全 文 ：第 32 卷第 3 期
2013 年 6 月
中 国 野 生 植 物 资 源
Chinese Wild Plant Resources
Vol． 32 No． 3
Jun． 2013
收稿日期:2012 － 12 － 19
doi:10． 3969 / j． issn． 1006 － 9690． 2013． 03． 007
荔枝草抗氧化部位的化学成分研究
龚 玺，杨守士
(上海一林生物科技有限公司，上海 201202)
摘 要 目的:研究荔枝草抗氧化部位的化学成分及单体化合物的抗氧化活性。方法: 采用 HP － 20 大孔树脂、硅
胶、Sephadex LH － 20 及中压制备等手段，对荔枝草抗氧化部位进行分离纯化。根据理化性质和核磁、质谱数据解
析化合物的结构;采用清除 DPPH自由基和还原力实验测试总黄酮和单体化合物的抗氧化能力。结果:分离得到 5
个黄酮类化合物:楔叶泽兰素( 1) ，高车前素( 2) ，高车前苷( 3) ，假荆芥属苷( 4) ，5，7，4 －三羟基 － 6 －甲氧基 －
二氢黄酮 － 7 － O － β － D －葡萄糖苷( 5) 和 2 个苯丙素类化合物:咖啡酸( 6) 和迷迭香酸( 7) ;抗氧化活性研究表明
总黄酮和化合物均具有明显的抗氧化活性。结论: 化合物 5 首次从野生荔枝草中分离得到，化合物 7 首次从该属
分离得到;系统地分析了提取物和组分的抗氧化活性。
关键词 荔枝草;总黄酮; 5，7，4 －三羟基 － 6 －甲氧基 －二氢黄酮 － 7 － O － β － D －葡萄糖苷;抗氧化
中图分类号:Q948． 12 文献标识码:A 文章编号:1006 － 9690(2013)03 － 0024 － 04
Isolation，Identification and Antioxidant Properties of
Flavonoids from Salvia plebeia
Gong Xi，Yang Shoushi
(Shanghai Yilin Biotechnology Co．，Ltd．，Shanghai 201202，China)
Abstract Objective:To study the flavonoidic compositions and the antioxidant properties of Salvia ple-
beia． Methods:The flavonoids were isolated and purified by HP － 20 macroresin，silica gel，Sephadex
LH －20 column chromatography and MPLC． The isolates were identified with the physicochemical prop-
erties and spectra data． Results:Seven isolates were nepetin (eupafolin) (1) ，hispidulin(2) ，ho-
moplantaginin(3) ，nepitrin (eupafolin － 7 － glucoside) (4) ，5，7，4 － trihydroxy － 6 － methoxy － di-
hydroflavone － 7 － O － β － D － glucopyranose(5) ，caffeic acid(6)and rosmarinic acid(7)． The total
flavonoids and compounds 1，4 exhibited obvious antioxidant action． Conclusion:Compound 5 was first i-
solated from the wild Salvia plebeia． Compond 7 was found in the genus Salvia plants for the first time．
The antioxidant constituents were analyzed systemly．
Key words Salvia plebeia;total flavonoids;5，7，4 － trihydroxy － 6 － methoxy － dihydroflavone － 7 －
