全 文 ：基金项目:国家自然科学基金资助项目(30370561)
作者简介:牛春雨 ,男 ,博士研究生 ,教授　　Tel:(0571)87217451　　＊通讯作者:李继承 ,教授 ,博士生导师　　Tel:(0571)87217451　　E-mail:
li jchen@zju.edu.cn
夏至草醇提物对大鼠淋巴循环作用的实验研究
牛春雨1 ,2 ,李继承1＊ ,刘艳凯2 ,赵自刚2(1.浙江大学细胞生物学研究所 , 杭州 310003;2.河北北方学院病理生理学教研室 ,河北 张
家口 075029)
摘要:目的　探讨夏至草醇提物对淋巴循环的调节作用。方法　采用淋巴微循环观察 、淋巴引流及淋巴液流变学技术 , 观察
夏至草醇提物对 32只大鼠肠淋巴循环的作用。结果　静脉推注夏至草醇提物后 , 在 6 g·kg-1剂量时肠系膜淋巴管收缩频率
及幅度均增大 , 3 g·kg-1剂量时收缩幅度也增加 ,均显著高于给药前及对照组(P<0.05);高剂量组的肠淋巴流量 、蛋白输出量
和淋巴细胞输出量明显高于给药前及对照组(P<0.05);中及高剂量组均能明显降低淋巴液黏度 ,但 1 g·kg-1剂量对淋巴循环
未发生影响。结论　较大剂量夏至草醇提物具有增强淋巴管收缩性 、淋巴液转运及降低淋巴液黏度的作用。
关键词:夏至草;淋巴管;淋巴循环;流变学
中图分类号:R965　　　文献标识码:A　　　文章编号:1001-2494(2006)12-0914-04
Effect of Ethanol Extract from Mrrubium incisum on Lymph Circulation in Rats
NIU Chun-yu1 ,2 , LI Ji-cheng1＊ , LIU Yan-kai2 , ZHAO Zi-gang2(1.Institute of Cell Biology , Zhejiang University , Hangzhou
310003 , China;2.Department of Pathophysiololgy , Hebei North University , Zhangjiakou 075029 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To explore the regulative effect of ethanol extract from Mrrubium incisum on lymph circulation.METHODS　
The regulative effect of total ethanol extract from Mrrubium incisum on lymph circulation was observed and determined in 32 rats by lymph mi-
crocirculation observation , lymph fluid drainage and lymph-rheology.RESULTS　After ethanol extract from Mrrubium incisum was injected in-
travenously , the contractile range and frequency in mesenteric lymphangion at the dose of 6 g·kg-1and the contractile range at the dose of 3
g·kg-1 were obviously higher than that of the pre-administration and control group(P<0.05).The lymph flow , output of protein and leuko-
cytes in the highest doses group were obviously higher than that of the pre-administration and control group(P<0.05).The lymph fluid viscos-
ity of rats in the middle and highest doses group was obviously reduced , but no effect on lymph circulation was abtained at the dose of 1 g·
kg-1.CONCLUSION　The ethanol extract from Mrrubium incisum at higher dose can improve lymph circulation effectively by increased
lymph contractility , increase the transportation of lymph circulation , and reduce lymph fliud viscosity.
