全 文 ：基金项目：新疆医科大学创新基金（ＸＪＣ２０１１２２）
作者简介：阿布都许库尔·吐尔逊（１９５９－），男（维吾尔族），副教授，研究方向：药物分析。
通信作者：孙　莲，女，硕士，教授，硕士生导师，研究方向：药物成分分析，Ｅ－ｍａｉｌ：ｓｌ＿ｙｘｙ＠１２６．ｃｏｍ。
维药罗勒子油脂的定性定量研究
阿布都许库尔·吐尔逊１，施　洋２，胡尔西丹１，孙　莲１
（新疆医科大学１药学院化学教研室，２学报编辑部，乌鲁木齐　８３００１１）
摘要：目的　建立罗勒子中亚油酸薄层鉴别及气相色谱法测定罗勒子油脂中各脂肪酸含量的方法。方法
　以石油醚－乙酸乙酯（３７∶３）为展开剂，薄层色谱法鉴别罗勒子中亚油酸。乙醚提取罗勒子油脂，气相色谱法测
定罗勒子油脂中各脂肪酸的含量。结果　薄层鉴别的Ｒｆ值较合适，紫外灯检视，供试品色谱中，在与对照品色谱
相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点。罗勒子油脂中各种脂肪酸在５０ｍｉｎ内完全分离，测得各脂肪酸的相对含
量分别为肉豆蔻酸（２３．３４％）、软脂酸（１５．６５％）、γ－亚麻酸（３２．２３％）、亚油酸（２８．３４％）、油酸（１９．３５％）及花生四
烯酸（１４．６９％）。结论　本法操作简便，结果准确可靠，重复性好，可为罗勒子的质量标准提供参考数据。
关键词：罗勒子；亚油酸；薄层色谱；气相色谱
中图分类号：Ｒ９１７　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９－５５５１（２０１４）０４－０４４０－０３
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００９－５５５１．２０１４．０４．０１４
Ｔｈｅ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｆ　ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ　ａｎｄ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｏｆ　ｏｉｌ　Ｕｉｇｈｕｒ　ｍｅｄｉｃｉｎｅ
ｏｆ　Ｓｅｍｅ　Ｏｃｉｍｉ　Ｂａｓｉｌｉｃｉ
Ａｂｕｄｕｘｕｋｕｅｒ　Ｔｕｅｒｘｕｎ１，ＳＨＩ　Ｙａｎｇ２，Ｈｕｅｒｘｉｄａｎ１，ＳＵＮ　Ｌｉａｎ１
（１　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，２　Ｅｄｉｔｏｒｉａｌ　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，
Ｕｒｕｍｑｉ　８３００１１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄｓ　ｏｆ　ＴＬＣ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｉｎｏｌｅｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ
ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｅｖｅｒｙ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄ　ｉｎ　Ｓｅｍｅ　Ｏｃｉｍｉ　Ｂａｓｉｌｉｃｉ　ｏｉｌ　ｂｙ　ＧＣ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ　ｅｔｈｅｒ　ａｎｄ　ｅｔｈｙｌ　ａｃｅ－
ｔａｔｅ（３７∶３）ａｓ　ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ　ａｇｅｎｔ．Ｔｈｅ　ｂａｓｉｌ　ｏｆ　ｌｉｎｏｌｅｉｃ　ａｃｉｄ　ｗａｓ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ｂｙ　ＴＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ　ｏｉｌ　ｗａｓ　ｅｘ－
