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豆瓣 绿 试 管 苗 快 速 繁 殖
蒋泽乎 朱鹿鸣
(江苏省 林业 科学研究所 )
豆瓣绿 ( P e p e r o m玄a t乞t h夕m a不o玄d e s )
是胡椒料 , 豆瓣绿属 , 多年生草本植物 。 它
叶片肥厚 , 光亮碧绿 , 四季常青 , 耐阴 , 喜
高温 , 具较高的观赏价值 。 但 目前我国栽培
尚少 , 为 了能在短期内获得大量保持原品种
优良特性的植株 , 我们进行了豆瓣绿茎 、 叶 、
花轴等器官的组织培养 。
1 材料和方法
取豆瓣绿的叶片 (幼叶 、 老叶 ) 、叶柄 、
不具腋芽茎段 、 具腋芽茎段 、 花 轴 为外 植
体 。 先用自来水洗净 , 然后在超净台上 , 用
7 0%的酒精溶液消毒 30 秒钟 , 再浸入 。 。 1%
升汞溶液 5 ~ 8分钟 , 用无菌水冲洗 3~ 5次 ,
切成 0 . 5厘米见方的小块 , 接种于无菌培养基
上 。 以士M S 、 M S 、 B 。 、 改良B S为基 本 培
养基 , 外加 B A O . 5~ s p pm (单位下同 ) 、 K T
1~ 5
、
I ^ A o
.
i ~ i
、
N ^ ^ 0
.
0 1一 0 . 5 , 糖 3% ,
琼脂 O。 5 % , p H调至 5 . 8~ 6 . 2 。 共设计 了种
培养基 : ①去 B 。 十 I A A + B A : . 。 ; ②士 M s
+ N A A
。 . 。 : + B A Z
。 。 ; ③ M S + I A A : . 。 +
K T ` . 。 ; ④ M S + N ^ ^ 。 . 。 : + B ^ 2 . 。 ; ⑤
M S
+ B A 3
. 。 +
N A A
。 . 。 : , ⑥ M S + B A 。 。 : +
N A A
。 。 。 : + G A : 。
. 。 。 ; ⑦ M S + B A 。 . : +
I A A
。 · : + G A 3 。
. 。 3 。 在 2 0~ 2 5℃ 、 光照时间
8~ 10 小时 , 光照度 2 0 0 L u x 的条件 下 进 行
培养 , 观察外植体分化及生长情况 。
同一外植体 , 在不同的基本培养基上分
化生长有一定的差异 。 士M s 、 M s 、 B 。 、 改
良B 5 4 种基本培养中 ,加入相同配比的激素 。
在用叶片为材料的试验结果表明 , 以M s 为
基本培养基 , 外植体分化生长较好 (表 1 ) 。
在继代繁殖中 , ⑤号培养基繁殖系数高 , 苗
色浓绿 , 芽丛紧密 ; ⑥号培养基中 , 幼苗叶
片较大 , 有效茎较长 , 幼苗健壮 , 利 于 移
栽 。
表 1 叶片在基本培养基中的分化状况
培 养 基 严点出现天 数 芽叶 色泽
士M S
M S
改 良P S
B 5
3 5
3 ,
较好 稍 黄
浓绿
较差
稍 黄
OC内J口J八j
2
.
2 激素配比与外植体分化
相同的外植体在同一基本培养基 , 外加
不同种类的激素和不同的浓度配比的培养基
中 , 其外植体分化生长差异显著 。 以 M S 为
基本培养基 , 叶片为外植体材料 , 用不同种
类的生长素 (I A A 、 N A A 、 I B A ) 和不同种
类的细胞分裂素 ( K T 、 B A ) 组合成各种配
比试验结果 , 以 B A I一 2 十 N A A O . 01 一 0 . 1
较好 , 外植体出现绿点早 , 芽量多 。
2
.
3 不同部位的外植体分化
不同部位的外植体 ,在相同培养条件下 ,
2 结果与分析 。
2
.
1 基本培养基的选择 才文 于 198 8 年
_
11月卫 日 收到 。
其分化的快慢 , 难易不同 。 具腋芽茎段 , 芽直
接自叶腋伸出 ,叶片先长大 ,后芽逐渐伸长 。
一月后腋芽茎段基部 (接触培养基部分 ) 周
围 , 细胞分化形成绿色芽点 ; 不 具 腋芽 茎
段 , 30 ~ 40 天左右 , 沿茎周一圈也可形成绿
色芽点 ; 叶柄接种后 20 天左右 , 先从伤口处
分化出绿色小圆点 , 解剖镜观察为小芽 , 它
分化早 , 生长好; 幼叶一般 30 一 40 天左右 ,
从伤口处出现绿色芽点 , 继续分化直至叶面
长满幼芽 ; 老叶质地厚 , 表皮腊质化 , 一般
不易分化 ,一个月左右材料发黑 ,逐渐死亡 ,
仅少数可分化出芽 ; 花轴切段上布满粗毛状
物 , 40 天左右两端切口先分化出 绿 色 芽 点
(表 2 ) 。观察结果表明 ,在相同条件下 , 以叶
柄 、 茎段分化快且易 , 叶片 (尤其老叶 ) 、
花轴不易分化 。
表 2 外植体在5号培养基中的分化情况
N A A
。 . : 5 + 糖 2 %为好 , 10 天左右即可生根 。
试管苗移栽 , 一般在生根培养基中处理
一周 , 茎基部出现了小突起 (根原基 ) , 但
根不外露时进行 。 试管幼苗采用丛生芽生根
处理 , 在移栽时 , 可把经生根处理的丛生芽
苗直接在室外移入含有等体积碧糠和土或森
林表层松土的营养钵中 。 覆盖保持相对湿度
90 % 以上 、 温度 25 一 30 ℃ , 适当遮荫 , 20 天
后生根成活 , 成活率达 90 %左右 。 再生长 3
一 4 个月即可成为商品苗 。
{分化天 数 分 化 情 况 生 长 情况
快
外 植 体
叶栖
不具腋芽 茎段
具腋芽茎段
老叶
幼叶
花轴
2 0一那 分化易
,量多 ,切 口处
先 分化
沿 基部茎周一圈 分化
沿基部茎周一 圈分化 较快
少 量分化
3 5
4 0
整个叶面 长满幼芽
不易 分化 , 切 口 处
少 分 化
较慢
2
.
4 生根与移栽
当豆瓣绿试管芽苗高达 2厘米左右 时 转
入生根培养基 中。 生 根 培 养 基 以告M S +
3 讨论
3
.
1 豆瓣绿叶片分化出芽有两种 途 径 : 由
叶片表皮直接分化出芽 , 幼苗能保持原品种
的优良性状 ; 由叶片先脱分化形 成 愈 伤 组
织 , 再 由愈伤组织分化出芽 , 幼苗往往会出
现变异 。 虽不利保持原品种优良特性 , 但 可
从中选择优 良变异类型 。 若性状稳定 , 则利
用价值较大 。 其变异频率等情况有待进一步
研究 。
3
。
2 豆瓣绿 由叶柄 、 叶片 、 茎 段 、 花轴等
不同来源的外植体培养成功 , 不但丰富了繁
殖材料 , 而且对其器官发生的研究具有一定
的参考价值 。
3
.
2 具根原基的豆瓣绿试管苗丛状 移栽 ,
不仅可以提高移栽 工 作 效 率 、 节省土地 ,
而 .且成活率高 。 但在幼苗成活后 , 应注意土
壤消毒和及时上盆 , 以免感病 , 影响幼苗生
长 。
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