全 文 ：高效液相色谱法测定红药胶囊中人参皂苷 Rg1的含量
王仿成 1 ,周文艳2
(1.安徽省岳西县人民医院 ,安徽 岳西　246600;2.合肥康诚科技有限公司 , 安徽 合肥　230023)
摘要:目的　建立一种高效液相色谱法测定红药胶囊中人参皂苷 Rg1的含量。方法　以 ODS-C18为固定相 ,乙腈-0.2%磷酸(20
∶80)为流动相 ,检测波长为 203 nm。结果　人参皂苷 Rg
1
线性范围为 1.0 ～ 20 μg, r=0.999 8,加样回收率为 98.9%, RSD为
0.5%。结论　该方法简便 、可靠 、准确 ,可用于红药胶囊的质量控制。
关键词:高效液相色谱法;红药胶囊;人参皂苷 Rg
1DeterminationofginsenosideRg1 inhongyaocapsulesbyHPLC
WANGFang-cheng1 , ZHOUWen-yan2
(1.ThePeople sHospitalofYuexiCountry, Yuexi246600, China;2.HefeiKangchengTechnologyLtd, Hefei230023, China)
Abstract:Aim　ToestablishanHPLCmethodfordeterminationofginsenosideRg1 inhongyaocapsules.Methods　Inthisstudy, ODS-
C18 wasadoptedasstationaryphasewiththemobilephaseofacetonitrile-0.2%phosphoricacid(20∶80), andthedetectionwavelength
wasat203 nm.Result　ThelinearrangeofginsenosideRg1 was1.0 ～ 20 μg, r=0.999 8.Theaveragerecoverywas98.9%, andRSD
was0.5%.Conclusion　Thismethodissimple, reliable, accurateandcanbeusedasaqualitycontrolofhongyaocapsules.
Keywords:HPLC;hongyaocapsules;ginsenosideRg1
　　红药胶囊由三七 、红花 、当归 、川芎 、白芷 、土鳖虫组成 , 具
有活血止痛 、去瘀生新功效。本制剂参照红药片 [ 1](标准号
WS3-B-3827-98)改变剂型研制而成。制法如下:取淀粉适量 ,
制成淀粉糊 , 加入红花中拌匀浆透 , 于 70 ～ 80℃烘干 , 备用。
将三七等五味药与红花掺匀 ,粉碎成细粉;另取淀粉适量 , 制
成淀粉糊 , 加入上述药粉中 , 制成颗粒 , 干燥 , 装胶囊 , 即得。
原红药片标准中没有含量测定项 , 参照处方及样品的制备工
艺 , 我们选择三七进行含量控制 , 以三七中的有效成分人参皂
苷 Rg1作为含量测定指标。建立了高效液相色谱法测定红药
胶囊中人参皂苷 Rg1含量 , 结果满意。
1　仪器与试药
1.1　仪器　LC-10ATvP高效液相色谱仪(日本岛津公司)、
SPD-10Avp紫外检测器 、浙大 N2000色谱工作站;756PC型紫
外分光光度计(上海光谱仪器有限公司);AL104型电子天平
(梅特勒-托利多仪器有限公司);JL-60型超声波清洗器(上
海杰理科技有限公司);HH-S2型数显恒温水浴锅(金坛市金
城国胜试验仪器厂)。
1.2　试药　乙腈 、甲醇(色谱纯 , 上海试一化学试剂有限公
司);磷酸(分析纯 , 中国医药(集团)上海化学试剂公司);重
蒸水;人参皂苷 Rg1对照品(中国药品生物制品检定所 ,产品
批号:110703-200322);红药胶囊(本医院制剂室研制)。
2　方法与结果
2.1　色谱条件　色谱柱 ODS-C18(4.6 mm×150mm, 5μm);
流动相为乙腈-0.2%磷酸(20∶80);流速为 1.0 ml· min-1;检
测波长为 203 nm;进样量为 20 μl。在该色谱条件下测定 , 人
参皂苷 Rg1的色谱峰保留时间为 23.2 min, 理论塔板数为 8
762, 与相邻杂质峰的分离度大于 1.5。
2.2　溶液的制备
2.2.1　对照品溶液　取人参皂苷 Rg1对照品适量 , 精密称
定 , 加甲醇制成每 1ml含 0.2 mg的溶液 ,即得。
2.2.2　供试品溶液　取本品装量差异项下的内容物,取约 0.45
表 1　加样回收试验结果
取样量
/g
胡薄荷酮
含量 /mg
加入胡薄
荷酮量 /mg
测量总
量 /mg
回收率
/%
0.6176 0.0474 0.04 0.0864 98.86
0.6284 0.0482 0.04 0.0870 98.64
0.6134 0.0472 0.04 0.0850 97.48
0.6180 0.0474 0.04 0.0862 98.63
0.6316 0.0486 0.04 0.0870 98.19
0.6192 0.0476 0.04 0.0858 97.95
4　讨论
在供试品溶液的制备时 ,比较了加热回流与超声提取 , 并
且对提取时间进行了考察 , 挥发油受热易挥发而使测得的结
果偏低 , 所以结果选用超声提取 30 min。 流动相同时比较了
甲醇-水(80∶20)、乙腈-水(30∶70)。结果表明 , 文中选定的流
动相色谱峰形佳 、分离度较好 ,出峰保留时间适度。 HPLC法
测定黄连上清片中胡薄荷酮含量准确 、稳定 、重复性好 ,可用
