醇部位薄层色谱图
氯仿萃取部位用 10%硫酸乙醇溶液显色后,在紫外光灯下
(365 nm)检视,薄层色谱图中可观察到不同秦艽品种的特征谱
带:如全萼秦艽 Rf 值约为 0.10 处有一橙黄色条带,而长梗秦
艽和粗茎秦艽则没有;粗茎秦艽 Rf 值约为 0.85 处有一蓝色条
带,长梗秦艽和全萼秦艽则没有。
正丁醇萃取部位同样用 10%硫酸乙醇溶液显色后,在紫外
灯下(365 nm)检视,全萼秦艽 Rf 值约为 0.25 处有一蓝紫色条
带,而长梗秦艽和粗茎秦艽没有,可将其鉴别出来;在 Rf 值约
为 0.40 处的一浅蓝色条带,长梗秦艽没有,因此又可以把长梗
秦艽和粗茎秦艽区别开来。
4 含量测定
4.1 色谱条件
色谱柱为Ultimate ODS-3 C18(250 mm×4.6 mm,5 µm),流动
相为水-甲醇(7∶3),检测波长254 nm,柱温40 ℃,流速1 mL/min。
4.2 对照品溶液的制备
精密称取龙胆苦苷对照品适量,加甲醇制成 0.5 mg/mL 对
照品溶液。
4.3 供试品溶液的制备
样品粉碎后过 3 号筛,分别取药材粉末约 0.5 g,精密称
定。加甲醇 20 mL,加热回流 30 min,放冷,滤过,滤液减压回收
至干,残渣用适量甲醇溶解,滤过,转移至50 mL容量瓶中,加甲
醇至刻度,摇匀,精密量取 1 mL,置 5 mL 容量瓶中,加甲醇至刻
度,摇匀,0.45 µm 滤膜过滤,备用。
4.4 样品测定
分别吸取对照品溶液、供试品溶液各 10 µL,注入液相色
谱仪。计算样品中龙胆苦苷的含量,结果见表 2。
表2 全萼秦艽与长梗秦艽根、茎叶和花中龙胆苦苷含量测定结果(n=3)
样品编号 原植物 部位 含量(%) RSD(%)
2008XZ021 全萼秦艽 G.lhassica Burk. 根 1.05 2.47
茎叶 1.91 1.09
花 1.85 -*
2009XZ002 全萼秦艽 G.lhassica Burk. 根 1.63 3.16
茎叶 4.74 1.36
花 4.40 -*
2009XZ001 长梗秦艽 G.waltonii Burk. 根 1.72 3.78
茎叶 6.71 2.33
花 7.00 -*
2007701 长梗秦艽 G.waltonii Burk. 根 1.40 3.12
注:*测试受样品量限制,n=2
5 讨论
秦艽类药材所含的化学成分丰富,且成分之间相似度高,
薄层色谱定性鉴别难度大。笔者尝试分极性段进行薄层色谱鉴
别,找到全萼秦艽、长梗秦艽与对照药材粗茎秦艽之间的特征
性鉴别谱带,可为秦艽类药材的定性鉴别提供参考。
全萼秦艽、长梗秦艽为国家药典品种秦艽的近缘种,因此
我们参考《中华人民共和国药典》(一部)秦艽项下有关含量测
定指标与方法,测定其龙胆苦苷含量,取得预期结果。
传统藏药解吉那保的药用部位为花[2],而我们定量分析结
果显示,全萼秦艽、长梗秦艽的茎叶和花中龙胆苦苷的含量高
于根中的含量,提示这 2 个品种地上部分的质量可能优于地下
部分;同时,分析结果亦与藏药用药习惯相一致,此现象值得我
们进一步思考与探究。
2005 年版《中华人民共和国药典》(一部)收载的秦艽品
种,规定其根中龙胆苦苷的含量不低于 2.0%[6]。然而,全萼秦艽
和长梗秦艽的根中龙胆苦苷的含量均低于此标准,茎叶和花中
的含量多达到要求,含量还比较高。这种龙胆苦苷在植株地上
部分高富集的分布特性,是否与其生长的特殊生态环境(高海
拔、强紫外线,昼夜温差大等)密切相关,需要更深入的研究。
参考文献:
[1] 宇妥·元丹贡布.四部医典[M].上海:上海科学技术出版社,1987.64-
66.
