全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2011，26( 1) ∶081 ～ 082
作者简介:蒋德锡( 1987 ―) ，女，正攻读药物分析专业的硕士学位。
* 通信作者( Correspondent author) ，Email: zdan321@ 126． com
分光光度法测定角花胡颓子中的总黄酮
蒋德锡，陈文芝，贾建静，张 丹*
( 四川大学华西药学院，四川 成都 610041)
摘要: 目的 采用分光光度法测定角花胡颓子中总黄酮的含量。方法 以芦丁为对照品，三氯化铝显色，在 417 nm测定吸光
度，计算角花胡颓子中总黄酮的含量。结果 芦丁 4． 4 ～ 35． 2 μg·mL －1与吸光度值呈良好的线性关系，回归方程为: Y =
0. 043X + 0． 0008( r = 0． 9999) ，平均加样回收率为 96． 21%，RSD = 1． 39% ( n = 9) 。结论 所建方法简便、快速、准确，可用于角
花胡颓子的质量控制。
关键词: 角花胡颓子;总黄酮;芦丁;分光光度法;含量测定
中图分类号: R917 文献标志码: A 文章编号: 1006 － 0103( 2011) 01 － 0081 － 02
Determination of total flavonoid in Elaeagnus gonyanthes Benth by spectrophotometry
JIANG De － xi，CHEN Wen － zhi，JIA Jian － jing，ZHANG Dan*
( West China School of Pharmacy，Sichuan University，Chengdu，Sichuan，610041 P． R． China )
Abstract: OBJECTIVE To establish a spectrophotometric method for determination of total flavonoids in Elaeagnus gonyanthes
Benth．METHODS Selecting rutin as control article，colorating with A1C13，a spectrophotometric method was adopted to determine
the contents of flavonoids． The total flavonoids in Elaeagnus gonyanthes Benth were calculated． RESULTS The linear concentration
range of total flavonoids was 4． 4 － 35． 2 μg·mL －1 ( r = 0． 9999) and the average recovery of total flavoniods was 96． 21% with RSD of
1． 39% ( n = 9) ． CONCLUSION This method is simple，quick，accurate and can be used for quality control of Elaeagnus gonyanthes
Benth．
Key words: Elaeagnus gonyanthes Benth; Total flavonoids; Rutin; Spectrophotometric method; Determination
CLC number: R917 Document code: A Article ID: 1006 － 0103( 2011) 01 － 0081 － 02
胡颓子属角花胡颓子 Elaeagnus gonyanthes
Benth，生于海拔 1 km以下的热带和亚热带地区，主
要分布于广东、海南、广西、湖南、云南等省区，属珍
贵的药食两用植物，以根、叶、果入药，可治肠炎、风
湿性关节炎、腰腿痛、河豚中毒、腹泻、痢疾、跌打、淤
积、肺病、支气管哮喘、感冒咳嗽等［1 － 3］。已有文献
分析研究角花胡颓子的挥发油成分［3 － 4］。角花胡颓
子中含有黄酮类化合物，夏秋季采收的枝叶中含量
较高。黄酮类化合物具有抗炎、抗癌、抗辐射、提高
机体免疫力、解热镇痛以及保肝护肝等作用［5］，因
此，可将角花胡颓子中总黄酮的含量作为评价药材
质量的指标成分之一。现在优化样品提取条件的基
础上，以芦丁为对照品，采用分光光度法测定角花胡
颓子中总黄酮的含量。
1 实验部分
1． 1 仪器与试药
UV －2450 紫外分光光度计( 日本岛津) 。芦丁
对照品( 中国药品生物制品检定所，批号: 100080 －
200306) ;角花胡颓子( 夏秋季采收的枝叶、根茎及
春季采收的混合样品) 采于海南省保亭县，经中国
医科院兴隆分所陈伟平教授鉴定; 其余试剂为分析
纯。
1． 2 方法与结果
1． 2． 1 溶液的制备 精密称取在 120 ℃干燥至恒
重的芦丁对照品适量，置 100 mL 量瓶中，加甲醇制
成 176 μg·mL －1的芦丁对照品溶液。称取角花胡颓
子粗粉( 过 20 目筛) 约 0． 5 g，精密称定，加入 95%
乙醇 30 mL，在 70 ℃加热回流 2 h，放冷，过滤，残渣
中再加入 95%乙醇 30 mL，回流提取 2 h，放冷，过
滤，药渣用少量 95%乙醇冲洗，合并滤液，挥去溶剂
至小体积，转移至 25 mL量瓶中，加 95%乙醇定容，
即得供试品溶液。
1． 2． 2 测定波长的选择 分别精密量取芦丁对照
品溶液与供试品溶液 1 mL，加入 5 mL 1% A1Cl3 甲
