全 文 :通讯作者:沈晓琴 Tel:13967338757 E-mail:370937018@ qq. com
不同药用部位及不同采收期疏花荠苧总黄酮含量动态比较
沈晓琴1 徐照辉2 (1.海宁市第二人民医院 浙江海宁 314419;2.浙江中医药大学中药饮片有限公司)
摘 要 目的:研究不同药用部位及不同采收期疏花荠苧总黄酮的含量变化,为确定疏花荠苧药材药用部位及最佳采收期提供
依据。方法:采用分光光度法测定总黄酮含量。结果:不同采收期疏花荠苧药材总黄酮含量以 9月为高;不同药用部位,叶中总
黄酮含量明显高于茎、根。结论:建议疏花荠苧药材采收以 9月地上部分为宜。
关键词 疏花荠苧;总黄酮;含量测定
中图分类号:R927. 2 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2014)04-0615-03
Dynamic Comparison of Total Flavones Content in Various Parts of Mosla Dianthera Harvested in Different
Seasons
Shen Xiaoqin1,Xu Zhaohui2(1. The Second People's Hospital of Haining,Zhejiang Haining 314419,China;2. Herbal Factory of Zhe-
jiang Chinese Medical University)
ABSTRACT Objective:To study the content of total flavones in different parts of Mosla dianthera harvested in different seasons to pro-
vide reference for the determination of optimal medicinal part and harvesting time of the plant. Methods:The total flavones content of M.
dianthera was determined by TLC-UV. Results:The content of total flavones extracted from the plant in September was highest,and that
in the leaves was much higher than that in the stems or the roots. Conclusion:It is advisable to harvest the aerial parts of M. dianthera
in September.
KEY WORDS M. dianthera;Total flavones;Content determination
疏花荠苧(Mosla dianthera)为唇形科(Lamiace-
ae)石荠苧属(Mosla)一年生草本植物,为民间常用草
药,其分布于长江以南地区,资源丰富,具有清暑热、
祛风湿、消肿、解毒之功效,临床上用于治感冒、中暑、
疟疾、便秘和慢性支气管炎等[1]。现代研究表明,疏
花荠苧含有挥发油、黄酮、皂苷、有机酸等多种成分,
其中黄酮类成分为其有效成分之一,具有抗菌、抗病
毒、抗炎镇痛等作用[2 ~ 5]。本文采用分光光度法,比
较不同药用部位及不同采收期疏花荠苧总黄酮的含
量,以期为合理开发利用该植物资源提供科学依据。
1 仪器与试药
S22PC可见分光光度计(上海棱光技术有限公
司),Mettler Toledo AG135电子天平。疏花荠苧采自
浙江临安、杭州及浦江等地,经浙江中医药大学中药
饮片有限公司质量管理部鉴定为疏花荠苧(Mosla di-
anthera)的全草,阴干备用。芦丁对照品购自中国食
品药品检定研究院(批号:100080-20030),所用试剂
均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 供试品溶液的制备[6]
取疏花荠苧药材粉末1. 0 g,索氏回流石油醚脱
脂,加 20倍量 65%乙醇,80℃水浴回流提取 2 次,每
次 1 h,过滤,合并滤液,回收乙醇至无乙醇味,用50%
乙醇定容至 25 ml,摇匀,即为供试品溶液。
2. 2 对照品溶液的制备
精确称取干燥至恒重的芦丁对照品6. 5 mg,置
25 ml量瓶,加50%乙醇使溶解,并稀释至刻度,摇匀,
即为对照品溶液。
2. 3 测定波长的选择
分别取芦丁标准品溶液和供试品溶液0. 2 ml,置
25 ml量瓶,加 5%NaNO2 试液1. 0 ml,放置 6 min,加
10%Al(NO3)3 试液1. 0 ml,放置 6 min,加 10%NaOH
试液 10 ml,加 50%乙醇至刻度,摇匀,放置 15 min,以
相应试剂作空白,于可见分光光度计上,在波长 400 ~
600 nm之间进行扫描,结果表明芦丁标准品溶液和
供试品溶液均在 504 nm处有最大吸收,故选 504 nm
为测定波长。
2. 4 标准曲线的制作
精密吸取芦丁对照品溶液0. 5,1. 0,2. 0,3. 0,
4. 0 ml,置 25 ml量瓶,按“2. 3”项下方法操作,以相应
试剂作空白,于 504 nm 处测定吸光度。以浓度(C)
对吸光度(A)绘制工作曲线得回归方程:C = 3. 047A
-0. 008(r =0. 999 7),结果表明,芦丁浓度在0. 130 ~
1. 040 mg·ml -1范围内呈良好的线性关系。
2. 5 精密度试验
精密吸取同一对照品溶液,平行测定 6 次,结果
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中国药师 2014 年第 17 卷第 4 期 China Pharmacist 2014,Vol. 17 No. 4
RSD为0. 10%,表明精密度良好。
2. 6 重复性试验
