全 文 ：生态科学2002年2月第21卷第l期 Eoo嘲cS 嗍硒．2002，21(1)：050～052
眼点拟微绿球藻生长的生态因子分析
陈洁1蒋霞敏2段舜山1*
(1．暨南大学水生态科学研究所，广州510632；2．宁波大学海洋系，宁波315211)
【摘要】眼点拟微绿球藻(№协，：‰一班拓on止咖)是重要的海水经济藻类，本文研究了温度，光强，盐度，碳因子对藻体生
长的影响，并采用正交实验的方法研究了N，P，Fe三因子对其生长的影响。试验表明：限点拟微绿球藻的生长适温范围
0—30℃，最适温度为20℃；适光范围较广，喜强光，最适光强5000一7000k；在盐度为13．7—33．4范围生长率差别不明
显。最适盐度为26．9；碳源偏喜重碳酸盐。N浓度为10舢l-L～．P浓度为2}咖卜L～，Fe浓度为0．2}曲d·L一1时对该藻
生长最有利。
关键词眼点拟微绿球藻生态因子生长速率
率围分类号：Q178．1，Q949．2108 文献标识码：A 文章编号：lO睁8873(22陀)Ol加删
Alm睁豳0f掣州Ih咖巧0f^i吼帖曲h印曲肿曲由／Chen皿一，腼唧)6蛐抒，D嘲铀岫出蛐】(1．In啦ih她0fAquBticE∞．
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眼点拟微绿球藻(№"M枇n簿jij∞如船)是海产
单细胞经济微藻，属EuBti静mt叩h”e∞，细胞球形或椭
球形，直径1．8—3．6加，，色素体1个，黄绿色，侧生，无
蛋白核，淀粉粒l一3个，细胞壁极薄。细胞含有丰富
的二十碳五烯酸(ⅡA)⋯、蛋白质、维生索等物质，国
际上已经用来生产高纯度EPA产品，用作健康食品和
药品【2J，在水产养殖中也具有良好的应用前景，在江浙
一带泥蚶养殖，斑节对虾、刀额新对虾、中国对虾等育
苗中初步应用已取得了较佳的效果。为探索该藻的最
佳培养条件，作者对其生长所需温度、光照、盐度、碳源
及营养盐等生态因子作了试验，为其更好地进行工业
化大规模生产提供理论依据。
1材料与方法
1．1材料来源
藻种取自宁波大学海洋系藻种室的单种培养。
1．2培养用水
试验用水取自鄞县成祥镇宁波市水产研究所苗种
试验场。经高位暗沉淀，砂滤，经脱脂棉过滤后煮沸消
毒。非营养试验配方均采用MAv(原浙江水产学院宁
波分院3号母液配方)。
1．3实验方法
除特别说明外，各项实验均采用100商三角烧
瓶，培养水体100d，设2个平行组。每天定时搅拌，
xB’X彩型血球计数板计数。每个样品重复计数2
次，取平均值。以x=(19ⅣI—lgⅣ0)／t计算生长率，
式中肌为第r天的细胞数量，Ⅳ0为初始细胞数量。l
为培养天数。
1．3．1生长率曲线测定实验采用1000砌三角烧
瓶，培养水体l000“，设2个平行组，Ⅳ0=8×1旷
cells·IIIl～，温度18—22℃，光照强度5000I)c，光暗比
12：12，I=15d。
1．3．2温度因子实验温度梯度设置为O℃，5℃，
lo℃，15℃，20℃，25℃，30℃，35℃。实验在玻璃缸中
水浴进行，低温以加冰块，高温以QzH型加热恒温器
·遁讯联系人．
第一作者简介：陈洁(1卵8一)。女．暨南大学永生态科学研究所环境辩
学专业磺士研究生，研究方向水污染生态学．Bm捌：dx删e040l@
∞IIll．口n
2∞I．10_儿收稿．2∞2．位．25接受．
万方数据
1期 陈洁等：眼点拟微绿球藻生长的生态因子分析
来进行控制。Ⅳo=91．25×1伊cell·Jl】l-。，自然光照，光
暗比12：12，t=12d。
1．3．3光强因子实验以40w日光灯为光源从三角烧
瓶顶部和侧面照射，光强梯度设置为：l000，2000，
3000，4000，5000，6000，7000lx，皆以圈强lo型照度计
测出光照强度。Ⅳn=328．75×埘ceu·温～，光照强度
5000l】c，平均水温20—25℃，光暗比12：12，t=Iodo
1．3．4盐度因子实验用消毒淡水和Nacl分别调节
培养用水的盐度，共设七个水平梯度：O．O、7．2、13．7、
