全 文 ：第 1 5 卷 第 2 期
1 9 9 3 年 6 月 J o u r n a l o f
延 边 农 学 院 学 报
Y a n b i a n A g
r i o u l t u r a l C o l l e g e
V o l
.
1 5 取 2
J u n e 1 9 9 3
不 同 树 龄 北 京 杨 大 青 杨 过
氧 化 物 酶 同 功 酶 的 分 ·析
金 贞 福
( 延边农学院 果林系 )
摘要 在 用 窄 丙 烯酞胺 凝 胶盘 状 电 脉分 离过 氧化 物酶 中 , 发 现 8 年 生北 京 杨与
大 青 杨相 比 , 北 京 场多生 P S带 。 两 种杨 树 8 年生 树过 氧 化物酶 同 功酶 的 酶 带 数 比
1 年生 树均 有增 加 ,
原 因 所 在 。
关键词 : 杨 树
1 前言
这 可 能 就 是 北 京杨 比 大青杨 、 8 年生 树比 1 年 生 树抗寒 力 强 的
同功酶 树给 抗寒 力
据国内外资料 , 过氧化物酶广泛存在于
植物体 中 , 是活性较高的一种酶 , 其 变化能
反映出遗传成份 、 组织 、 器宫的变化阶段 ,
同时也反映出树龄及抗寒 性 。 M c c o w n ( 19
6 9) 在石竹叶和茎的提取物中发现 , 耐冷品
系发展了新的同功酶谱带 , G e r l 。 f 等在 19
6 7年发现 , 经低温充分 锻炼过的首荫出现了
两条新的过氧化物酶同功酶区带 , 而且过氧
化物酶的总的活性都提高了 。 有关过氧化物
酶与树龄 , 抗寒性的关系 , 林业方面的报道
材料极少 , 本文主要以杨树两个品种的 8 年
生树木的叶片和 l 年生树的叶片为材料 , 分
析过氧化物酶同功酶 , 结果表明 , 过氧化物
酶的表达与树龄有关 , 即随树龄的增大 , 其
叶片中的酶带活性增强 , 酶带数增多 , 同时
不同品种其抗寒性不同 , 抗寒性强的品种 ,
酶带数增多 , 北京杨比大青杨酶带数多 , 抗
寒力高 。
本试验可以暗示 , 同功酶分析可以作为
判定不同杨树抗寒性 、 树龄 , 树种的指标 。
2 材料和方法
2
.
1 供试材料
在校园内采集北京杨 、 大青杨 8 年生树
叶片 , 在果林系的扦插苗田地采集 l 年生树
叶片 , 从中抽样 , 各 1 9作为分析之用 。 重
复三次 。
2
.
2 试验方法
样品制备 : 将 1 9叶片放入研钵 中 , 加
入 1 m l . ol M磷酸缓冲液 , 研磨成糊状 , 放
入小试管中 , 在 4 0 0 0转 / 分下离心 15 分钟 取
上层清液即为酶分析液 。
电泳 : 采用聚丙烯酞胺盘状凝胶电脉分
离胶浓度为 7 . 0% , P H S . 9 , 浓缩胶浓 度 为
2
.
5% P H 6
.
7
。 电极缓冲液为 T r is 一甘氨酸
电脉缓冲液 ( P H S . 3) , 每管上样量 为 5 0月
初始工作电流每管 1 m A , 过 5 分钟后电流
每管 2 m A 以澳酚兰作前沿指示 。
染色 : 采用抗坏血酸一联苯 胺 染 色 法
染色 。 染色后用固定液固定 , 保存在 3 % 酷
酸液中 。 每条酶带用如下方法确定相对迁移
率 ( R ) :
_ 酶带的迁移距离指示染料 (澳酚兰 ) 的迁移 距 离
收 稿 : 1 9 9 3 0 4 2 8 3 试验结果
DOI : 10. 13478 /j . cnki . jasyu. 1993. 02. 005
第 2 期 金 贞福 : 不 同树龄 北 京杨大青 杨 过氧化 物酿 同功酶 的 分 析
3
.
1 过氧化物酶的谱带变化
3
.
]
.
1 北京杨 、 大青杨过氧化物 酶 的
同功酶其酶带效 口 , 活性不同 。 如以 8 年生
树为例 : 北京朽比大青杨多 P S带 , 月. 其 活
性也强 。
3
.