KEY WORDS:Mrrubium incisum Benth;mesentery lymphatic vessel;lymph circulation;rheology
　　淋巴循环是循环系统的重要组成部分 ,近年来 ,
淋巴循环维持机体稳态和疾病中的作用逐渐受到重
视[ 1] 。已知夏至草具有利水消肿 、活血化瘀作用[ 2] ,
张利民等[ 3-4]的研究表明 ,夏至草可明显改善血瘀大
鼠的血液和淋巴微循环障碍。为了进一步阐明夏至
草对淋巴循环的药理学作用 ,我们观察了夏至草醇
提物对淋巴循环的调节。
1　材料与方法
1.1　药品
唇形科夏至草属植物夏至草[ Mrrubium incisum
Benth]的全草(内蒙驻张家口医药站提供 ,经河北北
方学院中医系姜希强教授鉴定),按文献[ 5]报道方
法 ,制备夏至草醇提物 ,经水煎醇沉 ,再经活性炭脱
色 、灭菌制成原生药含量为 5 g·mL-1的注射液(pH 、
澄清度 、溶血试验检测均为合格);戊巴比妥钠(北京
化学试剂厂 ,批号 20000919);肝素钠(北京奥博星生
物技术责任有限公司 ,批号 001218)。
1.2　仪器
微循环显微电视录像设备(徐州光学仪器厂);
3-9D型微循环 、血流变 、红细胞变形 、血小板聚集
综合仪(成都麦赛科贸公司生产);WZ -50C2型微
量灌流泵(浙江大学医学仪器有限公司)。
1.3　动物分组
Wistar雄性大鼠 32只(中国医科院实验动物繁
育中心),体重 250 ～ 300 g ,戊巴比妥钠全身麻醉后 ,
肝素全身抗凝 ,常规进行颈静脉插管。16只大鼠均
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分成夏至草组和对照组(n=8),用于肠系膜淋巴微
循环的观察;16 只大鼠用于淋巴流量 、淋巴液流变
学测定(夏至草组和对照组 ,均 n=8)。
1.4　给药方法
用生理盐水等倍稀释夏至草醇提物 ,实验组大
鼠每隔 30 min给药 1次 ,从低浓度向高浓度依次经
颈静脉匀速推注(0.5 mL·min-1),用药剂量(生药)
分别为1 ,3 ,6 g·kg-1;对照组用生理盐水代替 。
1.5　肠系膜淋巴微循环观察
按常规方法[ 6]制备大鼠活体肠系膜标本 ,以 K-
H液滴恒温(37±1)℃灌流 。通过微循环显微电视
观察回肠下段肠系膜微淋巴管(Mesenteic lymphatics ,
ML),夏至草组分别于给药 5 min后及给药前 5 min
进行观察 ,两次给药间隔 30 min ,通过录像机记录分
析ML 的收缩幅度(收缩幅度=最大舒张口径-最
大收缩口径)和自主收缩频率 。
1.6　淋巴循环转运功能测定
1.6.1　肠淋巴流量测定　大鼠麻醉后 ,打开腹腔 ,
分离肠淋巴管 ,按文献[ 7]方法进行肠淋巴管插管 ,自
然引流淋巴液 ,计算单位时间内的淋巴流出量 。
1.6.2　淋巴蛋白输出量测定　收集引流出的肠淋
巴液 ,采用 Lowry法测定淋巴液蛋白浓度 ,根据淋巴
流量计算淋巴蛋白输出量(淋巴蛋白输出量=淋巴
流量×淋巴蛋白浓度)。
1.6.3　淋巴细胞输出量测定　肠淋巴管插管引流
肠淋巴液 ,常规方法测定单位容积淋巴液中淋巴细
胞数目 ,计算淋巴细胞输出量(淋巴细胞输出量=淋
巴流量×每1 mL含淋巴细胞数目)。
1.7　淋巴液流变学测定
取0.3 mL 引流出的肠淋巴液 ,用 3-9D型综合
仪 ,测定各组大鼠不同切变率下的淋巴液黏度 。
1.8　统计学方法
资料以均数±标准差( x ±s)表示 , t 检验进行
统计学处理 , P<0.05为差异有显著性。
2　结　果
2.1　夏至草醇提物对肠系膜淋巴管收缩性的影响
1 g·kg-1的夏至草生药 ,ML 的收缩性未发生改
变;随着用药剂量的加大 ,可使肠系膜淋巴管的收缩
幅度和收缩频率增强 ,6 g·kg-1剂量时的ML收缩性
显著高于用药前和对照组(P<0.05)。结果见表 1。
2.2　夏至草醇提物对淋巴循环转运功能的影响
给药前与对照组比较 ,肠淋巴流量 、蛋白输出
量 、淋巴细胞输出量均无显著性差异;静脉推注小剂
量夏至草醇提物 ,对肠淋巴流量 、蛋白输出量 、淋巴
　　表 1 　夏至草醇提物对肠系膜淋巴管收缩性的影响.n =8 ,
x±s
Tab 1　Effects of ethanol extract from Mrrubium incisum on mesen-
tery lymphatic vessel contractility.n=8 , x±s
Group
Dose
/g·kg-1
Contractile range/μm Contractile frequency/ times·min-1
pre-
administration
After
administration
pre-
administration
After
administration
