全 文 ：光果葶苈中硫代葡萄糖苷的提取工艺研究
杨洪升，王长宝，王长平，李春丰，赵瑞艳，程海涛
（佳木斯大学生命科学学院，黑龙江 佳木斯１５４００７）
摘要：目的：通过试验来优化光果葶苈中硫代葡萄糖苷的提取工艺。方法：在单因素试验基础上设计正交试验，对光果葶
苈中硫代葡萄糖苷提取条件进行优化。结果：试验得出光果葶苈硫代葡萄糖苷提取最佳工艺条件为：提取温度８０℃、提取时
间２０ｍｉｎ、提取次数为１次，料液比１：７。结论：该工艺合理可行，可用于光果葶苈中硫代葡萄糖苷的大量提取。
关键词：光果葶苈；硫代葡萄糖苷；提取工艺；正交试验
中图分类号：Ｒ２８２　文献标识码：Ａ　文章编号：１００８－０１０４（２０１４）０４－００３９－０２
　　光果葶苈（Ｄｒａｂａ　ｎｅｍｏｒｏｓａ）为十字花科葶苈属植物，俗
称“猫耳朵菜”。光果葶苈分布于我国的北部，朝鲜、日本、俄
罗斯亦有分布，黑龙江省全省均有分布。十字花科植物硫代
葡萄糖苷含量较多，至今已分离得到１２０多种硫苷，是一类
重要的生物活性物质，它们在抗癌、植物防御等方面有重要
作用［１］。定量研究表明，光果葶苈全草中的硫代葡萄糖苷的
含量高达０．９５％，有较高的开发价值［２］。本研究以提取温
度、提取时间、提取次数、料液比作为研究因素，通过正交试
验对光果葶苈中的硫代葡萄糖苷提取工艺条件进行优化，为
开发抗肿瘤药物及合理利用大型野生植物资源提供理论依
据。
１　材料、仪器和试剂
１．１　材料
光果葶苈采自佳木斯市南郊四丰山。
１．２　仪器
中药粉碎机、电热恒温水浴锅、电子天平、电热恒温鼓风
干燥箱、离心沉淀机、旋转蒸发器、调温电热套。
１．３　试剂
氯化钡（ＡＲ）、醋酸铅（ＡＲ）、乙醇（ＡＲ）、盐酸（ＡＲ）、蒸馏
水等。
２　 试验方法
２．１　预处理
新鲜光果葶苈清净后，放入６０℃烘箱恒温干燥，粉碎过
４０目筛后置于自封袋备用。
２．２　硫代葡萄糖苷的提取
将光果葶苈干燥粉碎后，称重，乙醇加热回流，加入醋酸
铅，静止，抽滤，滤液，加入醋酸钡，过滤，除乙醇，加入氯化
钡、盐酸，９０℃水浴２ｈ，静止过夜，过滤，灰化至衡重，称重，计
算硫代葡萄糖苷含量（采用硫酸根离子沉淀法）。
２．３　单因素试验设计
在其它条件一致的情况下，分别考察提取温度、时间、次
数、固液比对光果葶苈中硫代葡萄糖苷提取的影响程度和取
值范围。
２．４　正交实验设计
选用提取温度、时间、次数、固液比作为研究因素，通过
Ｌ９（３４）正交试验设计，筛选葶苈中硫代葡萄糖苷的最佳提取
工艺。
３　 结果与讨论
３．１　硫代葡萄糖苷提取单因素试验
３．１．１　提取温度的选择
准确称取５ｇ光果葶苈干粉，按照固液比１：７（ｇ／ｍＬ）的
比例加入８０％乙醇，分别于５０、６０、７０、８０、９０℃恒温水浴加
热，提取２０ｍｉｎ，测定硫苷提取量，结果表明温度在５０～
８０℃，随着温度的升高，硫苷的含量逐渐增大，而在温度高于
８０℃条件下硫苷提取量增加幅度不大，可能是高于８０℃条件
下导致了部分硫苷的分解。
３．１．２　提取时间的选择
将光果葶苈干粉按照固液比１：７的比例加入８０％乙醇
溶剂，在８０℃恒温水浴中分别提取１０、１５、２０、２５、３０ｍｉｎ，测
其硫苷提取量，在１０～２０ｍｉｎ，提取时间对硫苷提取量的影响
较大，２０ｍｉｎ时硫苷提取量最大，２０ｍｉｎ以后继续加热，硫苷
和提取溶剂达到了平衡，硫苷含量提高的幅度不大。当提取
时间小于２０ｍｉｎ时间，由于提取时间过短，硫苷不能及时溶
出，所以提取量不高。
３．１．３　提取次数的选择
将光果葶苈干粉按照固液比１：７的比例加入８０％乙醇
溶剂，在８０℃恒温水浴中提取２０ｍｉｎ，分别提取硫苷１、２、３
和４次，测其硫苷提取量，在提取１～２次，提取次数对硫苷
提取量的影响较大，提取２次时硫苷提取量最大，在提取２
次以后继续提取，硫苷提取量变化不明显。
３．１．４　固液比的选择
分别以１：３、１：５、１：７、１：９不同的固液比（ｇ／ｍＬ）加入
８０％乙醇溶剂，在８０℃恒温水浴中提取２０ｍｉｎ，提取２次，测
其硫苷提取量，固液比为１：７时，硫苷的提取量达到最大，随
着提取溶剂的增加，原料中硫苷的提取量变化不明显。这表
明料液比低于１：７时，硫苷不能充分溶出，这时硫苷提取量
随着料液比的增大而增加，当固液比达到１：７的时候，硫苷
接近完全溶出，所以硫苷提取量不会随着固液比的增大而明
显变化。
３．２　硫代葡萄糖苷提取优化的正交试验
根据单因素试验结果，选用提取温度、提取时间、提取次
数及固液比（ｇ／ｍＬ）作为考察因素，以提取液中硫代葡萄糖
苷的含量为考察指标，选用Ｌ９（３４）正交试验，因素水平见表
１，并对结果进行极差分析，见表２。
表１　 正交实验设计
水平
试验因素
Ａ：温度（℃） Ｂ：时间（ｍｉｎ） Ｃ：次数 Ｄ：固液比（ｇ／ｍＬ）
１　 ７０　 １５　 １：５　 １
２　 ８０　 ２０　 １：７　 ２
３　 ９０　 ２５　 １：９　 ３
　　从结果可以得出各因素对提取硫代葡萄糖苷提取率的
