全 文 ：超声法提取维吾尔药罗勒叶中总黄酮的研究
杨 建1，付 玲2，何 倩2* (1．新疆医科大学药学院，新疆乌鲁木齐 830011;2．新疆医科大学附属中医医院，新疆乌鲁木齐 830000)
摘要 ［目的］探讨维吾尔药罗勒叶中总黄酮的超声波提取法。［方法］采用正交试验，以总黄酮含量为考察指标，对影响总黄酮超声提
取的因素进行研究。［结果］维吾尔药罗勒叶总黄酮的优化提取工艺为:乙醇浓度 60%、料液比 1∶ 30、提取时间 60 min。其中，乙醇浓度
对提取效果影响明显。［结论］该工艺设计合理，操作简单可行。
关键词 罗勒;总黄酮;超声提取法
中图分类号 S567 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2011)26 －15907 －02
Study on Extraction Process of Total Flavanone from Ocimum basilicum L． by Ultrasonic Wave Extraction
YANG Jian et al (College of Pharmacy，Xinjiang Medical University，Urumqi，Xinjiang 830011)
Abstract ［Objective］The research aimed to study the optimum extraction technique of total flavonoids from Ocimum basilicum L． by ultrasonic
wave．［Method］With the content of total flavonoids as the observation index，the conditions for the extraction by ultrasonic wave were studied by
the orthogonal experiment．［Result］The optimum extracting conditions were extracting by 60% ethanol with solid-liquid ratio of 1∶ 30 for 60 min．
The ethanol amount had significant effects on the results．［Conclusion］This procedure was convenient，appropriate and feasible．
Key words Ocimum basilicum L．;Total flavonoids;Ultrasonic wave extraction
作者简介 杨建(1979 － ) ，男，新疆乌鲁木齐人，讲师，硕士，从事天然
药用植物资源的开发与利用研究。* 通讯作者，药师，从事
新疆特色药用资源的开发与利用研究，E-mail:yj365@ hot-
mail． com。
收稿日期 2011-06-10
罗勒是维吾尔医应用历史悠久的常用药材之一，植物维
文名为热依汗(Rayhan) ，是唇形科罗勒属植物罗勒(Ocimum
basilicum L．，OBL)的地上部分［1］。现代化学研究表明，罗勒
主要含挥发油类、黄酮及其苷类、香豆素类，还含有三萜类和
生物碱类等成分［2］。罗勒全草和种子均可以入药，具有祛风
消肿、散瘀止痛、疏风解表的功能［3］。笔者采用超声辅助提
取，利用正交试验法对超声提取的影响因素进行考察，并对
提取条件进行优化。同时，采用分光光度法测定罗勒叶中黄
酮含量，确定超声提取罗勒叶中黄酮的最佳工艺条件。
1 材料与方法
1． 1 仪器与试剂 恒温水浴锅(北京医疗设备总厂) ，80-2
型离心机(湖南长沙) ，RE-52A旋转蒸发器(上海亚荣生化仪
器厂) ，SHB-Ш型循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有
限公司) ，KQ-400D型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有
限公司) ，赛多利斯 BS00S电子天平(北京赛多利斯厂)。无
水乙醇(AR ) ，三氯化铝(AR) ，醋酸钠(AR ) ，芦丁(中国药
品生物检定所，批号:100080-200306) ，罗勒叶(自治区维吾尔
医院药房)。
1． 2 正交试验因素和水平的确定 按照单因素试验的结
果，选取对黄酮提取率影响较大的提取时间、乙醇浓度、乙醇
用量 3个因素［4］，每个因素取 3 个水平进行优选，以总黄酮
的含量为指标，用 L9(3
4)正交表设计试验(表 1)。
表 1 L9(3
4)正交表设计试验
Table 1 Factors and levels of L9(3
4)orthogonal test
水平
Level
乙醇浓度(A)
Ethanol conce-
ntration∥%
料液比(B)
Solid-liquid
ratio∥g / ml
提取时间(C)
Extraction
time∥min
1 30 1∶ 10 20
2 45 1∶ 20 40
3 60 1∶ 30 60
