全 文 ：. 论 著 .
正交试验优选罗勒子中总黄酮的提取工艺
谢 晶
(新疆医科大学药学院 ,
孙 莲 *
新疆 乌鲁木齐 8 300 1 1 )
【摘要」 目的 优选 罗勒子中总黄酮 的提取工 艺 。 方法 以芦丁为标准品 , 通过紫外分光光度法测定罗勒子 中总黄酮含量 , 通过单因素试验
和正 交试验考察不 同因素和水平对提取工 艺的影响 。 结果 甲醇浓度对罗勒 子中总黄酮含量影响最 大 , 其他三个因素对样品含量的影响 大
小依次是 : 料液比 > 提取次数 > 提取时间 。 结论 最佳提取工 艺条件为甲醇浓度 80 % , 固液比 1 : 10 , 提取 l h , 提取 1次 。
【关键词」罗勒子 ; 总黄酮 ; 提取方法 ; 正 交试验
中图分类号 : R g 文献标识码 : B 文章编号 : 1 6 7 1一5 1 9 4 ( 2 0 1 4 ) 2 3一 0 0 0 4一 0 2
0 P t im iz a t io n o f E x t r a c t T e c h n o lo g y o f T o t a l F a v o n o id s i n S e m e 0 c im u m B a s i lic u m by 0 r t h o g o n a l E x Pe r im e n t
火7石 J in g , S口N L ia n
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现代药理学研究表明罗勒子具有抗癌 、 降血压 、 避孕 、 利尿 、 治
疗心血管疾病等作用 l[] 。 罗勒子的化学成分复杂 , 以挥发油 、 黄酮及
其普类 、 香豆素类为主 2[] 。 但其质量标准仅有性状与鉴别两项 , 不仅
不能有效控制罗勒子的内在质量 , 也制约了其运用价值和进一步开发
研究 。 本文以罗勒子中总黄酮为指标 , 采用单因素试验与正交试验设
计优选出罗勒子中总黄酮的提取工艺 。
1 材料与仪器
1
.
1 材料
罗勒子采自新疆和田地区 , 经生药教研室帕丽达教授鉴定为唇形
科植物罗勒的果实 。
1
.
2 试剂
石油醚 、 无水乙醇 、 乙酸乙醋、 甲醇均为分析纯 (天津市富宇精
细化工有限公司 ) , 芦丁标准品 (中国食品药品检定研究院 ) 。
1
.
3 仪器
A K
一
I 0 0 0 A摇摆式中药粉碎机 (温岭市奥力中药机械有限公司 ) ,
A L
一
2 0 4型电子天平 (梅特勒一托利多仪器上海有限公司 ) , KQ 5 20 D E
型数控超声波清洗器 (昆山市超声仪器有限公司 ) , 紫外分光光度计
(岛津 u v- 2 5 5 o ) , H w s 26 型电热恒温水浴锅 (上海一恒科学仪器有
限公司 ) 。
2 试验方法
2
.
1 单因素考察
2
.
1
.
1 不同的提取溶剂 : 观察不同溶剂对样品芦丁含量的影响 , 选择
甲醇为提取溶剂 。 见表 1。
2
.
1
.
2 不同的提取方法
表 1 不 同溶剂对样品芦丁含量的影响 (芦丁含量 gm /川 L )
平均 芦丁含量
乙酸乙酉旨
0
.
57 5 3
0
.
5 1 82
0
.
52 7 0
0
.
5 74 7
0
.
4 72 5
0
.
5 25 8
0
.
5 7 5 0
0
.
4 9 5 4
0
.
5 2 64
0
.
0 2 9 2
0
.
0 2 5 1
0
.
0 2 6 7
不同方法对样品芦丁含量的影响见表 2 。 ① 甲醇超声 : 两份脱脂
后滤渣各加人甲醇30 们I L , 超声提取 30 m in (T = 30 ℃ , 10 比 ) , 滤液
置于 25 们I L容量瓶中 , 甲醇定容。 ②甲醇回流 : 两份脱脂后滤渣各加人
甲醇30 们I L , 回流提取2次 (T = 85 ℃ ) , 每次 l h , 滤液置于25 们 IL容量
瓶中 , 甲醇定容 。 ③精密吸取供试品储备液0 . 5 m L置于 10 m L容量瓶
中 , 甲醇稀释 , 测定吸光度 , 选择回流法 。
表 2 不 同方法对样品芦丁含量的影响 (芦丁含量 gm /川 L )
方法 1 2 平均 芦丁含量
超声法
回流法
0 2 87 2
0
.
57 5 3
0 2 79 8
0
.
5 74 7
0 2 83 6
0
.
5 7 5 0
O刀 14 5
0
.
0 2 9 2
基金项 目 : 新疆医科 大学创新基金一一罗勒子脂 溶性成 分及质量
标准的研 究 (基金编号 : X JCZ O I 12 2 )
,通讯作者
2 2 正交试验设计
以测得的样品芦丁含量 (m g /n 1 L )为考察指标 , 见表 3 。
表3 因素水平表
甲醇浓度(% )A 料液比 B 提取时间 (h) c 提取次数D
1 6 0% l : 1 0 1 1
2 8 0% l : 1 5 1
.
