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苏州荠苧总黄酮与微量元素含量的测定



全 文 :文章编号:1006-446X (2004)09-0034-04
苏州荠艹宁总黄酮与微量元素含量的测定
吴巧凤 曾晓艳
(浙江中医学院药学系 , 浙江 杭州 310053)
摘 要:采用分光光度法测定了苏州荠艹宁的总黄酮含量;采用了等离子发射光谱法测定了其元素
含量。结果表明 , 苏州荠艹宁总黄酮的含量分别为 55.31 mg/g (7 月采收)、 65.00 mg/g (8 月采收);
含 K、 Ca、 Mg等多种常量元素;含 Cu、 Fe、 Mn、 Zn、 Cr、 Co 等多种人体必需的微量元素 , 其中
Fe含量最高;而有害重金属元素 Hg未检出 , Pb 和 As 的含量均较低 (小于药典规定量)。可见 8
月采收的苏荠艹宁总黄酮含量较高 , 苏州荠艹宁含多种人体必需的微量元素 , 有害重金属含量低 , 具
有较大的开发价值。
关键词:苏州荠艹宁;总黄酮;元素;含量测定
中图分类号:R 284.1  文献标识码:A
苏州荠艹宁Mosla soochowensis Matsuala 为唇形科石荠艹宁属一年生草本植物 , 但至今未被 《药典》
收载 , 为浙江 、 江苏民间常用草药 , 在浙江资源十分丰富 。《浙江民间常用草药》[ 1]记载 , 其有解
毒 、消炎 、 利尿 、镇痛作用。苏州荠艹宁能促进 T 细胞的转化 , 具有补肾阳药物一样的调节免疫
功能的作用。浙江民间在夏季常用其泡茶喝 , 口感良好 , 具有一般饮料无法取代的既清热消暑又
抗菌消食的作用 , 且无不良反应 。药理和临床试验表明 , 苏州荠艹宁为一广谱抗菌药 , 其水煎剂
具有广谱的抗菌作用;其浸膏有明显的治疗感冒的作用;其抗菌作用强于华荠艹宁 (石香薷), 而
且毒性很小。苏州荠艹宁的化学成分与唇形科石荠艹宁属植物石香薷的成分大致相似 , 含有挥发油 、
黄酮类 、 脂肪酸等成分[ 2] 。但对其总黄酮和元素的含量研究未见报道 。为了开发和利用这一资
源 , 本文对苏州荠艹宁的总黄酮和微量元素含量进行了测定 , 报道如下 。
1 实验部分
1.1 试剂与药材
芦丁标准品 (中国药品生物制品检定所 , 批号为 080-9002), 实验时精称 120℃烘至恒重的
芦丁对照品9.8 mg , 用50%乙醇定容于 500 mL容量瓶中 , 得质量浓度为 0.196 mg/mL 的标准品
液。其他试剂均为分析纯 , 测元素所用试剂为优级纯 。水为双蒸水 。
苏州荠艹宁于 2002年7月 、 8月采自浙江浦江 , 并经浙江中医学院药用植物教研室姚振生教授
鉴定分辨为唇形科植物苏州荠艹宁 (Mosla soochowensis Matsuala)。
1.2 仪 器
751-GW紫外分光光度计 (惠普上海分析仪器有限公司), IRIS/AP 型电感耦合等离子体发
基金项目:浙江省教育厅项目
收稿日期:2004-07-20
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 2004 年           GUANGDONG WEILIANG YUANSU KEXUE         第 11 卷第 9期 
DOI :10.16755/j.cnki.issn.1006-446x.2004.09.008
射光谱议 (美国 TJA公司), 全自动回流消化仪 (重庆南岸玻璃仪器厂)。
1.3 实验方法
1.3.1 总黄酮含量的测定
(1)样品液的制备:取苏州荠艹宁药材粉碎成末 , 烘至恒重 。称取药材粗粉 5.0 g , 置于 250
mL 圆底烧瓶中 , 加入 65%乙醇 100 mL , 80℃恒温水浴中回流提取两次 , 每次 1 h , 过滤合并滤
液 , 回收乙醇至无乙醇味 , 用 50%乙醇定容至100 mL , 摇匀 , 即为样品液 , 备用 。
(2)测定波长的选择及稳定性考察:精密量取芦丁标准品液和样品液各 0.5 mL 置 25 mL容
量瓶中 , 加 50%乙醇至 6 mL , 加 5%NaNO2 液 1.0 mL , 放置 6 min , 加 10%Al(NO3)3 试液 1.0
mL , 放置 6 min , 加10%NaOH试液 10 mL , 加50%乙醇至刻度 , 摇匀 , 放置 15 min , 以相应试剂
作空白 , 于751-GW紫外分光光度计上在波长 400 ~ 600 nm之间进行扫描 , 实验结果表明芦丁标
