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荔枝草农用活性初步研究



全 文 :江西农业学报 2008, 20(1):34 ~ 36ActaAgriculturaeJiangxi
荔枝草农用活性初步研究
孙伟光 ,魏艳 ,万大伟 ,历建燕 ,李园园 ,孟昭礼*
   收稿日期:2007-11-05
作者简介:孙伟光(1982-),男 ,山东莱西人,在读硕士 ,研究方向:杀菌剂的毒理和应用。*通讯作者:孟昭礼。
(山东省农业仿生应用工程技术研究中心 、青岛农业大学 ,山东青岛 266109)
摘 要:研究了荔枝草乙醇提取物及其萃取物的抑菌 、除草活性。结果表明 , 荔枝草乙醇提取物对 27种供试病原真菌均
有一定抑制作用。乙醇提取物在浓度为 0.03g/mL(以干材料计)时 ,对苹果腐烂病菌 、葡萄白腐病菌、瓜果腐霉病菌的抑制率
分别达到 89.09%、91.12%、92.59%;荔枝草乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物对苹果腐烂病菌 、葡萄白腐病菌 、瓜果腐霉病菌抑
制效果最好, 其 EC
50
分别为 0.24、0.29、0.12 mg/mL;荔枝草乙醇提取物对几种杂草也有很好的抑制效果 ,在浓度为 0.2g/mL
时 ,对生菜 、反枝苋 、黄瓜的抑制率分别为 93.65%、92.76%和 97.57%。
关键词:荔枝草;乙醇提取物;萃取物;除草活性;抑菌活性
中图分类号:S482.292 文献标识码:A 文章编号:1001-8581(2008)01-0034-03
PreliminaryStudyonActivityofSalviaplebeia
SUNWei-guang, WEIYan, WANDa-wei, LIJian-yan, LIYuan-yuan, MENGZhao-li*
(ResearchCenterofAgri-bionicEngineeringandTechnologyofShandongProvince, QingdaoAgriculturalUniversity, Qingdao
266109, China)
Abstract:AntifungalandherbicideactivitiesofethanolextractfromSalviaplebeiawerestudiedinthisexperiment.Theresults
showedthattheethanolextractfromSalviaplebeiawaseffectiveagainst27 pathogenicfungi, itsinhibitionratetoValsamali, Conio-
thyriumdiplodiellaandPhythiumaphanidermatumreachedto89.09%, 91.12%and92.59% attheconcentrationof0.03 g/mLre-
spectively;theethylacetateextractfromSalviaplebeiawithethanolhadefectiveinhibitiontoValsamali, Coniothyriumdiplodielaand
PhythiumaphanidermatumwiththeEC50 of0.24, 0.29 and0.12mg/mLrespectively;attheconcentrationof0.2g/mL, theinhibi-tionratetothreeweeds(lettuce, radrootamaranthandcucumber)was93.65%, 92.76%and97.57%, respectively.
Keywords:Salviaplebeia;Ethanolextract;Extract;Antifungalactivity;Herbicideactivity
  我国可作植物农药的资源十分丰富 ,我国近 3万种
高等植物中已查明约有近千种植物含有杀虫杀菌活性物
质 。据 《中国土农药志 》记载有 86科 220种植物性农药 ,
具有包括杀菌 、杀虫、除草和抗病毒的作用 [ 1] 。
植物杀菌剂是利用有些植物里含有的抗菌物质杀
