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(收稿日期:2012-01-14)
* 基金项目:内蒙古自治区高等科学技术研究项目(NJ10185) ;国家自
然科学基金项目(81102760)。
蒙古扁桃药材中总黄酮提取及含量测定*
石松利 白迎春 程向晖 钮树芳 王登奎 张桂莲
(包头医学院药学院，内蒙古 包头 014060)
摘 要 目的:利用索氏提取器提取蒙古扁桃药材中总黄酮，并建立总黄酮的测定方法。方法:以乙醇为溶剂，利用
索氏提取器提取蒙古扁桃药材中总黄酮;以芦丁为对照品，用亚硝酸钠及硝酸铝在碱性溶液中显色，采用可见分光光度
法，在 510 nm波长处测定吸光度。结果:在 4 ～ 40 μg /mL 的浓度范围内，芦丁的含量与吸光度呈良好的线性关系，
y = 1． 0 018x － 0． 004 4，R2 = 0． 999 3(n = 5)。蒙古扁桃种仁中总黄酮含量为 1． 44 %，稳定性 RSD = 1． 55 %，精密度
RSD = 1． 52 %;平均回收率为 103． 1 %，RSD = 1． 4 %。结论:该方法操作简便、快速、准确、稳定性较好，可作为检验蒙
古扁桃中总黄酮含量的一种手段，适用于蒙古扁桃药材的日常分析和质量控制。
关键词 蒙古扁桃;总黄酮;提取;含量测定
蒙古扁桃(Amygdalus mongolica) ，蒙名为乌兰 －
布衣勒斯，隶属蔷薇科扁桃属旱生落叶灌木［1］，为蒙
古高原特有的阿拉善荒漠种［2］，是集食用、药用、工业
用、生态、经济、社会效益为一体的优良的木本油料树
种［3］。蒙古扁桃是传统的中药材，以种仁入药，性苦，
味平，主治咽喉干燥、干咳及支气管炎、阴虚便秘。能
润燥滑肠、利尿，主治大便燥结、水肿、脚气等症。
黄酮类化合物是许多中草药的有效成分，具有抗
肿瘤、抗心脑血管疾病、抗炎镇痛、免疫调节、降血糖、
治疗骨质疏松、抑菌抗病毒、抗氧化、抗衰老、抗辐射、
清除自由基等多种作用［4 － 5］。近年来，黄酮类化合物
以其广谱的药理作用［6］倍受青睐，人们对含有黄酮的
化合物进行大量研究，以期获得黄酮含量较高的中草
药。因此，黄酮的含量测定成为研究的关键步骤［7］。
本文旨在通过可见分光光度法测定蒙古扁桃药材中总
黄酮含量，为其药理研究以及开发利用提供实验依据。
1 材料
1． 1 仪器 T6 －新悦紫外分光光度计(SHIMADZU
Corporation) ;数显恒温水浴锅 HH － 6(常州澳华仪器
械有限公司) ;JY1201 型电子天平(上海民桥精密科学
仪器有限公司) ;索氏提取器。
1． 2 试药 石油醚、80 %乙醇、芦丁标准品、5 %亚
硝酸钠、10 %硝酸铝、4 %氢氧化钠等所有试剂均为
分析纯。蒙古扁桃药材采自内蒙古阿拉善荒漠区，经
内蒙古大学生命科学学院王迎春教授鉴定为蔷薇科扁
桃属植物蒙古扁桃。
2 方法与结果
2． 1 样品溶液的制备 取蒙古扁桃干果仁去核，在
60 ℃下干燥恒重;精密称取干燥蒙古扁桃仁 2 g，粉碎
21 包 头 医 学 院 学 报 第 28 卷
后，用滤纸包好，置于索氏提取器中;用石油醚 60 mL、
60 ～ 90 ℃水浴回流脱脂 2 次，每次 2 h;然后用 80 %
乙醇回流提取 2 次，每次 2 h，至溶液无色;另用少量
80 %乙醇多次洗涤蒙古扁桃种仁，并入提取液中，置