ｔｒａｃｔｅｄ　ｂｙ　ｅｔｈｅｒ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｅｖｅｒｙ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄ　ｉｎ　Ｓｅｍｅ　Ｏｃｉｍｉ　Ｂａｓｉｌｉｃｉ　ｏｉｌ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ＧＣ．
Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　Ｒｆ　ｖａｌｕｅ　ｉｓ　ｍｏｒｅ　ａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅ，ｉｔ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｂｌｕｅ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｓｐｏｔｓ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｓｔａｎｄａｒｄ
ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ｐｏｓｉｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓａｍｐｌｅ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｂｙ　ＵＶ　ｌａｍｐ　ｒｅｖｉｅｗ．Ｔｈｅ　Ｓｅｍｅ
Ｏｃｉｍｉ　Ｂａｓｉｌｉｃｉ　ｏｉｌ　ｗａｓ　ｃｏｍｐｏｓｅｄ　ｏｆ　ｍｙｒｉｓｔｉｃ　ａｃｉｄ（２３．３４％），ｐａｌｍｉｔｉｃ　ａｃｉｄ（１５．６５％），ｏｌｅｉｃ　ａｃｉｄ（３２．２３％），
ｌｉｎｏｌｅｉｃ　ａｃｉｄ（２８．３４％），ｌｉｎｏｌｅｎｉｃ　ａｃｉｄ（１９．３５％），ａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃ　ａｃｉｄ（１４．６９％），ａｎｄ　ｔｈｅ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｌ
ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄｓ　ｗａｓ　ｃｏｍｐｌｅｔｅｄ　ｗｉｔｈｉｎ　５０ｍｉｎｕｔｅｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ｏｐｅｒａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｓｉｍｐｌｅ，
ｒｅｓｕｌｔｓ　ｗｅｒｅ　ａｃｃｕｒａｔｅ　ａｎｄ　ｒｅｌｉａｂｌｅ，ａｎｄ　ｈａｄ　ａ　ｇｏｏｄ　ｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙ．Ｉｔ　ｃａｎ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｄａｔａ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｑｕａｌｉ－
ｔｙ　ｓｔａｎｄａｒｄｓ　ｏｆ　Ｓｅｍｅ　Ｏｃｉｍｉ　Ｂａｓｉｌｉｃｉ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｓｅｍｅ　Ｏｃｉｍｉ　Ｂａｓｉｌｉｃｉ；ｌｉｎｏｌｅｉｃ　ａｃｉｄ；ＴＬＣ；ＧＣ
　　罗勒子为唇形科植物罗勒 （Ｏｃｉｍｕｍ　ｂａｃｉｌｉｃｕｍ
Ｌ．）的果实，是维吾尔医常用药材，已有几百年的药
用历史。罗勒子性为一级干热，有止泻、开通阻滞、
止血、爽身悦志、散气的作用，用于各种心脏病、心
悸、痔疮出血、久泻等的治疗［１］，还可用于治感冒头
痛、胸闷、妇女闭经或月经不调、暑天胃肠胀气、胸
闷、口臭等［２］。现代药理学研究证明罗勒子油具有
抗肿瘤、降血糖、降低血压、延长凝血时间及延长睡
眠时间等作用［３］。现行的药品标准只有对罗勒子的
形状和显微鉴别，无薄层鉴别及有效成分的定量测
定。有 研 究 显 示，罗 勒 子 的 有 效 成 分 为 亚 油
酸［４－１０］。本研究对罗勒子中的亚油酸进行薄层鉴