20．2、26．9、33．4、40．1。Ⅳ0=1．95×l驴oell·lIll～，光照
5000k，平均水温20℃，光暗比12：12，f=10d。
1．3．5碳因子实验设对照、加入NaHC03O．59，加
入Na}Ic鸭29共3个试验组，不同接种密度条件下，进
行了2次试验，平均水温20℃，光照强度5000I)【．光
暗比12：】2。第1次试验Ⅳo=1．6xl驴cell．矗一，￡；
lld，第2次试验‰=9．75×l舻oell．Inl～，l=6d。
1．3．6N、P、Fe三因子正交实验每个因子设置三个
水平进行正交试验，利用k(3”)正交表，见表l。r；
10d，自然光照，平均水温20℃。
表l因子水平表
1曲Ie】I蒯0r缸自m
因子F啦附(x10—6) N(A) “B) Fe(c)
水平1(kvell) l 0．1 O．05
水平2(kveI2) 10 1 0．I
查垩iI坠型22 垫 ! !：1
2实验结果与讨论
2．1生长率曲线测定
生长率3d～个高峰，峰值渐次减小(图I)。第
“d又出现一小高峰，可能是死亡藻体的分解产物被
新生藻吸收，在一定程度上促进其生长，使生长率有所
回升。但培养液的营养盐水平不会因为小部分死亡藻
体分解产生的少量营养盐的补充而大幅上升，因此第
“d的小高峰较前几个峰值都要低。总体来看，，v．
ocu切口生长旺盛，容易培养，利于生产。
1 3 5 7 9 ll 13 15
培养对阃QlI帆醯培(d)
圈1Ⅳ．钟岫的x生长率曲线F191m掣_th触㈣0fⅣ-∞龇
2。2温度实验
该藻的适温范围较广，在0℃一30℃范围内，细胞
数目都有不同程度的增加。35℃时，仅少数个体存活，
生长率出现负值，表明35℃不适合该藻生长。经方差
分析和多重比较，得到温度对Ⅳ．∞如缸生长的影响
高度显著且各水平对其生长的影响差异显著。由此得
出，该藻的适温范围为O一30℃，最适温度为20℃(图
2)。
0．t0
O．伽
O．∞
O．04
O．02
O．∞
O 5 lO 15 20 25 30
温度n唧mnn(℃)
翻2温度对Ⅳ．钟眦生长的影响
Fig2叫l啦峨0fd哦嘣岫np嘣咖盹蚰t№乒佣t110cⅣ．∞岫
2．3光照实验
该藻适光范围较广，1000一7000lx细胞数目都有
所增加，低光照对生长相对不利(图3)。经方差分析
和多重比较，光照对Ⅳ．oal地口生长的影响高度显著，
但5000lx，6000lx，70001]【水平对，v．∞如缸生长影
响的差异不显著。说明该藻喜强光．在实验设置范围
内，最适光强范围是5000～7000lx。
lOOO2Ⅸm3(1∞40∞50∞600070∞
光强ⅡIm；mtlon(蛐
田3光强对Ⅳ．钾础嘲生长的影响
№3瑚Im0f洲枷删椭i咖商她Ⅶthe掣州hofⅣ．卯||正山
2．4盐度单因子实验
该藻的适盐范围较广，0．0—40．1之问均有不同程
度的生长，低盐度与高盐度对藻细胞生长相对不利(图
4)。经方差分析和多重比较，盐度对Ⅳ．om“咖生长
的影响极显著，但盐度13．7、20．2、26．9、33．4对藻生长
影响的差异不显著。Ⅳ．ocu地D的适盐范围为O．0—
40．1，最适范围为13．7—33．4。
2．5碳因子实验
经方差分析，试验l、2中碳因子对Ⅳ．∞比船生
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万方数据
生态科学 21卷
长的影响均极显著。经多重比较，试验1中各水平差异
显著，加入NaHc码29对其生长最有利。而试验2中，
对照、N扭C03O．59、N棚00329对Ⅳ．∞妇缸生长的影
响差异两两不显著。
崔
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刊
n12
O．IO
0．∞
O∞
004
O．02
0．∞
O．O 7．2 13．720．226．933^柏．1
盐度Sal；Ilid∞
图4盐度对Ⅳ．∞龇生长的影响尉94枷Ilen∞0f出fft删荫l“哺墨蚰nt耳佣也0fⅣ·卯妇
