全 文 ：书云南大学学报 (自然科学版)，2012，34 (2):202 ～ 206 CN 53 －1045 /N ISSN 0258 －7971
Journal of Yunnan University http:/ /www． yndxxb． ynu． edu． cn
HPLC法测定姜状三七根茎中的人参皂苷 Rg1、
人参皂苷 Rb1 和三七皂苷 R1
*
吴其国1，2，符德欢1，王 丽1，高 丽1，张晓南1，李文艳2
(1．云南省药物研究所，云南 昆明 650111;2．云南中医学院，云南 昆明 650500)
摘要:建立人参属植物姜状三七根茎中人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Rb1 和三七皂苷 R1 的含量测定方法．采用
HPLC法，色谱柱为 Phenomenex C18(250 mm × 4． 6 mm，5 μm) ;流速为 1． 0 mL /min;检测波长 203 mm;柱温 30
℃;流动相为乙腈 －水(梯度洗脱)．三七皂苷 R1 的线性范围为 0． 315 ～ 1． 575 μg(r = 0． 999 1) ，平均回收率为
三七皂苷 R1101． 4%，RSD = 1． 79%;人参皂苷 Rg1 的线性范围为 1． 203 ～ 6． 015 μg(r = 0． 999 8) ，平均回收率为
人参皂苷 Rg198． 54%，RSD = 1． 90%;人参皂苷 Rb1 的线性范围为 0． 276 ～ 1． 38 μg(r = 0． 999 6) ，平均回收率
人参皂苷 Rb1102． 10%，RSD = 1． 53% ．所建方法简便、准确、重复性好，可同时测定姜状三七根茎中人参皂苷
Rg1、人参皂苷 Rb1 和三七皂苷 R1 的含量．
关键词:姜状三七;人参皂苷 Rg1;人参皂苷 Rb1;三七皂苷 R1;HPLC
中图分类号:R 284;Q 949． 763． 2 文献标识码:A 文章编号:0258 － 7971(2012)02 － 0202 － 05
姜状三七为五加科人参属植物姜状三七(Pa-
nax zingiberensis C． Y． Wu et K． W． Feng)的根茎．
姜状三七为多年生草本，高 30 ～ 60 cm，根茎肉质，
姜块状．生长于云南东南部海拔 1 000 ～ 1 700 m的
常绿阔叶林下，分布于云南东南部的马关和蒙自，
以及南部的普洱等地［1］． 为阴生植物，常生于石灰
岩常绿阔叶林下荫蔽处，生长地区气候温凉湿润． 5
月长叶，6 月开花，10 月果熟． 其味苦，性温． 有散
瘀、止血、定痛的功效．主治跌打损伤、内伤出血、产
后血晕、恶露不下、虚伤咳嗽贫血［2］．
1 实验部分
1． 1 实验材料 本试验药材由云南省药物研究所
天然药物资源研究中心高丽、符德欢亲临 3 产地采
挖，植物标本经中国科学院昆明植物研究所分类室
陶德定副研究员鉴定，为五加科人参属植物姜状三
七(Panax zingiberensis C． Y． Wu et K． W． Feng)．植
物标本收藏于云南省药物研究所标本室．药材经云
南省药物研究所天然药物资源研究中心高丽正高
级工程师鉴定，实验药材并经过显微鉴定． (植物
图见封三图 1;药材图见封三图 2)．
姜状三七与同属植物三七基本组织结构相似，
主要不同点为:姜状三七草酸钙簇晶较多，三七草
酸钙簇晶较少见．
1． 2 仪器与试药 安捷伦 1100 高效液相色谱仪
包括四元泵、在线脱气机、DAD 检测器、化学工作
站(美国安捷伦)．人参皂苷 Rb1、人参皂苷 Rg1 和
三七皂苷 R1 对照品(中国药品生物制品检定所，
批号:110704 － 200420，110703 － 200322，110745 －
200312)．乙腈为色谱纯;水为超纯水(18． 2ΩPa) ;
其他试剂为分析纯．
1． 3 方法与结果
1． 3． 1 溶液的制备 取人参皂苷 Rg1、Rb1 及三七
皂苷 R1，对照品适量，精密称定，分别加甲醇制成
* 收稿日期:2011 － 09 － 13
基金项目:云南省应用基础研究计划资助项目(2011FB133)．
作者简介:吴其国(1986 －) ，男，安徽人，硕士生，主要从事中药资源利用与开发方面的研究．
通迅作者:高 丽(1956 －) ，女，云南人，正高级工程师，硕士生导师，主要从事中药材鉴定与中药资源开发方面的研究． E － mail:
gaoli0527@ yahoo． com． cn．
每 1 mL含三七皂苷 R1 0． 105 0 mg、人参皂苷 Rg1
0． 401 0 mg和人参皂苷 Rb1 0． 092 mg的溶液，作为
对照品溶液．取本品粉末(过 4 号筛)0． 6 g，精密称
定，精密加入甲醇 50 mL，称定重量，放置过夜，置
80 ℃水浴上保持微沸 2 h，放冷，再称定重量，用甲
醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供
试品溶液．
1． 3． 2 色谱条件与系统适用性 采用 Phenome-
nex C18 柱(250 mm × 4． 6 mm，5 μm) ，流动相 A
为乙腈，流动相 B 为水，按表 1 进行梯度洗脱;检
测波长为 203 mm，柱温为 30 ℃，流速为 1． 0 mL /
min［3］．
分别精密吸取 10 μL 对照品溶液和供试品溶
液进样．三七皂苷 R1、人参皂苷 Rg1 和人参皂苷
Rb1 的保留时间分别为 26． 8，30． 6，55． 5 min，与其
他组分峰分离较好(R ＞ 1． 5) ，理论板数按三七皂
苷 R1 计算在 4 000 以上．
测定谱图见图 3 ～ 6．
1． 3． 3 线性关系考察 分别精密吸取对照品溶液
3，6，9，12，15 μL，依次注入高效液相色谱仪，按上
述色谱条件测定峰面积，以进样量(μg)为横坐标
x，峰面积(A)为纵坐标 y，绘制标准曲线，得标准曲
线回归方程．
