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生物技术通报
BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2016, 32(6):193-198
收稿日期：2015-09-16
基金项目：江苏省自然科学基金项目（BK20141248），江苏省高校自然科学重大项目（12KJA210001），连云港市科技局农业攻关项目 
（CN1307），国家级大学生实践创新训练计划项目（G201411641105002），江苏省“十二五”高等学校水产类重点专业项目资助
作者简介：王军强，男，研究方向：生物化工；E-mail ：873941442@qq.com
通讯作者：马桂珍，女，博士，教授，研究方向：抗菌微生物及植物病害生物防治；E-mail ：guizhenma@sohu.com
海洋细菌 L1-9 双抗菌株的定殖能力及其对黄瓜枯萎病
的防治作用
王军强  汪晶晶  王琦  马桂珍  暴增海  王淑芳  周向红 
（淮海工学院化工学院，连云港  222005）
摘 要 ： 采用抗生素标记法，对海洋多黏类芽孢杆菌 L1-9 菌株进行标记，抗性菌株 L1-9
Str，rif 对链霉素和利福平的抗性浓度
分别为 160 μg/mL 和 20 μg/mL。双抗菌株 L1-9
Str，rif 的抑菌特性及其对链霉素和利福平的抗性经多次传代仍比较稳定。盆栽试验表明，
该双抗菌株能在黄瓜根部土壤及根组织、茎基部、子叶和真叶组织中定殖。菌株 L1-9
Str，rif 在黄瓜外根际、根际和根表土壤及黄瓜
组织中的定殖动态基本一致，初期黄瓜组织中 L1-9
Str，rif 菌量较少，随着时间的延长，菌量逐渐增加，达到高峰后逐渐减少。菌株
L1-9
Str，rif 在根表土壤中菌量最多（1.76×109 CFU/g），其次是根际土壤，外根际土壤中菌量较少 ；在黄瓜组织中，菌株 L1-9
Str，rif 其
在子叶中的定殖能力最强（5.63×104 CFU/g），其次是根和茎基部（0-2 cm）；调查至第 26 d 时在根部土壤中的含菌量仍保持在稳
定的水平，其中根表土壤中含菌量最高（2.41×107 CFU/g），在黄瓜组织样品中，子叶中的含菌量最高（4.15×104 CFU/g）；温室防
病实验结果表明，菌株 L1-9 和 L1-9
Str，rif 菌株对黄瓜枯萎病具有良好的防治效果，不同时期防效均达 70 % 以上。上述结果表明来自
海洋的多黏类芽孢杆菌 L1-9 菌株能在黄瓜根部土壤及幼苗组织中定殖，是一株有潜力的黄瓜枯萎病生防菌株。
关键词 ： 海洋细菌 ；多黏类芽孢杆菌 ；抗生素标记 ；黄瓜枯萎病 ；定殖
DOI ：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.06.028
Colonization of Double-resistance Strain of Marine Bacterium L1-9 and
Its Biocontrol Effect on Fusarium Wilt of Cucumber
WANG Jun-qiang  WANG Jing-jing  WANG Qi  MA Gui-zhen  BAO Zeng-hai  WANG Shu-fang   
ZHOU Xiang-hong 
（School of Chemical Engineering，Huaihai Institute of Technology，Lianyungang 222005）
Abstract:  The Paenibacillus polymyxa strain L1-9 of marine bacterium was labeled by antibiotic marker，and strain L1-9
Str，rif showed the 
resistance to rifampicin and streptomycin at the concentrations of 160 μg/mL and 20 μg/mL，respectively. The antibacterial characters of double-
resistance strain L1-9
Str，rif and its resistance to rifampicin and streptomycin were still stable after 10 times subculturing. The pot experiment 
showed that L1-9
Str，rif successfully colonized in cucumber rhizosphere soil，root tissue，stem base，cotyledon，and true leaves. The colonized 