主次因素依次为：Ｂ＞Ｃ＞Ｄ＞Ａ，光果葶苈中硫代葡萄糖苷的
提取率最优组合为Ｂ２Ｃ１Ｄ２Ａ２，即提取最佳条件为提取温度
８０℃、提取时间为２０ｍｉｎ、固液比１：７、提取１次。经验证，在
上述最佳提取工艺条件下，从光果葶苈中提取硫苷的总量
１．７６ｕｍｏｌ／ｇ。
４　结论
实验考察了光果葶苈硫代葡萄糖苷提取过程中工艺条
件对提取过程的影响，采用正交试验方法对提取过程的工艺
条件进行了优化，确定了光果葶苈硫代葡萄糖苷提取的最佳
工艺参数为：提取温度８０℃、提取时间为２０ｍｉｎ、固液比１：７、
提取１次，通过验证实验证明所得提取工艺条件可靠。
·９３·ＨＥＩＬＯＮＧＪＩＡＮＧ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　ＡＮＤ　ＰＨＡＲＭＡＣＹ　Ａｕｇ．２０１４，Ｖｏｌ．３７Ｎｏ．４　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　
表２　 硫代葡萄糖苷的正交实验结果
序号 Ａ：温度（℃） Ｂ：时间（ｍｉｎ） Ｃ：次数 Ｄ：固液比（ｇ／ｍＬ） 硫苷含量（μｍｏｌ／ｇ）
１　 １　 １　 １　 １　 １．６３
２　 １　 ２　 ２　 ２　 １．７３
３　 １　 ３　 ３　 ３　 １．２４
４　 ２　 １　 ２　 ３　 １．６５
５　 ２　 ２　 ３　 １　 １．４５
６　 ２　 ３　 １　 ２　 １．５７
７　 ３　 １　 ３　 ２　 １．４０
８　 ３　 ２　 １　 ３　 １．７０
９　 ３　 ３　 ２　 １　 １．１９
Ｋ１ １．５３　 １．５６　 １．６３　 １．４２
Ｋ２ １．５６　 １．６３　 １．５２　 １．５７
Ｋ３ １．４３　 １．３３　 １．３６　 １．５３
Ｒ　 ０．１３　 ０．３０　 ０．２７　 ０．１５
　　参考文献：
［１］李鲜，陈昆松，张明方，等．十字花科植物中硫代葡萄糖苷的研究
进展［Ｊ］．园艺学报，２００６，３３（３）：６７５－６７９
［２］王丽红，刘娟，吴宏斌，等．光果葶苈全草中硫代葡萄糖苷总量的
测定［Ｊ］．黑龙江医药科学，２００８，３１（３）：３５
［３］涂宗财，郭逍遥，刘成梅，等．芥菜中硫代葡萄糖苷提取工艺条件
的优化［Ｊ］．食品与生物技术学报，２００７，２６（６）：９－１２
［４］邓艳美，王红妹，万从庆．青花菜中硫代葡萄糖苷的提取工艺［Ｊ］．
江苏农业科学，２０１３，４１（６）：２５４－２５６
（收稿日期：２０１４－０４－０２）
基金项目：黑龙江省卫生厅科研究项目，编号：２０１１－４５６。
作者简介：杨洪升（１９７９～）男，黑龙江绥化人，硕士，讲师，从事植物资源学研究。
通讯作者：王长宝（１９７２～）男，江苏徐州人，博士，讲师。Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｙ９８５＠ａｌｉｙｕｎ．ｃｏｍ。
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｇｌｕｃｏｓｉｎｏｌａｔｅｓ　ｆｒｏｍ　Ｄｒａｂａ　ｎｅｍｏｒｏｓａ
ＹＡＮＧ　Ｈｏｎｇ－ｓｈｅｎｇ，ＷＡＮＧ　Ｃｈａｎｇ－ｂａｏ，ＷＡＮＧ　Ｃｈａｎｇ－ｐｉｎｇ，
ＬＩ　Ｃｈｕｎ－ｆｅｎｇ，ＺＨＡＯ　Ｒｕｉ－ｙａｎ，ＣＨＥＮＧ　Ｈａｉ－ｔａｏ
（Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ　ｉｎ　Ｊｉａｍｕｓｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉａｍｕｓｉ　１５４００７，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｏｐｔｉｍｉｚｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｇｌｕｃｏｓｉｎｏｌａｔｅｓ　ｆｒｏｍ　Ｄｒａｂａ　ｎｅｍｏｒｏｓａ　ｂｙ　ｅｘｐｅｒｉ－
ｍｅｎｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｗａｓ　ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｂａｓｉｓ　ｏｆ　ｓｉｎｇｌｅ　ｆａｃ－
ｔｏｒ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　ｇｌｕｃｏｓｉｎｏｌａｔｅｓ　ｆｒｏｍ　Ｄｒａｂａ　ｎｅｍｏｒｏｓａ　ｗｅｒｅ
ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　８０℃，ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　２０ｍｉｎ，ｓｏｌｉｄ－ｌｉｑｕｉｄ　ｒａｔｉｏ　１ｇ：７ｍＬ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ｔｉｍｅｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｆｅａｓｉｂｌｅ　ａｎｄ　ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｇｌｕｃｏｓｉｎｏｌａｔｅｓ　ｆｒｏｍ　Ｄｒａｂａ　ｎｅｍｏｒｏｓａ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｄｒａｂａ　ｎｅｍｏｒｏｓａ；ｇｌｕｃｏｓｉｎｏｌａｔｅｓ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ
（上接第３７页）
Ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｐｌａｓｍａ　ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ
ａｎｄ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ
ＧＵＯ　Ｈｏｎｇ－ｆｅｎｇ１，ＴＩＡＮ－Ｂｏ２
（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｔｈｅ　Ｓｅｃｏｎｄ　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｊｉａｍｕｓｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉａｍｕｓｉ　１５４００２，Ｃｈｉｎａ；２．Ｊｉａｍｕｓｉ　Ｄｏｎｇｆａｎｇ
Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｊｉａｍｕｓｉ　１５４００４，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｄｅｔｅｃｔ　ｔｈｅ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　Ｈｃｙ（ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ），ａｎｄ　ｔｏ　ｄｉｓｃｕｓｓ　ｔｈｅ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｈｃｙ　ｉｎ
ｔｈｅ　ｍｏｒｂｉｄｉｔｙ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ　ｓｏ　ａｓ　ｔｏ　ａｎａｌｙｚｅ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｍｏｒｂｉｄｉｔｙ　ｏｆ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ
ａｎｄ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：５４ｃａｓｅｓ　ｏｆ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｎｆａｒｃ－
ｔｉｏｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｆｒｏｍ　ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ　ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｅｃｏｎｄ　ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｊｉａｍｕｓｉ　ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｊｕｎ，２０１１ｔｏ
Ｊｕｎ，２０１２）ｗｅｒｅ　ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ａｓ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ　ｇｒｏｕｐ　ｗｉｔｈ　３６ｍａｌｅｓ　ａｎｄ　１８ｆｅｍａｌｅｓ．２８ｐｅｒｓｏｎｓ　ｗｉｔｈｏｕｔ　ｃａｒ－
ｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ　ａｎｄ　ｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃｕｌａｒ　ｄｉｓｅａｓｅｓ　ｗｅｒｅ　ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｇｒｏｕｐ　ｗｉｔｈ　１５ｍａｌｅｓ　ａｎｄ　１３ｆｅｍａｌｅｓ．
