全 文 ：收稿日期:2003-07-14基金项目:浙江省教育厅 2001-16课题＊本院 2001 级研究生 , ＊＊本院 99 级实习生
苏州荠苎总黄酮的提取工艺研究
吴巧凤　陈　京＊　林　琳＊＊
(浙江中医学院药学系 ,浙江 杭州 310053)
摘　要　目的:研究苏州荠苎总黄酮的提取工艺。方法:选择乙醇浓度(A)、溶媒倍数(B)、提取时间(C)等为考察因
素 ,以总黄酮含量为考察指标 , 采用正交试验设计考察提取工艺。结果:乙醇浓度和提取时间对总黄酮含量影响显
著 ,应加以控制。结论:最佳提取工艺为 A1B1C3 , 即加 8倍量的浓度为 70%的乙醇回流提取 6 h , 总黄酮得率最高。
关键词　苏州荠苎;总黄酮;提取工艺;正交设计
Study on Extracting Technology of Total flavone in Mosla soochowensis Matsuda
Wu Qiaofeng , Chen Jing＊ , Lin Lin＊＊
(Department of Pharmacy , Zhejiang College of Traditional Chinese Medicine , Hangzhou 310053)
Abstract Objectve:Study the optimum extracting technology of total flavone in Mosla soochowensis Matsuda。
Methods:To choose the alcohol concentration(A)、the amount of alcohol(B)and the time of refluxing and ex-
tracting(C)as the study factors.The extracting conditions were studied by orthogonal design as guided by the
content of total flavone.Results:The alcohol concentration and the time of refluxing and extracting should be
strictly controlled because of the large influences on the dissolution of total flavone.Conclusion:The optimum
extracting condition of total flavone was A1B1C3:that is adding 8 times amount of 70% alcohol and refluxing
and extracting 6 hours.The yield of total flavone was high.
Key words　Mosla soochowensis Matsuda;Total flavone;Extracting technology;Orthogonal design
　　苏州荠苎(Mosla soochowensis Matsuda)为唇形科
植物石荠苎属一年生草本植物 ,至今未被《中国药
典》收载。据《浙江民间常用草药》[ 1] 记载 ,具有解
毒 、消炎 、利尿 、镇痛等功效 ,可用于治疗扁桃体 、感
冒等 。浙江民间在夏季常用其泡茶喝 ,口感良好 ,且
无不良反应 。药理和临床试验表明 ,苏州荠苎为一
广谱抗菌药 ,其水煎剂具有广谱的抗菌作用;其浸膏
有明显的治疗感冒的作用;其抗菌作用强于华荠苎
(石香薷),而且毒性很小 。此外苏州荠苎还具有补
肾阳药物一样的调节免疫功能的作用[ 2 ,3] 。苏州荠
苎的化学成分与唇形科石荠苎属植物石香薷的成分
大致相似 ,含有挥发油(1%左右)、黄酮类(总黄酮含
量5%左右)、脂肪酸等成分[ 4 ,5] 。但对其抗菌活性成
分和总黄酮的含量研究未见报道 。为了开发和利用
这一资源 ,以总黄酮含量为考察指标 ,采用正交试验
设计对苏州荠苎总黄酮的提取工艺进行了优选。
1　仪器试剂和药材
1.1　仪器
751-GW紫外分光光度仪;恒温干燥箱(重庆