dynamics of L1-9
Str，rif in cucumber ecto-rhizosphere soil，rhizosphere and rhizoplane soil，and cucumber tissues were similar ；the amount of 
L1-9
Str，rif colonized in cucumber tissue was little in the early stage，but increased gradually along with the cucumber growth，and reached a 
peak，then decreased gradually. The amount of L1-9
Str，rif was the most in rhizoplane soil（1.76×109 CFU/g），the followed in the rhizosphere，
while the least in ecto-rhizosphere soil. The detection of L1-9
Str，rif in cucumber tissues showed that it was the most in cotyledons（5.63×104 CFU/g），
followed by its number in roots and stem bases（0 - 2 cm）. The amount of bacteria in the rhizosphere soil was still in a stable level at 26 d，
and the quantity from rhizoplane soil was the highest with 2.41×107 CFU/g. The quantity of bacteria in the cotyledons got the highest of 4.15×104 
CFU/g among cucumber tissue samples. The greenhouse test showed that both strain L1-9 and strain L1-9
Str，rif had favorable control effects on 
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2016,Vol.32,No.6194
应用有益微生物防治植物病害因其环保、安全、
无副作用等优点，已成为植物病害防治的重要手段，
芽孢杆菌培养周期短，易发酵获得而日益成为生防
菌的优势菌源［1］。已报到的生防芽孢杆菌种类主要
有枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、多黏类芽孢杆
菌（Paenibacillus polymyxa）和蜡状芽孢杆菌（Bacillus
cereus）等［2］。但不同菌株的定殖能力不同，具有
较好的定殖能力是生防微生物发挥生防作用的重要
条件之一，其定殖能力的强弱决定着生防作用的大 
小［3，4］。本课题组从连云港海域海泥中分离得到的
多黏类芽孢杆菌 L1-9 菌株及其发酵产物对黄瓜枯萎
病菌（Fusarium oxysporum）等多种植物病原真菌的
菌丝生长和孢子萌发具有强烈的抑制作用，对小麦
根腐霉病和番茄早疫病的防病效果明显，而对大豆、
小麦、黄瓜等作物的种子发芽、出苗和以及幼苗生
长安全，表现出了良好的开发应用前景［5-7］，但该
菌株分离自海洋环境，能否在土壤中定殖是发挥生
防效果的关键。
对环境中的目标生防菌进行定殖检测是检验其
生防潜力的有效方法，其中抗生素标记法［8，9］已
成为研究生防菌在土壤和植物体内定殖规律的一种
简便、经济的方法。该方法一般不会导致原始菌株
重要特性的改变。杨洪凤等［10］、王静等［11］采用抗
利福平标记法研究了内生解淀粉芽孢杆菌（Bacillus
amyloliquefaciens）CC09 菌株和短小芽孢杆菌（Ba-
cillus pumilus）AR03 在小麦叶部和烟草根部及根际
土壤中的定殖规律；游春平等［12］使用利福平和青
霉素双抗标记法证明拮抗细菌 Bio-d5 在香蕉土壤中
有较好的定殖能力。有关来自于海洋的生防菌株的
定殖规律尚未见报道。为了探讨来自海洋生防菌株
在环境中的定殖规律及其生防效果，本研究通过盆
栽试验测定海洋多粘类芽孢杆菌对黄瓜枯萎病的防
病效果，采用双抗标记法明确来自海洋的生防多粘
类芽孢杆菌 L1-9 菌株在黄瓜根及茎、叶内的定殖情
况，旨在为研究海洋细菌 L1-9 菌株的生防作用机理
和效果评价提供理论依据。
1 材料与方法
1.1  材料
1.1.1  供试菌种和培养基  多黏类芽孢杆菌（P.
polymyxa）L1-9 由本实验室从连云港海域潮间带海泥
中分离获得并保存。供试病原真菌黄瓜枯萎病菌（F.