准品液和样品液均在 490 nm 处有最大吸收 , 故选 490 nm 为测定波长。同时 , 在显色反应结束 10
min后 , 取同一样品在490 nm波长进行稳定性考察 , 结果表明在40 min内吸光度稳定。本次实验
选择在加氢氧化钠后 15 min测吸光度。
(3)标准曲线的制作:精密称取在 120℃干燥至恒重的芦丁对照品 9.8 mg , 加 50%乙醇溶解 ,
转入50 mL容量瓶中 , 用 50%乙醇稀释至刻度 , 摇匀 , 即得对照品液 (质量浓度为 0.196 mg/mL)。
精密吸取该液 0.0 、 1.0 、 2.0 、 3.0 、 4.0、 5.0、 6.0 mL , 分别置 25mL 容量中 , 加 50%乙醇至 6 mL ,
加5%NaNO2试液 1.0 mL , 放置 6min , 加 10%Al(NO3)3 试液 1.0 mL , 放置 6 min , 加 10%NaOH 试
液10mL , 加 50%乙醇至刻度 , 摇匀 , 放置 15 min后 , 以相应试剂作空白 , 于 490 nm处测定吸光
度。以吸光度为纵坐标 y , 含量为横坐标 x 绘制标准曲线 , 得直线回归方程 y =18.946 8x-0.002 1
(r=0.999 8), 在含量为0.196 ~ 1.176 mg范围内吸光度 y 与含量 x 具有良好的呈线性关系。
(4)加样回收试验:称取已知黄酮含量的药材粗粉 2.5 g , 分别精密加入一定量芦丁对照品 ,
按 “1.3.1 (1)” 和 “1.3.3 (3)” 项下步骤 , 制备样品液 , 并进行总黄酮含量的测定 , 计算其回
收率 , 结果见表 1。
表 1 样品中总黄酮的回收率测定结果 (n=5)
项 目 试验次数1 2 3 4 5
芦丁加入量/mg 0.216 0 0.216 0 0.216 0 0.216 0 0.216 0
芦丁回收量/mg 0.213 4 0.216 8 0.218 6 0.215 6 0.213 8
回收率/ % 98.80 100.40 101.20 99.81 98.98
平均回收率/ % 99.84
RSD/ % 1.00
  (5)样品中总黄酮含量测定:精密吸取样品
液0.5 mL , 分别置 25 mL 容量瓶中 , 其余操作按
标准曲线的制备项下方法进行 , 依法测定吸光度 ,
由回归方程 , 计算总黄酮含量 。测定结果见表 2。
表 2 苏州荠艹宁中总黄酮含量 (n=5)
采收期 w(总黄酮)/(mg/g) RSD/ %
7月 55.31 1.51
8月 65.00 1.30
1.3.2 元素含量的测定
(1)样品液的制备:精密称取 8月份采收的苏州荠艹宁药材 0.5 g , 放入50 mL 圆底烧瓶 , 加 5
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mL 浓硫酸 , 在自动回流消化仪中加热回流 3 ~ 5 min , 药材变成黑色后 , 加消化液[ V(30%H2O2)
+V(H2SO4)=4+1]约 8.0 mL , 加热回流消化至无色透明 , 再继续加热 2 min以除去氧化剂 , 冷
却后 , 定量转移至 50 mL容量瓶中 , 加双蒸水至刻度 , 摇匀备用 。
(2)含量测定:将消化好的样品在 IRIS/AP 型电感耦合等离子体发射光谱仪上测定元素含
量。检测条件为:检测器 CID的低波段 λ<256 nm , 积分时间为 15 s;检测器 CID的高波段 λ>
265 nm , 积分时间为 5 s;进样蠕动泵转速为 100 r/min;进样雾化器氩气压力为 28 Pa;辅助气流
量为适中 (1.0 L/min);高频发生器功率为 1 500 W;冲洗时间为 5 s。元素含量测定结果见表 3。
表 3 苏州荠艹宁中元素的含量测定结果 单位:μg/g
Al As B Ca Cd Cu Co Cr Fe Hg K
934.30 1.35 25.77 3 956.00 0.02 10.09 0.56 1.95 676.10 未检出 12 670.00
Mg Mn Na P Pb S Se Si Sn Sr Zn
2 044.00 51.54 148.10 3 848.00 2.17 3 462.00 未检出 118.60 1.31 32.87 54.78
2 结果与讨论
(1)总黄酮的含量测定以芦丁为标准品 , 采用比色法测定总黄酮的含量 , 显色之前溶液颜色
很浅 , 不必对样品进行纯化处理。测定方法简便 , 稳定性好 , 回收率高 , 测定结果可靠 。
