全 文 ：71※基础研究 食品科学 2011, Vol. 32, No. 13
狗肝菜功能性成分的抗氧化活性
李南薇，刘长海，陆映机
(仲恺农业工程学院轻工食品学院，广东 广州 510225)
摘 要：以狗肝菜为原料，对其中的黄酮、多糖、多酚等功能性成分进行提取，并对其抗氧化活性进行研究。结
果表明：狗肝菜中含有丰富的黄酮、多糖和多酚类物质，其含量分别为 2.4、180.5mg/g和 61.2mg/g(以干基计)。
抗氧化实验表明：狗肝菜黄酮、多糖和多酚具有较强的清除 DPPH自由基和·OH的能力，对DPPH自由基的清
除率分别为 76.7%、88.2%和 35.8%，对·OH的清除率分别为 90.8%、95.7%和 80.9%。
关键词：狗肝菜；黄酮；多糖；多酚；抗氧化活性
Antioxidant Activities of Functional Components from Dicliptera chinensis
LI Nan-wei，LIU Chang-hai，LU Ying-ji
(College of Light Industry and Food Technology, Zhongkai University of Agricultural and Engineering, Guangzhou 510225, China)
Abstract：Functional components including flavonoids, polysaccharides and polyphenols were isolated from Dicliptera
chinensis, and their antioxidant activities were evaluated. The results indicated that Dicliptera chinensis was rich in flavonoids,
polysaccharides and polyphenols, of which the contents were 2.4, 180.5 mg/g and 61.2 mg/g of dry Dicliptera chinensis (md),
respectively. Moreover, flavonoids, polysaccharides and polyphenols from Dicliptera chinensis had strong free radical scaveng-
ing capacity, with respective scavenging rates of 76.7%, 88.2% and 35.8% against DPPH free radicals and of 90.8%, 95.7% and
80.9% against hydroxyl free radicals.
Key words：Dicliptera chinensis；flavonoids；polysaccharides；polyphenols；antioxidant activity
中图分类号：O623.54 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2011)13-0071-04
收稿日期：2010-10-08
基金项目：广东省科技计划项目(2008A024200003)
作者简介：李南薇(1982—)，女，讲师，硕士，研究方向为食品生物技术。E-mail：linanwei2006@yahoo.com.cn
狗肝菜，为双子叶植物药爵床科植物狗肝菜的全
草，分布在我国南方各省区，是药食同源的植物。狗
肝菜的食用部分为嫩茎，味甘、微苦，性寒，有清
热解毒、生津利尿之功效，其作为传统的中药在我国
已有上千年的使用历史，临床上用于治疗发热咳嗽、咳
血、感冒发热、暑热烦渴、目赤肿痛、斑诊发热、
眼结膜炎、便血赤痢等[ 1 - 3 ]。
迄今，有关该植物的研究报道很少，主要集中在
栽培技术、化学成分分析、多糖提取及其保肝作用等
方面[ 1-8]，对狗肝菜黄酮、多酚的提取及其体外抗氧化
活性的研究尚未见报道。本实验以狗肝菜为原料，对
其中的黄酮、多糖和多酚等功能性成分进行提取，并
对其抗氧化活性进行研究，探讨其能否作为一种新的植
物源食品或食品添加剂应用于生产中。
1 材料与方法
1.1 材料
狗肝菜采摘于广东肇庆农村，清洗干净后自然晒
干，将晒干的狗肝菜切成小段，然后放入 25000r/min的
高速粉碎机中打成粉末后，备用。
没食子酸 天津市科密欧化学试剂开发中心；葡
萄糖 江苏强盛化工有限公司；乙醇 天津市富宇精细
化工有限公司；水杨酸 天津市广成化学试剂有限公
司；亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、氯化铝、双氧
水 广州化学试剂厂；DPPH(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl
radical)、邻二氮菲 美国 Sigma-Aldrich 公司；芦丁 国
药集团化学试剂有限公司。
1.2 仪器与设备
S54紫外 -可见分光光度计 上海棱光技术有限公
司；RE-52AA旋转蒸发仪 上海亚荣生化仪器厂；6202
小型高速粉碎机 台湾欣镇企业有限公司；ALC-210.4
电子分析天平 德国 Sartorius公司；HWS12型电热恒