三七皂苷 R1 回归方程:y = 258． 59x － 10． 263，
r = 0． 999 1，三七皂苷 R1 的线性范围为 0． 315 ～
1． 575 μg;人参皂苷 Rg1 回归方程:y = 299． 24x +
19． 224，r = 0． 999 8，人参皂苷 Rg1 的线性范围为
1． 203 ～ 6． 015 μg;人参皂苷 Rb1 回归方程:y =
387． 79x － 3． 847，r = 0． 999 6，人参皂苷 Rb1 的线性
范围为 0． 276 ～ 1． 38 μg．
1． 3． 4 仪器精密度考察 精密吸取 10 μL“1． 3．
1”项的对照品混合溶液，重复进样 5 次，计算，得
三七皂苷 R1 的峰面积 RSD = 0． 97%、人参皂苷
Rg1 的峰面积 RSD =0． 86%、人参皂苷 Rb1 的峰面
积 RSD =0． 98% ．可见仪器精密度较好．
表 1 流动相梯度洗脱
Tab． 1 Gradient elution of the mobile phase
t /min φ(A)/% φ(B)/%
12 ～ 60 19 81
12 ～ 60 19→36 81→64
图 3 三七皂苷 R1 对照品 HPLC图
Fig． 3 HPLC chromatograms of notoginsenoside R1 control
solution
图 4 人参皂苷 Rg1 对照品 HPLC图
Fig． 4 HPLC chromatograms of ginsenoside Rgl control so-
lution
图 5 人参皂苷 Rb1 对照品 HPLC图
Fig． 5 HPLC chromatograms of ginsenoside Rb1 control so-
lution
图 6 姜状三七样品 HPLC图
Fig． 6 HPLC chromatograms of Panax zingiberensis solution
302第 2 期 吴其国等:HPLC法测定姜状三七根茎中的人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Rb1 和三七皂苷 R1
1． 3． 5 重复性试验 取同一批药材 5 份，按上述
方法制备供试品溶液，按上述色谱条件测定质量分
数，测得药材中三七皂苷 R1、人参皂苷 Rg1 及 Rb1
的质量分数分别为 0． 710 2% (RSD = 1． 51%) ，
3． 788 7%(RSD = 1． 01%)及 0． 809 1% (RSD =
1． 64%)．说明该方法有较好的重现性．
1． 3． 6 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别于
制备后的 0，4，8，12，16，24 h 依法测定其质量分
数，结果三七皂苷 R1 平均 w = 0． 793 3%，RSD =
1． 77%;人参皂苷 Rg1 平均 w = 3． 775 2%，RSD =
2． 00%和人参皂苷 Rb1 平均 w = 0． 800 3%，RSD =
1． 65% ．表明该溶液在 24 h内基本稳定．
1． 3． 7 加样回收率试验 取 5 份已知质量分数的
同一批药材各约 0． 6 g，精密称定，分别加入一定量
的三七皂苷 R1、人参皂苷 Rg1 和人参皂苷 Rb1 对
照品溶液，同前述方法制备供试品溶液，按上述色
谱条件测定． 得平均加样回收率为三七皂苷
R1101． 4%，RSD = 1． 79%、人参皂苷 Rg198． 54%，
RSD = 1． 90% 和人参皂苷 Rb1102． 10%，RSD =
1． 53% ．说明该方法准确可靠．结果见表 2．
1． 3． 8 样品测定 采用上述色谱条件，分别对不
同产地的药材进行三七皂苷 R1、人参皂苷 Rg1 和
人参皂苷 Rb1 含量的 HPLC分析．结果见表 3．
2 讨 论
姜状三七为五加科人参属植物，其同属植物三
七、人参、西洋参等现已研究得比较深入．姜状三七
由于资源稀少，仅在云南少数地区有种植，国内外对
其研究报道较少［4 － 5］．以前研究发现其根茎中主要
含有齐墩果烷型五环三萜，入药用于跌打损伤，虚痨
咳嗽、外伤出血及贫血等［1］，未见对其达玛烷型四环
三萜皂苷成分(三七皂苷 R1、人参皂苷 Rg1 和人参
皂苷 Rb1 等)进行研究的报道．本文按“1． 3”方法对
姜状三七中三七皂苷 R1、人参皂苷 Rg1 和人参皂苷
Rb1 进行测定，结果显示姜状三七中三七皂苷 R1、人
参皂苷 Rg1 和人参皂苷 Rb1 3 个产地的质量分数分
别为 5． 283 9%、5． 326 2%、5． 492 9%，达到药典中三
七项下规定(三七皂苷 R1、人参皂苷 Rg1 和人参皂
苷 Rb1 质量分数不低于 5%)
［3］．
表 2 姜状三七药材加样回收率测定结果
Tab． 2 Recovery test results of notoginsenoside R1，ginsenoside Rg1 and ginsenoside Rb1 in Panax zingiberensis
测定成分 m取样 /g m样 /mg m加入 /mg m测 /mg 回收率 /%
平均
回收率 /%
RSD /%
三七皂苷 R1 0． 106 6 0． 809 4 1． 02 1． 845 9 100． 9 101． 44 1． 79
0． 101 1 0． 767 7 0． 95 1． 721 7 100． 23
0． 108 9 0． 826 9 0． 93 1． 754 6 99． 87
0． 100 2 0． 760 8 0． 90 1． 734 0 104． 41
0． 103 7 0． 787 4 0． 98 1． 798 7 101． 77
人参皂苷 Rg1 0． 106 6 4． 131 1 3． 12 6． 943 7 95． 76 98． 54 1． 90