oxysporum）、禾谷镰刀菌（Fusarium graminearum）
和小麦根腐病菌（Bipolaris sorokiniana）由中国农业
科学院植物保护研究所提供，本实验室保藏。
1.1.2  L1-9 菌株培养保藏和抗药性菌株的筛选  培
养基为海水配制的 PDA 培养基：马铃薯 200 g，葡
萄糖 20 g，琼脂 15-20 g，用海水定容至 1 L ；L1-9
种子液和和发酵液的制备培养基为PD：马铃薯200 g，
葡萄糖 20 g，用海水定容至 1 L ；病原真菌活化及抑
菌试验用培养基为淡水配制的 PDA培养基；黄瓜枯
萎病菌扩繁培养基为麦粒砂培养基：麦粒 40 g，水
60 mL，砂 100 g，pH 自然。
1.1.3  抗生素及其溶液的配制  链霉素和利福平购
自上海英潍捷基生物技术有限公司。称取链霉素适
量，置于棕色试剂瓶中，在超净台无菌条件下加入
适量无菌水溶解，用孔径为 0.22 μm 的滤膜过滤，
配制成 200 mg/mL 链霉素母液。同样称取一定量的
利福平，于棕色试剂瓶中加入二甲基亚砜溶解，用
孔径 0.22 μm 的滤膜过滤，配制成 50 mg/mL 利福平
母液，整个过程在黑暗条件下进行。将配好的链霉 
素、利福平溶液装入 EP管中，避光 4℃密封保存。
1.1.4  黄瓜种子及土壤  黄瓜种子：津春四号，购
自连云港市新浦区种子站佳园种子公司。土壤：取
自连云港市花果山脚下新华村种植黄瓜土壤耕作层，
过筛后备用。
1.2  方法
1.2.1  黄瓜枯萎病菌接种物的制备  装有 200 g 麦
粒砂培养基的 250 mL 三角瓶中接种培养 4 d、直径
5 mm 的黄瓜枯萎病菌菌苔 6块，28℃恒温培养 5 d，
fusarium wilt of cucumber with the control efficacy over 70% at different stages. The above results indicated that strain P. polymyxa strain L1-9 
may colonize in cucumber rhizosphere soil and tissues，and present a great potential for the bio-control of fusarium wilt of cucumber.
Key words:  marine bacteria ；Paenibacillus polymyxa ；antibiotic marker ；fusarium wilt of cucumber ；colonization
2016,32(6) 195王军强等：海洋细菌 L1-9 双抗菌株的定殖能力及其对黄瓜枯萎病的防治作用
粉碎按 1∶1比例与无菌细砂混匀，即为黄瓜枯萎病
菌接种物［13］。
1.2.2  海洋多黏类芽孢杆菌 L1-9 菌株抗链霉素和利
福平标记  将液体培养 24 h 的 L1-9 菌株稀释涂布在
含有 5 μg/mL 链霉素的 PDA培养基上，28℃培养 24 
h，长出的单菌落再以同样的方法，接种到含有 10 
μg/mL 链霉素的 PDA 培养基上，逐步提高链霉素的
浓度，直到 L1-9 菌株不能生长，筛选出抗最高浓度
链霉素的 L1-9 菌株突变菌株。采用同样的方法，将
筛选出的抗最高浓度链霉素的 L1-9 菌株依次接种
在含高浓度链霉素，并同时加入不同浓度利福平的
PDA 培养基上，筛选出同时抗高浓度链霉素和高浓
度利福平的 L1-9 双抗菌株，在双抗培养基传代培养
10 代，测定双抗菌株的抗菌作用传代稳定性。
平板对峙培养法测定 L1-9 菌株的双抗菌株对
禾谷镰刀菌（F. graminearum）、小麦根腐菌（B.
sorokiniana）及黄瓜枯萎菌（F. oxysporum）等植物
病原真菌的抑制作用，并测定双抗菌株的抗性传代
稳定性。
1.2.3  L1-9 标记菌株发酵液的制备  L1-9 标记菌
株在含链霉素和利福平的 PDA 斜面上培养 24 h 
后，用 PD 培养液洗下菌苔，制备浓度为 5 ×108 
CFU/mL  的菌悬液作为种子液，按 8% 的接种量
接种到装有 50 mL 含链霉素和利福平的 PD 培养
液的 250 mL 三角瓶中，在转速 180 r/min，28℃
下振荡培养 24 h，制备成浓度为 109 CFU/mL 的菌 
悬液［13］。
1.2.4  标记菌株 L1-9