1
.
2 同种不同树龄树木的叶片 过 氧
化物酶谱带也有一定的差 异 。 从图 1 不同品
种不同树龄杨树过氧化物酶同功 酶 谱 型 图
中 , 可以看出 : 大青杨 8 年生树木叶片有 P :
、
P
Z 、
P
3 、
P
、 、
P
。五条酶带 , l 年 生 树
叶片有 P Z 、 P : 、 P ` 、 P 。四条酶 带 ; 8 年
生北京杨叶 片 有 p : 、 p Z 、 p 3 、 p 。 、 p s 、
P
。六条酶带 , 8 年生杨树具有 5 一 6 条 每
谱带 , 而 1年生树只有 4 条酶谱带 , 其 中 P 。
酶带活性较弱 , l 年生树叶片 有 P Z , P 3 ,
P
4 ,
P
。四条酶带 。 大青杨 8 年生树叶片 与
l 年树比 8 年生多出 P ,带 , P Z活性 增 强 。
P
3 、
P
4 、
P
。酶带负极向扩散区消失 : 北京
杨 8年生树叶片与 l 年生 比 , 8 年 生 树 多
P
, 、
P
S带 , P Z带活性增强 , P 3 、 P 4 、 P 。
酶带负极向扩散酶区消失 。 可见 , 一个总的
变化趋势是随着树龄的增加 , 过氧化物酶同
功酶的带数增加 。
3
.
2 从试验观察中可见 :
3
.
2
.
1 8 年生 , 1年生北京杨 、 大青杨经
电脉 , 染色 !l\F酶谱出现的时问顺序为 ; 大青
杨 ( l 年 ) ~ 北京杨 ( 1年 ) 一 , 大青杨 ( 8
年 ) ~ 北京杨 ( 8 年 ) 。
3
.
2
.
2 同是 8 年生树 夕北京杨比大青杨
多出 P S带 , _巨其活性也增强 这可能 是 北 京
杨比大青杨抗寒力强的原因 。
4 讨论
4
.
1 北京杨 、大青杨过氧化物酶同功酶
的酶带 , 因品种不同而有一定的差异 。 抗寒
力强的北京杨比大青杨 多 P : 带 。
4
.
2 同种不同树龄的酶带也有 差 异 。
如 8 年生北京杨比 l 年生多 P , 、 p 。 书} , 8
年生大青杨比 1 年生多 P ,带 。
4
.
3 抗坏血酸一联苯胺染色法的特点
过氧化物酶酶谱 出现所需时间与它的活性成
反 比 。 因此 , 本次试验的过酶化物酶活性从
大到小的顺序是 : 北京杨 ( 8 ) 、 大 青 杨
( 8 年 )北京杨 ( l 年 ) , 大青杨 ( l年 ) 。
即 8年生树的过氧化物酶活性比 l年生强 ,
北京杨比大青杨的过氧化物晦活性强 。 这可
能是 8 年生树比 l 年生树抗寒力弧 , 北京杨
比大青杨抗寒力强的原因。
图 1 不同品种不同树龄过氧化物酶同功酶谱型
延 边 农 学 院 学 报 第 1 5 卷82
参 考 文 献
〔 l 〕 吴少伯 1 9 7 9 植物组织中蛋白
质及同功酶的聚丙烯酞胺凝胶盘状电脉植物
生理学通讯 ( 1 )
〔 2 〕 胡志昂 1 9 8 1 植物分类学报
( 3 )
〔 3 〕
( 4 )
〔4 〕
业大学学报
刘鸿先等 1 9 81 植物生理学报
唐稚英 苏含英 1 9 8 7 东北林
( 3 )
八 B 5 T R A C T
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A n b t h e z o n e n u m b e r o f i s o d y n a m i e e n z y m e o f p e r o x i
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(上接第 86 页 )
A B S T R A C T
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T h e e x P e r i m e n t a l r e
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s h o w e d t h a t t h e y i e l d o f v e l v e t o f o p e r a t e d b r a n e h v e l v e t 1 5
1a s t y e a r S a 飞I l e
7 2
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9 0% a n d 8 1
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2 4% r e s P e e 士i v e l y 。
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y e a r b了