1． 3 样品制备 准确称取 9份 60目罗勒叶实体粉末 2 g，按
正交试验设计在 80 MHz下超声提取，提取完毕后过滤，弃去
固体残渣，转移到 100 ml容量瓶中，用浓度 60%乙醇稀释至
刻度，得样品液备用。
1． 4 定性反应
1． 4． 1 盐酸 －镁粉反应。少量提取物用乙醇溶解，加少许
镁粉、浓盐酸 3 ～4滴。加入镁粉前溶液呈暗黄色，滴加浓盐
酸后有泡沫产生，且升腾的泡沫呈橙红色。
1． 4． 2 浓氨水反应。将提取物乙醇溶液点在滤纸上，置于
浓氨水上方 30 s，紫外灯下观察，显黄色荧光斑点。
1． 4． 3 薄板层析。将提取物乙醇溶液点于硅胶板上，展开
剂(正丁醇∶醋酸∶水 =4∶ 1∶ 5)中展开，置于紫外灯下观察，显
黄色荧光斑点。
1． 5 总黄酮含量的测定
1． 5． 1 对照品储备液的制备以及标准曲线的绘制。精密称
取 105 ℃条件下干燥至恒重的芦丁对照品 10． 0 mg，置 50 ml
容量瓶中，加浓度 60%乙醇至刻度，摇匀，即得芦丁储备液
(0． 2 mg / ml)。分别吸取芦丁储备液 0、1、2、3、4、5、6 ml 于
25 ml量瓶中，加浓度 60%乙醇补充至 6 ml，分别加浓度 5%
亚硝酸钠 1 ml 混匀，放置 6 min，加浓度 10%硝酸铝溶液 1
ml，摇匀，放置 6 min，加浓度 10%氢氧化钠试液 10 ml，再加
浓度 60%乙醇至刻度，摇匀，放置 15 min。以试剂作空白参
比液，在 357 nm下测吸光度［5］，以芦丁浓度(C)为横坐标，吸
光度(A)为纵坐标建立标准曲线，回归方程为:A = － 0． 011 6
+2． 476 4C (r = 0． 999 5) ，线性范围为 8 ～40 μg /ml。
1． 5． 2 样品的测定。精密吸取样品液 3 ml置 25 ml容量瓶
中，参照“1． 5． 1”芦丁对照品标准曲线的制备方法绘制样品
标准曲线，并依标准曲线计算样品溶液的浓度以及总黄酮
含量。
2 结果与分析
2． 1 正交试验 由表 2 可知，各因素对总黄酮提取效果的
影响程度依次为 A ＞ B ＞ C，即乙醇浓度为主要因素，对总黄
酮的提取效果影响很大，其次为料液比，而提取时间对试验
结果的影响较小。最佳工艺条件为 A3B3C3，即浓度 60%乙
安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2011，39(26):15907 － 15908 责任编辑 刘月娟 责任校对 李岩
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.26.179
醇，料液比为 1∶ 30，超声提取 60 min。
表 2 正交试验结果
Table 2 Results of the orthogonal test
试验号
Test No．
因素
Factors
A B C
黄酮含量
Flavonoids
content∥mg /g
1 1 1 1 0． 51
2 1 2 2 0． 63
3 1 3 3 0． 89
4 2 1 2 0． 89
5 2 2 3 0． 93
6 2 3 1 1． 08
7 3 1 3 1． 17
8 3 2 1 1． 19
9 3 3 2 1． 29
K1 2． 03 2． 57 2． 78
K2 2． 90 2． 75 2． 81
K3 3． 65 3． 26 2． 99
R 1． 62 0． 69 0． 21
2． 2 精密度试验 取对照品溶液依照“1． 5． 1”测定吸光度，
连续测定 5 次，吸光度分别为 0． 308、0． 309、0． 309、0． 305、
0． 313，RSD为 0． 93%，表明仪器精密度良好。
2． 3 重复性试验 精密吸取同一罗勒提取液 6 份，制备供
试品溶液，依照“1． 5． 1”测定吸光度，得 RSD 为0． 69%，表明
重复性良好。
2． 4 优化工艺验证试验 称取罗勒叶粉末 2 g，做 3个平行
试验，按优化出的最佳提取工艺提取罗勒叶总黄酮，并进行
验证试验。经测定，3 份罗勒叶总黄酮含量分别为 1． 28、
1． 30、1． 29 mg /g，RSD为 0． 78%。
3 结论
研究表明，影响超声波法提取罗勒叶总黄酮的因素为乙
醇浓度 ＞料液比 ＞提取时间，最佳工艺组合为 A3B3C3，即乙
醇浓度 60%，料液比 1∶ 30，超声提取 60 min。该条件下提取
的总黄酮含量平均为 1． 29 mg /g。乙醇用量对试验结果的影
响在 0． 05水平显著，提取时间影响较小。重复性试验表明，
该提取工艺重复性好，简单可行，且该法为物理过程，无污
染，是一种理想的提取罗勒叶中黄酮类物质的途径，为罗勒
的质量控制提供可行的方法，为维吾尔药罗勒的资源利用和
进一步研究提供依据。
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2006 ．
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综合规划布局，以期达到工程的优化配置，资源的有效利用。
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