免费文献传递   相关文献

甘肃道地中药大黄、黄芩对多重耐药菌的抑菌活性



全 文 :2014年第 27卷第 5期
中国科技 核心期刊
多重耐药细菌感染的治疗是临床棘手问题,
而细菌的耐药性多来自于耐药质粒的传播。中药
不易产生药物残留,可避免产生耐药性,也不会造
成环境污染,且种类繁多,资源丰富,属天然植物
药,具有毒副作用小、应用安全、价格低廉等优点。
相关研究显示,中草药对耐药(R)质粒有消除作
用[1-6],本研究选取甘肃省道地中药中的大黄和黄
芩,检测二者对产超广谱 β-内酰胺酶(ESBLs)大
肠埃希菌及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的
抑菌活性,以期为中药治疗耐药菌感染提供理论
依据。
1 材料与方法
1.1 试验菌株本组产超广谱 β-内酰胺酶(ES-
BLs)大肠埃希菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌
株均由甘肃省中医院检验科微生物室依照CLSI
文件要求从临床标本中分离并鉴定。
1.2 器材M-H(Muelller-Hinton)琼脂平板(麦
迪公司提供);M-H肉汤、营养肉汤、营养琼脂干粉
方 药·道地药材
甘肃道地中药大黄、黄芩
对多重耐药菌的抑菌活性
梁 勤,乔登嫣△,马小明,罗向霞,李喜香,周思彤,窦娇莹
甘肃省中医院,甘肃 兰州 730050
[摘 要]目的:观察甘肃道地中药材大黄、黄芩的体外抑菌活性,为临床中药治疗耐药菌感染提供参考。
方法:采用煎煮法制备大黄、黄芩中药原液,用肉汤稀释法测定两种药液对产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠
埃希菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的最小抑菌浓度。结果:大黄对产超广谱 β-内酰胺酶(ESBLs)大
肠杆菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的最小抑菌浓度分别为250mg/mL和125mg/mL。黄芩对耐甲氧
西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的最小抑菌浓度为250mg/mL;对产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠杆菌未见明
显抑菌作用。结论:大黄、黄芩对临床常见的多重耐药菌有不同程度的抑菌活性,且大黄的抑菌活性优于黄芩;
大黄对金黄色葡萄球菌抑菌活性优于大肠埃希菌。
[关键词]大黄;黄芩;多重耐药菌;抑菌
[中图分类号]R284[文献标识码]A [文章编号]1004-6852(2014)05-0005-03
Antibacterial Activity of Gansu Genuine Herbs DaHuang
and HuangQin on Multiple Resistant Bacteria
LIANG Qin, QIAO Dengyan△, MA Xiaoming, LUO Xiangxia, LI Xixiang, ZHOU Sitong, DOU Jiaoying
Gansu Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine, Lanzhou 730050, China
AbstractObjective: To provide reference for herbs in treating drug resistant bacteria infection by observing
antibacterial activity of Gansu genuine herbs DaHuang (Rheum palmatum L.) and HuangQin (Scutellaria Baicalensis)
in vitro. Methods: The decoctions of DaHuang and HuangQin were prepared, the minimum antibacterial
concentrations of two kinds of decoctions for extended spectrum β lactamases(ESBLs) E.coli and methicillin-resistant
staphylococcus aureus (MRSA) were detected with broth dilution method. Results: The minimum antibacterial
concentrations of DaHuang for producting ESBLs E.coli and MRSA were 250mg/mL and 125 mg/mL. The
minimum antibacterial concentrations of HuangQin for producting MRSA were 250mg/mL, and it didn′ t show
notable antibacterial function to ESBLs E.coli. Conclusion: DaHuang and HuangQin show different degrees of
antibacterial activity to common multiple resistant bacteria, and antibacterial activity of DaHuang is superior to that
of HuangQin; antibacterial activity of DaHuang to MRSA is superior to that of ESBLs E.coli.