温水浴锅 上海一恒科学仪器有限公司。
2011, Vol. 32, No. 13 食品科学 ※基础研究72
标准品 回归方程 相关系数
芦丁 A = 24.25C + 0.0061 0.9999
葡萄糖 A = 58.706C + 0.0031 0.9993
没食子酸 A = 38.429C－ 0.0186 0.9976
表 1 芦丁、葡萄糖及没食子酸含量测定的标准曲线回归方程
Table 1 Regression equations of rutin, glucose and gallic acid
注：A 为吸光度；C 为物质含量。
1.3 狗肝菜功能性成分的提取和测定
1.3.1 狗肝菜黄酮的提取和测定[9]
称取狗肝菜干粉 10g，加入 70%的乙醇 100mL，在
75℃的水浴中回流提取 2h，离心取上清液并进行减压浓
缩，然后定容至 1 0 0 m L，摇匀，备用。
准确称取芦丁 10.0mg，用 70%的乙醇溶解后定容
到 100mL，配制成 0.1mg/mL的芦丁标准溶液。吸取 0、
1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL的芦丁标准溶液分
别置于 25mL比色管中，用 70%乙醇溶液补至 10mL，加
入 1mL 5g/100mL亚硝酸钠溶液，振摇，放置 5min，加
入 1mL 10g/100mL硝酸铝溶液，摇匀后放置 6min，加
入 5mL 1mol/L氢氧化钠溶液，用 70%乙醇定容至刻度，
摇匀，静置 15min，以试剂为空白参比液，于 510nm
波长处测定吸光度，以芦丁标准溶液质量浓度为横坐
标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。取 10mL狗肝菜黄
酮提取液，按上述操作测定其吸光度，计算样品中的
黄酮含量。
1.3.2 狗肝菜多糖的提取和测定
称取狗肝菜干粉 10g，加入 100mL蒸馏水，在 75℃
水浴中回流提取 2h，将浸提液于 3000× g离心 15min，
取上清液浓缩至50mL，然后用Sevag法脱蛋白，3000× g
离心 15min，取上清液，并加入 95%乙醇使乙醇终体积
分数为 80%，冰箱静置 48h过滤，再于 3000× g离心
1 5 m i n，取沉淀，沉淀重新溶于蒸馏水中，定容至
1 0 0m L，摇匀，备用[ 10 ]。
采用硫酸 -苯酚法[11]。准确称取 10.0mg葡萄糖，用
蒸馏水溶解后定容到 100mL，配制成 0.1mg/mL的葡萄糖
标准溶液。吸取 0、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4mL
葡萄糖标准溶液分别置于 10mL比色管中，用蒸馏水补
至 2mL，加入 1mL 6%苯酚试液，摇匀，迅速加入浓
硫酸 5 . 0 m L，摇匀后放置 1 0 m i n，置沸水浴中加热
1 5m in，取出冷却至室温，以试剂为空白参比液，于
490nm波长处测定吸光度，以葡萄糖标准溶液质量浓度
为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。取 2mL狗
肝菜多糖提取液，按上述操作测定其吸光度，计算样
品中的多糖含量。
1.3.3 狗肝菜多酚的提取和测定
称取狗肝菜干粉 10g，加入 30%的乙醇 100mL，在
60℃的水浴中回流提取 1.5h，离心取上清液并进行减压
浓缩，然后定容至 1 0 0 m L，摇匀，备用。
采用 Folin-ciocalteu法测定总多酚含量[12]。准确称
取 10.0mg没食子酸，用水溶解后定容到 100mL，配制
成 0.1mg/mL的没食子酸标准溶液。吸取 0、0.4、0.8、
1.2、1.6、2.0mL没食子酸标准溶液分别置于 10mL比色
管中，加水补至 6mL，再加入 1mL福林 - 酚试剂，摇
匀，在 1～8min内再加入 2mL 20g/100mLNa2CO3溶液，
以蒸馏水定容至刻度，40℃避光反应 2h。以试剂为空
白参比液，于 760nm波长处测定吸光度，以没食子酸
标准溶液质量浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准
曲线。取 2mL狗肝菜多酚提取液，按上述操作测定其
吸光度，计算样品中的多酚含量。
1.4 抗氧化活性的测定
1.4.1 清除 DPPH自由基的测定[13]
准确称取 DPPH标准品 11mg，用无水乙醇溶解并
定容至 100mL，配成 0.28mmo1/L的 DPPH储备液，置
于冰箱中备用。用0.1mL无水乙醇与3mL 0.28mmo1/L的DPPH
溶液加入同一试管中，摇匀，在黑暗中放置 30min，以
无水乙醇为空白在 517nm 测定其吸光度(A对照)。把狗肝
菜黄酮、多糖、多酚提取液分别稀释成不同质量浓
度，取 0.1mL稀释的待测样品溶液与 3mL 0.28mmo1/L 的
DPPH 溶液于同一试管中，摇匀，在黑暗中放置 30min，
以无水乙醇为空白在 517nm 波长处测定其吸光度(A样品)。
按式(1)计算 DPPH自由基清除率。
　　 A对照－A样品
DPPH自由基清除率 /% = ——————×100 (1)
　　 A对照
1.4.2 清除羟自由基的测定[14]
在试管中依次加入 1.5mL 5mmol/L邻二氮菲溶液，
2mL 0.05mol/L pH7.4的磷酸缓冲液，1mL 7.5mmol/L
