全 文 ：体的特异性越强［7］。本实验结果显示，单克隆抗体除
了与 GC存在高度特异性反应外，与其化学结构类似
物甘草次酸 3 － O － β － D －葡萄糖醛酸、脱氧胆酸、熊
果酸、齐墩果酸交叉反应较小。这表明都具有很强的
特异性，这将会在很大程度上避免检测中假阳性的存
在，有利于 ELISA检测方法的建立。
对本实验中3批次麻杏石甘汤中GA含量的 ELISA
和 HPLC测定结果表明，样品的检测结果都很接近，可
以互为参照和验证，说明用 ELISA 测定 GA 的方法可
行。因此利用单克隆抗体建立的免疫分析法是中药生
产过程中的质控的可选手段之一，对于复方中药的药物
化学分析和药理学研究提供了新的技术选择和可能。
本研究，利用免疫分析技术对于复方中药主要活性成分
的测定，提供了重要的技术补充和验证手段。
收稿日期:2013 － 08 － 15
作者简介:包同力嘎(1969 －) ，男，内蒙古通辽人，副主任药师，硕士，研
究方向:蒙药新药研发及质量标准研究。
参考文献
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nal Chem，2001，73:5784 － 5790．
HPLC法测定不同产地肋柱花中獐芽菜苦苷的含量
包同力嘎
(内蒙古民族大学附属医院，内蒙古 通辽 028007)
摘 要:目的:比较 4 个不同产地肋柱花药材中獐芽菜苦苷的含量，为临床药用提供依据。方法:采用高效液相色谱
法，测定獐芽菜苦苷的含量。结果: 不同产地肋柱花药材中獐芽菜苦苷的含量相差悬殊，从高到低依次为锡林浩特市乌
珠穆沁旗、赤峰市赛罕林场、锡林浩特市东乌珠穆沁旗、通辽市扎旗罕山自然保护区。结论: 不同产地的肋柱花药材中獐
芽菜苦苷的含量有显著的差异。
关键词:肋柱花;獐芽菜苦苷; HPLC色谱法
中图分类号:Ｒ927． 2 文献标志码:B 文章编号:1000 － 1719(2013)12 － 2558 － 02
Contents Determination of Swertiamarin from Lomatogonium Ｒotatum of Different Origins by HPLC
BAO Tongliga
(Affiliated Hospital of Inner Mongolia University for Nationalities，Tongliao 028007，Inner Mongolia，China)
Abstract:Objective:To compare the contents of Swertiamarin of Lomatogonium rotatum from four different origins or benefi-
ting the clinical medication． Methods:The contents of Swertiamarin were determined by HPLC． Ｒesults:It showed that the contents
of Swertiamarin from Lomatogonium rotatum of different origins varied significantly and its content order was the Uzhumuchin of
Xilinhot，Saihan Forest Farm of ChiFeng，West Uzhumuchin of Xilinhot，Tejinhanshan Natural Protective Area of Tongliao． Conclu-
sion:The contents of Swertiamarin from Lomatogonium rotatum of different origins varied significantly．
Key words:Swertiamarin;Lomatogonium rotatum;HPLC
肋柱花(别名:哈比日根 －地格达) ，蒙古族常用习
用药材之一，为龙胆科植物肋柱花 Lomatogonimu rota-
tum (L．)Fries ex Nym的干燥全草。收载于《中华人民
共和国卫生部药品标准·蒙药分册》(1998 版蒙药分
册)［1］，具有平息“协日”，清热，健胃，愈伤功能。主要用
于“协日”热，瘟疫，流感，伤寒，中暑头痛，肝胆热，黄疸，
胃“协日”，伤热等症。至今尚未见肋柱花中獐芽菜苦苷
的比较研究报道，本研究运用高效液相色谱法对不同产
地的肋柱花药材中獐芽菜苦苷的含量进行了测定和比
较，以期对肋柱花药材的临床用药提供依据。
1 仪器与材料
LC － 10AT 高效液相色谱仪(日本岛津) ，SPD －
10AVP检测器 (日本岛津) ，N3000 色谱工作站 (浙
江大学智能信息研究所) ，Hypersil ODS C18色谱柱
(250 mm × 4． 6 mm，5 μm)大连依利特公司，
ADW220D型电子分析天平 (max2208 /82 g d = 0． 1
mg /0. 01 mg) (日本岛津) ，KQ － 100 型超声波清洗
器 (昆山市超声波仪器有限公司)。
肋柱花药材分别由内蒙古锡林浩特市西乌珠穆沁
旗蒙医医院提供，批号 20120816，为样品 1;内蒙古锡
·8552· 辽宁中医杂志 2013 年第 40 卷第 12 期
DOI:10.13192/j.issn.1000-1719.2013.12.066
林浩特市东乌珠穆 沁 旗 蒙 医 医 院 提 供，批 号
20120902，为样品 2;採自内蒙古通辽市扎旗罕山林
场，批号 20120720，为样品 3;採自内蒙古赤峰市赛罕
林场，批号 20120805，为样品 4。经内蒙古民族大学蒙
医药学院布和巴特尔教授鉴定为龙胆科植物肋柱花
Lomatogonimu rotatum (L．)Fries ex Nym 的干燥全草。
獐芽菜苦苷对照品(批号 0875 － 200203)由中国药品
生物制品检定所提供。甲醇为色谱纯;水为高纯水;所
