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无芒雀麦的化学分析 Ⅰ.游离氨基酸和微量元素含量的测定



全 文 :无 芒 雀 麦 的化 学 分 析
I
。 游离氛基酸和微量元素含量的测定
周 维经 周维书
(青海省科学技术情报所 ) ( 北京中医学院中药系 )
无芒雀麦 ( B r om s u` n e rm f s L ey s h )为
禾本科雀麦属优 良饲用植物 。 我们于 1 8 2 9年
秋天在青海玉树及青海湖环湖地区采得结籽
期无芒雀麦全株 , 阴干后取其地上部分 , 粉
碎并过 40 目筛 , 用 80 % 乙醇 回流提取 , 通过
离子交换法 , 用 K L A 一 5 型氨基酸分析仪测
得 n 种游离氨基酸的含量 。 又将其地上部分
撕碎 , 经 30 ℃ 2 小时烘干 , 灰化后用发射光
谱半定量法测得 14 种微量元素及其含量 。
一 、 游 离氛基酸 的分 离和含量 测 定
1
. 总游离氨基酸的提取 称取 15 9 草粉
装在沙 氏提取器中 , 用80 %的乙醇 90 ,n1 水浴
回流加热提取 2 小时后 , 放冷 , 减压浓缩至
I Om l左右 , 再用 80 %的乙醇洗出使成 20 m 】,
即得粗提取液 , 其中含总游离氨基酸和游离
糖 , 供下步离子交换法分离 。
2
. 离子交换树脂处理 取国产苯 乙烯型
阳离子交换树脂 , 用蒸馏水 泡 24 小时 使膨
胀 , 倾去上层清液 , 加入 4 N 盐酸 (约为树
脂量的 2 倍 ) , 于 80 ℃水浴加热约 3 0分钟 ,
并不断搅拌 , 经布氏漏斗过沪 , 用热蒸馏水
洗至不低于尸 H 6 。 将树脂刮入烧 杯 中 , 加
入 Z N氢氧化钠溶液 , 与 用 盐 酸处 理方法
同 。 如此反覆 以酸碱处理 , 并洗至树脂不呈
黄色为止 (一般 2 一 3 次 ) 。 最后用 I N盐
酸处理使其变成酸性 , 再用蒸馏水洗至中性
供装柱 。
3
. 装柱并除尽游离糖 取 Z x 5 c0 m 的
离子交换柱 , 下端塞少许纱布 , 将处理好的
树脂装柱 , 上端空 l o c m 并按装一个 50 0m l的
分液漏斗 , 密闭 。 用 80 % 乙醇 冲洗树脂 , 至
冲洗液呈无色为止 ,约用80 %的乙醇 60 o m l 。
待树脂上部无 乙醇液时 , 将上面的 20 m l粗提
取液倒入柱顶 , 当提取液全部进入树脂后 ,
再用 80 %的乙醇冲洗 。 此时 , 氨基酸被树脂
交换吸附 , 冲洗下来的以游离糖和色素为主 。
洗至无糖反应为止 ,共得洗脱 液 1 5 0 0 m l (如
不测定游离糖 , 可弃去 ) 。
试糖法 : 将最后得到的洗脱液 5 m l置于
蒸发皿 中 , 水浴蒸发至干 , 用 1 m l水溶解并
以滴管移至锥形试管 中 , 加入 2 一 3 滴 5 %
a 一蔡酚乙醇溶液 , 摇 匀 , 沿试管壁小心滴加
浓硫酸约 l m l , 若样品溶液与硫酸的界面处
很快出现紫红色环 , 则表示有糖反应 , 应继
续冲洗交换柱 , 至无糖反应为止 。
水 氨基酸的洗脱和鉴别 用 Z N 氨水的
8 0% 乙醇溶液 , 将总的游离氨基酸 自离子交
换柱上洗脱下来 , 洗至无氨基酸反应为止 ,
共得洗脱液 80 Om l 。 减压浓缩至干 , 放冷 ,
用 8 0%的乙醇洗下 , 以滴管 吸出置 l o . 0 m l
容量瓶中 , 加 80 % 的乙醇至刻度 , 供氨基酸
定量 。
氨基酸的鉴别 : 称取层析 用硅胶 G 3 g ,
加入。 . 2%叛甲纤维素 ( C M C ) 溶液 I c m l ,
在乳钵中混合均匀铺 在 3 x 2 c0 m 的玻璃板
七 , 干燥后即可使用 。 将 样 品点在层析板
上 , 按薄层层析法 ( T L C ) 操作 , 用正丁醇