2010 年 11 月第 17 卷第 11 期 中国中医药信息杂志 ·43·
·质量标准研究·
高效液相色谱法测定茴桂妇炎胶囊中
芍药苷的含量
吴基威,朱锐金
(清远市药品检验所,广东 清远 511517)
摘要:目的 建立高效液相色谱法测定茴桂妇炎胶囊中芍药苷含量的方法。方法 采用 DiamonsilTM C18色谱柱
(200 mm×4.6 mm,5 µm),以甲醇-0.05 mol/L 磷酸二氢钾(30∶70)为流动相,流速 1.0 mL/min,检测波长 230 nm,柱
温 23 ℃。结果 芍药苷在 0.506~2.024 µg 范围内有良好的线性关系(r=0.999 7),平均回收率为 100.66%,RSD=
1.24%。结论 本法操作简单,精密度好,结果准确可靠,可作为茴桂妇炎胶囊的质量控制标准。
关键词:茴桂妇炎胶囊;高效液相色谱法;芍药苷;含量测定
DOI:10.3969/j.issn.1005-5304.2010.11.018
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1005-5304(2010)11-0043-02
Determination of Peoniflorin in Huiguifuyan Capsules by HPLC WU Ji-wei, ZHU Rui-jin (Qingyuan
Institute for Drug Control, Qingyuan 511517, China)
Abstract:Objective To establish an HPLC method for determination of peoniflorin in Huiguifuyan
capsules. Methods The analysis was performed on a DiamonsilTM C18 (200 mm×4.6 mm, 5 µm) column.
The mobile phase was methanol-0.05 mol/L potassium dihydrogen phosphate (30∶70) at a flow rate of
1.0 mL/min. The detective wavelength was 230 nm and the column temperature was 23 ℃. Results The
linear range of peoniflorin was 0.506~2.024 mg/mL (r=0.999 7), with average recovery of 100.66% and
RSD of 1.24%. Conclusion The method is accurate, reliable, specific and can be used for the quality control
of Huiguifuyan capsules.
Key words:Huiguifuyan capsules;HPLC;peoniflorin;content determination
茴桂妇炎胶囊为广东省英德市中医院院内制剂,由小茴
香、肉桂、赤芍、桂枝、当归、川芎等多味中药组成,具有温
经通阳散寒、养营活血、化瘀止痛之功效,主治妇科慢性盆腔
炎寒湿凝滞证。原标准中(广东省英德市中医院自制制剂质
量标准,2008.18-20)已对小茴香、肉桂、桂枝、赤芍、当归、
川芎进行了显微鉴别及薄层色谱鉴别的研究,但还未建立含
量测定的项目。为了有效地控制该制剂的质量,本试验建立
了该制剂中芍药苷的高效液相色谱(HPLC)测定方法。现报道
如下。
1 仪器与试药
Agilent1200 高效液相色谱仪;SartoriusCP225D 型十万
分之一电子分析天平;AE200 型万分之一电子分析天平。
茴桂妇炎胶囊由广东省英德市中医院制剂室生产,批号
2007011601、2007011602、2007011603;芍药苷对照品(中国
药品生物制品检定所,批号 110736-200526)。甲醇为色谱纯,
水为超纯水,其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱:DiamonsilTM C18(200 mm×4.6 mm,5 µm);流动相:
甲醇-0.05 mol/L 磷酸二氢钾(30∶70),柱温:23 ℃,流速:
1.0 mL/min;检测波长:230 nm;进样量:10 µL;理论塔板
数按芍药苷峰计算不低于 3 000。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液的制备 取芍药苷对照品 12.65 mg,精密
称定,置50 mL容量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,作为对照
品储备液。取对照品贮备液 5 mL,置 10 mL 容量瓶中,加流动
相稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液的制备 取本品 1 g,精密称定,置具塞锥

[2] 帝玛尔·丹增彭措.晶珠本草[M].上海:上海科学技术出版社,1986. 119.
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(收稿日期:2010-06-01,编辑:华强)