O － β － D － glucopyranose;antioxidant
荔枝草为唇形科鼠尾草属植物荔枝草 (Salvia
plebeia R． Br．)的全草，别名有蛤蟆草、雪见草、野
猪菜、青蛙草、皱皮草等，为 1 年或 2 年生直立草本
植物。生于山坡、路边、荒地、河边等地，主产于江
苏、浙江、安徽，全国大部均见分布，资源丰富。有利
水消肿，清热解毒等功效，主治感冒发热、咽喉肿痛、
肺热咳嗽、肾炎及泌尿系统感染等［1］。前期的化学
工作表明，该化合物含有黄酮类化合物、二萜类化合
物和三萜类化合物、苯丙素类化合物、甾体化合物及
饱和和不饱和脂肪酸酯等［2 － 7］。药理活性广泛，包
括抗氧化、镇咳平喘、抗菌抗病毒、保护线粒体等。
临床上治疗疮疖、疱疹及皮肤瘙痒等方面药效确
切［2 － 4，8］。
前期研究中发现荔枝草的抗氧化、抑制线粒体
脂质过氧化物生成等活性与富含的黄酮等多酚类成
分相关。本文中选择抗氧化活性最强的乙酸乙酯部
位［8］进行化学成分研究，并进一步考察总黄酮和主
要黄酮类成分的抗氧化活性。
—42—
第 3 期 龚玺，等:荔枝草抗氧化部位的化学成分研究
1 实验部分
1． 1 药材
植物于 2012 年 5 月采自上海浦东郊区，经鉴定
为唇形科鼠尾草属植物荔枝草(Salvia plebeia R．
Br．) ，标本现存于上海一林生物科技有限公司标本
室。
1． 2 试剂与仪器
Bruker DRX － 600 型核磁共振仪，Agilent MSD
－ Trap － XCT质谱仪。中压液相色谱仪(EZ Purifi-
er，ODS，43 － 60 μ，Pharmacia 公司)。DIAION HP －
20 大孔吸附树脂为日本三菱公司产品。Sephadex
LH － 20 为 Pharmacia 公司产品。柱层析硅胶(100
～200 目、200 ～ 300 目)为青岛海洋化工厂生产，所
用试剂均为分析纯。
1． 3 提取与分离
荔枝草干燥全草(31 kg)粉碎后以 80%乙醇回
流提取 3 次，每次 2 h，提取液减压浓缩成浸膏，加水
稀释后分别用石油醚、乙酸乙酯萃取，得到石油醚部
位(120 g) ，乙酸乙酯部位(474． 5 g)和水部位。200
g乙酸乙酯部位样品与 300 g硅胶(100 ～ 200 目)拌
样，上硅胶柱(100 ～ 200 目) ，用二氯甲烷∶甲醇(10∶
1 － 5∶ 1 － 2∶ 1 － 0∶ 1)洗脱，得 4 个流分(SF1 － SF4)。
流分 SF1 经多次硅胶(200 ～ 300 目)柱层析，二氯甲
烷∶甲醇(20∶ 0 － 20∶ 1 － 10∶ 1)洗脱，TLC 跟踪，得化
合物 1(55 mg) ，化合物 2(60 mg)和化合物 6(15
mg)。流分 SF2 经硅胶柱粗分，用二氯甲烷 ∶ 甲醇
(10∶ 1 ～ 5 ∶ 1)洗脱，TLC 跟踪，组分相近的流分合
并，得 5 个细分的流分(SF2a ～ SF2e)。其中 SF2b部分
经硅胶柱纯化，得化合物 7(14 mg)。SF2c和 SF2d流
分进一步经 Sephadex LH －20 柱色谱(80%甲醇)反
复纯化，得化合物 3(150 mg)和化合物 4(100 mg) ，
均为淡黄色粉末。流分 SF2e经 Sephadex LH － 20 柱
色谱(70%甲醇)处理后，进一步经中压制备液相，
以梯度甲醇溶液(30% ～ 45%)洗脱，得到化合物 5
(10 mg)。
2 结构鉴定
化合物 1 淡黄色粉末，HCl － Mg 反应为阳性，
Molish 反应为阴性。1H － NMR (600 MHz，DMSO －
d6) :δ3． 75(3H，s，6 － OCH3) ，6． 55(1H，s，H － 3) ，
6． 63(1H，s，H － 8) ，6． 87(1H，d，J = 8． 4 Hz，H －
5) ，7． 40(1H，brs，H － 2) ，7． 41(1H，brs，H － 6) ，
12． 8(1H，s，5 － OH)． 13C － NMR(150 MHz，DMSO －
d6) :δ163． 8(C － 2) ，102． 6(C － 3) ，182． 0(C － 4) ，
152． 1(C －5) ，131． 3(C －6) ，157． 0(C －7) ，94． 3(C