实验设备厂);HANGPING FA1104型电子天平(上海
仪器厂)。
1.2　试剂
芦丁购自中国药品生物制品鉴定所 ,其余试剂
均为分析纯 。
1.3　药材
苏州荠苎于 2002年 6月采自浙江浦江 ,并经浙
江中医学院资源鉴定教研室熊耀康教授鉴定为
(Mosla soochowensis Matsuda)。
2　实验方法与结果
2.1　因素水平与设计
为优选苏州荠苎总黄酮的最佳提取工艺 ,以总
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第 23 卷第 3期
2004 年 6月 　　　　　　　　　　　　　中 国 野 生 植 物 资 源Chinese Wild Plant Resources　　　　　　　　　　　　Vol.23 No.3June 2004
黄酮得率为考察指标 ,选择乙醇浓度 、溶媒倍数 、提
取时间等作为考察因素 ,每个因素取3个水平 ,选用
L9(34)表进行正交试验[ 6]因素水平见表 1。
表 1　因素水平表
水平 因　　素
A(乙醇浓度) B(溶媒倍数) C(提取时间)
1 70% 8 倍 4h
2 80% 10 倍 5h
3 90% 12 倍 6h
2.2　总黄酮的含量测定[ 7]
2.2.1　标准品的制备
精密称取 120℃烘至恒重的芦丁对照品 10.67
mg ,加 50%乙醇溶解并稀释定容于 50 mL 容量瓶
中 ,摇匀 ,即得 0.213 4 mg/mL的标准液。
2.2.2　标准曲线的制作[ 7]
精密吸取芦丁对照品溶液0.0 , 1.0 , 2.0 , 3.0 ,
4.0 ,6.0 mL ,分别置于 25 mL 容量瓶中 ,各加 50%乙
醇至 6.0 mL ,加 5%亚硝酸钠溶液1.0 mL ,摇匀放置
6 min 后 ,加 10%硝酸铝溶液 1.0 mL ,摇匀 ,放置 6
min后 ,加10%氢氧化钠溶液 10 mL ,再加 50%乙醇
至刻度 ,摇匀放置 15 min后 ,以空白液为参比 ,在波
长510 nm处测吸收度 ,结果芦丁浓度在 0 ～ 1.28 mg
范围内吸收度与浓度成线性关系。吸收度与浓度的
回归方程为:
A=2.3305C+0.0401;(r=0.9995)(C 为浓度
mg , A为吸收值)
2.2.3　回收率试验
精密吸取 5份已知总黄酮含量的苏州荠苎样
品 ,各加入一定量的芦丁标准品 ,加 8倍量的 70%
乙醇回流 6 h ,制得供试品液 ,总黄酮的含量测定同
“2.2.2” 。计算回收率 ,结果见表 2。
表 2　回收率实验
加入标准液
(mg)
回收芦丁
(mg)
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
0.2160 0.2134 98.80
0.2160 0.2168 100.4
0.2160 0.2186 101.2 99.84 1.00
0.2160 0.2156 99.81
0.2160 0.2138 98.98
2.2.4　样品溶液的总黄酮含量测定
精密称取苏州荠苎的全草干燥粉末 9份(10 g/
份),按正交表设计安排 9次实验。所得滤液回收乙
醇直至无醇味 ,以 50%乙醇定容于 100 mL 容量瓶。
从中吸取溶液5 mL 置25 mL 容量瓶中 ,以50%乙醇
定容于 25 mL容量瓶后作为样品液 。从样品液中吸
取 1 mL 入 25 mL容量瓶中 ,其余操作同“2.2.2” ,得
到各样品的总黄酮含量 ,结果见表3 ,表 4。
表 3　正交试验表
实验号 因　　素
A B C D
总黄酮含量
(mg.g-1)
1 1 1 1 1 37.66
2 1 2 2 3 41.74
3 1 3 3 3 50.94
4 2 1 2 3 41.86
5 2 2 3 1 44.19
6 2 3 1 2 35.91
7 3 1 3 2 43.37
8 3 2 1 3 27.52
9 3 3 2 1 31.72
K 1 130.34 122.89 101.10 113.56
K 2 121.95 113.45 115.31 121.02
K 3 102.61 118.57 138.50 120.32
R 9.24 3.15 12.47 2.49
