全 文 ：·研究报告·
杭州石荠 总黄酮的提取工艺研究＊
楼小红　吴巧凤　何佳奇　余陈欢
(浙江中医药大学药学院 ,杭州 310053)
　　摘要:目的:优选杭州石荠 总黄酮提取工艺。方法:采用正交试验设计 , 以总黄酮含量为指标 ,考察乙醇
浓度 、溶媒倍数 、提取时间等因素对总黄酮提取率的影响 。结果:杭州石荠 总黄酮的最佳提取工艺为
A1B2C2 , 即加 20倍量65%乙醇 ,回流提取2 次 , 每次 1 h。结论:本提取工艺简便可行。
关键词:石荠 ;总黄酮;正交试验设计
Study on Extraction Method of Total Flavonoids in Hangzhou Population of Mosla hangchouensis Matsuda
Lou Xiaohong　Wu Qiaofeng　He Jiaqi　Yu Chenhuan
(College of Pharmacy , Zhejiang University of TCM , Hangzhou 310053)
　　Abstract:Objective:To study the extraction method of total flavonoids in Mosla hangzhowensis Matsuda.Methods:
Orthogonal experiment design was used , with the content of the total flavonoids as the index , to study the effect of ethanol
concentration , solvent quantity and extraction time on recovery rate of total flavonoids.Results:The best extraction condition
was:extract two times;adding 20 fold 65% ethanol and to extract an hour each time.Conclusion:This extraction method
is convenient and feasible.
Key words:Mosla hangzhowensis Matsuda;total flavonoids;orthogonal experiment design
＊浙江省自然科学基金项目(No.Y204256)
通讯作者:楼小红 ,浙江中医药大学药学院 ,邮编:310053,电话:0571-86554082 , E-mail:eva5677@163.com
　　杭州石荠 (Mosla hangzhowensis Matsuda)是唇形科石荠
属一年生草本植物 ,为江浙民间常用中草药[ 1] 。据《浙江民
间常用草药》记载 ,其辛 、温 ,无毒 ,具有补肺益脾 、清热 、消肿 、
解毒等功效 ,主治暑热中暑、感冒咳嗽、痈疽疮肿等。现代研
究表明 ,其含有挥发油、黄酮 、生物碱等成分 ,具有广谱抗菌作
用[ 2] 。本文采用正交试验设计对杭州石荠 总黄酮的提取工
艺进行研究 ,为其进一步开发和合理利用提供科学依据。
仪器与材料
1.实验仪器　FA1104 型电子天平(上海仪器厂), 751-GW
紫外分光光度计(惠普上海分析仪器有限公司)。
2.实验材料　杭州石荠 全草于 2005年 7 月采于浙江
杭州 , 经本院资源鉴定教研室姚振生教授鉴定为 Mosla
hangzhowensis Matsuda。芦丁对照品(中国药品生物制品检定
所 ,批号:080-9002)。其他试剂均为分析纯。
方法与结果
1.总黄酮的含量测定[ 3-4]
1.1　对照品溶液的制备　精密称取经 120℃干燥至恒
重的芦丁对照品 9.8mg ,置 50ml量瓶中 , 加 50%乙醇适量溶
解并稀释至刻度 ,摇匀 , 得对照品液(0.196mg/ml)。
1.2　最大吸收波长的选择　精密移取芦丁对照品液
0.5ml , 置 25ml 量 瓶 中 , 加 50% 乙 醇 至 6ml , 加 5%
NaNO21.0ml , 放置 6min ,加 10%Al(NO3)31.0ml , 放置 6min , 加
10%NaOH 10ml , 加 50%乙醇至刻度 , 摇匀 , 放置 15min , 以相
应试剂作空白 , 在 400-600nm 波长范围内进行光谱扫描 , 结
果在 490nm 处有最大吸收 , 故本实验选 490nm 为测定波长。
1.3　标准曲线的制备　分别精密移取芦丁对照品液 0、