5 2
3 10 0% l : 2 0 2 3
2 3 样品提取
称取2 . 0 9罗勒子粉末 9份 , 石油醚脱脂后采用不同浓度甲醇以不
同物料比回流提取不同时间不同次数 , 过滤置于 25 m L容量瓶 , 精密
吸取滤液Q s mL 置 10 m L容量瓶 , 定容后即为供试品溶液 。
2 4 对照品溶液的制备
精密称取芦丁标准品 10 m g , 以适量甲醇溶液溶解后置于 50 们I L容
(下转 8页 )
DOI : 10. 15912 /j . cnki . gocm. 2014. 23. 031
. 论 著 .
内动脉开窗畸形 , 无辐射损伤 , 对于制订神经外科手术及介人手术前
的手术方案 , 具有一定的指导意义。
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,
1 9 6 7
,
1 0 1( l )
: 6 8
一
8 7
.
(上接4 页 )
表5 L g (3 4 )正交实验表
甲醇浓度 (% ) 提取时间 (h) 提取次数 芦丁含量 (m g/ 们止 )
l
l
l
2
2
2
3
3
3
0
.
1 2 65
0
.
11 18
0
.
0 7 83
0
.
0 4 22
0
.
0 3 72
0
.
0 2 6 1
0
.
0 1 6 1
料液比
l
2
3
l
2
3
l
2
3
0
.
1 2 7 3
0
.
0 9 9 8
0
.
8 9 5 0
0
.
04 24
0
.
0 3 3 3
0
.
0 2 9 8
0
.
0 1 2 6
l
2
3
2
3
l
3
l
2
0
.
0 9 9 4
0
.
1 1 13
0
.
10 5 9
0
.
0 3 3 1
0
.
0 3 7 1
0
.
0 3 5 3
0
.
0 { )4 0
l
2
3
3
l
2
2
3
l
0
.
0 9 9 0
0
.
10 6 8
0
.
11 0 8
0
.
0 3 3 0
0
.
0 3 5 6
0
.
0 3 6 9
0
.
0 0 3 9
0
.
8 9 2 8
0
.
84 34
O石 7 0 1
0
.
9 5 3 0
0
.
6 5 6 0
0
.
5 9 7 9
0
.
6 6 8 3
0
.
4 7 1 2
0
.
4 04 4
O名9 3 4
O名4 17
0
.
6 6 6 9
0
.
9 5 3 6
0
.
6 5 7 6
0
.
5 9 6 2
0
.
6 6 8 6
0
.
4 7 2 3
0
.
4 { )4 2
0
.
0 4 5 2
0
.
0 4 2 6
0
.
0 3 87
0
.
0 4 82
0
.
0 3 3 3
0
.
0 3 0 3
0
.
0 3 3 9
0
.
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量瓶中并稀释到刻度 , 摇匀 , 即得位 2 m g /n 1 L的对照品储备液。
2
.
5 测定波长的选择
选择测定波长为交叉吸收326 nm处 。
2
.
6 芦丁标准曲线的绘制
芦丁检测浓度在位01 一位05 m g /mL 范围内与吸光度呈良好的线性关
正交试验及其结果见表5 , 方差分析见表 6 。
2
.
8 试验验证
按照正交试验的最佳提取工艺条件A ZB I C I D I进行验证 (=n 3
表 6 方差分析表
因素 偏差平方和 自由度 F FI 庙界值 显著性
A 4刀6 8 2 2 2 9 5 4 4 6 0 *
B 2 5 4 6 2 1
.
4 3 6 4 4 6 0
*
C 0
.
2 3 7 2 0
.
13 4 4
.
4 6 0
D 0
.
2 4 0 2 0
.
13 5 4
.
4 6 0
误差 7刀9 8
芦丁含量为位 0 4 7 m g / m L , 与正交试验各工艺结果的平均值比较含量
较高 , R s D值为Q 98 % , 说明该工艺条件稳定可行 。
3 讨 论
文献报道的植物中总黄酮含量测定多采用 比色法 , 而本实验发
现 , 芦丁对照品溶液显色后 , 在 5 0 n m处有最大吸收 , 符合文献记
载 ; 而罗勒子样品溶液显色后在 50 n m处有多个最大吸收峰 , 无法进
行比较 ; 而二者不显色在 326 n m处有交叉吸收现象 。 因此 , 本实验采
用显色法无法测定罗勒子样品 , 只能采用紫外分光光度法直接测定样
品中芦丁含量 , 测定波长选定3 26 n m 。
本研究通过单因素和正交试验 , 以芦丁为对照品 , 使用紫外分光
光度法测定罗勒子 中总黄酮含量 , 优化工艺稳定可靠 。 罗勒子总黄酮
提取工艺的研究为罗勒子的深人开发和研究提供了实验依据 。
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