全 文 ： 石香薷水提物抗流感病毒作用研究
徐军烈１ 蒋维尔２
１ 浙江省杭州市推拿医院 浙江 杭州 ３１０００１
２ 浙江省杭州市中医院 浙江 杭州 ３１０００７
摘要 目的：观察石香薷水提物 （ＭＡＥ）抗流感病毒作用及其机理。方法：采用流感病毒滴鼻感染小
鼠，以达菲作为阳性对照，对 ＭＡＥ抗病毒作用进行评价。采用ＥＬＩＳＡ法检测流感病毒感染小鼠血清
中ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ的含量。结果：与空白对照组相比，ＭＡＥ可改善感染小鼠的临床症状，减少小鼠死亡
数，延长其平均存活时间，升高血清中ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ含量。结论：ＭＡＥ具有较强的抗流感病毒活性，
并通过调节感染小鼠血清细胞因子从而增强机体抗病毒感染的功能。
关键词 石香薷 流感病毒 ＩＬ－２ ＩＦＮ－γ 小鼠
石香薷为唇形科石荠苧属香薷 Ｍｏｓｌａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ
Ｍａｘｉｍ的地上干燥部分，为江浙民间常用中药材，具
有清热解毒，理气化湿的功效，主治夏日感冒、腹痛
泄泻、湿疹、疖肿等［１－２］。目前尚未有对其理化及药
理作用的研究报道，为充分利用开发该植物资源，本
实验在前期研究基础上采用体内抗流感病毒实验，观
察 ＭＡＥ对流感病毒性肺炎小鼠血清中细胞因子白介
素－２ （ＩＬ－２）、γ干扰素 （ＩＦＮ－γ）的影响，并从细胞
因子水平探讨该药抗病毒作用机制。
１ 实验材料
１．１ 药物：石香薷水提物 （ＭＡＥ）由浙江省医学科
学院 制 备，以 芦 丁 为 对 照 品，其 总 黄 酮 含 量 为
８２．３％，使用前用０．５％ＣＭＣ－Ｎａ配成所需浓度；达
菲，上海罗氏制药有限公司，国药准字：Ｊ２００２００３８。
１．２ 试剂及仪器：ＣｌａｓｓⅡＴｙｐｅ／Ａ／Ｂ２ 生物安全柜，
Ｂｅｃｋｍａｎ ｃｏｍｐａｎｙ，ｌｎｃ；３５３酶标仪，Ｔｈｅｒｍｏ Ｅｌｅｃｔｒｏｎ
Ｃｏｍｐａｎｙ；ＳＳ－２４５全自动高压灭菌器，日本 Ｔｏｍｙ公
司；ＭＯＵＳＥ ＥＩＩＳＡ ＩＬ－２ （批号１０３１０６０６）、ＩＦＮ－γ （批
号２８０８０６０１）试剂盒，购于美国Ｒａｐｉｄｂｉｏ（ＲＢ）公司。
１．３ 动物：ＩＣＲ小鼠由中国科学院上海实验动物中心／
上海斯莱克实验动物有限公司提供，雌雄各半，体重
１８～２２ｇ。动物合格证号：ＸＹＸＫ （浙）－２００３－０００３。
１．４ 病毒株：Ａ型流感病毒小鼠肺适应株 Ａ／ＰＲ８，
由浙江省疾病预防控制中心提供。经鸡胚尿囊腔接种
传代，滴定病毒效价为１∶５１２。
２ 实验方法
２．１ 半数致死量ＬＤ５０的测定：流感病毒经过１０日龄
鸡胚传代，以１０倍递减稀释成１０－１～１０－５，分别滴
鼻０．０２ｍｌ感染小鼠，每组１０只，逐日观察，记录动物
死亡数，２４ｈ内死亡者不计；死亡小鼠解剖观察肺脏病
理变化，以确定其死亡由流感病毒感染所致。用
Ｍｕｅｎｃｈ法计算其ＬＤ５０为２．８２，实验用１０ＬＤ５０病毒量。
２．２ 对小鼠体内感染流感病毒的保护作用：取ＩＣＲ
小鼠，雌雄各半，随机分组，每组１４只，给药组预
先灌胃给药２天，连续给药至实验结束，０．２ｍｌ／１０ｇ，
于给药第３天后在乙醚轻度麻醉下以１０ＬＤ５０攻击量感
染小鼠，２０μｌ／只，正常对照组在同一条件下，用生理
盐水代替病毒液滴鼻，记录感染１４天后死亡数，并
计算保护率及平均存活天数［３］，结果见表１。
表１ ＭＡＥ对小鼠体内感染流感病毒的保护作用 （ｘ±ｓ）
组别
剂量
／ｍｇ·ｋｇ－１
动
物
数
死
亡
数
死亡率
／％
平均存活天数／ｄ
正常对照组 — １４ ０ ０ １５．００±０．００＊＊
病毒对照组 — １４ １０ ７１．４３ ８．７１±２．３４△△
达菲对照组 ２０ １４ ２ １４．２９＊＊１３．７１±２．２９＊＊
ＭＡＥ低剂量组 ３０ １４ ７ ５０．００ １０．３６±１．８５△△
ＭＡＥ中剂量组 ６０ １４ ７ ５０．００ １０．４３±２．７７△△
ＭＡＥ高剂量组 ９０ １４ ５ ３５．７１＊ １２．４３±２．３１＊
注：与病毒对照组比较，＊Ｐ＜０．０５，＊＊Ｐ＜０．０１；与达
菲对照组比较，△△Ｐ＜０．０１。
２．３ 对小鼠流感病毒肺炎的抑制作用：小鼠随机分
为６组，每组１０只，雌雄各半。药物组于感染前２开
始灌胃给药，连续给药至实验结束，０．２ｍｌ／１０ｇ，空
白对照组及病毒对照组给予同容积蒸馏水。于给药第