－8) ，152． 7(C － 9) ，104． 2(C － 10) ，121． 7(C －
1) ，113． 2 (C －2) ，149． 6(C －3) ，145． 7(C －4) ，
116． 1(C －5) ，118． 7(C － 6) ，59． 8(OCH3)。该化
合物的1H －和13C － NMR数据与化合物楔叶泽兰素
一致［5］，故化合物 1 鉴定为楔叶泽兰素(eupafolin)。
化合物 2 淡黄色粉末，HCl － Mg 反应为阳性，
Molish反应为阴性。1H － NMR(600 MHz，DMSO －
d6) :δ3． 70(3H，s，6 － OCH3) ，6． 59(1H，s，H － 8) ，
6． 77(1H，s，H －3) ，6． 90(1H，d，J = 8． 4 Hz，H － 3，
5) ，7． 92(1H，d，J = 8． 4 Hz，H － 2，6) ，12． 9(1H，
s，5 － OH)． 13 C － NMR(150 MHz，DMSO － d6) :δ
163． 7(C －2) ，102． 4(C － 3) ，182． 2(C － 4) ，152． 4
(C －5) ，131． 5(C － 6) ，157． 3(C － 7) ，94． 4(C －
8) ，152． 6(C － 9) ，103． 9(C － 10) ，121． 1(C － 1) ，
128． 0(C － 2，6) ，115． 6(C － 3，5) ，161． 7(C －
4) ，59． 2(OCH3)．该化合物的
1H －和13 C － NMR 数
据与化合物高车前素一致［6，7］，故化合物 2 鉴定为
高车前素(粗毛豚草素，hispidulin)。
化合物 3 淡黄色粉末，HCl － Mg 反应为阳性，
Molish 反应为阳性。ESI － MS m/z:461． 1［M －
H］－，299． 1［M － H － glc］－;1H － NMR(600 MHz，
DMSO － d6) :δ3． 11(3H，s，6 － OCH3) ，6． 14(1H，s，
H －3) ，6． 26(1H，d，J = 8． 4 Hz，H － 3，5) ，6． 33
(1H，s，H －8) ，7． 26(1H，d，J = 8． 4 Hz，H － 2，6) ，
12． 25(1H，brs，5 － OH) ，4． 43(1H，d，J = 7． 8 Hz，H
－1″) ，2． 55 － 3． 08(6H，m，H － 2″ － 6″)． 13 C － NMR
(150 MHz，DMSO － d6) :δ164． 2(C － 2) ，102． 6(C －
3) ，182． 2(C － 4) ，152． 4(C － 5) ，132． 6(C － 6) ，
156． 4(C －7) ，94． 4(C －8) ，152． 0(C －9) ，104． 7(C
－10) ，121． 1(C － 1) ，128． 4(C － 2，6) ，115． 9(C
－3，5) ，161． 3(C － 4) ，60． 2(OCH3) ，100． 3(C －
1″) ，73． 2(C －2″) ，77． 2(C － 3″) ，69． 6(C － 4″) ，76．
7(C －5″) ，60． 6(C － 6″)． 该化合物的1H －和13 C －
NMR数据与化合物高车前苷一致［4，7］，故化合物 3
鉴定为高车前苷(homoplantaginin)。
化合物 4 淡黄色粉末，HCl － Mg 反应为阳性，
Molish 反应为阳性。ESI － MS m/z:477． 1［M －
H］－，315． 1［M － H － glc］－;1H － NMR(600 MHz，
DMSO － d6) :δ3． 77(3H，s，6 － OCH3) ，6． 75(1H，s，H
－3) ，6． 91(1H，d，J = 8． 4 Hz，H － 5) ，6． 98(1H，s，
H －8) ，7． 42(1H，m，H － 2，6) ，13． 0(1H，s，5 －
OH)． 13 C － NMR(150 MHz，DMSO － d6) :δ164． 5(C
—52—
中 国 野 生 植 物 资 源 第 32 卷
－ 2) ，102． 7(C － 3) ，182． 2(C － 4) ，152． 1(C － 5) ，