KeywordsDaHuang; HuangQin; multiple resistant bacteria; antibacterial Activity
5
Western Journal of Traditional Chinese Medicine,2014 Vol.27 No.5
中国科技 核心期刊
(均由杭州微生物有限公司生产);XK96-A快速混
匀器(姜堰市新康医疗器械有限公司生产);721分
光光度计(山东高密彩虹分析仪器有限公司生产)。
1.3 中药的选择与提取两种中药制剂均由甘
肃省中医院药剂科用煎煮法制备。大黄、黄芩浓缩
提取,浓度均为1g/mL,经121℃下灭菌20分钟,
-20℃保存备用。
1.4 药液制备排列无菌试管10支,于第2~10
管中各加无菌营养肉汤5mL,取大黄10mL,于第
一管中加入5mL,第2管中加入5mL,将第2管中
溶液混合后取出5mL,加入第3管,再混合后取出
5mL,加入第4管,如此连续稀释至第 9管,取出
5 mL弃掉,第10管仅为无菌营养肉汤做对照,则
第1~10管为不同浓度药液5mL。黄芩制备方法同
大黄。最终每支试管的药物浓度为1000、500、250、
125、62.5、31.25、1 .63、7.82、3.91、0mg/mL。
1.5 菌液制备将两种菌株分别用 M-H 肉汤
35℃培养2~6 小时,用 M-H 肉汤稀释菌液到 0.5
麦氏比浊管浊度(721分光光度计625nm吸光度
为0.08~0.10),约含菌1~2×108cfu/mL。
1.6抑菌实验 将“1.4”项下配好的菌液分别加
入“1.5”项下稀释的两种药液中,每管加菌液1mL,
置35℃孵厢培养24~48小时,于24、48小时时分
别吸取0.1mL转种营养琼脂平板一次,置35℃孵
厢培养48小时观察细菌生长情况,判断中药的最
小抑菌浓度。
2 结果
大黄对产超广谱 β-内酰胺酶大肠杆菌和耐
甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的最小抑菌浓度
分别为 250 mg/mL 和 125 mg/mL;黄芩对 MRSA 的
最小抑菌浓度为250mg/mL;对ESBLs大肠杆菌未
见明显抑菌作用,见表1。
方 药·道地药材
表1 大黄、黄芩对产超广谱 β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的MICmg/mL
药物 菌株
中草药浓度(24h/48h)
1000 500 250 125 62.50 31.25 15.63… 0
大黄
大肠埃希菌 -/- -/- -/+ +/+ +/+ +/+ +/+ +/+ +/+
金黄色葡萄球菌 -/- -/- -/- -/- +/+ +/+ +/+ +/+ +/+
黄芩
大肠埃希菌 -/- +/+ +/+ +/+ +/+ +/+ +/+ +/+ +/+
金黄色葡萄球菌 -/- -/- -/+ +/+ +/+ +/+ +/+ +/+ +/+
注:-表示不生长;+表示生长;0为阴性对照。
3 讨论
相关报告数据显示引起医院感染的病原菌分
离率最高的革兰氏阴性菌是大肠埃希菌,阳性菌
为金黄色葡萄球菌,且高耐抗生素的产超广谱 β-
内酰胺酶大肠埃希菌和 MRSA 分离率高达 70.4%
和56.5%[7]。所以寻求有良好抑菌作用的中药成
为目前研究的热点。
本研究结果表明,大黄对产超广谱 β-内酰胺
酶大肠埃希菌和MRSA有较好的抑制作用,与费娜
等[8]研究结果相符。黄芩对MRSA有抑制作用,与
苏广珠等[9]的研究结果类似;对产超广谱 β- 内
酰胺酶大肠杆菌未见明显抑菌作用,说明不同药
物在MRSA最小抑菌浓度方面差异明显;同一种药
物对MRSA和产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌可表
现出不同的抑菌浓度;经稀释的黄芩没有表现出
明显抑菌浓度,其原因可能是本实验采用的煎煮
方法不利于提取其有效抑菌成分。需要强调的是,
中药对厌氧菌的药物敏感性实验还没有制定统一
标准,且需要进一步规范中药的品种、产地、炮制
方法,以便为中药治疗厌氧菌感染提供更科学的
实验依据[10]。近年来随着抗生素的广泛使用,由
金黄色葡萄球菌导致的院内感染的发生率也逐年
升高,临床多可出现对多种抗菌药物耐药,且此细
菌分布广、传播快,故临床对其感染者的治疗较为
困难。本研究结果表明黄芩、大黄对常见院内感
染细菌具有抑制作用。
参考文献
[1] 鞠洪涛,韩文瑜.中草药消除大肠埃希氏菌耐药性及耐药质
粒的研究[J].中国兽医科技,2000,30(3):27-29.
[2] 彭元丽,邹坤,陈国华.中药消除大肠杆菌耐药质粒研究[J].
时珍国医国药,2009,20(1):139-140.
[3] 黄金珠,雍刚,廖菁,等.土茯苓加减方对淋病奈瑟菌耐药质
粒的消除作用[J].实用医院临床杂志,2010,7(6):35-37.