Mrrubium 1 39.53±8.47 47.72±9.35 5.12±0.62 5.19±0.78
incisum 3 42.05±8.86 55.11±8.461)2) 5.02±0.69 5.43±0.97
6 42.61±7.08 57.25±8.081)2) 5.12±0.64 6.12±0.831)2)
Control 37.83±7.58 39.14±9.014 4.95±0.72 5.11±0.79
注:1)P<0.05 ,与给药前相比;2)P<0.05 ,与对照组相比
Note:1)P<0.05 , vs pre-administration;2)P<0.05 , vs control
细胞输出量未见影响 ,在 6 g·kg-1剂量时肠淋巴流
量 、淋巴蛋白输出量和淋巴细胞输出量均显著高于
给药前和对照组 ,而 3 g·kg-1剂量对淋巴流量无明
显影响 ,但后两者显著增大 ,见图 1 ～ 3。
图 1　夏至草醇提物对大鼠淋巴流量的影响.n=8 , x±s
---对照组;---给药前;-◆--给药后;1)P<0.05 ,与给药前相比;2)P<
0.05 ,与对照组相比
Fig 1　Effects of ethanol extract from Mrrubium incisum on lymph
flow.n=8 , x±s
---control;---pre-administration;-◆--post-administration;1)P <0.05 , vs
pre-administration;2)P<0.05 , vs control
图 2　夏至草醇提物对大鼠淋巴蛋白输出量的影响.n=8 , x±s
---对照组;---给药前;-◆--给药后;1)P<0.05 ,与给药前相比;2)P<
0.05 ,与对照组相比
Fig 2　Effects of ethanol extract from Mrrubium incisum on protein
output of lymph.n=8 , x±s
---control;---pre-administration;-◆--post-administration;1)P <0.05 , vs
pre-administration;2)P<0.05 , vs control
2.3　夏至草醇提物对淋巴液流变学的影响
1 g·kg-1剂量组的淋巴液黏度无论高切或低切
变率 ,均与对照组无显著性差异 。而 3和 6 g·kg-1
组 ,给药后各切变率下的淋巴液黏度均明显低于对
照组 ,但此二组之间未见统计学差异 ,见表 2。
·915·中国药学杂志 2006年 6月第 41卷第 12期　　　　　　　　　　 Chin Pharm J , 2006 June , Vol.41 No.12
图3　夏至草醇提物对大鼠淋巴细胞输出量的影响.n=8, x±s
---对照组;-□--给药前;-◆--给药后;1)P<0.05 ,与给药前相比;2)P
<0.05 ,与对照组相比
Fig 3　Effects of ethanol extract from Mrrubium incisum on output
of leukocytes.n=8 , x±s
---control;-□--pre-administration;-◆--post-administration;1)P <0.05 , vs
pre-administration;2)P<0.05 , vs control
3　讨　论
淋巴回流不仅能把组织液及所含蛋白回流到血
液循环 ,而且在组织液生成增多时可代偿性回流增
加 。在某些疾病如恶性肿瘤 、乳癌根治术 、水肿 、丝
虫病时 ,由于淋巴循环障碍 ,可使过多的组织液积聚
于细胞外 ,造成细胞稳态异常 ,因此有必要通过干预
淋巴流的方法进行纠正 。由于许多中药具有作用温
和 、双向调节的特点 ,更为安全 ,因此 ,利用中药调控
淋巴流以维持机体稳态 ,达到改善淋巴循环障碍的
措施是较佳选择。
较高浓度的夏至草醇提物对淋巴微循环的影响
主要是增大淋巴管收缩幅度和收缩频率。淋巴管的
　　表 2 　夏至草醇提物对淋巴液黏度的影响.n=8 , x±s
Tab 2　Effects of ethanol extract from Mrrubium incisum on viscosity of lymph.n=8 , x±s
Group
Dose
/g·kg-1
Viscosity/ mPa·s
1 s-1 30 s-1 60 s-1 90 s-1 115 s-1 300 s-1
Mrrubrium incisum 1 2.91±0.47 2.32±0.41 1.42±0.33 1.34±0.27 1.21±0.29 0.98±0.19
3 2.33±0.411) 1.54±0.361) 1.22±0.211) 1.12±0.171) 0.95±0.151) 0.84±0.141)