别，气相色谱法测定罗勒子油脂的组成及各脂肪酸
的含量，为罗勒子的质量控制提供实验数据。
　第３７卷　第４期 新 疆 医 科 大 学 学 报 Ｖｏｌ．３７　Ｎｏ．４
　２０１４年４月 Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ａｐｒ．２０１４
１　仪器及试药
１．１　仪器　ＧＣ２０１０气相色谱仪（日本岛津），ＦＩＤ
氢离子火焰检测器（日本岛津），Ｒｔｘ－Ｗａｘ色谱柱
（３０ｍ×０．２５ｍｍ，０．２５μｍ）（日本岛津）。
１．２　试剂与药材　肉豆蔻酸、软脂酸、油酸、亚油
酸、亚麻酸、花生四烯酸对照品、内标物（正十七烷
酸）均购于上海晶纯试剂有限公司。香草醛硫酸、正
庚烷、三氟化硼、甲醇、石油醚、乙醚、丙酮、氢氧化
钠、氢氧化钾、盐酸、酚酞均为分析纯。罗勒子购于
新疆维吾尔医院，经新疆医科大学药学院天然药物
教研 室 帕 丽 达 · 阿 不 力 孜 教 授 鉴 定 为 罗 勒
（Ｏｃｉｍｕｍ　ｂａｃｉｌｉｃｕｍＬ．）干燥成熟的种子。
２　方法与结果
２．１　对照品溶液制备　精密称取亚油酸对照品
０．１６９　９ｇ，分别置２５ｍＬ量瓶中，加入１０％ＢＦ３－甲
醇溶液１ｍＬ，６０℃ 水浴中加热１５ｍｉｎ，放冷，精密加
入正庚烷１０ｍＬ，充分振摇，作为对照品贮备溶液。
分别精密吸取亚油酸正庚烷层液１ｍＬ，置５ｍＬ量瓶
中，加正庚烷至刻度，摇匀，即得３．３９９　８ｍｇ／ｍＬ亚油
酸标准储备液。
２．２　供试品溶液制备　称取过６０目筛得罗勒子粉末
１００ｇ，以石油醚为溶剂用索式提取脂肪油，精密称取
罗勒子脂肪油７０ｍｇ，置２５ｍＬ量瓶中，加入０．５ｍｏｌ／Ｌ
氢氧化钾－甲醇溶液１ｍＬ，６０℃ 水浴中加热１５ｍｉｎ，
取出，放冷，再精密加入１０％ＢＦ３ 甲醇溶液１ｍＬ，
６０℃ 水浴中加热１５ｍｉｎ，取出，放冷，精密加入正庚烷
１０ｍＬ，充分振摇，取正庚烷层，作为供试品溶液。
２．３　亚油酸薄层鉴别　分别吸取亚油酸对照品溶
液５μＬ及供试品溶液１μＬ，分别点于硅胶Ｇ薄层
板上，以石油醚（６０～９０℃）－醋酸乙酯（３７∶３）为展
开剂，展开，取出，晾干，喷以１％香草醛硫酸试液，
于１０５℃ 加热至斑点显色清晰，放在荧光下观察。
供试品色谱中，在与亚油酸对照品溶液色谱相应的
位置上，显相同的蓝色荧光斑点，结果见图１。
２５４ｎｍ（ａ：紫外光） 　　 ３６６ｎｍ（ｂ：紫外光） 　　 ｃ：（可见光）
１：亚油酸标准品；２：样品
图１　罗勒子油中亚油酸薄层鉴别
２．４　色谱条件　色谱柱：Ｒｔｘ－Ｗａｘ色谱柱（规格：
ｍｅｔｅｒ　０．２５ｍｍＩＤ，０．２５μｍ　ｄｆ），柱温１７０℃，进样
口温度２５０℃，氢焰离子化检测器，温度２５０℃，进样
量１μＬ，分流比（１∶１５）。
２．５　溶液的制备
２．５．１　对照品溶液的制备及甲脂化　精密称取肉
豆蔻酸、软脂酸、亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸 、油酸
标准品各１００ｍｇ于１０ｍＬ容量瓶中，用甲醇稀释
至刻度，配成１０ｍｇ／ｍＬ标准储备液，取各标准品储
备溶液５０μＬ，用甲醇稀释至１ｍＬ，制成０．５ｍｇ／ｍＬ
单标液储备液。取内标物用甲醇配成１．０ｍｇ／ｍＬ
储备液，使用时再稀释成０．１ｍｇ／ｍＬ溶液。取６种
脂肪酸储备溶液各５００μＬ，置于１０ｍＬ的容量瓶
中，用甲醇稀释至刻度，得２５μｇ／ｍＬ混标液。取以
上混标液６ｍＬ于反应瓶中，加１５％的三氟化硼－甲
醇溶液２ｍＬ，于６０℃水浴回流酯化５ｍｉｎ后，精密
加入正庚烷５ｍＬ，用冷水迅速冷却回流装置，加入
饱和氯化钠溶液２ｍＬ，猛烈振摇，取上层正庚烷溶
液备用。
２．５．２　罗勒子油脂的提取　称取罗勒子粉１００ｇ，
用乙醚超声提取１ｈ，过滤得淡黄色油脂，含油量
达２５％。
２．５．３　罗勒子油脂皂化及甲脂化　取罗勒子油脂
约２０ｍｇ，精密称定，置回流瓶中，加０．５ｍｏｌ／Ｌ氢
氧化钾－甲醇溶液２ｍＬ，于６０℃水浴中回流１０ｍｉｎ，
取出放冷至室温，再加１５％的三氟化硼－甲醇溶液
２ｍＬ，于６０℃水浴回流酯化５ｍｉｎ后，精密加入正
庚烷５ｍＬ，用冷水迅速冷却回流装置，加入饱和氯
化钠溶液２ｍＬ，猛烈振摇，取上层正庚烷溶液１μＬ，
在上述色谱条件下进样，色谱图见图２和图３。
