全 文 :文章编号:1006-3110(2009)01-0009-02 【论 著】
丽江野生香薷籽油急性毒性和对高脂血症
小鼠血脂水平的影响
殷建忠1 ,赵云丽2 ,周建于1 ,王 琦1 ,尚建华2 ,池开胜3
摘要: 目的 评价丽江野生香薷籽油急性毒性 ,探讨其对高脂血症小鼠血脂水平的影响 , 为深入研究提供依据。
方法 采用《食品安全性毒理学评价程序和方法》最大耐受量法对受试物进行大鼠 、小鼠急性毒性实验;采用高脂饲料
致小鼠高脂血症模型给予受试物 ,观察对小鼠血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的影响。 结果 野生香薷籽油以急性毒
性半数致死量(LD50)毒性分级属实际无毒。连续灌胃 7 d 时高剂量组对 TC 有效(P<0.05), 14 d 时高 、中剂量皆有效(P
<0.01),而且三剂量间有量效关系。但对降低 TG不明显 。 结论 香薷籽油对脂质代谢存在一定的调节作用 , 其降血
脂作用有待于进一步深入研究。
关键词: 香薷籽油;急性毒性;高脂血症
中图分类号:R-332 文献标识码:A
Evaluation on Acute Toxicity of Wild Elsholtzia Seed Oil from Lijiang and Its Influence on Plasma Lipid Level of Mice with
Hyperlipidemia YIN Jian-zhong , ZHAO Yun-li , ZHOU Jian-yu , et al.(Research Institute of Nutrition and Food
Science , Kunming Medical College , Kunming 650031 , Y unnan , China)
Abstract: Objective To evaluate the acute toxicity of wild Elsholtzia seed oil from Lijiang and to investigate its influ-
ence on plasma l ipid level of mice withhyperl ipidemia. Methods Acute toxicity test on both rats and mice was carried out
by giving themmaximum tolerance dose according to Procedures and Methods for Toxicolohical Assessment on Food Safety.
Besides , we fed mouse model of hyperlipidemia resulting from high fat diet with test sample and then observed its influence on
total cholesterol(TC)and triglyceride(TG)in the sera of mice. Results The results indicated that acute toxicity LD50 of
Elsholtzia seed oil was classified as no toxicity.Only by high dose of Elsholtzia seed oil could reduce serum TC when the mice
were administered by gastr ic perfusion on 7 successive days(P<0.05), while bothhigh dose and moderatedose were able to
reduce TC in the serumwhen the mice were given Elsholtzia seed oil by gavage for 14 days(P<0.01).There was a dose-
effect relationship among the three dosages.Meanwhile , the results showed no pronounced effect on the decrease of TG in the
