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狗肝菜多糖的抗肝纤维化研究



全 文 :华西药学杂志
W C J·P S 2012,27(6)∶634 ~ 635
基金项目:国家自然科学基金资助项目(批准号:30860393) ;广西科学研究与技术开发计划项目(编号:桂科能 10100027 - 1)
作者简介:朱华,博士,从事中药品质评价的研究工作。Email:xueshengcailiao@ 163. com
* 通信作者(Correspondent author) ,Email:249218755@ qq. com
狗肝菜多糖的抗肝纤维化研究
朱 华1,2,陈力锋2,3,张可锋2*
(1.广西中医药大学,广西 南宁 530001;2.桂林医学院,广西 桂林 541004;3.广西桂东人民医院,广西 梧州 543001)
摘要:目的 观察狗肝菜多糖对二甲基亚硝胺(DMN)诱导的大鼠肝纤维化的拮抗作用。方法 以 DMN 诱导 Wistar 大鼠致
肝纤维化,观察狗肝菜多糖对大鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶 (AST)、总胆红素(TBIL)和白蛋白(ALB)等指标含
量及肝、脾湿重的影响;Masso染色观察肝纤维化(HF)的形成。结果 狗肝菜多糖高、低剂量组血清中 ALT、AST、TBIL 的水
平均显著低于模型组,ALB水平高于模型组;给药组大鼠肝、脾湿重较模型组明显降低;肝组织炎症坏死和纤维化病变程度较
模型组明显减轻。结论 狗肝菜多糖具有抗 DMN所致大鼠肝纤维化的作用,其机制可能与保肝降酶有关。
关键词:狗肝菜多糖;肝纤维化;对二甲基亚硝胺
中图分类号:R96 文献标志码:A 文章编号:1006 - 0103(2012)06 - 0634 - 02
Study on anti - hepatic fibrosis effect of polysaccharide form Dicliptera chinensis
ZHU Hua1,2,CHEN Li - feng2,3,ZHANG Ke - feng2*
(1. Guangxi Traditional Chinese Medical University,Nanning,Guangxi,530001 P. R. China;2. Guilin Medical University,Guilin,
Guangxi,541004 P. R. China;3. Guidong People’s Hospital of Guangxi,Wuzhou,Guangxi,543001 P. R. China)
Abstract:OBJECTIVE To observe the antagonism of polysaccharide from Dicliptera chinensis to liver fibrosis of dimethyl
nitrosamine(DMN)induced rats.METHODS The liver fibrosis in the rats was induced with DMN,those rats were administrated with
polysaccharide. The contents of ALT,AST,TBIL and ALB content in serum were tested,and the wet weight of liver and spleen were also
determined. The formation of liver HE stained by masson was observed. RESULTS Every dose of polysaccharide could decrease the
contents of ALT,AST,TBIL and increase the contents of ALB significantly. The wet weight of liver and spleen in medicine groups was
obvionsly decreased compared with model groups. The pathologically changing degrees of inflammation - necrosis and fibrosis in live
tissue were clearly reduced. CONCLUSION The polysaccharide from Dicliptera chinensis can prevent the rats’liver fibrosis induced
by DMN,and the mechanism may be associated with protecting liver and reducing the enzyme contents.
Key words:Polysaccharide from Dicliptera chinensis;Liver fibrosis;DMN
CLC number:R96 Document code:A Article ID:1006 - 0103(2012)06 - 0634 - 02
肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)是肝炎向肝硬化
转化的必经环节,是各种病因所致慢性肝病的共同
病理过程[1]。抗肝纤维化药物的不良反应较多,疗
效不理想。近年来,中草药及其有效单体,在抗肝纤
维化方面显示出较好的疗效,且不良反应少,具有较
大的研发潜力和优势。爵床科一年或多年生草本植
物狗肝菜 Dicliptera chinensis(L.)Ness全草中的狗肝
菜多糖对 CCl4 和 D -半乳糖胺致大鼠肝损伤模型
有保护作用[2 - 3]。现研究了狗肝菜多糖在二甲基亚
硝胺诱导的大鼠肝纤维化中的抑制作用,可为临床
抗肝纤维化治疗提供新的途径。
1 实验部分
1. 1 仪器、试药与动物
TSN - 695B 型放免测量仪(上海日环仪器一
厂) ;752 型分光光度计(上海第三分析仪器厂) ;
AU600 全自动生化检测仪、CK4O - F200 倒置显微
镜(日本奥林巴斯)。狗肝菜多糖(桂林医学院天然
药化教研室,纯度≥85%) ;二甲基亚硝胺(DMN,天
津市化学试剂研究所) ;秋水仙碱粉剂(Serva 公司) ;
谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素
(TBIL)和白蛋白(ALB) (南京建成生物工程研究