(2)实验结果表明 , 8月份采收的苏州荠艹宁总黄酮的含量较高 , 为 65.00 mg/g , 是苏州荠艹宁
中一类含量很高的成分。黄酮类成分具有改变毛细血管的脆性 、 降脂 、 抗血栓 、 抗氧化 、降糖 、
止咳 、祛痰 、抗菌等多种生理活性[ 3~ 5] , 是已知的强有力的抗氧化剂和抑制菌物质[ 6] 。因此 , 苏
州荠艹宁具有潜在的开发价值。
(3)经元素分析 , 苏州荠艹宁中含Al 、 B 、 Ca、 K 、 Mg 、 Na 、 P 、 S 、 Si等多种常量元素;此外
还含 Cu 、 Fe 、Mn 、 Zn 、 Cr 、 Co等多种人体必需的微量元素 。其中铁的含量最高;而有害重金属
元素 Hg未检出 , Pb的含量为 2.171μg/g , 小于药典规定量 10 μg/g;As的含量为1.352μg/g , 小
于药典规定量 2μg/g;这可能也是苏州荠艹宁基本无毒的原因之一。苏州荠艹宁的抗菌 、治疗感冒及
免疫调节作用 , 与其丰富的微量元素和总黄酮含量有一定的相关性 。Fe、 Zn 、 Cu 、 Mn等元素对
生物体内的免疫系统起着重要的调节作用 , 并能通过体内的酶系发挥对机体代谢功能的协调和控
制 , 从而提高机体的免疫功能 , 达到抗菌和抗病毒的效果 。Fe、 Cu是人体的必需微量元素 , 是
合成血红蛋白的催化剂 , 并参与造血机能 , 从化学结构可知荠艹宁黄酮能与多种元素形成配合物 ,
其配合物有抗菌消炎作用[ 7] 。
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Determination of Total Flavones and Elements in
Mosla soochowensis Matsuala
WU Qiao-fen , ZENG Xiao-yan
(Department of Pharmacy , Zhejiang College of Traditional Chinese Medicine , Hangzhou 310053 , China)
Abstract:To determine the content of total flavones and elements in Mosla soochowensis Matsuala , the con-
tent of total flavonees was determined by spectrophotometmic analysis , and the content of elements was deter-
mined by ICP-AES.The result showed that the total flavones content of Mosla soochowensis Matsuala was
55.31 mg/g(collected in July), 65.00 mg/g (collected in August).It contained rich macroelement such as
K , Ca , Mg , also rich necessary trace elements such as Cu , Fe , Mn , Zn , Cr , Co , etc , and Fe was the
highest content trace element.The noxious heavy metal element Hg was not been foud , the content of Pb and
As was low(match to the national standard.)It concluded Mosla soochowensisMatsuala(collected in August)
had the higher content of total flavones.It contained rich necessary elements , the content of noxious heavy
metal elements was low.And this resource had a great value of exploitation.
Key words:Mosla soochowensis Matsuala;total flavones;elements;content determination
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