表 4　方差分析表
方差来源 方差平方和 自由度 方差 F P
A 134.85 2 67.42 11.92＊＊ <0.01
B 14.88 2 7.44 1.31
C 237.65 2 118.82 21.01＊ <0.05
误差 e 11.31 2 5.65
　注:F0.05(2 , 2)=19.00 , F0.01(2 , 2)=9.00
3　实验结果与讨论
(1)由正交试验的极差分析可知 ,苏州荠苎总黄
酮的最佳提取工艺为A1B1C3 ,即用 8倍量的浓度为
70%的乙醇 ,回流提取 6 h。对总黄酮提取工艺影响
因素的次序为C>A>B ,其中提取时间为最大影响
因素 ,其次是乙醇浓度 ,溶媒倍数影响最小 。由方差
分析结果可知 ,A 、C 两因素有显著性差异 ,而 B 无
显著性差异。综合考虑 , 其最佳提取工艺为
A1B1C3 ,即用 8倍量 70%乙醇 ,回流提取 6 h。
(2)工艺验证
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按最佳提取工艺验证试验 ,重复5次 ,所得数据
及计算结果见表 5。
表 5　重复实验
总黄酮含量(mg/ g) 平均总黄酮含量(mg/g) RSD%
1 55.72
2 56.30
3 54.91 56.09 1.42
4 56.65
5 56.88
由表中数据可知 ,5次试验 ,测得总黄酮平均含
量为 56.09 mg/g ,高于正交试验设计中的任何一次 ,
本实验的可靠性得到很好的验证。为课题由实验室
研究向中试放大和大生产过渡提供了科学依据 ,具
有较高的实用价值。建议在制剂生产中推广使用 。
(3)总黄酮的含量测定以芦丁为标准品 ,采用比
色法测定总黄酮的含量 ,显色之前溶液颜色很浅 ,不
必对样品进行纯化处理。测定方法简便 ,稳定性好 ,
回收率高 ,测定结果可靠 。
(4)苏州荠苎的黄酮为黄酮甙[ 5] ,本实验的最佳
工艺中采用 70%的乙醇提取 , 符合高浓度的乙醇
(如 90%～ 95%)适宜于提取黄酮甙元 , 60%左右的
浓度的乙醇适宜于提取黄酮甙类的报道[ 8] 。
参考文献:
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[ 8] 　李　苑 ,张　敏.中草药中黄酮类化合物提取工艺的研究概况
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(上接第 28页)
食药同源 ,营养价值高 ,性平 ,甜酸适口 ,风味好。具
有健脾益肾 、抗衰老 、防癌等多种营养保健功能 ,这
早在《食疗本草》中就有记载。现代科学进一步证明
了乌饭树浆果的营养保健价值 。乌饭树具有人体不
可缺少的多种营养元素 ,更为独特的是它含有丰富
的抗氧化和抗衰老的花色苷和生物类黄酮成份 ,因
而具有软化血管 、抗衰老的保健功效。
2.3　在医学上的应用
乌饭树的药用历史悠久 , 《本草纲目》 、《中国药
典》有“添胃补髓 ,消灭三虫” , “强筋身骨 ,益气固精
驻颜”之记载。现代研究表明 ,乌饭树浆果含有丰富
的抗氧化剂 ———花色苷类黄酮 , 氧自由基可破坏
DNA分子从而诱发癌症 ,而抗氧化剂可以中和新陈
代谢过程中产生的自由基 ,减慢蛋白质和 DNA的老
化速度 ,抑制癌细胞的生长 ,从而达到防癌效果。此
外 ,乌饭树果汁含有天然黑色素 ,有松驰血管 、改善
血液循环的作用 ,可以预防动脉硬化 、糖尿病等 ,药
用价值较高 。
2.4　在园林绿化中的应用
随着城市化进程的加快 ,人们开始追求人类与
自然的和谐统一 ,乌饭树是适应性很强的乡土树种 ,
其树姿优美 ,秋后紫红色果实串挂枝头 ,煞是美观 ,
是一种良好的园林观果绿化树种 ,与海桐 、金叶女贞 、
含笑等树种相间配植 ,点缀于假山 、绿地之中 ,相互映
衬 、别有情趣 ,可为城市环境绿化渲染出一种浓浓的
秋收壮美景观 ,大大提高城市绿化的品位与档次。
参考文献:
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第3 期　　　　　　　　　　　　　　　　吴巧凤等:苏州荠苎总黄酮的提取工艺研究