serum of mice. Conclusions Elsholtzia seed oil may influence lipid metabolism to some extent , but its effect of reducing
blood lipid awaits further study.
Key words: Elsholtzia seed oil;Acute toxicity;Hyperl ipidemia
野生香薷(Micromeria barosma (W.W.Smith)Hand.-
Mazz.)生于谷地干旱多砾石草地及石灰岩岩隙上 ,海拔 2 300
~ 3 800 m [ 1] 。小坚果长圆状三棱形 ,长 1 ~ 2 mm ,黑褐色。花
期7 ~ 8 月 ,果期 9 ~ 10 月。野生香薷籽油系香薷籽经压榨制成
清亮 、透明 、浅黄色液体。目前对于野生香薷籽油降血脂作用
尚无报道 ,在对其进行急性毒性安全性评价基础上 , 通过小鼠
高脂血症模型初步观察其对小鼠血脂水平的影响 , 现将结果报
道如下。
1 材料与方法
1.1 样品 野生香薷籽产自云南丽江宁蒗彝族自治县 , 采样
基金项目:云南省教育厅资助项目(5y0281c)
作者单位:1 昆明医学院营养与食品研究所(云南 昆明 650031);
2 云南省药物研究所; 3云南省营养学会
作者简介:殷建忠(1970-),男 ,硕士 ,副教授 ,硕士导师 ,主要从事营养
与食品卫生研究工作。
点包括大兴镇安乐村 、下仁河村;红旗乡白牛厂 、羊窝子村 、官
地坝村。 野生香薷籽经筛选 、清洗 、破碎 、软化 、扎胚 、压榨 、沉
淀 、过滤得到香薷籽油 , 4 ℃冰箱保存。
1.2 急性毒性实验[ 2] 最大耐受量法。 Ⅱ级 ICR小鼠 、SD
大鼠由昆明医学院实验动物中心提供(实验动物生产许可证:
SCXK(滇)2005-0008 , 动物合格证号:No:0003161;实验动物
使用许可证:SYXK(滇)2005 -0001)。小鼠体重 15.8 ~ 22.3
g , 共 30 只 ,雌雄各半 , 小鼠剂量 18 g/ kg.Bw(受试物比重 0.9
g/ ml), 按 0.2 ml/10 g空腹经口灌胃。大鼠体重175 ~ 211 g , 共
10 只 , 雌雄各半 ,大鼠剂量 13.5 g/kg.Bw , 按 1.5 ml/ 100 g 空腹
经口灌胃。灌胃结束后密切观察 2 h ,喂养观察 7 d。
1.3 调节血脂实验[ 3]
1.3.1 高脂饲料配方 1%胆固醇 、10%猪油 、0.5%胆酸钠 、
5%蔗糖 、0.2%丙基硫氧嘧啶 、83.3%基础饲料。 用热猪油溶
解胆固醇后 , 各物混匀 ,加水搅拌 , 揉合成小块状 , 置入 80 ℃~
100 ℃烘箱中烤干。
9实用预防医学 2009年 2月 第 16卷 第 1期 Practical Preven tive Medicine , Feb.2009 , Vol 16 , No.1
1.3.2 动物分组与剂量 选用 18 ~ 22 g 雄性小鼠 70 只 , 随
机分为 7组:正常对照组;模型组;非诺贝特阳性对照组;受试
物高 、中 、低剂量组。除正常对照组喂普通饲料外 , 其余各组动
物均喂高脂饲料 ,自由摄食和饮水。造型期间各组动物每日上
午按容量定时灌胃给受试物一次 , 高 、中 、低剂量的灌胃容积分
别为 20 、10、5 ml/ kg ,阳性药组为非诺贝特 0.1 g/kg , 空白对照
组和模型组灌服同容积的纯水。分别于灌胃 7 、14 d 时 , 末次给
药后禁食不禁水 12 h , 由眼眶取血 , 分离血清 , 测定 TC(胆固醇
氧化酶-过氧化物酶法)、TG(GPO-PAP法)的含量。
1.3.3 试剂 总胆固醇试剂盒(批号:20070824)、甘油三酯
试剂盒(批号:20070724), 购自上海科华东菱诊断用品有限公
司;丙基硫氧嘧啶(批号:0705131), 深圳市中联制药有限公司
生产;胆固醇 , 上海生化技术有限公司提供;牛胆酸钠 , 北京奥
博星生化科技有限责任公司提供;非诺贝特片(批号:050220),
江苏宜兴前进制药厂生产。
1.3.4 仪器 TMS-1024 全自动生化分析仪(日本东京株式
会社);JJ2000 型电子天平(常熟双杰测试仪器厂);Centrifuge
5810R台式高速冷冻离心机(德国 Eppendorf公司)。
1.3.5 统计分析 数据以( x±s)表示,数据统计采用 t检验。