精密吸取同一批疏花荠苧样品(批号:20120911)
6份,按供试品溶液的制备方法操作,按“2. 3”项下条
件测定,结果其 RSD为1. 67%(n = 6),表明重复性良
好。
2. 7 稳定性试验
取同一批供试品溶液(批号:20120911),分别于
显色完全后 0,5,15,30,45,60 min 于 504 nm 测定吸
光度,结果其 RSD为0. 96%(n = 6),表明供试品溶液
显色完全后在 1 h内稳定。
2. 8 加样回收试验
精密称取已知含量的 8 月份采摘疏花荠苧茎部
样品1. 0 g(含量约为 2 mg),平行 6份,加入适量对照
品溶液(1. 95 mg),按“2. 1”项下方法操作,计算回收
率,结果平均回收率为98. 70%,RSD =1. 94%(n =6)。
2. 9 样品测定
取疏花荠苧干燥药材,按叶、茎、根 3 个不同部位
分别制备供试品溶液,按“2. 3”项测定操作,计算含
量,结果见表 1。
表 1 不同药用部位及采收期总黄酮含量(mg·g -1,n =3)
产地 不同部位
不同采收期总黄酮含量
5 月 6 月 7 月 8 月 9 月 10 月 11 月
临安 根 8. 4 8. 8 10. 6 10. 4 11. 3 9. 7 9. 4
茎 22. 4 26. 1 24. 1 26. 8 24. 1 19. 6 19. 4
叶 34. 3 35. 5 40. 6 43. 3 55. 8 32. 2 -
浦江 根 23. 1 23. 9 27. 9 28. 2 28. 1 26. 1 25. 9
茎 34. 5 31. 7 33. 7 25. 3 20. 8 20. 5 21. 7
叶 47. 3 59. 1 5. 4 58. 0 67. 4 62. 4 -
杭州西湖区 根 12. 1 12. 4 13. 6 14. 2 14. 5 14. 4 14. 1
茎 27. 5 28. 2 29. 4 32. 3 33. 6 26. 4 24. 3
叶 41. 5 47. 8 52. 6 55. 3 58. 4 54. 1 43. 3
杭州余杭区 根 11. 3 11. 5 12. 0 12. 4 12. 4 12. 3 12. 4
茎 19. 6 23. 4 24. 1 25. 5 25. 4 24. 8 25. 1
叶 45. 4 46. 8 52. 4 56. 3 56. 5 53. 6 -
注:11 月部分产地疏花荠苧已落叶,故未检测。
由表 1 结果可知,不同产地的疏花荠苧药材中
总黄酮的含量差异较大;不同部位中总黄酮的含量
亦各不相同,其中以叶中的含量最高;同一部位不同
月份的总黄酮含量基本呈现先增后减的变化趋势,
以 9 月时的药材中总黄酮含量最高。因此,建议疏
花荠苧药材采收以 9 月地上部分为宜。
3 讨论
疏花荠苧为多年草本植物,生长初期茎部色绿柔
软,可进行光合作用及次生代谢,故此时茎部黄酮含
量相对较高,但随着植株的生长,其逐渐木质化,不再
或较少参与植株的代谢过程,因此其含量也随之降
低。而叶及根部在 9 月前,全草以营养生长为主,形
成的初生代谢产物主要满足植株生长需要,此时植株
总黄酮含量相对较低;开花结果后,部分初生代谢产
物转化为总黄酮等次生代谢产物,从而形成 9 月疏花
荠苧总黄酮累积的高峰期。可见,疏花荠苧总黄酮的
形成与累积同植株生长繁殖的过程密切相关。
本文对浙江浦江、杭州西湖区、杭州余杭区、浙江
临安 4个不同产地的疏花荠苧样品分别进行了总黄
酮含量的测定。由结果分析可知,各个产地疏花荠苧
总黄酮含量具有明显差异,说明不同产地的疏花荠苧
中总黄酮含量有着明显的差异。黄酮类化合物为植
物化感物质之一,受环境因素影响较大[7],因此,土
壤、温度、湿度、栽培及储藏等条件可能造成了不同产
地疏花荠苧中总黄酮含量的差异性。至于各黄酮组
分种类及含量的变化尚需采用 HPLC 或 LC-MS 进一
步研究。
近年研究发现,黄酮类具有较强的抗自由基作
用,A环上 5,7-二羟基是其活性必需基团,且消除游
离基活性大小与 B环上羟基取代数目有关,数目越多
活性越强[8]。研究表明,石香薷、苏州荠苧含有多种
5,7-二羟基黄酮及其衍生物[9],与疏花荠苧为同属植
物。该属植物不同溶剂提取物体外具有较强的还原
力、抗氧化、清除自由基等作用,且自由基清除率与各
提取物中总黄酮含量呈正相关。黄酮类化合物可能
是其抗氧化作用的主要物质基础[10]。因此,根据植
物亲缘性理论,疏花荠苧可能亦含有多羟基黄酮,可
作为一种天然抗氧化剂,具有潜在的开发价值。
参 考 文 献
1 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志[M].北京:科学
出版社,1997. 287-293
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and inflammatory cytokine production [J]. Toxicology and Applied
Pharmacology,2006,216:479-484
3 Wu QF,Wang W,Dai XY,et al. Chemical compositions and anti-
influenza activities of essential oils from Mosla dianthera[J]. Journal
of Ethnopharmacology,2012,139(2):668-671
4 吴晓宁,吴巧凤,陈京. 浙江产石荠苧属植物研究进展[J]. 浙江
中医学院学报,2005,29(4):92-93
616
www. zgys. org 中药资源与鉴定专栏
基金项目:山东省科技发展计划项目(编号:2011BAI06B06);“山东道地药材资源质量控制科技平台建设”项目(编号:2008GG2NS02022);山
东省农业良种工程项目(编号:2009LZ01-03)
通讯作者:彭艳丽 Tel: E-mail:
櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊
ply567@ 163. com
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活性研究[J].中华中医药学刊,2008,26(11):2442-2444
(2013-10-20 收稿 2014-02-12 修回)
基于植株性别差异的天花粉多糖、蛋白质含量比较
张波 刘红燕 李佳 彭艳丽 (山东中医药大学 济南 250355)
摘 要 目的:比较雌雄株栝楼根中多糖、蛋白质含量差异,为天花粉主要来源于雄株栝楼的根提供理论依据。方法:水提
醇沉法提取可溶性多糖,硫酸蒽酮比色法检测多糖含量;丙酮分级沉淀法提取天花粉蛋白,考马斯亮蓝染色紫外比色法检测
蛋白含量。结果:雌、雄株栝楼根中多糖含量分别为2. 628%、3. 237% ;雌、雄株天花粉蛋白含量分别为0. 193%、0. 280%,雄
株天花粉多糖、天花粉蛋白含量均高于雌株。结论:以多糖和蛋白质含量为指标,雄株根入药优于雌株。
关键词 天花粉;雌雄株;多糖;天花粉蛋白
中图分类号:R927. 2 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2014)04-0617-03
Content Comparison of Polysaccharide and Protein in Male and Female Trichosanthis Radix
Zhang Bo,Liu Hongyan,Li Jia,Peng Yanli(Shandong University of Traditional Chinese Medicine,Shandong Jinan 250355,China)
ABSTRACT Objective:To compare the contents of polysaccharide and protein in male and female Trichosanthis Radix to provide
reasonable explanation for that male plant was better. Methods:Polysaccharides in Trichosanthis Radix were obtained by water-extrac-
tion and ethanol-precipitation method,and the content was determined by anthrone-sulfuric acid method. Tichosanthin (TCS)was ob-
tained by hydrochloric acid extraction and acetone precipitation. Based on the light absorption of Coomassie brilliant blue G-250 com-
bined with proteins,the content of TCS was detected. Results:The polysaccharides content in male and female Trichosanthis Radix
was 2. 628% and 3. 237%,TCS content was 0. 193% and 0. 280%,respectively. Conclusion:The contents of polysaccharides and
TCS in male plant are higher than those in female plant. The male plant is a better source for Trichosanthis Radix.
KEY WORDS Trichosanthis Radix;Male and female plant;Polysaccharide;Tichosanthin(TCS)
天花粉(Trichosanthis Radix)为葫芦科植物栝
楼(Trichosanthes kirilowii Maxim)或双边栝楼(Tri-
chosanthes rosthornii HarIlls)的干燥根。栝楼为葫芦
科栝楼属多年生草质藤本植物,雌雄异株,以根及果
实入药为主。天花粉多取自雄株的根,雌株以采收
果实为主。研究表明,雌雄异株药用植物在生理生
化及某些活性成分的含量上有显著差异[1]。天花
粉以雄株根入药为主是否与其物质基础有关尚未有
研究报道,为深入探讨这一问题,本试验以天花粉中
主要活性成分天花粉蛋白、多糖[2]为指标,比较雌
雄株中两者含量差异,报道如下。
1 仪器与试药
FA2004 型电子天平(上海良平仪器仪表有限公
司);LDZ4-0. 8 自动平衡微量离心机(北京医用离心
机厂);FE20 /EL20 型 PH计(梅特勒-托利多仪器有
限公司);H-1850R台式高速冷冻离心机(长沙湘仪
离心机仪器有限公司);UV /V-16 /18 型紫外可见分
分光光度计(上海美谱达仪器有限公司)。
根据雌雄花特征标记校药用植物园雌雄栝楼植
株,当年秋采收根,洗净,阴干,研磨过 40 目筛。蒽
酮(国药集团化学试剂有限公司,批号:30015014),
PH缓冲溶液,考马斯亮蓝 G250(上海展云化工有限
公司,批号:0711259),牛血清白蛋白(GENVIEW 公
司,批号:3222010160),试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 样品溶液提取
2. 1. 1 水提醇沉法提取天花粉多糖[3] 取栝楼根
粉末0. 5 g,加入 5 ml 蒸馏水,45℃浸泡 2h,超声提
取 2 h,抽滤,滤渣加少量蒸馏水再次超声提取
0. 5 h,抽滤,合并滤液,定容至 10 ml,加入等体积无
716
中国药师 2014 年第 17 卷第 4 期 China Pharmacist 2014,Vol. 17 No. 4