全 文 ：生态科学2006年4月第25卷 第2期 ECOLOGICSCIENCEApr．，2006，25(2)：128～130
微藻叶绿素荧光值与传统生长指标的关联性研究
任永霞，徐 宁，段舜山8(暨南大学水生生物研究中心，广州510632)
【摘要】 利用TD．700型叶绿素荧光仪测定了6种不同海洋和淡水微藻，即锥状斯氏藻(＆啦筘据讹们c向oj出口)、球
形棕囊藻(尸俺疗PDc”凰加60sd)、三角褐指藻(尸协口PD如c叫甜m护f∞M“f踟)、眼点拟微绿球藻(Ⅳa门甩oc^ZD心口括oc“肠招)、四
列藻(死f，铘P砌括胞胞砌g彪)和雨生红球藻(日a绷口fDcDcc螂p，“v妇凰)的叶绿素荧光值，同时采用经典方法同步测定其细胞
密度和叶绿素a含量。统计分析结果显示，微藻细胞密度、叶绿素a含量、叶绿素荧光值三者之间具有显著或极显著的
正相关关系。因此，利用叶绿素荧光仪测定微藻生物量的方法是切实可行的，具有快捷方便、灵敏度高的优点。
关键词：叶绿素荧光值：生物量；叶绿素a；细胞密度
中图分类号：X173 文献标识码：A 文章编号：l008．8873(2006)02．128．03
ThestudyofusingTD一700Fluorometertodeterminethebiomassofmicroal2al
REN1rbng．xia，XUNing，DUANShun．shan宰(ResearchC nteofHydrobio】ogy，JinanUniversity，Guangzhou510632，China)
AbstractSixmicroalgaes，incIuding。S0，栅矗已盯臼f，口c矗Df锄，乒凌口PDcv，舾加60艿口， 鳓口Poc兹cfl∥“搬＆誓∞，7z“f“m，
JⅣa门珂。幽，o加琊括oc“肠缸。尼f，日sP砌括招f陀腑P把and月矗已mdfococc螂p，“v肠凰werestudied．Theirnuor scentvalueofdi腑rent
kindsandconcentrationsofm croalgaeswerdetemlinedwithusingTD-700Fluorometer．ComparedwitllcellcountingaIld
chlorophvll．acontentmeasure，itshowsaverygood1inearinterrelationbetweenm celldensity，chlorophyH—ac ntenta d
fluorescentvalue．SothemethodusingTD．700Fluorometertodetemlinethemicroalgalbiomassisaquickandreliablemethod
whichanreduceanificialerror，increasehighconsistencyandoperationalsimplicit)r．
Kevwords：Fluorometer；Biomass：Chlorophyll-a：Celldensity
微藻生物量的测定是藻类生理生态学研究中的常
规测定指标。微藻生物量的测定方法很多，如细胞计
数法、干重测定法、叶绿素a含量测定法、浊度法、最
大比生长率法等llj。实验室最常用的方法是细胞计数
法和叶绿素a含量测定法。细胞计数法虽然简单易行，
可粗略反应微藻的生长情况，但是工作量大，费时费
力，且重现性差，误差也比较大12J。叶绿素a含量测定
法大多采用分光光度法。MsokiIlIley(1941)提出利用分
光光度法测定叶绿素a含量，以有机溶剂丙酮作为提取
液，减少了工作量，1949年经Amon解释和推导以来，
丙酮法就作为Amon法在国际上被广泛应用至今p】。但
是，叶绿素a含量测定法操作繁琐，耗费时问长，不利
于多样品的连续测定【2J。叶绿素分子被紫外光照射后
可发射出特征红色荧光，其荧光强度与叶绿素浓度成
正比[4】，荧光法逐渐成为测定叶绿素a含量的常规分析
方法，而且具有灵敏度高、选择性好的优点。随着仪
器分析技术的飞速发展，荧光仪已经成为微藻研究不
可缺少的仪器之一。TD一700型叶绿素荧光仪是专为测
量含有不同荧光物质(包括叶绿素)的不连续样品而
设计的小型实验室荧光仪，通过设定标准后，可以在
直接浓度模式下直接读出样品的浓度，快捷而且方便。
本文利用TD一700型叶绿素荧光仪测定了6种海洋和淡
水微藻的叶绿素荧光值，并与经典的细胞计数和叶绿
素a含量测定法进行比较，用以研究叶绿素荧光法在微
藻生物量测定中的可行性及其适用范围。
1材料与方法
1．1实验材料
选取6种不同门类的海洋和淡水微藻：锥状斯氏
藻(＆，_嘲粥把砌抛c乃Df锄)(甲藻)、球形棕囊藻
(砌口∞t”出g，06Dsa)(定鞭藻)、三角褐指藻
(砌口PD妣砂觑m护fcoMzfm肌)(硅藻)、眼点拟微绿球藻
(^切朋刀Dc向幻徊筇西Dc甜肠幻)(金藻)、四列藻(死舭玷P砌括