0． 101 1 3． 918 0 2． 99 6． 640 7 96． 13
0． 108 9 4． 220 3 3． 13 7． 316 5 99． 54
0． 100 2 3． 883 2 3． 11 6． 735 6 96． 32
0． 103 7 4． 018 8 3． 50 7． 588 7 100． 93
人参皂苷 Rb1 0． 106 6 0． 914 8 0． 92 1． 878 0 102． 35 102． 10 1． 53
0． 101 1 0． 867 6 0． 90 1． 762 5 99． 71
0． 108 9 0． 934 6 0． 95 1． 938 5 102． 86
0． 100 2 0． 859 9 0． 91 1． 846 7 104． 34
0． 103 7 0． 890 0 0． 91 1． 822 0 101． 22
402 云南大学学报(自然科学版) 第 34 卷
表 3 样品含量测定结果
Tab． 3 Determination results of samples
测定成分 产地
w测 /%
1 2 3
w平均 /%
三七皂苷 R1 马关 0． 821 6 0． 857 6 0． 841 0 0． 840 1
金平 0． 694 6 0． 699 2 0． 705 6 0． 699 8
景东 0． 758 6 0． 762 4 0． 756 9 0． 759 3
人参皂苷 Rg1 马关 3． 657 8 3． 647 5 3． 657 3 3． 654 2
金平 3． 8173 3． 869 3 3． 841 8 3． 842 8
景东 3． 8517 3． 893 4 3． 881 2 3． 875 4
人参皂苷 Rb1 马关 0． 745 1 0． 831 7 0． 792 1 0． 789 6
金平 0． 767 8 0． 804 2 0． 778 9 0． 783 6
景东 0． 871 7 0． 847 2 0． 855 6 0． 858 2
研究可见，姜状三七所含达玛烷型四环三萜皂
苷成分很高，能达到《中华人民共和国药典》三七
项下达玛烷型四环三萜成分的含量标准．将来对本
品的开发利用中可以将其所含达玛烷型四环三萜
皂苷成分很好地利用起来．本文方法简便、准确，精
密度和重复性较好，可用于姜状三七中三七皂苷
R1、人参皂苷 Rg1 和人参皂苷 Rb1 的含量测
定［6 － 11］为以后的开发利用及质量标准的制定提供
参考依据．
参考文献:
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Determination of notoginsenoside R1、ginsenoside Rg1 and
ginsenoside Rb1 in Panax zingiberensis by HPLC
WU Qi-guo1，2，FU De-huan1，WANG Li1，GAO Li1，ZHANG Xiao-nan1，LI Wen-yan2
(1． Yunnan Institute of Materia Medica，Kunming 650111，China;
2． Yunnan University of Traditional Chinese Medicine，Kunming 650500，China)
502第 2 期 吴其国等:HPLC法测定姜状三七根茎中的人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Rb1 和三七皂苷 R1
Abstract:A method is established for the determination of notoginsenoside R1，ginsenoside Rg1 and ginsen-
oside Rb1 in Panax zingiberensis． A HPLC method was adopted． The analysis was carried out on all analytical col-
umn C18(50 mm ×4． 6 mm，luna 5 μm)． The flow rate was 1． 0 mL·min －1 and the detective wavelength was
set at 203 mm with column temperature of 30 ℃ ． The mobile phase consisted of acetonitrile － water(gradient elu-
tion)． The linear range was 0． 315—1． 575 μg(r = 0． 999 1)and the average recovery was 101． 4% with the RSD
of 1． 79% for notoginsenoside R1 ． The linear range was 1． 203—6． 015 μg(r = 0． 999 8)and the average recovery
was 98． 54%with the RSD of 1． 9% for ginsenoside Rg1 ． The linear range was 0． 276—1． 38 μg(r = 0． 999 6)
and the average recovery was 102． 1% with the RSD of 1． 53% for ginsenoside Rb1 ． The method is simple，repro-
ducible and suitable for determination of notoginsenoside R1，ginsenoside Rg1 and ginsenoside Rb1 in Panax zin-
giberensis．