[4] 肖潇,李英伦,杨锐.复方蒲公英对金黄色葡萄球菌耐药质
粒的体外消除试验[J].中国兽医科学,2010,40(3):307-
311.
[5] 王永芬,席磊,边传周,等.猪致病性大肠杆菌耐药质粒检测
及其中药消除作用研究[J].中国预防兽医学报,2011,33(12):
6
2014年第 27卷第 5期
中国科技 核心期刊
瑶宝克癌灵胶囊由救必应、半边莲、夏枯草、
了哥王等19味药物组成,其中瑶药6味,临床上
治疗乳腺癌、乳腺纤维瘤、白血病、骨肉瘤及淋巴
肉瘤效果明显,尤其对乳腺肿瘤具有独特的疗效。
本研究以瑶宝克癌灵胶囊为研究对象,从分子生
物学水平探讨瑶宝克癌灵胶囊的作用机制,为开
发更为有效的治疗肿瘤的中药新药和民族药提供
理论依据。
瑶宝克癌灵胶囊抗肿瘤作用机制研究
赵成国 1,秦书芝 1,毛晶磊 2,吴丽艳 1,肖洪彬 3△
1吉林大学珠海学院,广东 珠海 519041;2 大庆油田总医院;3 黑龙江中医药大学
[摘 要]目的:从分子生物学角度探讨瑶宝克癌灵胶囊抗肿瘤的作用机理。方法:采用双抗体夹心
ELISA法检测S180荷瘤小鼠外周血白细胞介素-2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)的含量;采用免疫组化法检测凋
亡相关基因突变型p53和Bcl-2基因的表达。结果:瑶宝克癌灵胶囊可明显增加小鼠外周血IL-2、IFN-γ的含
量,可抑制突变型基因p53和Bcl-2基因的表达。结论:瑶宝克癌灵胶囊抗肿瘤的作用机制可能与增强荷瘤小
鼠免疫功能,抑制突变型基因p53和Bcl-2基因的表达有关。
[关键词]瑶宝克癌灵胶囊;IL-2;IFN-γ;p53;Bcl-2
[中图分类号]R273.5[文献标识码]A [文章编号]1004-6852(2014)05-0007-03
Investigation on Anti-tumor Mechanism of YaoBao KeAiLing Capsules
ZHAO Chengguo1, QIN Shuzhi1, MAO Jinglei2, WU Liyan1, XIAO Hongbin3△
1 Zhuhai College of Jilin University, Zhuhai 519041, China; 2 Daqing Oilfield General Hospital;
3 Heilongjiang University of Chinese Medicine
AbstractObjective: To explore anti-tumor mechanism of YaoBao KeAiLing capsules with molecular biolo-
gy. Methods: The contents of interleukin-2 (IL-2) and interferon-γ (IFN-γ) were detected with double antibody sand-
wich ELISA method; the expressions of Bcl-2 gene and p53 were measured by immunohistochemical method. Re-
sults: YaoBao KeAiLing capsules could increase the contents of IL-2 and IFN-γ in peripheral blood of mice, inhibit
the expressions of p53 and Bcl-2. Conclusion: Anti-tumor mechanism of YaoBao KeAiLing capsules might be relat-
ed to increasing the immunity of the mice, inhibiting the expressions of p53 and Bcl-2.
KeywordsYaoBao KeAiLing capsules; IL-2; IFN-γ; p53; Bcl-2
方 药·药理研究
932-935.
[6] 陈世彪.3种中药对产β-内酰胺酶金黄色葡萄球菌R质粒
的消除作用[J].畜牧与兽医,2010,42(1):81-83.
[7] 陈晓,杨青,张伟丽,等.Mohnarin 2010年报告:西北地区细
菌耐药监测[J].中华医院感染学杂志,2011,21(23):4933-
4938.
[8] 费娜,杨俊杰.大黄等四种中草药体外抑菌活性比较[J].黑
龙江医药科学,2010,33(1):18-19.
[9] 苏广珠,贺坤,裴凤艳.6 种中草药抑菌活性的研究[J].中
国临床研究,2012,25(8):801-802.
[10]史跃杰.黄芩黄连水煎剂对厌氧菌的体外抑菌活性[J].中
国实验方剂学杂志,2011,17(17):226-227.
收稿日期:2014-01-10
作者简介:梁勤(1972—),女,副主任检验师。研究方向:临床
检验及微生物学检验。
△通讯作者:乔登嫣(1973—),女,副主任检验师。研究方向:
临床微生物学检验。
7