全 文 ：延边大学医学学报　2008 年 6 月　第 31卷　第 2期
[ 收稿日期] 　2008-03-26
＊[ 通讯作者] 　罗惠善(1964—), 女(朝鲜族), 副教授 , 硕
士 , 研究方向为天然药物活性成分分析.
正交设计法优选翻白草中总黄酮的提取工艺
金泉 ,廉丽花 ,罗惠善＊
(延边大学药学院 , 吉林 延吉 133000)
[ 摘要] 　 [目的] 探讨翻白草中总黄酮的最佳提取工艺.[方法] 采用正交设计法以提取物中总黄酮含
量为评价指标 ,以乙醇浓度 、提取时间 、固液比及提取次数为考察因素 ,筛选翻白草的最佳提取工艺.应
用分光光度仪测定提取物中总黄酮的含量.[ 结果] 最佳提取条件为在乙醇浓度为 700 mL/ L ,固液比为
1∶12 ,提取时间为 150 min , 提取 2 次 ,其中乙醇用量为主要影响因素.[ 结论] 所优选的提取工艺合理 ,
操作简便 ,可行.
[ 关键词] 　黄酮类;提取工艺;植物 ,药用
[ 中图分类号] 　R 284.2　　　[ 文献标识码] 　A　　　[ 文章编号] 　1000-1824(2008)02-0091-02
Optimization of extraction process of total flavonoids from the Potentilla
discolor Bunge by orthogonal design
JIN Quan , LIAN Li-hua , LUO Hui-shan＊
(Yanbian University College of Pharmacy , Yan ji 133000 , J i lin , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To study the optimum ex traction technique of to tal f lav onoids in the Potent il la
discolor Bunge .METHODS Using orthogonal design , to tal f lav onoids in ex t ract w as as evaluat ion index ,
and ethanol concentration , ex t ract ion time , rat io o f mate rial to solvent and ex tration f requency we re as
inspecting facto rs to screened the optimum ex traction technique , and to tal flavonoids content in ex t ract
w as detected by spect rophotog raphy .RESULTS The optimum ex tracting conditions were that the ethano l
concentration w as 700 mL/L , rat io of material to solvent 1∶12 , ex t raction t ime 150 min , and ext raction
pro cess w as tw o times , in w hich the ethanol do se w as impo rtant inf luencing factor.CONCLUSION This
pro cedure is convenient , appropriate and feasible.
Key words:flavones;ex t ract ion techno logy;plants , medicinal
　　翻白草为蔷薇科委陵菜属(Potenti l la discolor
bge)干燥全草 ,全草含鞣质 ,植株各部分均含有黄酮
类化合物[ 1] .它具有抗溃疡 、解痉 、消炎及降血脂等
功能 ,广泛应用于制药及食品加工业[ 2] .本实验对影
响翻白草黄酮提取的主要因素进行了正交试验 ,以
黄酮含量为指标 ,采用方差分析法进行分析 ,筛选了
翻白草的最佳提取工艺 ,为进一步开发利用翻白草
提供了依据.
1　材料
原料为翻白草全草 ,于 2005年 6月采集于吉林
省延边朝鲜族自治州铜佛寺镇 ,经延边大学药学院
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DOI :10.16068/j.1000-1824.2008.02.004
Journal of Medical Science Yanbian University　Jun.2008 Vo l.31 No.2
生药学教研室吕惠子副教授鉴定为翻白草正品.芦
丁购自中国药品生物制品检定所;电子天平为上海
精密科学仪器有限公司产品 , REE-52 C 型水浴锅为
北京市医疗设备总厂产品 ,紫外分光光度仪为上海
精密科学仪器有限公司产品;所用试剂均为 AR级.
2　方法与结果
2.1　对照品溶液的制备及标准曲线的绘制　精密
称取 105 ℃条件下干燥至恒质量的芦丁对照品
10.0 mg ,用 700 mL/L 乙醇溶解定容于 100 mL 容
量瓶中 ,即得质量浓度为 0.10 g/L 的芦丁对照品溶
液.精确吸取芦丁对照品溶液 0 , 1 , 2 , 3 ,4 ,5 mL ,分
别置于25mL 容量瓶中 ,各加入 50 g/ L 亚硝酸钠溶
液 1.0 mL ,摇匀 ,放置 6 min ,加入 100 g/L 硝酸铝
溶液 1.0 mL ,摇匀 ,放置 6 min ,再加入 40 g/L 氢氧
化钠溶液 10 mL , 加入 700 mL/L 乙醇至刻度 , 摇
匀 ,放置 15 min ,于 510 nm 处测定吸光度[ 3 , 4] .得回
归方程 y=7.745 7 x+0.000 9(r=0.999 6),芦丁质
量浓度在 20 ～ 50 mg/ L 范围内 ,与峰面积呈良好的
线性关系(图 1).
图 1　芦丁标准曲线
2.2　翻白草中总黄酮提取量的测定　精确称取翻
白草 100 g 置于锥形瓶中 ,按比例加入一定量的提
取溶剂回流提取总黄酮 ,在 80 ℃条件下回流提取一
定时间 , 流水冷却后过滤 , 合并过滤液 , 定容至
100 mL ,即得总黄酮提取液[ 5 , 6] .精确吸取总黄酮提
取液 1.0 mL 置于 100 mL容量瓶中 ,按标准曲线的
要求测定吸光度 ,通过标准曲线得总黄酮含量.