醇液，加甲醇定容，于室温下显色 10 min 后，在
200 ～ 600 nm 扫描。芦丁对照品溶液在 432 nm 有
最大吸收，供试品溶液在 417 nm 有最大吸收，未显
色的供试品溶液在此范围内无吸收或吸收很弱，故
选择 417 nm作为测定波长。
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2011.01.017
1． 2． 3 标准曲线的制备 精密量取对照品溶液
0. 25、0． 50、1． 00、1． 50、2． 00 mL，分别置 10 mL量瓶
中，加入 5 mL 1% A1Cl3 甲醇液，加甲醇定容，于室
温下显色 10 min后，以相应试剂为空白，在 417 nm
测定吸光度。以芦丁对照品溶液浓度( μg·mL －1 )
对吸光度进行线性回归，回归方程为: Y = 0． 043X +
8 × 10 －4 ( r = 0． 9999 ) ，芦丁 4． 4 ～ 35． 2 μg·mL －1与
吸光度呈良好的线性关系。
1． 2． 4 显色精密度试验 精密量取“1． 2． 1”项下
的对照品溶液 1 mL，按“1． 2． 3”项下方法显色，平行
制备 6 份，测定吸光度。计算吸光度的 RSD =
1. 44%。
1． 2． 5 中间精密度试验 取样品，分别在不同日期
( 第 1、3、5 天) 由不同分析人员，按“1． 2． 1”“1． 2． 3”
项方法制备供试品溶液，显色并测定，计算样品中总
黄酮的含量，计算得含量的 RSD = 2． 33% ( n = 5) 。
1． 2． 6 重复性试验 取样品适量，按“1． 2． 1”
“1. 2. 3”项下方法平行制备 6 份供试品溶液，显色
并测定，计算样品中总黄酮的含量。计算得平均含
量为 6. 04 mg·g －1 ( RSD = 0． 84%，n = 6) 。
1． 2． 7 稳定性试验 精密量取对照品溶液 1 mL，
按“1． 2． 3”项下方法操作，于室温下分别显色 10、
20、30、45、60、90、120 min 后，在 417 nm 测定吸光
度，结果吸光度的 RSD = 0. 13%，表明对照品溶液显
色后( 显色 10 min) 较稳定，在 2 h内均可进行测定。
1． 2． 8 回收率试验 精密称取已知总黄酮含量的
样品 9 份，每份约 0． 5 g ，平均分为 3 组，每组分别
精密加入 1． 0057 mg·mL －1的芦丁对照品溶液 2． 4、
3． 0、3． 6 mL，按“1． 2． 1”“1． 2． 3”项下方法制备供试
品溶液，显色并测定。计算总黄酮的含量及回收率
( 表 1) 。
表 1 回收率试验结果( mg，n =9)
Table 1 Results of recovery test( mg，n =9)
Original Added Detected Recovery /% 珔X /% RSD /%
3． 1062 2． 4137 5． 4140 95． 61 96． 21 1． 39
3． 0130 2． 4137 5． 2917 94． 41
2． 9081 2． 4137 5． 2334 96． 34
3． 0654 3． 0171 5． 9211 94． 65
3． 1703 3． 0171 6． 1017 97． 16
3． 0188 3． 0171 5． 9793 98． 13
3． 1528 3． 6205 6． 6437 96． 42
2． 9664 3． 6205 6． 5097 97． 87
3． 0072 3． 6205 6． 4572 95． 29
1． 2． 9 样品的测定 取样品 3 批，按“1． 2． 1”
“1. 2. 3”项下方法制备供试品溶液、显色并测定。
计算样品中总黄酮的含量分别为 6． 2260、0. 3164、
0． 3242 mg·g －1。
2 讨论
角花胡颓子各批次样品中的总黄酮含量差异较
大，以夏秋季采收的枝叶中含量较高，根茎中含量较
低;而早春季采集的混合样品含量也较低。因此，在
制定质量标准及评价药材质量时，建议规定采收季
节以及所用药材的部位。
曾对索氏提取、加热回流提取和超声提取方式
和提取条件进行了考查，加热回流提取的提取率最
高。也对提取剂( 不同浓度乙醇) 、提取时间( 1、2、3
h) 、提取剂用量 ( 10、20、30、40、50 mL) 、提取温度
( 40、50、60、70、80、90 ℃ ) 及提取次数( 1、2、3 次) 进
行了考察，以采用 95%乙醇为提取剂时提取率最
高。当提取温度大于 70 ℃及提取时间大于 2 h 时，
总黄酮含量均呈下降趋势，可能因为黄酮类化合物
结构中的酚羟基在较高温度及长时间加热下均不稳
定，易出现氧化降解等情况，从而影响了铝离子与酚
羟基的络合使吸光度减小。当提取剂用量大于 30
mL和提取次数大于 2 时，提取率均无明显提高。故
试验的提取条件确定为: 取本品约 0． 5 g，在 70 ℃
以 95%乙醇 30 mL回流提取 2 h，提取 2 次。
试验考察了 A1Cl3 和 NaNO2 － Al ( NO3 ) 3 －
NaOH两种显色系统，以后者显色时，芦丁对照品溶
液显色后在 500 nm左右有最大吸收峰，而供试品溶
液在此波长范围没有吸收或是吸收很弱; 以 A1Cl3
显色时，芦丁对照品溶液显色后在 432 nm左右有最
大吸收，与文献［6 － 7］一致，供试品溶液显色后在 417
nm有最大吸收，故试验选择 A1Cl3 显色，检测波长
为 417 nm。
参考文献:
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收稿日期: 2009 － 11 － 13
28 华 西 药 学 杂 志 第 26 卷