全 文 ：新疆中医药 2008年 第26卷 第3期(总第115期)
高效液相色谱法测定罗勒中芦丁的含量
马雅斌1,田 英1,于 宁2
(1.昌吉回族自治州中医医院,新疆 昌吉 831100;2.自治区药物研究所,新疆 乌鲁木齐 830004)
摘 要:目的:用高效液相色谱法测定罗勒中芦丁的含量。方法:采用KromasilODS-1色谱柱(250mm×
4.6mm,5!m),柱温为35℃,以甲醇-水-冰醋酸(40∶57∶3)为流动相,流速1mL·min-1,检测波长257nm,柱温35℃,用
外标法定量,测定罗勒中芦丁的含量。结果:芦丁在4～32!g/mL,!=0.9999)范围内都呈良好线性关系,回收率
100.71%,RSD为0.28%。结论:该方法简便、快速,线性关系良好,可用于罗勒中芦丁的含量测定。
关键词:罗勒;芦丁;高效液相色谱法
罗勒(OcimumbasilicumL.)为唇形科植物罗勒的地上部
分,一年生草本,全国各地多有栽培。能疏风解表、化湿和中、
行气活血、解毒消肿,主治感冒头痛、发热咳嗽、中暑、食积不
化等,主要含黄酮和香豆素等成份[1-2]。目前对罗勒精油的研
究报道很多,但对于罗勒的化学成份及成份的测定方面的文
献尚很少见。本文采用高效液相色谱法测定了罗勒中黄酮类
成份芦丁的含量,方法稳定、快速、重现性好。
1 仪器及试剂
SPD-10AVP型高效液相色谱仪(日本岛津制造所),包
括 LC-10ATVP二 元 高 压 泵 ,SPD-10AVP紫 外 检 测 器 ,
CTO-10ASVP柱温箱,SCL-10AVP系统控制器;BP211D型十
万分之一电子天平(sartorius);Miliporesimplicity-185超纯水
器 (美国密理博公司),UV-2501PC型紫外分光光度计
(SHIMADZU),KQ-100DE型数控超声波发生器(昆山市超声
仪器有限公司)。
对照品芦丁由中国药品生物制品检定所提供(批号分
别为0080-9705)。甲醇为色谱纯,冰醋酸为优级纯,水为超纯
水。罗勒(市售)。
2 方法和结果
2.1色谱条件[3]
KromasilODS-1色谱柱(250mm×4.6mm,5!m),以甲醇
-水-冰醋酸(40∶57∶31为流动相,流速1mL·min-1,检测波
长257nm,柱温35℃。
2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取芦丁对照品8mg,加甲
醇溶解并定容至100mL量瓶中,再精密量取1mL置10mL量瓶
中,配置成浓度为8!g/mL的对照储备液,摇匀,过0.45!m滤
膜,备用。
2.1.2 供试品溶液的制备 精密称取罗勒粉末(过三号筛)
2g,置具塞锥形瓶中,精密加入50%甲醇50mL,称定重量,超
声处理30min,放冷,再称定重量,用50%甲醇补足减失的重
量,摇匀,滤过,取续滤液,过0.45!m滤膜,备用。
2.2 线性关系考察实验
精密称取芦丁对照品0.0040g,置50mL量瓶中,用甲醇
溶解并稀释至刻度,摇匀,即得芦丁对照品贮备溶液(80!g/
mL)。分别精密吸取对照品贮备液0.5,1,2,3,4mL,分别置
10mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,制成含芦丁浓度为
4,8,16,24,32!g/mL的对照品系列溶液。从中分别精密吸
取10!L,注入液相色谱仪,记录峰面积,以进样浓度(!g/
mL)为横坐标,峰面积为纵坐标进行回归,得回归方程:
Y=18513X-20706,!=0.9999。结果表明,芦丁在4!g/mL～
32!g/mL范围内,峰面积与进样浓度具有良好线性关系。
2.3 精密度实验
取上述对照品溶液连续进样6次,测得芦丁峰面积,RSD
为0.86%,表明仪器进样精密度良好。
2.4 稳定性实验
取供试样品溶液10!L,分别在0、2、4、8、16h进样,测定
芦丁的峰面积,RSD为1.05%,表明样品溶液在16h内稳定。
2.5 重现性实验
取样品,按供试品制备方法配制6份,分别进样10!L测
定芦丁的含量,RSD为1.54%,表明该方法的重现性较好。
2.6 加样回收率实验
精密称取已知含量的供试品9份,精密加入芦丁对照品
溶液适量,按供试品溶液制备方法制备样品,分别进样10!L,
按正文芦丁含量测定方法进行含量测定,计算回收率。结果
见表1。
作者简介:马雅斌(1971-),女,主管药师,主要从事中药制剂研究。电话:(0994)2345962。
NO.取样量g
加入量
mg
测定量
mg
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0.9998
0.9995
1.0028
1.0014
1.0027
1.0053
0.9997
1.0012
1.0078
1.0002
0
0.08
0.08
0.08
0.12
0.12
0.12
0.16
0.16
0.16
0.1149
0.1956
0.1956
0.1949
0.2357
0.2369
0.2358
0.2769
0.2771
0.2763
回收量
!g
0.0808
0.0803
0.0798
0.1205
0.1214
0.1209
0.1619
0.1613
0.1614
回收率
%
100.95
100.43
99.80
100.39
101.14
100.77
101.16
100.82
100.88
平均回
收率%
100.40
100.77
100.95
平均回
收率%
100.71
RSD
%
0.28
表1 加样回收率试验结果
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新疆中医药 2008年 第26卷 第2期(总第114期)
2.7 样品含量测定
精密吸取样品溶液10!L,进样测定,记录芦丁的峰面
积,代入回归方程计算出样品中芦丁的含量为0.2mg·g-1。色
谱图略。
3 讨 论
3.1 提取方法的选择,测定芦丁时,供试品的提取方法进行
了超声和回流两种提取方式,结果采用超声法提取得到的样
品中芦丁的量比回流得到的高,提取更完全,并且方法简便,
故选择超声作为提取方法。
3.2 样品超声时间的选择,本文采用超声处理方法对罗勒进
行提取。超声处理时间的考察按以下方法进行:精密称取罗
勒粉末(过三号筛)2g,置具塞锥形瓶中,精密加入50%甲醇
50mL,称定重量,分别超声处理15、30、45和60min后,放冷,按
样品测定项下方法测定含量。结果表明超声处理30min可以
提取完全。故含量测定时,样品提取采用超声处理30min的方
法。
3.3 采用HPLC法测定罗勒中芦丁的含量,尽管具有方法简
便、灵敏,结果稳定、准确等优点,但罗勒中芦丁的含量较低,
作为其质量控制标准还不够准确。
参考文献
[1] 尹锋,胡立宏,楼风吕.罗勒化学成份的研究[J].中国天然药物,
2004,1(1):20-23.