132． 5(C －6) ，156． 4(C －7) ，94． 2(C －8) ，152． 5(C
－9) ，105． 7(C － 10) ，121． 4(C － 1) ，113． 5(C －
2) ，145． 8(C －3) ，149． 9(C － 4) ，115． 9(C － 5) ，
119． 1(C － 6) ，60． 3(OCH3) ，100． 2(C － 1″) ，73． 2
(C －2″) ，77． 2(C － 3″) ，69． 5(C － 4″) ，76． 7(C －
5″) ，60． 6(C －6″)．该化合物的1H －和13 C － NMR 数
据与化合物假荆芥属苷一致［4，7］，故化合物 4 鉴定
为假荆芥属苷(nepitrin)。
化合物 5 淡黄色粉末，Molish 反应为阳性，
Molish 反应为阳性。ESI － MS m/z:479． 2［M －
H］－，317． 1［M － H － glc］－;1H NMR(600 MHz，DM-
SO － d6) :δ2． 68(1H，m，H － 3a) ，3． 30(1H，m，H －
3b) ，3． 85(3H，s，6 － OCH3) ，5． 38(1H，m，H － 2) ，
6． 31(1H，s，H －8) ，6． 76 － 6． 77(2H，m，H － 5，6) ，
6． 89(1H，brs，H － 2)． 13 C － NMR(150 MHz，DMSO
－ d6) :δ78． 7(C － 2) ，42． 3(C － 3) ，197． 9(C － 4) ，
158． 0(C －5) ，130． 1(C －6) ，158． 6(C －7) ，94． 3(C
－8) ，154． 4(C － 9) ，103． 2(C － 10) ，129． 3(C －
1) ，114． 4(C －2) ，145． 2(C － 3) ，145． 8(C － 4) ，
115． 3(C －5) ，118． 1(C － 6) ，60． 3(OCH3) ，101． 8
(C －1″) ，73． 1(C － 2″) ，77． 2(C － 3″) ，69． 5(C －
4″) ，76． 5(C －5″) ，60． 6(C － 6″)。该化合物的1H －
和13C － NMR 数据与文献报道［9］比较，鉴定合物 5
为 5，7，4 －三羟基 － 6 －甲氧基 －二氢黄酮 － 7 － O
－ β － D － 葡萄糖苷(5，7，4 － trihydroxy － 6 － me-
thoxy － dihydroflavone － 7 － O － β － D － glucopyr-
anose)。
化合物 6 淡黄色粉末，mp 215 － 218 ℃。1H －
NMR(600 MHz，DMSO － d6) :δ6． 74(1H，d，J = 7． 8
Hz，H －5) ，6． 96 － 7． 01(2H，H － 2，6) ，6． 16(1H，d，
J = 12． 6 Hz，Hα) ，7． 41(1H，d，J = 12． 0 Hz，Hβ) ，
9． 40 － 9． 54(2H，－ OH) ，12． 10(COOH) ，该1H －
NMR数据与已知化合物咖啡酸一致［10］，故化合物 6
鉴定为咖啡酸。
化合物 7 黄色粉末，ESI － MS m/z:359． 1［M
－ H］－;1H － NMR(400 MHz，DMSO － d6) :δ2． 85 －
3． 02(2H，m，H －7) ，5． 04(1H，q，J = 8． 0，4． 0 Hz，H
－8) ，6． 25(1H，d，J = 16． 0 Hz，H － 8) ，6． 54(1H，
dd，J = 8． 0，1． 6 Hz，H － 6) ，6． 65(1H，d，J = 8． 0
Hz，H － 5) ，6． 69(1H，d，J = 1． 6 Hz，H － 2) ，6． 78
(1H，d，J = 8． 0 Hz，H －5) ，7． 02(1H，d，J = 8． 0 Hz，
H －6) ，7． 07(1H，d，J = 1． 6 Hz，H － 2) ，7． 48(1H，
d，J = 16． 0 Hz，H － 7) ，8． 76 － 7． 81(2H，br s，－ OH
×2) ，9． 19(1H，br s，－ OH) ，9． 68(1H，br s，－