Ｏｒｄｉｎａｒｙ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｄａｔａ　ｏｆ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｒｅｃｏｒｄｅｄ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　ｇｅｎｄｅｒ，ａｇｅ，ｓｍｏｋｉｎｇ　ｈｉｓｔｏｒｙ，ｄｒｉｎｋｉｎｇ　ｈｉｓｔｏｒｙ，
ｄｉａｂｅｔｅｓ　ｍｅｌｉｔｕｓ　ｈｉｓｔｏｒｙ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ（ｔＨｃｙ）ａｎｄ　ＴＧ、ＨＤＬ－Ｃ、ＬＤＬ－Ｃ、ｃｏｎｔｅｎｔ　ｆｏｒ
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０ｓｏｆｔｗａｒｅ．Ｗｈｅｔｈｅｒ　ｔｈｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｈａｖｅ　ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ　ｏｒ　ｗｈｅｔｈｅｒ　ｔｈｅ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｉｎｄｅｘｅｓ
ｅｘｉｓｔ　ｗｅｒｅ　ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：①Ｂｙ　ｃｏｍｐａｉｎｇ　ｏｒｄｉｎａｒｙ　ｄａｔａｓ　ｏｆ　ｐａｔｉｅｎｔｓ，ｆｏｒ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ，
ｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｄｉａｂｅｔｅｓ　ｍｅｌｉｔｕｓ　ｈｉｓｔｏｒｙ、ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ　ｈｉｓｔｏｒｙ、ｓｍｏｋｉｎｇ　ｈｉｓｔｏｒｙ　ａｒｅ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｏｆ　ｃｏｎ－
ｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｈａｓ　ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ．②Ｆｏｒ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ，ＴＧ，ＬＤＬ－Ｃ，
Ｆｇ，ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ　ｏｆ　ｂｌｏｏｄ　ｐｌａｓｍａ，ａｇｅ　ｖａｌｕｅｓ　ａｒｅ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｏｆ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｈａｓ
ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：①Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｈｃｙ　ｆｏｒ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｉｎｃｒｅａｓｅ，ａｎｄ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｈｃｙ　ａｒｅ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｍｏｒｂｉｄｉｔｙ　ｏｆ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ．②Ｉｎｄｅｘｅｓ　ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　ｇｅｎｄｅｒ，ａｇｅ，ｈｙ－
ｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ，ｄｉａｂｅｔｅｓ　ｍｅｌｉｔｕｓ，ｓｍｏｋｉｎｇ，Ｈｃｙ　ａｒｅ　ｈａｚａｒｄｓ　ｗｈｉｃｈ　ｍａｙ　ｃａｕｓｅ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｈｃｙ；ａｔｈｅｏｓｃｌｅｏｒｓｉｓ；ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ
·０４· 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　黑龙江医药科学　２０１４年８月第３７卷第４期