全 文 ：小叶女贞果实抗氧化活性研究
杨再波 ,吴勇刚
(黔南民族师范学院 化学与化工系 ,贵州都匀　558000)
摘　要:以乙醇为溶剂提取小叶女贞果实 ,经减压浓缩后 , 依次用乙酸乙酯和正丁醇进行萃取。用 DPPH自由基的清
除能力来评价两个部位的抗氧化活性。结果表明 ,乙酸乙酯部位浓度为 500μg/mL时自由基清除率大于 75%, IC50=302.
818μg/mL,正丁醇部位浓度为 300μg/mL时自由基清除率大于 75%, IC50=189.241μg/mL。正丁醇部位抗氧化能力比乙酸
乙酯部位更好 , 是乙酸乙酯部位的 1.6倍。
关键词:小叶女贞;果实, 抗氧化活性
中图分类号:R284.1　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1674-2389(2011)03-0047-03
StudyonAntioxidantActivityoftheFruitfromLigustrumquihouiCarr
YANGZaibo, WUYonggang
(Dept.ofChemistryandChemicalEngineering, QiannanNormalColegeforNationalities, Duyun558000, China)
Abstract:ThefruitofLigustrumquihouiCar.wasextractedwiththeethanolsolventandwasconcentratedbyvacuum, andfolowedbythe
extractionofethylacetateandbutanol.DPPHradicalscavengingcapacitywasusedtoevaluatetheantioxidantactivityofthetwoparts.Theresults
showthatwhentheparteofethylacetateconcentrationof500μg/mLradicalscavengingrategreaterthan75%, IC50 = 302.818μg/mL, andpart
oftheconcentrationofbutanolwhentheradicalscavenging300μg/mLthan75%, IC50 = 189.241μg/mL.Antioxidantcapacitybutanolparts
beterthantheethylacetateisethylacetate1.6times.
Keywords:ligustrumquihouicarr;fruit;antioxidantcapacity
小叶女贞(LigustrumquihouiCarr.)是木犀科女贞属的小灌木 , [ 1]主要分布在我国南部 。叶 、花 、果
实和皮均可入药 ,叶具清热解毒等功效 ,可用于治烫伤 、外伤;树皮入药治烫伤;果实入药用于治疗肝炎
等症;还具有抗多种有毒气体 ,是优良的抗污染树种 。近年来 ,它的叶部位提取物经临床和试验 ,发现具
有显著的增强机体免疫功能 、止咳平喘[ 2, 3]作用及清除氧自由基的作用 。[ 4]该属植物女贞果实中所含的
主要成份齐墩果酸也已用于肝类的临床治疗 。[ 5]文献报道小叶女贞叶主要含熊果酸 、齐墩果酸和甘露
醇等化合物 。[ 6]目前 ,国内外研究多集中在叶部位 ,而关于小叶女贞果实提取物生物活性方面的研究还
未见报道。因此 ,本文以乙醇为溶剂从小叶女贞果实中提取大部分生物活性物质 ,并对其体外抗氧化作
用进行研究 ,以期为小叶女贞果实营养保健及及药用方面的开发应用提供理论依据。
1　材料与方法
1.1仪器与试剂
仪器:电子天平(北京赛多利斯公司),粉碎机(浙江金华武义屹立仪器公司),恒温电热套(天津市
泰斯特公司), TU1901-紫外分光光度计(北京普析通用设备有限责任公司), DZKW—D水浴锅(河北
基金资助:贵州省教育厅 2010年度自然科学研究基金资助项目(黔教科 2010094),贵州省黔南民族师范学院 2009
年度重点资助科研项目(QNSY0915).
收稿日期:2011-04-11
作者简介:杨再波(1976-), 男(侗族), 贵州石阡人 ,副教授 , 硕士 ,研究方向:天然产物化学及有机化学的教学。
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省黄骅航天仪器厂), RE-52旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂), 2XZ-1型片式真空泵(上海博尔康
真空电子有限公司)。
试剂:乙酸乙酯 ,正丁醇 , 95%乙醇 ,均为分析纯 。DPPH(1.1-二苯基 -2-苦基肼 , 1, 1-Diphenyl
-2-picrylhydrazyl)自由基(日本东京化成工业株式会社)。
1.2材料
小叶女贞果实采于黔南民族师范学院校园内 ,经鉴定为木犀科女贞属植物小叶女贞 (Ligustrum
quihouiCar.)果实。自然阴干粉碎过 80目筛备用。
1.3小叶女贞果实活性成分提取
称取经粉碎的小叶女贞果实 250g于 2000mL圆底烧瓶中 ,加入 70%的乙醇 1000mL回流提取 2.5
小时;提取液经过滤除去残渣后 ,得提取液;然后将提取液浓缩至无醇味得浸膏;浸膏再用适量乙醇溶解
后浓缩至干得初提物;初提物用适量水分散后 ,先用乙酸乙酯进行萃取 3次(每次 20ml乙酸乙酯),静
置分层 ,分出水层 ,合并乙酸乙酯层 ,将其浓缩至干得乙酸乙酯提取部位 。将上述分出的水层用正丁醇
3次萃取(每次 20ml正丁醇),静置分层 ,分出水层 ,合并正丁醇层 ,将其浓缩至干 ,得正丁醇提取部位 。
1.4抗氧化活性筛选方法
1.4.1 DPPH法