6 2.02±0.421) 1.38±0.221) 1.11±0.191) 1.01±0.161) 0.91±0.161) 0.77±0.141)
Control 3.45±0.67 2.53±0.54 1.51±0.31 1.43±0.36 1.26±0.29 1.13±0.26
注:1)P<0.05 ,与对照组相比
Note:1)P<0.05 , vs control
自主节律性收缩是淋巴回流的主要动力[ 8] ,其收缩频
率加大 ,可明显增加淋巴回流量。加之夏至草可显著
增大淋巴管收缩幅度 ,淋巴管对淋巴液的驱动作用加
大 ,也促进了淋巴回流的增加 。研究表明[ 9] ,淋巴管
收缩性受神经 、体液等多种因素调节 ,张静等[ 10]曾报
道淋巴管受交感神经调控 ,肠系膜淋巴管存在交感神
经膨体 ,故推测夏至草对淋巴管收缩性的调节是通过
神经 、体液等多种因素综合作用的结果 。
正常淋巴液的成分主要是脂肪 、蛋白质 、淋巴细
胞及相关的细胞因子等 。其主要功能是物质转运 、
排泄和免疫监视作用 。一方面正常淋巴回流可保证
细胞外环境恒定和生物大分子的转运 ,其次淋巴液
中蛋白质的回流对维持血浆胶体渗透压具有积极作
用 ,而淋巴液中淋巴细胞的转运对机体的免疫监视
功能是必不可少的。因此 ,夏至草增加淋巴流量 、淋
巴蛋白输出量及淋巴细胞输出量的作用 ,在维持机
体稳态和减轻病理性损害中具有重要意义。
淋巴液黏度是反映淋巴液流动性的物理性指
标 ,其黏度的高低同血液黏度一样 ,能反映淋巴回流
阻力的大小。张静等[ 11]的研究表明 ,正常情况下淋
巴液黏度明显低于血液黏度 ,危重病 、严重血瘀证时
由于血液黏度异常增高 ,常造成血液循环障碍甚至
衰竭 ,此时淋巴液因黏度较低 ,淋巴回流中黏滞力和
阻力较小 ,故淋巴液黏度降低有一定的代偿意义 ,一
方面淋巴液回流可转运组织细胞产生的有害物质 ,
减轻局部损伤 ,另一方面黏度较低的淋巴液不断注
入血液可降低血液流动时的阻力 ,有利于血液循环
的恢复。夏至草醇提物可明显降低淋巴液黏度 ,无
疑增加了病理情况下淋巴液的代偿 ,有利于机体稳
态的恢复 ,但其降低淋巴液黏度的机制有待探讨 。
本实验采用每隔 30 min静脉给药进行观察 ,从
每次给药前ML收缩频率和收缩幅度与对照组及第
一次给药前并无统计学差异来看 ,可以排除药物的
累加效应。
总之 ,本研究表明 ,夏至草醇提物除可改善血液
循环外 ,又可通过增强淋巴管收缩性 、增强淋巴循环
转运及降低淋巴液黏度而有效地改善淋巴循环 。因
此 ,以淋巴循环为靶点 ,深入揭示夏至草等中药的药
理学作用 ,对于多种疾病的防治具有重要意义。
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·916· Chin Pharm J , 2006 June , Vol.41 No.12 　　　　　　　　　　　 中国药学杂志 2006年 6月第 41卷第 12期
作者简介:陈卫,女 ,硕士研究生　　＊通讯作者:朱春燕 ,女,研究员　　Tel:(010)62899763　　E-mail:zhuchunyan168@yahoo.com.cn
三七总皂苷胃肠道生物黏附片的体外释药及黏附特性考察
陈卫 ,朱春燕＊(中国医学科学院-中国协和医科大学药用植物研究所 ,北京 100094)
摘要:目的　考察三七总皂苷胃肠道生物黏附片中的总皂苷及主要单体皂苷的体外释药动力学 、生物黏附片体外对离体家兔肠粘膜
的黏附力。方法 　释放度测定按中国药典2000年版附录转篮法 ,采用显色法测定黏附片中三七总皂苷的释放 ,采用高效液相方法测
定三七皂苷 R1 ,人参皂苷 Rg1 ,人参皂苷 Rb1 的释放特征,分别用零级释放、一级释放模型、Higuchi方程 、Peppas方程对4者的释放曲线
进行动力学模拟,阐明其释药机制 ,并采用相似因子法判断各单体皂苷和总皂苷的释放曲线是否相似;采用自制的黏附力测试装置测
定生物黏附片对兔肠粘膜的黏附力 ,对黏附力进行体外评价。结果　三七总皂苷 ,三七皂苷 R1 ,人参皂苷 Rb1的释放符合 Peppas 方
程,人参皂苷Rg1的释放曲线符合一级释放动力学;相似因子法判断 3种单体的释放曲线均与总皂苷的释放曲线相似。生物黏附片
对肠粘膜的黏附力明显大于普通片(P<0.01)。结论　三七总皂苷胃肠道生物黏附片中单体皂苷与总皂苷的释放机制不同, 但释放
曲线相似。生物黏附片对于肠粘膜具有较大的黏附力。
关键词:三七总皂苷;生物黏附片;释药机制
中图分类号:R943.41　　　文献标识码:A　　　文章编号:1001-2494(2006)12-0917-04
Evaluation of Adhesion and Release Kinetics of Panax Notoginseng Saponines Bioadhesive Tablets in vitro