Key words:Panax zingiberensis;notoginsenoside R1;ginsenoside Rg1;ginsenoside Rb1;HPLC
＊＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊
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A new tortoise coordination transformation and the thermal radiation of
non － stationary Kerr － Newman － de sitter black hole
LI Guo-ping，JIANG Qing-quan，FENG Zhong-wen，DENG Juan
(Institute of Theoretical Physics，China West Normal University，Nanchong 637009，China)
Abstract:Based on the method of Tortoise coordination transformation(GTCT) ，the thermal radiation of Kerr
－ Newman － de sitter black hole is investigated． First，We make use of the Klein － Gordon function which depic-
ted by the scalar particle，its mass is μ and spin is zero． Then，the thermal radiation spectrum of the dynamic Kerr
－ Newman － de sitter black hole is obtained in two different tortoise coordination transformations． Finally，we can
attain the temperature at the event horizon． Also We find the form of the thermal radiation spectrum with two dif-
ferent tortoise coordination transformations are same，but the value of the thermal radiation spectrum are different．
That different tortoise coordination transformations lead the value is different is the basic reason． Furthermore，we
study the rationality and other related issues of the new tortoise coordination transformation．
Key words:new Tortoise coordination transformation;Kerr － Newman － de sitter black hole;thermal radia-
tion
602 云南大学学报(自然科学版) 第 34 卷
近日，由教育部科学技术司和中国高校科技期刊研究会组织的“2011年中国
高校科技期刊优秀团队和优秀个人评选活动”结束。《云南大学学报（自然科学
版） 》编辑部被教育部科技司评为“中国高校科技期刊优秀团队”，优秀团队
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桂西南三省区唯一获得该荣誉的编辑部。同时本刊编辑部夏元铃被评为“优秀编
辑”，周丽萍被评为“优秀青年编辑”。
近年来，本刊编辑部通过各种方式扩大宣传，在作者中建立良好口碑，稿源
质量不断提高。同时，我们严格控制录用稿件质量，使得本刊的各项指标（影响
因子、总被引频次等）一直位居全国高校科技期刊前列。
这次评比结果也是对我刊学术水平和影响力的充分肯定，我们将在今后的工
作中更加努力，更好的服务于长期关心、支持我们的广大读者、作者。
1《云南大学学报（自然科学版）》是云南大学主办的自然科学综合性学术刊物，于1938年创刊。本刊现
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期刊），并连续三届入选“中国高校精品科技期刊”，是影响因子较高的大学学报。
2 来稿要求和注意事项
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2.3 摘要及关键词 摘要应具有独立性和自明性，用第三人称叙述，阐明研究的目的、方法、结果和
结论，不应出现图表、冗长的数学公式和非公知公用的符号、缩写词语及参考文献号等，字数应在
200～300为宜。关键词3～8个，选取请参照《汉语主题词表》。
2.4 图表 只附最必要的，表格采用三线表格式，图要求用计算机描绘，并且应线条均匀，图形适中，照
片应黑白清晰、层次分明，图中文字、数字符号与文中一致，并标出中英文图（表）题，图、表应按在
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2.5 参考文献 须在文中作标引，文献表按文中出现先后次序编排。格式如下：
期刊：［序号］作者（外文姓前名后，名可缩写，均用大写，列至3名）．题名[J]．期刊名（外文可缩
写），年份，卷号（期号）：起止页码．
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3 来稿如不符合上述要求，将退请作者修改后再送审。
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