2.3　翻百草中总黄酮提取工艺的正交试验　主要
对乙醇浓度(A)、提取时间(B)、固液比(C)及提取
次数(D)等 4个因素进行四因素三水平 L 9(34)正交
试验 ,考察因素和水平见表 1 ,结果见表 2及表 3.由
表 2中 k 1 , k 2 ,k 3 , R分析见 ,乙醇浓度 、提取时间 、
固液比和提取次数 4个因素对总黄酮提取率影响的
主次顺序依次为乙醇浓度 、提取时间 、固液比 、提取
次数 ,最佳提取条件为在乙醇浓度为 700 mL/L .
表 1　因素水平表
水平 A/(m L/ L) B/ h C D/次
1 600 1.5 1∶8 1
2 700 2.0 1∶10 2
3 800 2.5 1∶12 3
表 2　正交实验设计及结果
试验号 A B C D 总黄酮/(g/kg)
1 1 1 1 1 118.9
2 1 2 2 2 125.3
3 1 3 3 3 129.9
4 2 1 2 3 168.4
5 2 2 3 1 187.1
6 2 3 1 2 188.9
7 3 1 3 2 69.0
8 3 2 1 3 72.3
9 3 3 2 1 72.0
k 1 12.470 11.877 12.670 12.600
k 2 18.147 12.823 12.190 12.733
k 3 7.110 13.027 12.867 12.353
R 11.037 1.150 0.677 0.420
表 3　方差分析结果
方差来源 偏差平方和 自由度 F 值＊ P 值
A 182.762 2 367.730 <0.05
B 2.260 2 4.547 >0.05
C 0.727 2 1.463 >0.05
D 0.267 2 0.537 >0.05
＊ F0.05(2 , 2)=6.940
2.4　最佳条件重复性验证试验　为证实上述筛选
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法提取工艺的稳定性 ,以优选工艺 ,重复进行 3次实
验 ,测定翻白草总黄酮平均提取量为 18.94 g/kg ,
RSD为 0.19%,提示该工艺稳定 ,重复性好.
3　讨论
正交实验结果表明 ,在乙醇热浸提取翻白草中
总黄酮时 ,各因素对提取量的影响大小依次为乙醇
浓度 、提取时间 、固液比及提取次数 ,其中乙醇浓度
的影响最大.在选定的水平范围内 ,随着回流温度和
固液比的增大 ,提取量亦提高 ,但由于本试验中使用
的固液比值较大 ,提取充分 ,故对翻白草总黄酮提取
量的影响较小.从极差分析中可直观见 ,乙醇提取翻
白草总黄酮的最佳工艺条件是 A 2B3 C 3D 2 ,即乙醇
浓度为 700 mL/ L , 固液比为 1 ∶12 , 提取时间为
150 min ,提取 2次 ,以最佳提取工艺测得翻白草中
总黄酮含量为 189.4 g/kg.
[参　考　文　献]
[ 1] 　钟海军.翻白草的化学成分[ J] .中草药 , 2000 , 31(70):
488.
[ 2] 　邹俊利.翻白草的研究进展[ J] .黑龙江医药科学 ,
2006 , 29(4):104.
[ 3] 　许松姬 ,韩春姬 , 许妍姬.轮叶党参降血脂保健饮料中
总黄酮的含量测定[ J] .延边大学医学学报 , 2007 , 30
(2):111.
[ 4] 　金泉 ,廉丽花 , 罗惠善.紫外分光光度法测定翻草中总
黄酮的含量[ J] .延边大学医学学报 , 2007 , 30(4):262.
[ 5] 　张彩霞 ,董相军 , 胡凤祖.正交试验优选珠芽蓼果实中
总黄酮提取工艺[ J] .中国药房 , 2008 , 19(3):186.
[ 6] 　宋秋烨 ,陈梅 , 吴启南.淡竹叶中总黄酮提取工艺研究
[ J] .中国中医药信息杂志 , 2007 , 14(3):46.
■延边大学 医学系 2004 级学生
[ 收稿日期] 　2008-04-25
＊[ 通讯作者] 　贺永贵(1974—), 男 , 讲师 , 硕士 , 研究方向
为应用生理学.
核桃叶水提取物对小鼠炎症及免疫功能的影响
许青松 ,陈新用■ ,宋卫锋■ ,兰艳 ,贺永贵＊
(延边大学基础医学院 生理学与病理生理学教研部 长白山生物功能因子省部共建重点实验室 ,吉林 延吉 133000)
[ 摘要] 　 [目的] 探讨核桃叶水提取物对小鼠炎症及免疫功能的影响.[ 方法] 采用二甲苯致小鼠耳壳
肿胀 、植入棉球致小鼠肉芽组织增生和免疫器官称取质量等方法观察核桃叶水提取物对小鼠炎症和免
疫功能的影响.[ 结果] 核桃叶水提取物可明显抑制因二甲苯所致的小鼠耳壳肿胀 , 提高小鼠脾脏质量
比.[ 结论] 核桃叶水提取物具有抗炎作用.
[ 关键词] 　抗炎剂(中药);植物 , 药用;小鼠
[ 中图分类号] 　R 285.5　　　[ 文献标识码] 　A　　　[ 文章编号] 　1000-1824(2008)02-0093-03
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