按照文献[ 7-9]的方法 ,将不同溶剂的提取物样品用甲醇配制成一系列浓度 ,取 1 mL样品加入 2.5
mLDPPH的无水乙醇溶液 2×10-4mol· L-1,并用无水乙醇定容至 5mL;混合 30 min后测定 515 nm
波长处吸光度。每份样品平行操作 3次 ,取平均值 ,计算出清除率 ,并计算出半数抑制率(IC50)。
1.4.2不同提取物溶液制备
(1)称取乙酸乙酯部位提取物 100 mg于 100mL容量瓶中用无水乙醇定容即得 1mg/mL的乙酸乙
酯提取物的溶液 。从该溶液中分别吸取 10、15、20、30mL于 100 mL容量瓶中 ,用无水乙醇定容即得
10μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL、200μg/mL、300μg/mL、 400μg/mL和 500μg/mL的溶液 ,此
溶液用于抗氧化活性测试 。
(2)称取正丁醇部位提取物 100 mg于 100mL容量瓶中用无水乙醇定容即得 1mg/mL的正丁醇提
取物的溶液 。从该溶液中分别吸取 10、15、20、30mL于 100 mL容量瓶中 ,用无水乙醇定容即得 10μg/
mL、50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL、200μg/mL、300μg/mL、400μg/mL和 500μg/mL的溶液 ,此溶液用
于抗氧化活性测试。
1.4.3抗氧化活性测试
取不同浓度的乙酸乙酯提取提取物(或正丁醇提取物)溶液 1 mL与 2.5 mL2×10-4 mol· L-1DP-
PH溶液 ,用无水乙醇定容至 5mL,充分混匀 ,在室温下静置 30min后 ,在 515 nm处测定其吸光度 Ai。
同时用同法测定 2.5mL2×10-4 mol· L-1 DPPH溶液与用无水乙醇定容至 5mL,混合均匀 30min后测
吸光度 A0 。用 1mL不同浓度各提取物溶液与用无水乙醇定容至 5mL(10ml刻度试管)混合后 30min
后测吸光度 Aj。清除率计算公式如下:
清除率 Y(%)=[ 1-(Ai-Aj)/A0] ×100%
2　结果与讨论
2.1乙酸乙酯提取物抗氧化活性
乙酸乙酯提取物抗氧化活性测试结果见表 1。将表 1中的数据以清除率为 Y,样品浓度为 X,进行
线性回归 ,计算回归方程 ,得回归方程为:Y=0.140X+7.666,相关系数 R=0.994。由此可知 ,回归方
程线性较好 ,同时从分析数据及回归方程可知随着样品浓度的增加 ,乙酸乙酯提取物对 DPPH自由基的
清除能力是逐渐增加 ,当浓度为 500μg/mL时 ,自由基的清除率大于 75%以上 ,表现出较好的抗氧化能
力 。
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表 1:乙酸乙酯提取物抗氧化活性测试结果
样品浓度 (μg/mL) DPPH吸光度 A0 样品 +DPPH+无水乙醇吸光度 Ai
样品 +无水乙醇
吸光度 Aj 清除率%
100 1.071 0.871 0.003 18.954
150 1.071 0.722 0.003 32.867
200 1.071 0.676 0.004 37.255
300 1.071 0.575 0.004 46.685
400 1.071 0.379 0.004 64.986
500 1.071 0.250 0.005 77.124
　　 2.2正丁醇提取物抗氧化活性
正丁醇提取物抗氧化活性测试结果见表 2。将表 2中的数据以清除率为 Y,样品浓度为 X,进行线
性回归 ,计算回归方程 ,得回归方程为:Y=0.169X+18.094 ,相关系数 R=0.976。由此可知 ,回归方程
线性较好 ,同时从分析数据及回归方程可知随着样品浓度的增加 ,正丁醇部位对 DPPH自由基的清除能
力是逐渐增加 ,当浓度为 300 μg/mL时 ,自由基的清除率大于 75%以上 ,表现出较好的抗氧化能力 。
表 2:正丁醇提取物抗氧化活性测试结果
样品浓度 (μg/mL) DPPH吸光度 A0 样品 +DPPH+无水乙醇吸光度 Ai
样品 +无水乙醇
吸光度 Aj 清除率%
100 1.071 0.777 0.001 27.544
150 1.071 0.612 0.001 42.951
200 1.071 0.494 0.003 54.155
300 1.071 0.220 0.003 79.739
400 1.071 0.111 0.003 89.916
500 1.071 0.077 0.004 93.184
2.3半清除率 IC50值的计算
半清除率 IC50值是指抑制率为 50%时抑制剂的浓度 。因此 ,应用 IC50值可以用来衡量药物对
DPPH自由基的抑制能力 ,即抑制能力越强 ,该数值越低 ,即说明某种药物的抗氧化能力较强。通过计
算得乙酸乙酯部位提取物的 DPPH自由基的清除能力 IC50 =302.818μg/mL。正丁醇部位提取物为
IC50=189.241μg/mL。由实验结果得知 ,正丁醇部位提取物的抗氧化能力高于乙酸乙酯部位提取物 ,
正丁醇部位提取物抗氧化能力是乙酸乙酯部位提取物的 1.6倍。
3　结论
　　本文通过对小叶女贞果实乙酸乙酯部位提取物与正丁醇部位提取物抗氧化活性的研究发现 ,小叶
女贞果实的乙酸乙酯和正丁醇部位提取物均具有较好的抗氧化活性能力 ,正丁醇部位提取物的抗氧化
能力高于乙酸乙酯部位提取物 ,并且是乙酸乙酯部位的 1.6倍 。因此 ,在对小叶女贞果实营养保健及药
用有效成分进行提取时 ,应该同时对这两个部位的活性成分进行系统研究与分析 ,特别是正丁醇部位 。
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