OH)。13 C － NMR(100 MHz，DMSO － d6) :δ125． 3(C
－1) ，114． 9(C － 2) ，145． 6(C － 3) ，148． 6(C － 4) ，
115． 7(C －5) ，121． 6(C － 6) ，145． 9(C － 7) ，113． 2
(C －8) ，165． 9(C － 9) ，127． 3(C － 1) ，116． 7(C －
2) ，144． 9(C －3) ，144． 0(C － 4) ，115． 4(C － 5) ，
120． 0(C － 6) ，36． 1(C － 7) ，72． 8(C － 8) ，170． 8
(COOH)。该化合物的1H －和13 C － NMR 数据与化
合物迷迭香酸一致［10］，故化合物 7 鉴定为迷迭香酸
(rosmarinic acid)。
化合物 5 的结构图
3 抗氧化活性测试
3． 1 DPPH自由基清除能力的测定
参照文献［8］方法，将待测液配成 20、50、100、
200 μg /mL 的溶液，用移液枪取溶液 1 mL，加入
60%乙醇溶液 2 mL，0． 1 mmo1 /L DPPH溶液 1 mL ，
摇匀，黑暗处静置 30 min。用 60%乙醇调零，测定
517 nm处的吸光度 A 样品。同时，测定样品溶液
1 mL与 60%乙醇 3 mL 混合液在 517 nm 处的吸光
度 A对照，再测定 1 mL DPPH 溶液与 3 mL 60%乙
醇在 517 nm处的吸光度 A空白。
DPPH清除率 =［A空白 －(A样品 － A 对照)/A 空
白］× 100%
3． 2 还原能力测定
按文献［11］采用铁氰化钾还原法测定还原能
力，将待测液配成 0、100、300 μg /mL 的溶液，用移
液枪取溶液 1 mL，加入 pH = 6． 6 的磷酸缓冲液 2． 5
mL和1%铁氰化钾溶液2 ． 5mL，混合后置于50℃
表 1 荔枝草提取物和单体化合物的抗氧化活性
样 品
吸光值(A)
100 μg /mL 300 μg /mL
IC50(μg /mL)
乙酸乙酯部位 0． 12 0． 36 36． 9
总黄酮* 0． 24 0． 53 25． 1
楔叶泽兰素(1) 0． 21 0． 62 14． 1
高车前素(2) 0． 20 0． 36 80． 9
高车前苷(3) 0． 12 0． 21 73． 6
假荆芥属苷(4) 0． 22 0． 83 21． 6
二氢黄酮 (5) 0． 18 0． 69 26． 1
Vc 0． 39 1． 72 10． 6
总黄酮* :取乙酸乙酯部位，经 LH －20 柱色谱(甲醇)纯化 2 次。
—62—
第 3 期 龚玺，等:荔枝草抗氧化部位的化学成分研究
水浴中 20 min，加入 10%三氯乙酸溶液 2． 5 mL，
4 000 r /min离心 l0 min，取上清液 2． 5 mL，加入 2． 5
mL蒸馏水和 0． 1%氯化铁 2． 5 mL，混匀，静置 10
min，在 700 nm处测定吸光度，用蒸馏水调零，Vc 作
为对照。
3． 3 结果与分析
由表 1 可见，荔枝草总黄酮和主要单体化合物
均有较好的抗氧化活性。其中化合物 1 和 4 清除
DPPH自由基活性最强，还原 Fe3 +能力也较强。但
结构类似的化合物 2 和 3 的抗氧化能力明显弱于 1
和 4，说明黄酮结构中 B 环上邻二酚羟基结构对于
发挥抗氧化能力至关重要。总黄酮的抗氧化能力虽
然强于乙酸乙酯部位，但无显著优势，说明在制备总
黄酮的过程中可能损失了一些含量较低但抗氧化活
性显著的组分。化合物 3 和 4 是含量最高的两种成
分，但其抗氧化活性并不显著优于乙酸乙酯部位，也
说明乙酸乙酯部位可能含有某些抗氧化活性较强但
含量较低的化合物。
本研究报道了野生荔枝草提取物及主要成分的
抗氧化活性，提示该药材可能含有含量不高但抗氧
化活性显著的组分，为该药材的深入研究和应用提
供了基础。
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129 － 134．
( 上接第 9 页)
能满足市场需求，也不破坏资源，可以作为一种新型
的药食两用野菜加以开发利用，以丰富食品种类，将
资源优势转化经济优势。
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