[2] 周绪霞,李卫芬.罗勒的应用与发展 [J].中草药,2003,2(8):
25-26.
[3] 中华人民共和国药典.2005年版,一部[S]:245.
(收稿日期:2008-03-10)
中药汤剂是应用最普遍,且认为易吸收、易显效的剂型。
中药汤剂多年来几乎是千篇一律的服用方法。即:将头煎与
二煎药液合并混匀分早晚两次服。笔者认为这种服法是一种
传统的不科学的服药方法。中药汤剂质量的好坏与服用方法
的合理与否,直接影响着药物在人体中的吸收和治疗效果。
只有严格的掌握服药规程,方能达到用药的目的。中药汤剂
的合理服用,应当注意以下几个方面。
1 根据疾病性质选择合理的服药时间
1.1 餐前服
一般在饭前30～60min服用。健脾药、补益药、止泻药以
及腰以下疾病,欲使药力速达病所,应在餐前服用。因餐前胃
中空虚,药液能较快地经过胃肠吸收而作用于全身,或使药
物充分作用于胃壁,及时地发挥药效,不致被胃内食物稀释
而影响药效。苦味药如龙胆草、大黄等(宜于饭前10min左右
服)可增加食欲和胃液分泌。收敛药饭前服使药较快通过胃
入小肠,遇碱性肠液分解出鞣酸,起止泻作用。
1.2 餐后服
一般在饭后15～30min服用。有两种情况:一是对胃粘
膜有刺激性的汤剂,餐后服可减轻其对粘膜的刺激性;二是
可减慢胃排空速率,使药液缓慢而均匀地到达肠道吸收部
位,以利于某些药液的吸收。病在上焦的(心、肺部),欲使药力
停留较久,宜饭后服;毒性较大者,亦应在饭后服药,以免吸
收太快而发生毒副作用。消食化积药宜饭后服,以助消化。驱
虫药雷丸(可在饭后2～3.5h半空腹时服),可减少副作用,且
通过胃较快。
1.3 餐间服
即在两餐之间服用。用于治疗脾胃疾病,或用于攻下者
以避免食物对药物产生影响。
1.4 空腹服
两种情况:一是为了充分发挥某些药液对胃肠道的局
部作用,如苦味健胃药,给药时间对这类药液的作用有显著
影响。二是可以避免胃的充盈度和食物对某些药液吸收的干
扰。滋补类汤剂空腹服,易于吸收;润肠或泻下药空腹时服,
有助于其发挥润肠荡涤作用:驱虫药使君子等早晨空腹服驱
虫效果好。用于治疗四肢血管疾病者,也应空腹服用,这样可
使药液迅速入肠,并保持较高浓度,快速发挥药效。
1.5 睡前服
为了适应某些特定治疗的需要,凡具有镇静、补心、安
神等功效的汤药,须于睡前15～30min给药,使适时入睡。此
外,为了减少某些药物的不良反应(如消化道、神经系统反应
等)也可采用睡前给药。治疗哮喘的药物宜睡前服。一般患有
积滞、胸膈病的患者,服药后应仰卧;患头、目、耳病的病人,
服药后宜去枕而卧;有左右两胁病症者,服药后应按药性的
升降浮沉作用选择睡姿,如药性为升浮,应选择向健侧卧;药
性为沉降时,应选择向患侧卧。
1.6 隔夜服
主要用于驱虫药。睡前服1次,第二天早晨空腹再服1
次,使药力集中以便将虫杀死排出本外。
解表药不拘时间服用,以免病邪由表入里;治疟药宜在
发作前2h服;治妇女经血病的应在月经来潮前几天服药。急
症用药需立即服用或遵医嘱服用,慢性病则应定时服[2]。
2 服药次数和剂量
2.1 顿服
指药性峻烈的小剂量汤剂,要一口气顿服完,使其迅速
浅谈中药汤剂的合理服用
刘玉琴1,徐雪荣1,徐 倩2
(新疆医科大学第二附属医院,新疆 乌鲁木齐830028;新疆医科大学中医学院,新疆 乌鲁木齐,830054)
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