２．６　方法学考察
２．６．１　线性关系考察　精密量取以上制备的脂肪
酸标准品混合液适量，置于离心管中，氮气吹干，加
入内标溶液，溶解，分别进样１、３、５、７、９μＬ，以亚麻
酸、花生四烯酸、肉豆蔻酸、油酸、软脂酸、亚油酸的
峰面积对正十七烷酸的峰面积的比值对各种脂肪酸
的浓度进行线性回归，得回归方程，结果见表１。
２．６．２　精密度试验　取供试品连续进样５次，测定各
１４４　第４期 阿布都许库尔·吐尔逊，等：维药罗勒子油脂的定性定量研究
脂肪酸的峰面积对正十七烷酸峰面积比值的ＲＳＤ％
值分别为１．３％、２．９％、５．４％、１．８％、２．５％、３．１％。
图２　罗勒子油样品ＧＣ色谱图
１：肉豆蔻酸２：软脂酸３：亚油酸４：亚麻酸５：花生四烯酸６：油酸
图３　脂肪酸标准品的ＧＣ色谱图
表１　６种脂肪酸标准品的标准曲线（ｎ＝５）
脂肪酸 线性范围／（μｇ／ｍＬ） 回归方程 相关系数
γ－亚油酸 １５～１３５
Ｙ ＝５３４．１６　Ｘ＋４４２．２４
０．９９９　７
花生四烯酸 １５～１３５
Ｙ ＝３２０．８５　Ｘ＋５５４１．５
０．９９９　６
肉豆蔻酸 １５～１３５　 Ｙ＝５１０．０７　Ｘ＋３５　２７０　 ０．９９９　２
油酸 １５～１３５　 Ｙ ＝８３１　Ｘ＋９０１２．１　 ０．９９９　４
亚油酸 １５～１３５　 Ｙ ＝３７５．１　Ｘ＋１０　４９２　 ０．９９９　１
软脂酸 １５～１３５　 Ｙ ＝５４９．３６　Ｘ＋９　５９０　 ０．９９９　７
２．６．３　重复性试验　取同一批供试品共５份，在上
述色谱条件下平行操作，测得亚麻酸、花生四烯酸、
肉豆蔻酸、油酸、亚油酸、软脂酸的峰面积对正十七
烷酸峰面积比值的ＲＳＤ％ 值分别为３．７％、４．６％、
２．３％、３．４％、４．３％、１．０％。
２．６．４　稳定性试验　取同一供试品溶液，分别在同
一天不同时间分别测定各脂肪酸的含量，结果基本
稳定，含量的 ＲＳＤ 分别为１．７％、３．３％、２．５％、
１．９％、３．６％、２．７％。
２．６．５　回收率试验　精密称取已知各种脂肪酸含
量的样品９份，于每３份中依次加入２００μＬ低
（５０μｇ／ｍＬ）、中（２００μｇ／ｍＬ）、高（５００μｇ／ｍＬ）浓度
的混标溶液，按“２．５．３”项下方法制备供试品溶液，
进样测定，结果见表２。
２．７　罗勒子中各脂肪酸含量的测定　将以上制备
的供试品溶液，在选定的色谱条件下进样１μＬ，计
算亚麻酸、花生四烯酸、肉豆蔻酸、油酸、亚油酸及软
脂酸的相对含量分别为 ３２．２３％、１４．６９％、２３．
３４％、１９．３５％、２８．３４％及１５．６５％。
表２　回收率测定结果
组分
回收率／％
低 中 高
肉豆蔻酸 ９６．８　 ９６．９　 ９６．５
软脂酸 ９６．６　 ９７．１　 ９７．５
γ－亚麻酸 ９７．５　 ９６．５　 ９８．０
亚油酸 ９５．６　 ９７．７　 ９７．８
油酸 ９７．７　 ９８．９　 ９８．０
花生四烯酸 ９６．８　 ９８．９　 ９８．０
３　结论
３．１　展开剂的选择　在薄层鉴别研究过程中，分别
考察了石油醚－乙酸乙酯（３７∶３）、石油醚－乙酸乙酯－
甲酸（１０∶３０∶２）、石油醚－醋酸乙酯（８∶３）、石油
醚－醋酸乙酯－甲酸（１８∶２∶１）等展开系统，结果表
明，石油醚－乙酸乙酯（３７∶３）的Ｒｆ值为０．７２，较合
适，分离效果良好。
３．２　提取方法的选择　比较了超声提取及索氏提
取法对罗勒子脂肪油提取率的影响，结果表明２种
提取方法对罗勒子脂肪油的提取率基本相等，考虑
超声提取方法方便简单的特点，故选择超声提取法。
３．３　甲酯化试剂的选择　由于罗勒子所含不饱和
脂肪酸大多为十二碳以上的长链不饱和脂肪酸，选
用氢氧化钾 －甲醇溶液进行甲酯化，酯化反应不完
全；三氟化硼 －甲醇溶液对十二碳以上的长链不饱
和脂肪酸酯化效果较好，本实验用三氟化硼 －甲醇
溶液进行甲酯化。
参考文献：
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木齐：新疆科技卫生出版社，１９９３：１２３．
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［收稿日期：２０１３－９－２２］
（本文编辑　施洋）
２４４ 新 疆 医 科 大 学 学 报 第３７卷