0.5、1.0 、2.0 、3.0、4.0、5.0ml , 置 25ml量瓶中 , 按 1.2 项显色
操作 , 以相应试剂作空白 , 在 490nm 处测定吸收度 , 以浓度
(C)与吸光度(A)进行直线回归 , 得回归方程为C=18.9468 A
-0.0021(r=0.9998)。结果显示在 0.196-1.176mg 范围内
具有良好的呈线性关系。
1.4　精密度考察　取同一显色样品 , 平行测定 6 次 , 结
果 RSD 为 0.60%, 表明精密度良好。
1.5　重复性试验　取同一样品按 1.3 项操作 , 平行测
定 6 次 ,结果 RSD 为 2.13%,表明重复性良好。
1.6　稳定性试验　取同一对照品液按 1.3 项操作显色
15min后 0 、10、20 、40、60min 分别测定吸光度 , 结果表明 , 在
40min 内稳定。
·486· 中华中医药杂志(原中国医药学报)2007 年 7月第 22 卷第 7 期 CJTCMP , July 2007 , Vol.22 , No.7
1.7　加样回收率试验　精密称取 5 份已知含量的药材
粗粉 ,分别精密加入等量芦丁对照品 , 按样品制备法制备 , 并
按 1.3项测定总黄酮含量 ,计算其回收率。结果见表 1。
表 1　回收率试验结果
样品含量
(mg/ g)
加入量
(mg/ g)
测得值
(mg)
回收率
(%)
平均回
收率(%) RSD(%)
34.65 39.20 73.40 98.85
34.67 39.20 74.16 100.74
34.66 39.20 75.25 103.55 100.39 1.93
34.72 39.20 73.47 98.85
34.61 39.20 73.80 99.97
2.正交试验设计[ 5] 　称取杭州石荠 药材粗粉 5.0 g ,
按正交试验设计表(见表 2)于 80℃进行回流提取 , 过滤 ,减压
回收乙醇至无醇味 ,再用 50%乙醇定容至 100 ml ,摇匀后精密
吸取 0.5 ml按1.3 项测定样品中总黄酮含量。结果见表 3。
表 2　杭州石荠 总黄酮提取因素水平表
因素
A乙醇浓度(%)B乙醇用量 C提取时间(h) D空白
1 65 15 0.5 1
2 75 20 1.0 2
3 85 25 1.5 3
表 3　L9(34)正交试验方案与结果
试验号 A B C D 总黄酮含量(mg/g)
1 1 1 1 1 35.53
2 1 2 2 2 41.60
3 1 3 3 3 38.59
4 2 1 2 3 36.00
5 2 2 3 1 38.01
6 2 3 1 2 37.27
7 3 1 3 2 29.77
8 3 2 1 3 37.53
9 3 3 2 1 37.27
k1 38.57 33.77 36.78 36.93
k2 37.09 39.04 38.29 36.21
k3 34.86 37.71 35.46 37.37
R 3.71 5.28 2.83 1.16
对上述结果进行方差分析 ,结果见表 4。
表 4　方差分析结果表
方差来源 偏差平方和 自由度 F 比 显著性
A 21.00 2 10.16
B 45.17 2 21.91 ＊
C 12.06 2 5.846
D 2.062 2 1.000误差 2.06 2
注:＊P <0.05。
3.验证试验　平行称取杭州石荠 药材粗粉 5.0g , 按
上述最佳提取工艺进行实验验证 , 结果见表 5。结果显示此
工艺稳定可行。
讨论
由表 3和表 4 得出的结果可知 ,最佳工艺为A1B2C2 , 对
表 5　验证性试验
编号 石荠 含量(mg/ g) 平均含量(mg/ g) RSD(%)
1 42.79
2 39.14 41.28 1.91
3 41.92
提取工艺影响因素的大小顺序为 B>A>C , 因素 A、C 无显
著性差异 , 仅 B有显著性差异(P<0.05)。从生产实际和节
约成本考虑 , 确定最佳条件为 A1B2C2。即加 20 倍量 65%乙
醇于 80℃回流提取 2次 , 每次 1 h。
中药总黄酮提取工艺的报道较多, 其中乙醇浓度影响较
大[ 6-7] 。一般认为乙醇浓度增大有利于总黄酮的提取 , 但本
实验发现采用 65%乙醇回流提取最佳 , 说明杭州石荠 黄酮
类成分可能以黄酮苷形式存在 , 其类型与结构等有待进一步
深入探讨。
参 考 文 献
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(收稿日期:2007 年 1 月 30日)
·研究报告·
益气活血防治老年糖尿病早期心功能受损的依据与方法＊
衡　先　培
(福建中医学院附属人民医院 , 福建省人民医院 ,福州 350004)