2 结果
2.1 急性毒性实验结果 灌胃后喂养 7 d , 未见动物死亡 , 亦
未见任何异常反应 ,各组动物体重增长差异无显著性 , 试验结
束后解剖小鼠和大鼠 , 肉眼观察主要脏器无异常变化。小鼠经
口 LD50>18.0 g/ kg.Bw , 大鼠经口 LD50>13.5 g/ kg.Bw 。结果
表明 , 野生香薷籽油以急性毒性半数致死量(LD50)毒性分级属
实际无毒。
2.2 对高脂血症小鼠血脂水平的影响 模型对照组与空白
对照组比较 , 胆固醇有显著性差异(P<0.01), 说明模型成功。
连续灌胃 7 d时高剂量对小鼠血清 TC 有效(P<0.05), 到 14 d
时高 、中剂量组对小鼠血清 TC 皆有效(P<0.01), 而且三剂量
间有量效关系(r=-0.9896)。但对降低小鼠血清 TG 不明显 ,
结果见表 1。
表 1 连续灌胃 7~ 14 d对高脂血症小鼠血脂水平的影响( x±s , mmol/ L)
分组 剂量(/kg/次)
动物
(只)
TC
7d 14d
TG
7d 14d
空白组 20 ml 12 2.34±0.25 2.37±0.29 1.49±0.29 2.42±0.48
模型组 20 ml 12 4.31±0.46■■ 5.23±0.64■■ 1.69±0.82 1.23±0.38■■
阳性对照组 100 mg 12 3.69±0.73* 4.98±0.94 1.19±0.52 0.94±0.31
高剂量组 20 ml 12 3.54±1.02* 3.24±0.90** 0.76±0.23** 1.11±0.28
中剂量组 10 ml 11 3.97±0.71 4.13±0.65** 1.86±1.08 1.23±0.41
低剂量组 5 m l 11 4.49±1.05 4.89±0.56 1.52±0.79 1.31±0.31
注:与空白相比:■■P<0.01;与模型相比:*P<0.05 , **P<0.01
3 讨论
α-亚麻酸主要来源于陆地植物,紫苏、亚麻和杜仲是目前含
油量高 、资源丰富 、原料价格低廉 、富含α-亚麻酸的植物。α-
亚麻酸在体内代谢过程中 ,它主要作为 EPA 和 DHA 前体物质 ,
是维系人类脑进化的生命核心物质 。大量基础研究 、流行病学
调查 、动物实验及临床观察表明 , α-亚麻酸在降低胆固醇 、抑制
过敏反应 、保护视力 、抑制衰老 、降血脂 、预防心脑血管病、降压、抑
制癌症发生和转移等方面 , 已被国际医学界 、营养学界所认
可[ 4 ~ 11] 。笔者测定丽江野生香薷籽油主要由棕榈酸(C16:0)、硬
脂酸(C18:0)、油酸(C18:1)、亚油酸(C18:2)、α-亚麻酸(C18:3)5 种
脂肪酸组成 ,其中亚油酸和α-亚麻酸占 76.61%,α-亚麻酸含
量明显高于核桃油 、花生油 、葵花籽油 、玉米胚芽油 、油茶籽油 、
芝麻油 、大豆色拉油 、色拉油 ,是一种富含α-亚麻酸的植物油。
研究结果提示野生香薷籽油以急性毒性半数致死量(LD50)
毒性分级属实际无毒 , 安全性较高。《中国居民膳食指南
(2007)》建议每人每天烹调油用量不超过 25 g 或 30 g[ 12] , 据
此 ,野生香薷籽油以每人每日摄入 25 g , 体重 60 kg 计 , 则人的
推荐摄入量为 0.42 g/ kg.Bw.d。本研究动物低 、中 、高剂量分
别相当于人推荐摄入量的 11 、21 、43 倍(香薷籽油密度为 0.9)。
受试物对高脂血症小鼠血脂水平的影响 , 连续灌胃 7 d 时高剂
量组对小鼠血清 TC 有效(P<0.05), 至 14 d 时高 、中剂量组对
小鼠血清 TC 皆有效(P<0.01),而且三剂量间有量效关系。在
评价保健食品保健功能的剂量设计中 , 动物剂量设计最高剂量
不超过相当于人推荐摄入量的 30 倍 , 本研究在连续灌胃 14 d ,
相当于人推荐摄入量 21 倍时对小鼠血清 TC 有效 , 说明香薷籽
油对脂质代谢存在一定的调节作用。本研究高脂饲料配方对小
鼠胆固醇升高显著 , 而对甘油三酯升高不是很明显 , 有待于深入
研究。
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10 实用预防医学 2009年 2月 第 16卷 第 1期 Practical Preven tive Medicine , Feb.2009 , Vol 16 , No.1