一冰醋酸一水 ( 4 : 1 : 1 ) 上行展开 , 当
溶剂行进前沿时取出 , 以使板上的溶剂 自行
挥散 , 用 。 . 5%布三酮丙酮溶液喷 , 置烘箱中
经 80 一 1 0 ℃烧 10 分钟 , 若呈紫红色 ,则为正
反应 。
5
. 游离氨基酸含量测定结果 用 K L A
一 5 型氨基酸分析仪 , 分析条件如下 : 进样
浓度为 15 0 m g / m l , 进样量为 0 . 5 m l ; 分析条
件为 巾 6 一 13 。一尸 月一 2 . 3一 5 5 。 结 果见表
表 1 无芒雀麦游离氨基酸的含亚
10 0 9样品所含游离
氮基 ;俊的m g数
占总游离氨墓酸
的%
门冬盆咬
苏 氨 艘
乡之 氨 酸
补 抓 酸
爪汀 氨 酸
丙 氨 酸
撇 氨 酸
分万乙氨酸
亮 氨 酸
酪 氮 酸
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3

1 0
系 。
G e ar ld 报道 汇“ , `无芒雀麦生长初期铁 、
锌和铜的含量较高 , 而成熟期则下降 ; 钻的
含量随生长时间的延长而增高 ; 但铂的含量
则保持恒定。
R叱 ilt s M · 指 出 [ 3 〕 , 无芒雀 麦在夏季
含钙多 ; 由春天到秋季含镁增多 , 同样 , 锰
较高而锌很少 。 钾的含量与植物的灰分呈平
行 ; 磷的含量变化很小 ; 铜的含量也随着植
物的成熟而下降。
若土壤中尸 H高 ,则铜和锌的含量 下降 。
在匈牙利 R en dj i n a 地 区 生 长 的 无 芒 雀
麦 , 7 一 8 月间 锰 的 含 量 可高达 80 一 2 20
p p m [
` 〕。
A m a n o v a N
.
M
. 等测定了苏联 塔吉克
斯 坦 20 种 无 芒 雀 麦 的 含 硼 量 , 均 高 达
6 o m g / k g 以上 [” ] 。
表 2 无芒雀麦的微盘元素及其含皿 ( % )
由表 1可知 , 每百克无芒雀麦含总的游
离氨基酸为 o . 8 1 2m g ,其中脯氨酸占60 . 7% ,
这与文献记载相类似 〔` ’ 。 含量最少 的为门冬
氨酸和酪氨酸 , 均为 0 . 74 % 。 由于赖氨酸含
量极微 , 未包括在表 1 内。
一二一卜介1…一: 一「· “钡 } “ · 0 0 3 }1 钙 … `一 3铅 1 。 · 0 3 } } 铜 …《 0 · 0。 `铁 … “ · “ {… 铭 … “ · 0 2锰 ! o · ` }】 硼 } ” · “ 0 2
铁 】” · 。5一 0 · 1 {} 钾 } > ` · 0铁 1 。 · 0 0 3 11 钠 } ” · 5一竺七二二翌兰二二止乞一匕逻二口
二 、 微量元素及其含量 的刚定
近年来 , 国外学者们发现不同地区生长
的无芒雀麦 中含有镁 、 锰 、 铁 、 翎 、 钙 、
铜 、 硼 、 钾 、 钠 、 钻 、 锌等微量元素 , 并着
重研究了钾 、 钠 、 铁 、 锌 、 锰 、 铂 、 硼 、
钻等几种主要微量元素的含量与无芒雀麦生
长期 、 季节 、 地理环 境 、 土壤及其尸 H的关
我们用发射光谱半定量法对 1 98 2年 .秋采
自青海高寒牧区的无芒雀麦地上部分的 14 种
微量元素及其含量进行了测定 。其中钡 、铅 、
钦和惚的存在及其含量 , 近年来一直无详细
报道 。
我们取阴干无芒雀麦地上部分 , 均匀选
样并撕成约一寸长 , 用蒸馏水漂洗三次以除
附土 , 控干 , 再撕碎 (禁 用 金属 器 ) , 于
80 ℃烘干 2 小 时 。 精称 2 . 9 9 3 3 9 , 置 于 已
称定恒重的蒸发皿中 , 用电炉灰化成黑灰 , 放
冷 , 移至箱型电炉 中于 5 0一 60 0℃加热 1 小
蛋白质补料提高反自家畜粗饲料利用效力的研究
— 补加蚕豆提高大麦桔 的生产效果及其营养生理机制
谢崇文
(银川 , 宁夏农学院畜牧系 )
