全 文 ：中国农业科学 2006,39(11):2396
Scientia Agricultura Sinica
油柿下胚轴培养再生植株
Plant Regeneration from Hypocotyl Explants of Persimmon
(Diospyros oleifera Cheng)

试验于 2004～2006在广东省汕头大学生物系遗传实验室进行。供试油柿幼果 6月中旬采自汕头市澄海区栽培的成年油
柿树。切取油柿幼果种子，用 70%酒精表面消毒 30 s，0.1%升汞浸泡 15 min，无菌水冲洗 6次。切开种子，取出幼胚，切
除胚根、胚芽和子叶，将胚轴横切几处伤口后接种于预先配好的培养基上培养。分别以MS、1/2MS、MS（1/2N）为基础培
养基，添加 0.05 mg·L-1IAA和 2.0 mg·L-1 ZT，将胚轴接种于培养基上培养，试验基础培养基种类对不定芽再生的影响。以
MS（1/2N）为基础培养基，附加不同浓度的 IAA（0.01、0.05、0.1 mg·L-1）和 ZT（0.5、2.0、5.0 mg·L-1），确定不同浓度
的激素组合对不定芽再生的影响。以 1/2MS为基础培养基，添加 0.1 mg·L-1 IAA和不同浓度的 ZT（0.5、2.0、5.0 mg·L-1）
和 BA（2.0 、5.0、10.0 mg·L-1），试验不同种类和浓度的细胞分裂素对胚轴不定芽再生的影响。培养 8周后统计再生结果。
所有培养基均添加 0.8%琼脂、3%蔗糖和 500 mg·L-1PVP，pH调至 5.8后于 121℃高温灭菌 15 min（下同）。培养物置于 28℃、
光周期为 12 h、光照度为 60 µmol·m-2·s-1的条件下培养。
用两种方法诱导生根：一种是把再生芽基部浸入 250 mg·L-1 IBA 溶液中不同时间（15、30、45 s）后接种于无激素的
MS(1/2N)培养基；另一种是切取再生芽直接接种于单独或组合添加了 IAA（0、0.25、0.5、1.0 mg·L-1）、IBA（0、0.25、0.5、
1.0 mg·L-1）、NAA（0、0.5 mg·L-1）的MS（1/2N）培养基。先暗培养 9 d再移至光照下培养。
结果表明，外植体接种后逐渐从乳白色转为暗黄色，2周左右即有褐色、致密的愈伤组织形成，3周后开始出现绿色芽
点。大部分不定芽形成于胚轴基部的伤口末端和侧面，而顶部较少，单个外植体最多可再生 17个不定芽。试验的 3种基础
培养基中，MS（1/2N）效果最好，其愈伤形成率、不定芽再生率和外植体平均不定芽数分别为 100%、48.3%和 4.3个；MS
培养基效果最差，各指标分别为 90.4%、22.4%和 3.5个；1/2MS的效果居于前两者之间。
在不同浓度的 IAA与 ZT组合中，IAA 0.1 mg·L-1与 ZT 2.0 mg·L-1组合的愈伤形成率、不定芽再生率和外植体平均不定
芽数分别达到 100%、81.7%和 5.3个，均显著高于其它组合。ZT浓度较高（大于 2.0 mg·L-1）时再生率均超过 40%，随着 IAA
浓度的增加，形成的愈伤组织也增加。ZT诱导不定芽的效果明显好于 BA，BA浓度从 2.0 mg·L-1升高到 10.0 mg·L-1，不定
芽再生率和平均不定芽数分别从 20.5%和 2.2个下降到 0。
试验结果显示，用 250 mg·L-1IBA浸泡基部 30 s和 45 s时生根最快，第 7天即有不定根出现，但形成的不定根较细，植
株生长缓慢。添加了不同浓度、不同种类生长素的培养基中，以 IAA和 IBA各 0.5 mg·L-1的组合，再生苗生根较快，生根
率和平均根数分别达到 100%和 3.2 条，且愈伤少、侧根多、植株生长快且健壮，移栽后易成活，为本试验中的最佳组合。
再生植株经炼苗后移栽，30 d时成活率达 96.2%。

谢启鑫，庄东红，吴奕恒
（汕头大学生物系，汕头 515063）