200 mL容量瓶中，加 80 %乙醇至刻度，摇匀，即得总
黄酮样品溶液。
2． 2 对照品溶液的制备 精密称取芦丁标准品
20 mg，加 80 %乙醇，定容至 100 mL 容量瓶中，即得
0． 2 mg /mL的标准品溶液。
2． 3 测定波长的确定 精密量取芦丁标准品溶液和
总黄酮样品溶液各 1 mL，分别置于 10 mL 容量瓶中，
加 5 %亚硝酸钠摇匀，放置 6 min 后加 10 %硝酸铝，
摇匀放置 6 min，加 4 %氢氧化钠，再加蒸馏水定容，摇
匀，放置 15 min。置于比色皿中，以试剂空白作为参
比，在波长 400 ～ 700 nm 之间进行扫描，结果，芦丁标
准品溶液与总黄酮样品溶液在 510 nm处，均有最大吸
光度值，因此确定 510 nm为最大吸收波长。
2． 4 标准曲线的绘制 精密吸取芦丁对照品
0． 0 mL、0． 2 mL、0． 4 mL、0． 8 mL、1． 0 mL、2． 0 mL，分
别置于 10 mL容量瓶中，加 5 %亚硝酸钠 0． 3 mL，放
置 6 min，再加 10 %硝酸铝 0． 3 mL，放置 6 min，加
4 %氢氧化钠 4 mL，加水至刻度，摇匀。进行全波长
扫描，在 510 nm处均有最大吸收。以测定结果计算得
回归方程为 y = 1． 001 8x － 0． 004 4，R2 = 0． 999 3，在
4 ～ 40 μg /mL的浓度范围内，浓度与吸收度有良好的
线性关系。
2． 5 样品含量测定 精密吸取 1 mL 待测溶液 5 份，
按照标准曲线制定项下方法操作，测定吸收度 A，由回
归方程求出样品溶液中总黄酮的含量。结果，蒙古扁
桃种仁中总黄酮的含量为 1． 44 %。
2． 6 稳定性试验 取样品溶液 1 mL，按制作标准曲
线方法操作，对同一显色后的样品溶液，于 0 min、
15 min、30 min、45 min、60 min、75 min、90 min、
105 min、120 min 测定其吸光度，结果吸光度在 2 h 内
无明显差异，RSD = 1． 55 %，表明显色后的供试液在
2 h内稳定性良好。
2． 7 精密度试验 取同一份样品溶液测定 5 次，
RSD = 1． 52 %，表明本法精密度好。
2． 8 加样回收试验 精密吸取一定量的已知浓度样
品溶液 5 份，各加入一定量的对照品，按照标准曲线制
定项下方法分别显色并测量其吸光度值。结果其平均
加样回收率为 103． 1 %，RSD = 1． 40 %。
3 讨论
本实验以乙醇为溶剂，利用索氏提取器提取蒙古
扁桃药材中总黄酮，以分光光度法测定其含量，最大吸
收波长为 510 nm，最佳显色条件为:5 % 亚硝酸钠
0． 3 mL、10 %硝酸铝 0． 3 mL、4 %氢氧化钠 4． 0 mL。
通过线性关系考察、精密度、重复性、稳定性试验表明，
分光光度法测定蒙古扁桃中总黄酮的含量准确性高、
重现性好，方法具有快速、经济、简便的优点，加样回收
率高，可作为测定蒙古扁桃多糖含量的一种手段，适用
于蒙古扁桃药材的日常分析和质量控制，为大规模提
取、开发黄酮类化合物及进一步挖掘蒙古扁桃药用植
物资源的临床价值提供理论和实验依据。
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(收稿日期:2011-10-21)
31第 1 期 石松利，等．蒙古扁桃药材中总黄酮提取及含量测定