胞抛砌P彪)(绿藻)和雨生红球藻(f砌绷口fDcocc淞
p励砌胁)(绿藻)，均由暨南大学水生生物研究中心藻
种室提供。
1．2实验方案
利用人工海水或蒸馏水将指数生长期的微藻稀释
成7个密度梯度，使其叶绿素a含量介于0～250肛g·L。
之间，分别测定其叶绿素荧光值、细胞密度和叶绿素
a含量，利用颗粒计数仪CASY固．Technology测定微藻
的细胞体积。对实验结果进行统计分析。
收稿日期：2006．01．17，2006一03—20接受
基金项目：国家自然科学基金(30370231)；广东省科技计划重点引导项
目(2005833201001)；珠海市科技计划重大项目fPB20041018)．
作者简介：任永霞(198l一)，女，硕士研究生，主要从事藻类生理生态
学研究。E—mail：xi“iarcn@126．com
}通讯作者：电话：020．85223192．E．mail．tssd啪@jnu．edu，cn
万方数据
万方数据
130 生态科学 25卷
表3 微藻的叶绿素a与细胞密度的直线回归分析
Table3 Comparisonofregressionequationandrelative
coeffiaientR‘ofmicroalgaeschlorophyll—acontentdcell
畦旦翌!i生
藻名 回归方程 R2 P值
Species RegressionRelative
皇g坠垒!i垒望 !竺壁垒!曼!曼望!
锥状斯氏藻 Chl．a= 0．9420<0．05
(Scrippsiellatrochoidea)133．9D+88．546
球形棕囊藻 Chl．a= 0．9871 <0．05
f砌aeocyst括globosa)0．3785D+9．8597
三角褐指藻 Chl．a=0．9853<0．05
(Phaeodactylumtricornutum)1．447lD+0．1413
眼点拟微绿球藻 Chl．a= 0．9862<0．01
(Nannochloropsisoculata)0．5479D．0．4659
四列藻 Chl．a=0．9870<0．01
(Tetraselmistetrethele)345．48D+2826．7
雨生红球藻 Chl=0．9996<0．01
(Haematococcuspluvialis)29．748D一9t．364
表4不同藻种单个细胞叶绿素a含量
雹!垒!皇璺旦旦i!曼望!垒!壁!壁巳塾Z!!：璺!壁坠!竺坠!Q!壁i!堕盟望!璺堕璺!
藻种名称(学名) 单爪细胞(xl鬻)稽量
Species Unicellch 孟嚣菊一；content
锥状斯氏藻
(Scrippsiellatrochoidea)
球形棕囊藻
(Phaeocystisglobosa)
三角褐指藻
(Phaeodactylumtricomutum)
眼点拟微绿球藻
(Nannochloropsisoculata)
四列藻
(Tetraselmistetrethele)
541．08
4．49
5．28
0．37
68．22
雨生红球藻
219．89
(Haematococcuspluvialis)
系(图1)。因此，在叶绿素荧光仪的标准设定中，可根
据微藻细胞密度和单个细胞叶绿素a含量计算出藻液的
叶绿素a浓度，并直接设定叶绿素a浓度标准。这样，叶
绿素荧光仪的读数即可直接反映藻液的叶绿素a浓度。
3 结论
3．1不同微藻的叶绿素荧光值(F)分别与细胞密度
(D)、叶绿素a含量(Chl．矗)之间呈正相关关系，
而且细胞密度(D)与叶绿素a含量(Chl．a)之间也
存在正相关关系。
0 2000 4000
不同微藻的平均细胞体积(帅3)
( Averagecellvolumeofdifferentki dsof
microalgaes
图1不同藻种细胞体积与叶绿素a含量的关系曲线
Fig．1Relationshipbetweenaveragevolumeandchlorophyil-a
contentofdifferentmicroalgaes
3．2单位细胞叶绿素a含量与细胞体积之间具有正相关
关系，叶绿素荧光值可直接反映藻液的叶绿素a浓度。
3．3利用叶绿素荧光仪测定藻类生物量，方法简便，结
果可靠，是一种非常简便、有效的测定方法。
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万方数据
微藻叶绿素荧光值与传统生长指标的关联性研究
作者： 任永霞， 徐宁， 段舜山， REN Yong-xia， XU Ning， DUAN Shun-shan
作者单位： 暨南大学水生生物研究中心,广州,510632
刊名： 生态科学
英文刊名： ECOLOGIC SCIENCE
年，卷(期)： 2006,25(2)
被引用次数： 4次

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