CHENWei , ZHU Chun-yan＊(Institute of Medicinal Plant Development , Chinese Academy of Medical Sciences-Peking Union Medical College ,
Beijing 100094 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　　To study the release kinetics of Panax Notoginseng Saponines(PNS)and various ginsenosides from gastrointestinal
bioadhesive tablets , and to evaluate their bioadhesive force to rabbit small intestine in vitro.METHODS 　Using rotating basket method , the dissolu-
bility was determined with water as dissolution medium at speed of 100 r·min-1.The concentrations of PNS and three ginsenosides(notoginsenoside
R1 ,ginsenoside Rg1 and ginsenoside Rb1)were determined by coloration method and HPLC method respectively.To study the release mechanism of
PNS and three ginsenosides , Zero order model , first order model , Higuchi equation and Peppas equation were used to simulate the dissolution curves.
Similarity factor method was used to determine whether the release curves of PNS and three ginsenosides were similar.A self-made apparatus was used
to compare the adhesive force between the bioadhesive tablets and regular tablets in rabbit small intestine in vitro.RESULTS 　The release kinetics
of PNS ,notoginsenoside R1 and ginsenoside Rb1 in bioahesive-tablets was discribed by Peppas equation , and the release kinetics of ginsenoside Rg1was
fitted by first order model.The bioadhesion study showed that there were obvious differences between bioadhesive tablets and regular tablets in ad-
herering to small intestine mucosa(P<0.01).CONCLUSION　The release mechanism of PNS , notoginsenoside R1 ,ginsenoside Rg1 and ginsenoside
Rb1 in bioadhesive tablets are different , but their release curves are similar.The adhesive force of PNS bioadhesive tablets is stronger than that of reg-
ular tablets.
KEY WORDS:Panax Notoginseng Saponins;bioadhesive tablets;release mechunism
　　20世纪 80年代 ,生物黏附给药系统的引入 ,为 胃肠道给药提出了新的发展方向[ 1] 。胃肠道生物黏
　　
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(收稿日期:2005-08-25)
·917·中国药学杂志 2006年 6月第 41卷第 12期　　　　　　　　　　 Chin Pharm J , 2006 June , Vol.41 No.12