所) ;Masson三色染色试剂盒(福州迈新生物技术开
发有限公司)。SPF级 Wistar 大鼠[桂林医学院实验
动物中心,许可证号:SCXK(桂)2007 -0001]80只,♀
♂兼用,体重 175 ~230 g。
1. 2 方法与结果
1. 2. 1 分组与给药 将 80 只 Wistar大鼠随机均分
为正常组、模型组、狗肝菜多糖高、低剂量组和秋水
仙碱组。除正常对照组外,其余大鼠均 ip 0. 5%
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2012.06.006
DMN溶液(1. 6 mL·kg -1) ,每周连续 3 d,qd,第 1 周
用 2 /3 剂量,以后用全量。狗肝菜多糖高、低(0. 3、
0. 1 g·kg -1·d -1)剂量组及秋水仙碱组(0. 1 mg·
kg -1·d -1)均 ig 给药,qd,正常组予生理盐水,共 4
周。4 周末,摘大鼠眼球取血,称量肝、脾湿重并收
取肝组织;按试剂盒说明,用全自动生化仪检测血清
中的 ALT、AST、TBIL 和 ALB 等指标;进行 Masson
染色,观察 HF的形成。
1. 2. 2 大鼠肝、脾脏湿重的影响 与正常组比较,
狗肝菜多糖高、低剂量组大鼠的肝、脾湿重均无明显
变化(P >0. 05) ;与模型组比较,狗肝菜多糖高、低剂
量组的肝湿重增加,脾湿重降低(P <0. 05) (表 1)。
表 1 大鼠肝、脾湿重的变化(g,珔x ± s)
Table 1 The wet weight change of liver and spleen in rat(g,珔x ± s)
Groups n live spleen
Blank 16 12. 35 ± 0. 46* 0. 90 ± 0. 06*
Model 10 11. 03 ± 0. 81 1. 23 ± 0. 07
High dose 15 12. 46 ± 0. 53* 0. 92 ± 0. 04*
Low dose 14 12. 07 ± 0. 49* 1. 02 ± 0. 06*
Positive 15 12. 49 ± 0. 55* 0. 94 ± 0. 05*
Compared with model group:* P < 0. 05,**P < 0. 01
1. 2. 3 血清肝功能的测定 模型组大鼠血清中
ALT、AST、TBIL 的水平较正常组明显升高,ALB 水
平降低,差异均具有显著性意义(P < 0. 01) ,说明造
模成功。狗肝菜多糖高、低剂量组和秋水仙碱组大
鼠血清中 ALT、AST、TBIL 的水平均明显低于模型
组,ALB 水平高于模型组,差异有统计学意义(P <
0. 01,P < 0. 05) (表 2)。
表 2 狗肝菜多糖对 DMN 肝纤维化大鼠肝血清酶含量的影响
(珔x ± s)
Table 2 The effects of enzyme content in rats with hepatic fibrosis
induced by DMN after polysaccharide of Dicliptera chinen-
sis curded (珔x ± s)
Groups n ALT /U·L -1
AST /
U·L -1
TBIL /
umol·L -1
ALB /
g·L -1
Blank 16 56. 3 ± 7. 46** 78. 4 ± 23. 5** 1. 78 ± 0. 65** 36. 6 ± 2. 68**
Model 10 196. 4 ± 30. 3 274. 2 ± 36. 3 3. 86 ± 0. 83 25. 2 ± 2. 89
High dose 15 88. 5 ± 14. 7** 128. 6 ± 23. 8** 1. 86 ± 0. 76** 33. 2 ± 2. 48**
Low dose 14 106. 9 ± 21. 4* 169. 2 ± 27. 2* 2. 03 ± 0. 54** 30. 1 ± 2. 59**
Positive 15 83. 4 ± 16. 9** 119. 1 ± 28. 5** 1. 84 ± 0. 81** 31. 4 ± 2. 72**
Compared with model group:* P < 0. 05,**P < 0. 01
1. 2. 4 病理形态学的观察 肝脏组织经 Masson 染
色后,于光学显微镜下可见:除正常对照组外,各组
大鼠的肝脏均显示了明显的组织学病理改变。模型
组大鼠的肝组织纤维的增生明显,大量存在汇管区,
少量见于中央静脉。增生的胶原纤维伸入肝实质内
形成粗大的纤维间隔,并连成网状分割包绕肝细胞
形成假小叶(图 1)。
A B C D E
图 1 正常组(A)、模型组(B)、阳性组(C)、狗肝菜多糖高(D)、低(E)剂量组的大鼠模型肝组织病理切片(×400)
Fig 1 Pathological sections of rats’liver tissue of blank group(A),model group(B),positive group(C),high dose group(D),low dose group
(E)of polysaccharide from Dicliptera chinensis(×400)
1. 2. 5 数据处理 采用 SPSS 13. 0 统计软件进行
数据分析,P < 0. 05 为差异有统计学意义。
2 讨论
文中结果显示:DMN致肝纤维化模型明显表现
出肝细胞损伤、慢性肝纤维化等症状,狗肝菜多糖不
同剂量对血清中的 ALT、AST、TBIL、ALB 指标均有
不同程度的改善,显示其具有较好的降酶、退黄作
用。肝、脾湿重实验表明:狗肝菜多糖不仅能够改善
试验鼠的一般状况,还可使 DMN 引起的脾肿大程
度明显减轻。Masson 染色表明:狗肝菜多糖高、低
剂量组大鼠的肝内炎症细胞浸润较模型组明显减
轻,其肝内炎症活动度也明显降低,提示狗肝菜多糖
有抑制肝内炎症反应的作用,此作用可能是其抗肝
脏纤维化的机理之一。
参考文献:
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[2] 张小玲,肖胜军,朱华,等. 狗肝菜多糖对 D -半乳糖胺所致
大鼠急性肝损伤的保护作用[J]. 时珍国医国药,2010,21
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[3] 张可锋,朱华,高雅.狗肝菜保肝有效部位筛选研究[J].中国
中药杂志,2010,35(4) :497.
收稿日期:2012 - 01 - 04
536第 6 期 朱 华,等。狗肝菜多糖的抗肝纤维化研究