死或有效抑制某些病原菌的生长。以现有的研究结果来
看 ,高等植物中抗菌的有效成分是香精油 ,香精油为酯 、
醛 、酮 、萜烯的化合物 ,另外还有单宁 、黄酮类 、有机酸、蛋
白质也有抑菌作用 [ 2] 。从银杏外种皮分离提纯得到的
生物活性较好的白果酚 ,对多种病原菌具有明显的抑菌
杀菌作用。通过结构改造 ,已经仿生合成出 “银果 ”、“银
泰 ”、“仿生安 ”三个产品 [ 3] 。
荔枝草 ,为唇形科鼠尾草属植物荔枝草(Salviaple-
beiaR.Brown)的全草 ,别名也叫雪见草、蛤蟆草、猪婆草
等 ,主要生长在河边荒地或路边等阴湿处。自然条件下
荔枝草很少受到病虫害的侵袭 ,而且荔枝草生长多的地
块其他的杂草生长稀疏 ,因此推测其体内可能含有并释
放出高活性的他感物质 ,可抑制病菌 、害虫对它的侵害 ,
以及其他植物对其生存空间的争夺。黄桂荣等报道的 9
种湘西植物甲醇提取物的抗真菌活性中提到在 0.01 g/
mL的条件下荔枝草提取物对荔枝霜疫霉菌菌丝生长的
抑制率为 84.16%,对稻瘟菌和香蕉炭疽菌的抑制率也
分别达到 74.86%和 64.84%[ 4] 。此外荔枝草全草具有
清热解毒、利尿通淋和抗氧化活性[ 5] 。裴云萍等利用荔
枝草制成纯中药制剂 ,用于治疗泌尿系统感染、肾盂肾
炎 , 20多年来 ,疗效显著 。他们发现荔枝草提取液和复
方荔枝草提取液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及绿脓杆
菌有明显的体外抑菌效果[ 6] 。本实验对荔枝草农用活
性进行了研究 ,现将结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 供试材料 荔枝草:为唇形科鼠尾草属植物荔枝草
(SalviaplebeiaR.Brown)的全草。采自青岛 ,取植物全
株 ,洗净 、阴干备用。供试菌种:苹果干腐病菌 (Botryo-
shaeriadothidea)、立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)、番茄
早疫病菌(Alternariasolani)、番茄叶霉病菌(Fulviaful-
va)、番茄灰霉病菌(Botrytiscinerea)、小麦全蚀病菌
(Gaeumannomycesgraminis)、西瓜枯萎病菌 (Fusarium
oxysporum)、辣椒白绢病菌(Sclerotiumrolfsisai)、黄瓜枯
萎病菌(Rhizoctoniasolani)、苹果轮纹病菌(Physalospora
piricolo)、小麦纹枯病菌(Rizoctoniacerealis)、柑桔炭疽病
菌(Colotrihumgloeosporioides)、棉花枯萎病菌(Fusarium
oxysporium)、番茄绵腐病菌 (Phytophthoramelongenae)、
小麦赤霉病菌(Gibberelazeae)、苹果炭疽病菌(Glomerel-
lacingulata)、苹果斑点落叶病菌(Alternariaalternata)、
黄瓜枯萎病菌(Fusariumoxysporium)、白菜软腐病菌(Er-
winiacarotovora)、番茄早疫病菌(Alternariasolani)、葡萄
黑痘病菌(Elsinoeampelina)、青霉病菌 (Peniciliumex-
pansum)、黄瓜黑星病菌(Cladosporiumcucumerinum)、苹
果腐烂病菌(Valsamali)、葡萄白腐病菌 (Coniothyrium
diplodiela)、瓜果腐霉病菌(Phythiumaphanidermatum),
由山东省农业仿生应用工程技术研究中心提供 。供试植
物种子:生菜 (romaineletuce)、反枝苋 (redrootama-
ranth)、黄瓜(cucumber)。
1.2 试验方法
1.2.1 荔枝草活性成分的提取 称取荔枝草粉末 500
g,用 90%乙醇提取 3次 ,提取时间分别设定 7、5、3 d,合
并提取液 ,减压浓缩 ,冷冻干燥得粗提物 45 g,取 5g用乙
醇定容至 25 mL,得到相当于干材料含量为 0.2 g/mL的
乙醇提取物。