Str，rif 在土壤和黄瓜根、茎、叶
组织中的定殖及防病效果  采用室内盆栽试验的方
法，L1-9 标记菌株和原始菌株发酵液分别与土壤混
和，使土壤中 L1-9 标记菌株和原始菌株的含量为
109 CFU/g，分别为处理 1 和处理 2，以等量的 L1-9
标记菌株发酵培养基和 PD 培养基为对照 1（CK1）
和对照 2（CK2），每个口径为 10 cm 的营养钵装土
200 g，播种黄瓜种子 5粒，采取上覆下垫方式接种
黄瓜枯萎病菌接种物5 g，每个处理和对照播种50盆，
播种当天开始，每隔 3 d 取黄瓜根际、外根际和根
表土壤以及黄瓜根组织、茎、子叶和真叶组织，每
次取黄瓜 5 株。采集根际土及根表土参考涂璇等人
的方法［14］。
1.2.4.1  根际土  将同一处理的黄瓜幼苗轻轻拔起，
稍微抖动下，使根上大块土壤脱落，用无菌纸包裹，
轻轻揉搓，使依附在根上的土壤落在无菌纸上，充
分混匀后即为根际土。
1.2.4.2  根表土及根组织  将取过根际土的黄瓜根
系剪下，称质量为 m1，后放入装有石英砂和 99 mL
无菌水的三角瓶中，在摇床上室温振荡 30 min 后
取出根系，用吸水纸将其周围的水分吸干后，称
得质量为 m2，即为根系的质量。根表土的质量
m=m1-m2。
采用含有链霉素和利福平的 PDA平板对抗性菌
株进行回收，分别测定各样品中 L1-9 标记菌株的菌
落数。出苗 1 周后开始，每隔 6 d 调查黄瓜枯萎病
的发病率，计算防病效果。
防病效果 =（对照的发病率 -处理的发病率）/ 对
照的发病率 *100%。
2 结果
2.1  L1-9菌株的抗性标记
2.1.1  抗链霉素菌株的筛选  L1-9 菌株在链霉素浓
度为 0-100 μg/mL 的 PDA 平板上生长较好，菌落密
集；浓度为 120-150 μg/mL 时，菌落较稀疏，出现
了单菌落，浓度为 160-180 μg/mL 时，出现明显的
单菌落，平板上的数量在 10 以下，链霉素浓度高于
180 μg/mL 时，L1-9 菌株不能生长，结果见表 1。
表 1 L1-9 菌株在不同浓度链霉素平板上的生长情况
链霉素 / 
（μg·mL-1）
L1-9 菌株 
生长情况
链霉素 / 
（μg·mL-1）
L1-9 菌株 
生长情况
0 +++ 140 ++
20 +++ 150 ++
40 +++ 160 +
60 +++ 170 +
80 +++ 180 +
100 +++ 190 -
120 ++ 200 -
130 ++
注：+++ ：菌落密集，生长旺盛；++ ：菌落稀疏，出现可数单菌落；+：
出现明显的单菌落，平板上的数量在 10 以下；- ：无菌落生长
将在浓度为 160-190 μg/mL 链霉素的平板上生
长的 L1-9 菌株单菌落接种到含有高浓度链霉素的平
板上连续培养，观察不同时间 L1-9 菌株的生长情况。
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2016,Vol.32,No.6196
实验结果表明在链霉素浓度为 190 μg/mL 时无菌落
长出，浓度为 180 μg/mL 时，培养 24 h 和 48 h 无菌
落长出，培养 72 h 有少量 L1-9 菌株菌落长出，菌落
较小，生长较弱；在链霉素浓度为 160 和 170 μg/mL
的平板上，L1-9 菌株在 48 h 长出较好菌落，连续观
察菌落生长相对稳定。 因此，选择链霉素浓度为
160 μg/mL 作为 L1-9 菌株抗链霉素最佳浓度，用于
进行抗利福平菌株的筛选。
2.1.2  抗链霉素 L1-9 菌株抗利福平的筛选  抗链霉
素浓度为 160 μg/mL 的 L1-9 菌株在含有不同浓度利
福平的平板上，随着利福平浓度增加长出的菌落数
量明显减少，利福平浓度为 10、15、20 μg/mL 的平
板上 L1-9 菌株生长良好，利福平浓度高于 20 μg/mL
时 L1-9 菌株不能生长。通过抗生素浓度梯度筛选得
到的 L1-9 菌株双抗菌株命名为 L1-9
Str，rif，对链霉素
和利福平的抗性浓度分别为 160 μg/mL 和 20 μg/mL。
2.1.3  双抗菌株 L1-9
Str，rif 的抗药、抑菌和传代稳定
性  L1-9
Str，rif 菌株在双抗培养基上连续转接传代 10
次，仍然生长良好，生长特性稳定，与原始菌株无
差别；不同转接代数对供试的禾谷镰刀菌、小麦根
腐病菌和黄瓜枯萎病菌具有较强抑制作用，抑菌带