口试验I啦pi e11)-试验2(B叩dh啪呲曲
目一。
转
不冗气 N胡O嘎059 “a¨吣强
培养方式cIll如6∞∞fldid叩
图5碳因子对Ⅳ．蚓*船4生长的影响
F．g5瑚uen衅0farb伽血f撕
两组实验结果的不同是由接种密度不同引起的。
试验l中的Ⅳ．—如缸接种密度相对较高，培养液营
养成份消耗大，碳易成为限制因子，因此加入N赶lc03
的组生长相对旺盛，且NaHc鸭的量影响着细胞的增
长速率。试验2中，接种密度相对低，培养液中碳含量
相对充足，短期内不形成限制因素，因此出现此试验结
果(图5)。这说明：Ⅳ．∞出。对碳源的利用偏喜重碳
酸盐。
表2交互作用二元表塑些!望鬯堂堡堂堂
型吐!丛吐 ! ! i
1 —50．00 330．17 595．00
2 —454．58 跚．25 642．25
3 —308．33 2099．25 399．25一
硅百盂j丽疆日i夏根据该表两因素的不同组合，从正交宴验总表中选
取相应组合数值相加得到[=^-BⅡ(cl+也+∞)]a正交实验总表中的
数据为(细胞数目一lO∞)．‰dm舶intabk2骶d七崩¨I协0f一．1日iIlgo盯-∞叩∞di嚷咖I岫0f血edlid讲如删诅b妇把哪0fv鲥叫B伽mK珊匝∞sd
A如Bk协m[=^一巩(cl+＆+o)]‰dm∞dlhedlid酬嘴∞血I出
口e(cdlnm妇一l∞0)．单位恤n：5×一。曲‘IId～
2．6氮、磷、铁浓度三因子正交实验
实验结果经F检验，N因子F=11．84，大大于8．53
(F0ol(2，16))，表明氮浓度对Ⅳ．∞也缸的生长有极
显著影响，而磷与铁浓度对该藻的生长无显著影响。
但氮浓度与碑浓度的交互作用对该藻的生长影响显
著，F=3．66大于3．01(F0∞(4，16))。结合表2、3得出
最优水平组合为：A2岛c3，即氮lO舯1．L-。，
磷2舯d·L～，铁O．2胛l·L～。
表3正交实验结果删e3确曩m0f循山叩叩d矗非曲眦m
因素№ A B C
水平1(kvd1) 一821．9l B66．17 1231．25
水平2(Le词2)2986．67744．蛇 8印．59
坐壬!!望喧≥2 1塑i：竺 !!塑：!! !!婴：丝
注N咖：表中数据是根据单因素的各个水平在正交实验总表中对应的
值相加得剜(∑AIBIq．8=I一3，t=l一3，u=l一3)．1hed岫斟inIIle龇3∞岫础dp晡w“酬咄幽0fk出d“Ⅻ枷汕irIt唧0fodd妇c啪袖aHle池(∑^I珏q，·=l一3，t=l一3．u=l～3)o
3结论
眼点拟微绿球藻是一种广温广盐的种类，适应性
很强．繁殖速度快，藻种不易老化，容易培养。生长适
温范围O。30℃，最适温度20℃；喜强光，最适光强
5000～7000lx；在盐度为13．7～加．1范围内都能生
长。最适盐度26．9；偏喜重碳酸盐型碳源，在培养时加
入№Hc仉效果较好，大规模培养时，如需在短时间内
获得高的产量可以考虑加入Nac吼。N对该藻的生长
以及N与P的交互作用对该藻的生长影响显著，当N
浓度为10脚卜L～。P浓度为2pmol·L～，Fe浓度为
0．2Iml01·L。1时对该藻生长最有利。
近年来，随着人们对藻类优势的认识，特别针对利
用转基因藻类作为高效的生物反应器来进行产品开发
这一前景【3．“，研究发现JIv．oa如缸体积小，结构简单，
生长迅速并且旺盛，作为高效新型生物反应器用于基
因工程的研究具有一定的潜力。
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万方数据
眼点拟微绿球藻生长的生态因子分析
作者： 陈洁， 蒋霞敏， 段舜山
作者单位： 陈洁,段舜山(暨南大学水生态科学研究所,广州,510632)， 蒋霞敏(宁波大学海洋系,宁波
,315211)
刊名： 生态科学
英文刊名： ECOLOGIC SCIENCE
年，卷(期)： 2002,21(1)
被引用次数： 5次

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