于对该药的质量控制。
参考文献:
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g, 精密称定 ,加乙醚 25ml, 超声处理 10 min, 滤过 ,取药渣 , 挥
尽乙醚至无乙醚味 , 残渣置具塞锥形瓶中 , 精密加入甲醇 25
ml, 称定重量 ,超声处理 30 min, 放冷 ,再称定重量 , 用甲醇补
足减失的重量 , 摇匀 ,滤过 , 即得。
2.2.3　阴性样品溶液　模拟处方制备不含三七药材的阴性
样品 , 按供试品溶液制备方法制成阴性样品溶液 , 备用。
2.3　检测波长的确定　取人参皂苷 Rg1 ,加甲醇制成每 1 ml
中含 0.1 mg的溶液 ,照紫外分光光度法(中国药典 2005年版
一部附录Ⅳ A),取溶液在 200 ～ 400 nm波长范围内进行扫描。
由光谱图可知 , 人参皂苷 Rg1的最大吸收波长为 205nm。参照
中国药典及相关文献 [ 2 ～5]对人参皂苷 Rg1的检测 ,波长均采用
203 nm, 故本品亦采用 203nm作为检测波长(图 1)。
图 1　紫外吸收光谱图
2.4　方法可行性考察　分别取对照品溶液 、供试品溶液 、阴
性样品溶液各 20 μl,在上述色谱条件下进行测定 , 结果见图
2。结果显示 , 样品色谱图中与对照品色谱峰保留时间 23.2
min处有相应的人参皂苷 Rg1色谱峰 , 而阴性样品在相应位
置处没有吸收峰 , 说明阴性样品不干扰样品中人参皂苷 Rg1
的测定。
对照品　　　　　　　　　　　　　　　供试品　　　　　　　　　　　　　　　阴性样品
图 2　高效液相色谱图
2.5　线性关系考察　精密称取人参皂苷 Rg1 对照品 20.0
mg,置 10 ml量瓶中 , 加甲醇溶解并稀释至刻度 , 摇匀 , 分别精
密量取适量 , 加甲醇稀释并制成每 1 ml中含 0.05、0.1、 0.2、
0.5、 1.0 mg的五种不同浓度溶液。依次精密量取 20 μl注入
液相色谱仪 , 记录峰面积。并以人参皂苷 Rg1峰面积对进样
量进行线性回归 , 得回归方程为 Y=340329X+13134, r=
0.999 8。结果表明 ,人参皂苷 Rg1在 1.0 ～ 20 μg范围内与峰
面积呈良好的线性关系。
2.6　进样精密度试验　精密吸取对照品溶液(0.2 g· L-1)
20 μl, 注入液相色谱仪 , 连续进样分析 6次 , 记录峰面积 , 结
果测得峰面积的 RSD为 0.84%。
2.7　溶液稳定性试验　精密吸取新制备的供试品溶液 ,分别
于 0、2、4、6、8h,各取 20μl进样分析 , 记录峰面积。结果测得
峰面积的 RSD为 0.53%,表明供试品溶液在 8 h内是稳定的。
2.8　样品测定及方法重现性试验　取同一批样品 6份 , 按供
试品溶液制备方法制备 ,并按正文色谱条件分别进行测定 , 样
品中人参皂苷 Rg1的含量分别为每粒 2.76、2.79、2.82、2.54、
2.80、2.78 mg, 平均含量为每粒 2.748 mg, RSD=0.39%。
2.9　加样回收率试验 　取已知含量的样品(产品批号为
070703,每粒含人参皂苷 Rg1 2.748 mg, 平均装量为每粒
0.251 8 g),研细 ,取细粉约 0.22 g,共 6份 ,精密称定 , 加乙醚
25ml,超声处理 10min,滤过 , 取药渣 , 挥尽乙醚至无乙醚味 ,
残渣置具塞锥形瓶中 ,分别精密加入对照品(2.0 g· L-1)1.2
ml, 精密加入甲醇 25 ml,称定重量 , 超声处理 30 min, 放冷 ,再
称定重量 , 用甲醇补足减失的重量 ,摇匀 ,滤过 ,照样品含量测
定方法测定含量 , 分别进行测定 , 计算回收率。结果见表 1。
结果可知 , 平均回收率为 98.82%, RSD=0.57%, 本法测定加
样回收率试验结果良好 ,说明本法准确度高。
3　讨论
中国药典 2005年版一部收载的三七中人参皂苷 Rg1的
含量测定所选用的提取溶剂为甲醇。本文比较了甲醇和水饱
表 1　加样回收率试验结果
编号 取样量/g
样品含量
mg· g-1
测得浓度
g· mL-1
对照品加
入量 /mg
测得量
/mg
回收率
/%
1 0.2237 0.18369 2.4 4.812778 98.81
2 0.2265 0.18532 2.4 4.855384 99.31
3 0.2244 10.9134 0.18478 2.4 4.841236 99.68
4 0.2293 0.18574 2.4 4.866388 98.50
5 0.2281 0.18506 2.4 4.848572 98.30
6 0.2206 0.18197 2.4 4.767614 98.34
和的正丁醇 , 结果甲醇提取的效果明显优于正丁醇 , 且样品中
其他组分不干扰。本试验比较了超声处理 30 min和加热回
流 1 h两种提取方法 , 结果提取效率基本相同。超声处理比
较简便 , 故选用超声处理的提取方法。另外对超声提取时间
进行了 15、20、30、40 min的考察 , 结果 30 min后提取量不再
增加。本试验建立的红药胶囊中人参皂苷 Rg1的高效液相色
谱法 , 与文献报道的方法 [ 3] ,在主峰的保留时间 、理论塔板数
等方面有较大改善 , 且具有快速 、准确 、重复性好等优点 , 可用
于该制剂的质量控制。
参考文献:
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