宽度无明显差异（表 2）。表明 L1-9
Str，rif 菌株具有良
好的遗传稳定性，可用于后续定殖研究。
表 2 双抗菌株 L1-9Str，rif 连续转接 10 代对不同病原真菌的
抑菌带宽度（mm）
传代 
次数
禾谷镰刀菌 
（F. graminearum）
小麦根腐病菌 
（B. sorokiniana）
黄瓜枯萎病菌 
（F. oxysporum）
0 42±1.00 52±1.73 45±1.00
1 44±0.00 48±1.00 43±1.00
2 41±1.00 53±2.00 45±1.73
3 43±1.00 51±1.73 46±2.00
4 46±2.00 53±1.73 40±2.00
5 42±1.73 49±1.00 45±1.00
6 48±2.65 47±1.00 42±2.00
7 45±1.00 50±1.73 45±1.00
8 49±1.00 48±1.00 42±2.00
9 46±1.00 48±2.00 45±1.00
10 44±2.00 50±1.73 46±1.73
2.2  L1-9
Str，rif菌株对黄瓜枯萎病的防治作用
从表 3 可以看出，标记菌株 L1-9
Str，rif 和原始菌
株 L1-9 在不同调查时期对黄瓜枯萎病均有较好的防
病效果，防效均高于 70 %，两菌株对黄瓜枯萎病的
防病效果无明显差别。
表 3 L1-9 双抗菌株对黄瓜枯萎病的防治作用
处理
7 d 13 d 20 d 26 d
病情指数 防效 /% 病情指数 防效 /% 病情指数 防效 /% 病情指数 防效 /%
CK1 6.31a - 22.85a - 32.52a - 52.33a -
处理 1 1.56b 75.28a 4.32b 81.09a 8.65b 73.40a 15.18b 70.99a
CK2 5.85a - 23.13a - 30.82a - 51.64a -
处理 2 1.42b 75.73a 4.36b 81.15a 9.1b 73.56a 15.16b 70.64a
注：同一栏中不同字母代表 Duncan’s 多重比较差异显著（P ≤ 0.05）
2.3  L1-9
Str，rif菌株在黄瓜根际土壤和组织中的定殖
2.3.1  在黄瓜根部土壤中的定殖  用 L1-9 原始菌株
处理土壤的处理 2 以及相应的 L1-9
Str，rif 菌株发酵培
养基和 PD培养基对照组（CK1 和 CK2）处理的土壤，
在双抗平板上均未分离到 L1-9 菌株；用 L1-9 双抗菌
株发酵液处理土壤的处理 1，在黄瓜幼苗根系的各
部位土壤中均分离到了 L1-9 菌株，说明 L1-9 菌株已
被成功标记，且双抗菌株可用于海洋细菌 L1-9 菌株
定殖规律研究。
从图 1 可以看出，L1-9
Str，rif 菌株在根际、外根
际和根表的定殖趋势不同。总体根表土壤中的菌量
最高，可达 1.76×109 CFU/g，其次是根际土壤，外
根际土壤中的菌量较少。接种后 0-7 d 的根际、外
根际和根表土壤中 L1-9
Str，rif 菌株的数量明显下降，
但 7 d 后根表土壤的菌量开始增加，第 10 天菌量达
到最高，为 1.76×109 CFU/g，其后开始减少，第 23
天菌量较少；与根表相比，根际和外根际土壤中标
记菌株的数量增加较为缓慢，从 10 d 后才有所增加，
第 13 天菌落数才得到最高，分别为 2.88×108 CFU/g
和 8.24×107 CFU/g，其后逐渐减少。
2016,32(6) 197王军强等：海洋细菌 L1-9 双抗菌株的定殖能力及其对黄瓜枯萎病的防治作用
2.3.2  在黄瓜组织中的定殖  从图 2可知，从不同时 
期的黄瓜根、茎基部组织中均可以检测到 L1-9
Str，rif，
在不同部位黄瓜组织中的定殖趋势类似。0-4 d 不
同部位组织的菌量较小，4 d 后逐渐增加，至第 13
天、16 天、20 天根、子叶和茎（0-2 cm）中的菌量
分别达到最高，分别为 1.61×104 CFU/g，5.63×104 
CFU/g，1.89×104 CFU/g，随后开始缓慢下降，随
后趋于平稳。至第 23 天，L1-9
Str，rif 菌株在子叶中的
含菌量仍然保持较高水平，说明 L1-9
Str，rif 菌株在黄
瓜组织中具有好的定殖能力。但 L1-9
Str，rif 在不同组
织中的菌量和达到高峰的时间明显不同。L1-9
Str，rif 