将剩余的粗提取物加入 200mL蒸馏水搅匀 ,然后依
次用石油醚、乙酸乙酯 、正丁醇进行萃取 ,分别得到石油
醚萃取物 11.34 g、乙酸乙酯萃取物 12.84 g、正丁醇萃取
物 1.85 g,取各萃取物分别用乙醇定容。
1.2.2 抑菌作用测定方法 采用生长速率法:将配制好
的供试药液加入到热的培养基(40℃)里面 ,后倒入 6cm
的培养皿内 ,制成平板 。用内径为 0.4 cm的打孔器在
PDA平板上的菌落边缘打若干个菌饼。将打好的菌饼 ,
用接种针移植到带毒平板中央(长有菌丝的一面与培养
基接触),每一处理做 3次重复 。同时以对照溶剂作为空
白对照 。放入培养箱中培养至对照菌落直径为培养皿直
径的 2/3或者 3/4时 ,采用十字交叉法测量菌落直径并
计算抑菌率。
抑菌率(%)=[ (对照纯菌落直径 -处理纯菌落直
径)/对照纯菌落直径 ] ×100%
1.2.3 微量除草活性测定方法 [ 7]  除草活性测试方法:
在培养皿(d=9 cm)中铺两层滤纸 ,在培养皿中上部放
入 1个载玻片 ,剪取大小(2.5cm×5cm)的滤纸(使滤纸
上边缘盖于载玻片上 ,下边缘切近培养皿边缘)准确滴
加药液 0.1 mL,使药液浸渍的面积不要超出上缘添加药
剂框(2.5cm×1 cm)外 ,对照加入相等的量 ,待乙醇完全
挥发后 ,加入蒸馏水 5 mL,再将 10粒经过催芽处理的供
试植物种子 ,放在覆盖有载玻片的滤纸上摆成一行使根
朝下 ,将培养皿倾斜 30度角放置于光照培养箱(27±1
℃,相对湿度 90%, L/D=12 h∶12h)中培养 ,所有处理重
复 6次 ,期间适时补充水分 ,保持载玻片上的滤纸湿润 。
48h后测量种子主根长 ,计算胚根生长抑制率。
抑制率(%)=[(对照的胚根长度 -处理的胚根长
度)/对照的胚根长度 ] ×100%
2 结果与分析
2.1 荔枝草乙醇提取物对 27种病原真菌的抑菌活性 
荔枝草乙醇提取物对 27种病原真菌的抑菌活性测定结
果见表 1。由表 1可看出 ,荔枝草提取物在最终供试浓
度为 0.03 g/mL(以干材料计)时 ,对测定的 27种病原真
菌都表现不同程度的抑制效果 ,抑菌率达到 50%以上的
有 22种病原菌 ,其中对苹果腐烂病菌、葡萄白腐病菌 、瓜
果腐霉病菌抑制率分别达到 89.09%、91.12%和
92.59%。由此选定苹果腐烂病菌 、葡萄白腐病菌 、瓜果
腐霉病菌进行活性追踪。
表 1 荔枝草提取物对 27种病原真菌的抑制作用
供试菌种 对照菌落平
均直径 (cm)
处理菌落平
均直径 (cm)
抑菌率
(%)
苹果干腐病菌 5.20 4.30 18.75
立枯丝核病菌 5.30 3.83 29.93
番茄疫霉病菌 3.87 2.73 32.69
番茄叶霉病菌 3.47 2.13 43.48
番茄灰霉病菌 4.57 2.63 46.40
小麦全蚀病菌 4.93 2.57 52.21
西瓜枯萎病菌 5.33 2.63 54.73
辣椒白绢病菌 3.20 1.67 54.76
黄瓜枯萎病菌 5.27 2.60 54.79
苹果轮纹病菌 4.47 2.23 54.92
构巢曲霉病菌 4.86 2.40 55.22
小麦纹枯病菌 4.67 2.27 56.25
柑桔炭疽病菌 4.73 2.23 57.69
棉花枯萎病菌 5.67 2.37 57.86
番茄绵腐病菌 5.97 2.53 61.68
小麦赤霉病菌 5.93 2.43 63.25
苹果炭疽病菌 4.30 1.73 65.81
苹果斑点落叶病菌 6.00 2.23 67.26
黄瓜枯萎病菌 5.93 2.10 69.28
白菜软腐病菌 5.60 1.77 73.72
番茄早疫病菌 5.97 1.80 74.85
葡萄黑痘病菌 4.33 1.20 79.66
青霉病菌 4.90 1.30 80.00
黄瓜黑星病菌 4.77 1.10 83.97
苹果腐烂病菌 5.90 1.00 89.09
葡萄白腐病菌 4.53 0.77 91.13
瓜果腐霉病菌 5.80 0.80 92.59
2.2 荔枝草乙醇提取物各部分萃取物的抑菌活性比较
 把石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物分别
按倍减方法配制 5个浓度 ,对苹果腐烂病菌 、葡萄白腐病