　　摘要:基于《黄帝内经》说 ,心气不足 、血行不畅是老年人基本生理特点之一。患糖尿病的老年人在此基础
上演变为气虚血滞的病机特征 , 临床可通过宏观表征(证候)及微观表征(早期心功能检查)反应出来。临床可
选用益气活血治法改善老年糖尿病患者的心脏收缩及舒张功能 ,提高病人生存质量。
关键词:老年糖尿病;中医药疗法;心功能;益气活血
Evidence and Approach of Benefiting Qi for Activating Blood Circulation Method on Prevention
and Treatment of Early Myocardial Dysfunction in Senile Diabetics
Heng Xianpei
(People s Hospital Affiliated to Fujian College of TCM , People s Hospital of Fujian Province , Fuzhou 350004)
　　Abstract:In view of Inner Canon of Huangdi , deficiency of heart-QI and blockage of blood circulation is one of ba-
sic physical features in senile people.The senile diabetics have more risks in developing into pathogenesis character of defi-
ciency of qi and blood stasis.In Clinic , it could be found by macroscopic syndrome and microcosmic examination.So we
prefer that benefiting Qi for activating blood circulation method could be used to amelioration heart systole and diastolic func-
tion in elderly diabetes patients to improve their life qualities.
Key words:senile diabetes;TCM therapy;heart function;benefiting qi for activating blood circulation method
＊福建省科技厅资助项目(No.K20068)
通讯作者:衡先培 ,福建省福州市 817中路 602号 ,邮编:350004 ,电话:0591-87656228 , E-mail:hengxianpei@hotmail.com
　　心气不足 、血行不畅是老年人基本生理特点之一
人都具有生 、长 、壮 、老 、已的生理演变过程 ,必然伴随人
体五脏六腑各器官系统结构和功能的规律性演变 ,其实质是
人体阴阳气血或者说精气的盛衰变化。《灵枢·天年》曰:“六
十岁 ,心气始衰 , 苦忧悲 ,血气懈惰 , 故好卧” ,指出 60 岁以上
的老年人 ,由于心气渐衰 , 容易发生情志的变化。同时也说
明忧悲等情志变化 , 心气不足常是致病因素。因心主神志 ,
情志的变化自然包含有七情和智力两方面的含义 ,这是衰老
的重要早期特征。老年人心气渐衰 ,推动不足 , 心失主血 , 导
致气与血运行无力 ,即形成了气虚血滞的特点 。
《素问·举痛论》 :“忧则心无所寄 , 神无所归 ,虑无所定” ,
《黄帝内经太素·卷第二》杨上善注:“心 ,神之用。 人之忧也 ,
忘于从事”等论述 ,明确指出忧者心失所主 , 神 、虑 、记忆等思
维智力失常 ,皆因于心。《灵枢·五癃津液别》:“心悲气并则
心系急 , 心系急则肺举” 。《素问·调经论》 :“神不足则悲” , 结
合“心气始衰 , 苦忧悲”之论述 , 可得出悲忧皆因心气虚的认
识。说明心气虚是心神失用 、智能障碍的原因;心悲者必心
气不足 , 引起气机升降失常 ,可致心脉急促不畅 、呼吸喘促之
症。提示人进入老年后 , 由于心气不足 、血脉欠畅 , 可导致智
能障碍 , 情绪不稳 ,呼吸急促 , 动则喘促等衰老的临床特征。
《灵枢·五癃津液别》论:“五藏六府 ,心为之主” 。说明心
脏具有主统藏腑的功能 ,心之为病五脏六腑皆可受其影响。
·488· 中华中医药杂志(原中国医药学报)2007 年 7月第 22 卷第 7 期 CJTCMP , July 2007 , Vol.22 , No.7