蛋白质补料能够维持或提高绵羊对低质
量粗饲料的采食量 , 并且紧密地与其生产力
相关 ( A l l d e n , 2 9 7 9 ; B l a e k , 1 9 7 3 ; C o l e b -
r o o k等 , 1 9 6 9 ; E g a n , z 9 6 5 a , 1 9 6 5 b ; F e r g 。 -
s o n 等 , 1 9 4 9 ; M a r s t o n , 1 9 4 8 ; R e i s等 , 1 9 6 1 ,
1 9 6 9 )
。 其原因是蛋白质能促进瘤胃细菌的活
动能力 ,并有助于氮的合成和存 留率 ( E ga n ,
1 9 7 0 ; L e i b h o l g等 , 2 9 7 9 ; S r i s k a n d a r a j a h
等 , 2 9 8 1 ; B l a e k等 , 1 9 6 2 ; D o 了l e等 , 1 9 5 2 ) 。
但是 , 至令还没有关于蚕豆对大麦秸饲用效
果影响的报道 , 也没有完善地阐明蛋白质补
料营养生理机制的报道 。 这两个问题正是本
文论述的主题 , 以期为提高低质量粗饲料利
用开辟新途径 , _ 并能科学地认识其营养生理
机制 。 -
材杆和方法
试验选用 6 月令陶赛特 x 美利奴杂种阉
羊 8 只 , 试验初活重 2 72 士 0 . 6公斤 。 每只羊
装有瘤胃和真胃疹管 , 分别管理于 代 谢 笼
内 , 分两组 。 N O . 1饲喂基础饲料 (大麦秸 ) ,
N O
.
2补加 1 9%蚕豆 ( F a b a b e a n ) , 将日粮含
N 量从 0 . 5%校正到 1 . 1 % 。 两组饲 料均添加
4
.
8%糖密制成颗粒饲料 , 自由采食 。 日粮成
分见表 1 。
试验共 45 日 。 其中予试期 15 日 , 试验期
30 日 。 在试验期最后 7 日收集粪尿样品 , 最
后 3 日每隔 2 小时收集瘤胃和真胃的食糜样
品 , 最后一昼夜每隔 3 小时采颈静脉的血液
样品 , 供测算营养生理变化 。 试验期内还测
定活重 、 采食量和羊 毛生 长 (按 Y e a et s方
法 , 1 9 75 ) 。 利用双指示剂 、 C r一E D T A ( F ia -
e h n e y
, 2 9 5 0 )

A I A ( V a n k e it l e n 和 Y o u n g ,
19 7 ) 测定消化道食糜的流速和瘤胃容积 。
测定样品含 N量 ( A O A C , 1 9 7 0 ) , 瘤 胃和 真
胃N壬王。的浓度 ( C o n w a y , 1 9 5 7 ) , 血液的 尿
素 ( A n o n , 1 9 78 ) 。 蚕豆蛋白质瘤胃降解度应
用 N y l o n B a g s D i s a p p e a r a n e e方 法 测定 ,
瘤胃食糜的挥发性脂肪酸含量应用 H e W l e t t
一 p a e k a r d 5 8 4 0 g a s C h r o m a t o g r a p h测
定 , 其它项 目分析按常规方法完成 。
时 、 放冷 (这时已成 白色灰 ) , 精称 0 . 1 6 9 8 9
灰 (占干燥植物的5 . 7 % ) , 再精称 30 m g灰
供发射光谱法半定量微量元素用 。 结果如表
沙 2 。
主要参考文献 .
〔1〕 L e ; t e r W e t a l : A g : o n J . 5 2 : 5 2 3 , 2 5 6 0
〔2了C A 石后: 2 0 2 8 7b , 2 0 6 1 。
〔匆 C人 5 0 : 一 i o o i s o a , 1 07 9。
〔` 〕C A o 6 : z 9 1o 4 r , 2 9 5 2。
〔5〕C A 呀.7 : 2 5 1 1 4 05 , 19 5 2 。