FeSO4溶液，1mL不同质量浓度的待测样品溶液，混合
均匀，再加入 1mL 0.1%H2O2，用蒸馏水补至 10mL，在
37℃静置 1h后于波长 510nm处测定其吸光度(A样品)，用
蒸馏水代替样品液按上述方法测定吸光度为 A 损伤，用
蒸馏水代替 H2O2及样品溶液按上述方法测定吸光度为
A 未损伤。按式( 2 )计算·O H 清除率。
A样品－A损伤
·OH清除率 /% =——————× 100 (2)
A未损伤－A损伤
2 结果与分析
2.1 狗肝菜黄酮、多糖和多酚含量的测定结果
分别以芦丁、葡萄糖、没食子酸为标准品制作标准
曲线来测定狗肝菜中黄酮、多糖和多酚的含量。根据标
准曲线计算出回归方程和相关系数，结果见表 1。
73※基础研究 食品科学 2011, Vol. 32, No. 13
成分 黄酮 多糖 多酚
含量 /(mg/g) 2.4 180.5 61.2
表 2 狗肝菜中黄酮、多糖和多酚含量
Table 2 Contents of flavonoids, polysaccharides and polyphenols in
Dicliptera chinensis
注：以干基计。
由表 2 可知，狗肝菜中含有丰富的黄酮、多糖和
多酚。其中多糖含量最高，多酚其次，黄酮的含量相
对较少。
2.2 狗肝菜的抗氧化活性
2.2.1 狗肝菜黄酮的抗氧化活性
DPPH自由基是一种很稳定的氮中心的自由基，常
用于抗氧化成分的体外抗氧化评价。·O H 被认为是
毒性最强的活性氧自由基，辐射损伤等物理、化学因
子都会促进其形成，是造成有机体过氧化损伤的主要
因素[15]。实验以DPPH自由基和·OH清除率为指标，对
提取的狗肝菜黄酮、多糖和多酚的体外抗氧化活性进行初
步研究。
图 1 狗肝菜黄酮对 DPPH自由基和·OH的清除能力
Fig.1 Scavenging rates of flavonoids from Dicliptera chinensis against
DPPH and hydroxyl free radicals
·O H
DPPH自由基
清
除
率
/%
黄酮质量浓度 /(μg/mL)
100
80
60
40
20
0
0 10 20 30 40 50
由图 1可知，狗肝菜黄酮对 DPPH自由基和·OH
具有较强的清除作用，并且呈显著地剂量依赖关系，随
着狗肝菜黄酮质量浓度的增加，清除效果增强。当狗
肝菜黄酮质量浓度大于 11.7μg/mL时，质量浓度的增加
对DPPH自由基清除率的影响很小，最高清除率达到76.7%。
当样品质量浓度达到 23.5μg/mL时，样品对·OH的清
除率达到 90.8%，之后质量浓度的增加对·OH的清除
率没有太大的影响。
2.2.2 狗肝菜多糖的抗氧化活性
由图 2可知，狗肝菜多糖对·OH 和 DPPH 自由
基具有极好的清除作用，并且自由基的清除率均随
质量浓度的上升而增加。当狗肝菜多糖质量浓度达到
0.36mg/mL时，继续增大质量浓度，·OH和 DPPH自
由基的清除率基本不再增加，其最大清除率分别为 95.7%
和 88.2%。
图 2 狗肝菜多糖对 DPPH自由基和·OH的清除能力
Fig.2 Scavenging rates of polysaccharides from Dicliptera chinensis
against DPPH and hydroxyl free radicals
·O H
DPPH自由基
清
除
率
/%
多糖质量浓度 /(mg/mL)
100
80
60
40
20
0
0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5
2.2.3 狗肝菜多酚的抗氧化活性
图 3 狗肝菜多酚对 DPPH自由基和·OH的清除能力
Fig.3 Scavenging rates of polyphenols from Dicliptera chinensis
against DPPH and hydroxyl free radicals
·O H
DPPH自由基
清
除
率
/%
多酚质量浓度 /(mg/mL)
100
80
60
40
20
0
0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6
由图 3可知，狗肝菜多酚对·OH具有较好的清除
作用。当狗肝菜多酚质量浓度小于 0.30mg/mL时，·OH
的清除率随着质量浓度的加大而增强，继续增大质量浓
度，对·O H 的清除效果影响甚小，最高清除率达到
80.9%。
狗肝菜多酚对 DPPH自由基也有一定的清除作用。
狗肝菜多酚质量浓度小于 0.15mg/mL时，随着质量浓度
的增加，清除DPPH自由基的作用加强，当质量浓度大
于 0.15mg/mL时，DPPH自由基的清除率增加缓慢，最
高清除率达到 35.8%。
3 讨 论
狗肝菜广泛分布于我国南方各省市，是药食同源的
植物。目前有关该植物的研究报道不多，在市场上也
没有对其进行进一步开发的产品，这种现状严重制约了
狗肝菜的应用。根据本实验可知，狗肝菜中含有丰富
的黄酮、多糖和多酚，尤其以多糖含量最高。抗氧化
实验表明狗肝菜黄酮、多糖和多酚都具有良好的抗氧化
活性，且对·OH的清除率均高于其对 DPPH自由基的
清除率，这些都为开发利用该资源提供了参考依据。
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