在子叶中的菌量最高，其次是根和茎基部 0-2 cm 组
织，在茎基部 2-4 cm 组织中较少，在真叶的含菌量
最低。
才能在实际生产中具有使用意义。生防菌的定殖能
力与其自身遗传学特性和根部的分泌物相关，同时
受植物和土著微生物种类及根际复杂的土壤环境等
因素影响［15］。研究生防菌在植物根部的定殖能力，
有助于认识生防细菌的作用机制，提高生防细菌的
防治效果。
赵新海等［16］研究发现多黏类芽孢杆菌 LICC 
10427 在黄瓜叶面和土壤中第 5天达到最大定殖量，
分 别 为 2.3×106 CFU/g 和 1.6×107 CFU/g， 在 20-
30 d 抗性菌株的数量基本上趋于稳定，分别保持在
0.9×106 CFU/g 和 0.9×107 CFU/g。海洋细菌 L1-9 菌
株在根表土壤，根际土壤和外根际土壤中菌量最高
分别为1.76×109 CFU/g，2.88×108 CFU/g和8.24×107 
CFU/g 明显多于 LICC 10427 菌株在土壤中的定殖量；
而根、子叶和茎基部（0-2 cm）等黄瓜组织中的菌
量最高分别为 1.61×104 CFU/g，5.63×104 CFU/g 和
1.89×104 CFU/g 比 LICC 10427 菌株在黄瓜叶面的定
殖量小，定殖量不同可能与环境和拮抗菌自身因素
有关。本研究结果显示至第 26 天时 L1-9 菌株在根
部土壤中保持在相对稳定的水平，其中根表土壤中
含菌量最高（仍可达 2.41×107 CFU/g），在黄瓜组织
样品中，子叶的含菌量最高（4.15×104 CFU/g），与
LICC 10427 菌株的定殖结果相一致，都在 20 d 后定
殖量基本上趋于稳定。
黄瓜枯萎病是一种维管束病害，枯萎病菌从根
部侵染黄瓜，然后沿维管束向上转移，因此该病害
是一种比较难防治的病害。镰刀菌非致病株 F047
之所以具有较高的防效，其中一个重要原因就是该
菌株可在植株内定殖，并且具有和枯萎病菌一样的
生态位点，竞争枯萎病菌的营养和生态位点，从而
抑制病原菌的扩展［17］。许多内生菌，如拮抗菌 bio- 
d5、内生菌 01-144 和内生菌 BPT-18 不仅能在植物
表面的附着位点扩展、繁殖，而且能在植物体内转移，
并对特定部位有所偏好，表现出较强的亲和定殖能
力，对维管束病害表现出良好的防治作用［18，19］。 
本研究中海洋细菌 L1-9 菌株不仅可以在黄瓜
根部土壤中很好定殖，而且可以在黄瓜组织中定
殖，并随着植株的生长从根向茎、叶转移，表明海
洋细菌L1-9菌株具有较强的定殖能力和环境适应性。
该菌株对黄瓜枯萎病防治效果也比较明显（可达
9.5
9.0
8.5
8.0
7.5
7.0
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6.0
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图 1 双抗菌株 L1-9Str，rif 在黄瓜土壤中的定殖规律
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茎基部24 cm
茎基部02 cm
根
子叶
真叶
图 2 不同时期黄瓜组织样品中 L1-9 菌株的分离结果
3 讨论
生防菌能在根围成功定殖是发挥生防作用的第
一步，只有能够在土壤和植物根部中定殖的生防菌
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2016,Vol.32,No.6198
70%）。关于海洋细菌 L1-9 菌株在田间环境条件下的
适应性和对黄瓜枯萎病的防治效果尚需进一步明确。
4 结论
海洋多黏类芽孢杆菌 L1-9 菌株能在黄瓜根部土
壤及幼苗组织中定殖，在根部土壤中根表土壤含菌
量最高，第 7 天达最大 1.76×109 CFU/g，在其根、
茎基部和子叶等幼苗组织中子叶的含菌量最高，第
16 天达最大为 5.63×104 CFU/g ；至第 26 天时在根
部土壤中的含菌量仍保持在较高的水平，其中根表
土壤中含菌量最高（2.41×107 CFU/g），在黄瓜组织
样品中，子叶中的含菌量最高（4.15×104 CFU/g）；
对黄瓜枯萎病具有较高的防治效果，达 70 % 以上，
是一株有潜力的黄瓜枯萎病生防菌株。
参 考 文 献
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（责任编辑  李楠）