３天乙醚轻度麻醉下，以１０ＬＤ５０攻击量滴鼻感染，
２０μｌ／只，正常对照组在同一条件下，用生理盐水代替
病毒液滴鼻，逐日观察动物活动进食死亡情况。感染
后第７ｄ脱椎处死，称体重，计算肺指数，肺指数抑
制率，并进行组间ｔ检验，结果见表２。
·３７２·浙江中医杂志２０１３年４月第４８卷第４期
表２ ＭＡＥ对小鼠流感病毒肺炎的抑制作用 （ｘ±ｓ，ｎ＝８）
组别
剂量／
ｍｇ·ｋｇ－１
肺指数
／％
肺指数抑制率
／％
正常对照组 — ０．７５±０．０９＊＊
病毒对照组 — １．８０±０．２９
达菲对照组 ２０ １．０５±０．２４＊＊ ４１．６７
ＭＡＥ低剂量组 ３０ １．２１±０．２２＊ ３２．７８
ＭＡＥ中剂量组 ６０ １．１２±０．１７＊ ３７．７８
ＭＡＥ高剂量组 ９０ ０．９４±０．２１＊＊ ４７．７８
注：与病毒对照组相比，＊Ｐ＜０．０５，＊＊Ｐ＜０．０１。
２．４ 对流感病毒性肺炎小鼠血清中细胞因子的影响：
小鼠随机分为６组，每组１５只，给药及实验方法同
“２．３”。分别于感染后第２、５、９天眼球取血，按试
剂盒要求测定相关细胞因子。结果见表３、表４。
３ 讨论
一般认为，流感病毒感染后ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ等具有
保护作用，而ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ等与感染的炎症反应和临
床症状的发生有关。ＩＬ－２作为重要的免疫调节细胞因
子，可直接促进多种细胞分化发挥功能。ＩＬ－２是活化
表３ ＭＡＥ对流感病毒性肺炎小鼠血清中ＩＬ－２的含量 （ｘ±ｓ）
组别 剂量／ｍｇ·ｋｇ－１
ＩＬ－２的含量／ＯＤ·ｍｌ－１
感染后第２天 感染后第５天 感染后第９天
正常对照组 — ７９．４±３．２８＊＊
病毒对照组 — ６９．６±７．１２ ６６．８±３．３６ ５８．２±３．４４
达菲对照组 ２０ ８０．０±２．４０＊＊ ８１．０±２．７６＊＊ ８２．０±３．５３＊＊
ＭＡＥ低剂量组 ３０ ７６．８±１．８４＊＊ ７４．８±５．０４＊＊ ７３．４±４．４８＊＊
ＭＡＥ中剂量组 ６０ ８２．８±５．０４＊＊ ７６．４±４．０８＊＊ ７７．２±１．４４＊＊
ＭＡＥ高剂量组 ９０ ８４．４±３．２８＊＊ ８２．６±５．７６＊＊ ７７．８±１．０４＊＊
注：与病毒对照组比较，＊＊Ｐ＜０．０１。
表４ ＭＡＥ对流感病毒性肺炎小鼠血清中ＩＦＮ－γ的含量 （ｘ±ｓ）
组别 剂量／ｍｇ·ｋｇ－１
ＩＦＮ－γ的含量／ＯＤ·ｍｌ－１
感染后第２天 感染后第５天 感染后第９天
正常对照组 — ７９．６±２．１２＊＊
病毒对照组 — ５９．８±２．６４ ５０．２±３．０４ ４４．６±３．５２
达菲对照组 ２０ ７８．４±６．５２＊＊ ８０．０±５．６０＊＊ ７９．４±４．４８＊＊
ＭＡＥ低剂量组 ３０ ７７．２±１．４４＊＊ ６５．２±３．３６＊＊ ７０．８±３．７６＊＊
ＭＡＥ中剂量组 ６０ ７６．４±４．０８＊＊ ６３．２±１．８４＊＊ ７２．６±４．０８＊＊
ＭＡＥ高剂量组 ９０ ７８．８±４．９６＊＊ ７０．０±７．６０＊＊ ７５．８±５．０４＊＊
注：与病毒对照组比较，＊＊Ｐ＜０．０１。
的Ｔ细胞产生Ｔｈ１ 的细胞因子，虽然没有直接的抗病
毒活性，但对于免疫反应具有重要作用，能刺激Ｔ细
胞快速地增殖和分化，通过增强外周血 Ｔ杀伤细胞
（ＣＴＬ）、自然杀伤细胞 （ＮＫ）杀伤活性以及诱导
ＩＦＮ－γ产生而介导抗病毒感染的作用［４－５］。
本实验研究表明，ＭＡＥ可改善感染小鼠的临床
症状，减少小鼠死亡数，延长其平均存活时间。同
时，高、中、低剂量组能使小鼠血清中ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ
含量显著升高，与病毒对照组比较具有显著性差异。
说明 ＭＡＥ不同剂量组均能促进血清中ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ
产生，从而提高机体抗病毒感染的免疫功能。其具体
途径可能是通过增强 Ｔｈ１ 细胞的活性而增强 ＣＴＬ、
ＮＫ和巨噬细胞对病毒的清除。表明其防治呼吸道病
毒感染一方面直接抑制或杀灭病毒，另一方面通过对
机体免疫功能的整体调节而起作用。
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收稿日期 ２０１２－１２－２４
·４７２· 浙江中医杂志２０１３年４月第４８卷第４期