用试剂均为分析纯。
2 试验方法
2. 1 色谱条件［2］ 色谱柱:Diamonsil C18色谱柱(250
mm ×4. 6 mm，5 μm，迪马公司) ;流动相:甲醇 － 0. 1%
磷酸溶液(25∶ 75) ;检测波长:238 nm;流速:1. 0 mL·
min －1;柱温:25 ℃;进样量:10 μL。
2. 2 对照品溶液的制备 取獐芽菜苦苷对照品 5. 2
mg，精密称定，置 10 mL容量瓶中，加甲醇使溶解并稀
释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。精密吸取上液各
1. 0 mL，置 10 mL 容量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至
刻度，摇匀，即得(每 1 mL 中含獐芽菜苦苷 0. 052
mg)。
2. 3 供试品溶液的制备 取肋柱花约 0. 2 g，精密称
定，置具塞三角瓶中，精密加入甲醇 25 mL，称定重量，
超声 20 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重
量，摇匀，滤过，精密量取续滤液 5 mL，置 25 mL 量瓶
中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
2. 4 线性关系及其工作范围的考察 分别精密吸取
对照品溶液 2. 5、5. 0、7. 5、10. 0、12. 5、15. 0 μL，注入液
相色谱仪，记录色谱图，测定其峰面积(A)。并以峰面
积(Y)对獐芽菜苦苷的进样量(X)进行线性回归，得
回归方程分别为:y = 23651x － 8864，r = 0. 999 9。结
果表明，獐芽菜苦苷在 0. 125 ～ 0. 75 μg 范围内与峰面
积具有良好的线性关系。结果见表 1 和图 1 。
图 1 獐芽菜苦苷对照品的标准曲线图
表 1 线性关系考察结果
C(μg) 0. 125 0. 250 0. 375 0. 520 0. 625 0. 750
A 51 669 107 758 167 745 228 093 287 678 345 535
结果表明，獐芽菜苦苷对照品进样量在 0. 125 ～
0. 750 μg 范围内，与峰面积具有良好的线性关系。
2. 5 精密度试验 精密吸取供试品溶液 10 μL，在上
述色谱条件下，分别重复进样 6 次，记录色谱图，测定
其峰面积积分值。结果獐芽菜苦苷的 ＲSD 值为
1. 13%。结果表明，精密度良好。
2. 6 稳定性试验 精密吸取同一份供试品溶液 10
μL，分别于 0、2、4、6、8、10 h 注入液相色谱仪，记录色
谱图，测定其峰面积积分值。结果獐芽菜苦苷的 ＲSD
值为 0. 72%。表明供试品溶液在 10 h 内测定稳定性
良好。
2. 7 重复性试验 称取同一批样品约 0. 2 g，共 6 份，
精密称定，照供试品溶液制备方法制得供试品溶液 6
份，按含量测定方法，分别精密吸取 10 μL，注入液相
色谱仪，记录色谱图，测定其峰面积。结果獐芽菜苦苷
的 ＲSD 值分别为 1. 25%。表明该含量测定方法具有
良好的重复性。
2. 8 回收率试验 取已知含量的样品约 0. 1 g ，计 6
份，精密称定，分别加入一定量的獐芽菜苦苷对照品溶
液，照供试品溶液制备方法制得供试品溶液后进样测
定峰面积，并计算回收率。结果獐芽菜苦苷的回收率
为 98. 36%，ＲSD为 1. 79%。结果见表 2。
表 2 獐芽菜苦苷的回收率试验结果
编号
取样
量(g)
样品中
含量(mg)
对照品
加入量(mg)
测得
量(mg)
回收
率(%)
X(%)ＲSD(%)
1 0. 100 8 3. 000 0 3. 000 0 5. 880 0 96. 00
2 0. 101 2 3. 011 9 3. 000 0 9. 940 0 98. 00
3 0. 101 1 3. 008 9 3. 000 0 5. 916 0 97. 20
4 0. 100 9 3. 002 9 3. 000 0 6. 035 4 101. 18
5 0. 101 5 3. 020 8 3. 000 0 5. 964 0 98. 80
6 0. 100 5 2. 991 1 3. 000 0 5. 970 0 99. 00 98. 36 1. 79
注:* 獐牙菜苦苷对照品 1. 0 mg /mL ×1 mL =3. 0000 mg
2. 9 样品测定 精密取不同产地肋柱花药材约 0. 2
g，各 6 份，分别置具塞三角瓶中，精密加入甲醇 25
mL，称定重量，超声 20 min，放冷，再称定重量，用甲醇
补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液 5 mL，
置 25 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。分别精
密吸取供试品溶液各 10 μL，注入液相色谱仪，测定，
计算獐芽菜苦苷的含量。结果见表 3。
表 3 不同产地肋柱花中獐芽菜苦苷的含量(n = 6)
样品 平均含量(%) ＲSD(%)
1 10. 954 1. 51
2 2. 939 1. 26
3 1. 493 1. 92
4 4. 591 1. 60
3 结 论
试验考察了甲醇回流提取和超声提取等条件下的
提取率，结果提示，回流提取和超声提取对獐牙菜苦苷
含量并没有影响，故采用超声提取;考察了以下色谱系
统:甲醇 －水、甲醇 －磷酸 －水、乙腈 －水、乙腈 －磷酸
－水，所得到的色谱图以甲醇 － 磷酸 － 水(水中含
0. 1%磷酸)为最佳，故采用该方法;样品测定结果表
明，内蒙古锡林浩特市西乌珠穆沁旗蒙医医院提供的
肋柱花中獐牙菜苦苷含量最高，具一定的开发前景及
药用价值。
参考文献
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·9552·辽宁中医杂志 2013 年第 40 卷第 12 期