菌、瓜果腐霉病菌 3种活性追踪病原菌做毒力测定 ,将所
测数据用 Finney几率分析法求出毒力回归方程 ,根据该
方程求出 EC50 。结果见表 2、表 3和表 4。
对表 2、表 3、表 4进行比较可以看出 ,石油醚萃取物
和乙酸乙酯萃取物对苹果腐烂病菌 、葡萄白腐病菌、瓜果
腐霉病菌三种活性追踪病原菌的 EC50都在 0.50 mg/mL
以下 ,故可知荔枝草对这 3种病原菌的有效活性成分主
35 1期                孙伟光等:荔枝草农用活性初步研究
要分布在石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物;而且乙酸乙
酯萃取物对 3种活性追踪病原菌的 EC50分别达到 0.24、
0.29、0.12 mg/mL,所以乙酸乙酯萃取物中存在的对 3种
活性追踪病原菌的活性成分更优于石油醚萃取物;另外
正丁醇萃取物对瓜果腐霉病菌的 EC50也达到 0.38 mg/
mL,表现出不错的抑制效果。
表 2 石油醚萃取物对 3种植物病原菌的毒力测定
供试菌种 毒力方程 相关系数 EC50
(mg/mL)
苹果腐烂病菌 Y=1.5637x+10.179 0.9763 0.49
葡萄白腐病菌 Y=1.2668x+9.6023 0.9817 0.23
瓜果腐霉病菌 Y=1.3377x+9.4894 0.9651 0.44
表 3 乙酸乙酯萃取物对 3种植物病原菌的毒力测定
供试菌种 毒力方程 相关系数 EC50
(mg/mL)
苹果腐烂病菌 Y=1.1861x+9.3006 0.9659 0.24
葡萄白腐病菌 Y=1.164x+9.1127 0.9987 0.29
瓜果腐霉病菌 Y=0.8355x+8.2653 0.9463 0.12
表 4 正丁醇萃取物对 3种植物病原菌的毒力测定
供试菌种 毒力方程 相关系数 EC50
(mg/mL)
苹果腐烂病菌 Y=1.3289x+8.3526 0.8607 3.0
葡萄白腐病菌 Y=2.2822x+11.624 0.9718 1.3
瓜果腐霉病菌 Y=1.2684x+9.3445 0.9311 0.38
2.3 荔枝草提取物除草活性测定 荔枝草乙醇提取液
对 3种杂草萌发胚根抑制活性见表 5,荔枝草提取液在
0.2 g/mL的供试浓度对 3种杂草种子萌发抑制效果都
接近或大于 90%,并且对单子叶植物和双子叶植物都有
很好的作用效果。通过观察发现种子的芽先端最幼嫩处
的分生区坏死 ,导致胚根不能正常地生长伸长 。
表 5 荔枝草提取物对 3种杂草种子的抑制作用
供试种子 CK平均(cm) 处理平均(cm) 抑制率(%)
生菜 2.99 0.32 89.29
反枝苋 2.31 0.18 92.21
黄瓜 5.15 0.33 93.59
3 讨论
由本研究可以看出:荔枝草乙醇提取物对 27种植物
病原真菌均表现出不同程度的抑制作用 ,而且抑菌活性
较好 ,说明荔枝草中含有较丰富的抑菌活性成分 ,抑菌谱
较广 ,具一定开发价值。
本实验只用荔枝草乙醇粗提物和其萃取物做了抑
菌和除草的生物活性测定 ,其他部位活性还有待于进一
步研究。对本部分主要抑菌活性成分的分离纯化 、杀菌
作用机理以及杀菌谱研究是下一步工作的重点。
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(上接第 33页)
3 结论
室内毒力测定结果表明 ,鱼藤酮与高效氟氯氰菊酯
混用防治牛蒡长管蚜具有明显的增效作用。当鱼藤酮
与高效氟氯氰菊酯按有效成分 4.7∶1的比例进行混配
时 ,其增效作用最明显 ,共毒系数达 150.6900。田间试
验结果表明 ,鱼藤酮与高效氟氯氰菊酯按有效成分 4.7∶
1比例进行混配后的 1000 ~ 2000倍液药后 7 d的校正防
治效果超过了 91%。
利用鱼藤酮与高效氟氯氰菊酯混用的增效作用 ,不
仅可以大幅度提高鱼藤酮对牛蒡长管蚜的毒力和田间
药效 ,而且可以达到减少高效氟氯氰菊酯的用量 ,减轻
牛蒡长管蚜对不同药剂的选择压力和延缓抗药性产生
的目的 。
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36 江 西 农 业 学 报                   20卷