全 文 ：　分析测试
化 学 工 程 师
Sum 154No.7　　　 　　　　　　　　　　　　　　 　Chemical　Engineer　 2008年 7月
收稿日期:2008-05-14
作者简介:鞠福龙(1966-), 男 ,黑龙江五常人 ,硕士 , 高级工程师 ,黑
龙江省质量监督检测研究院院长 , 主要从事食品科学与食
品安全研究。
　　　　　　文章编号:1002-1124(2008)07-0026-02
翻白草中三萜类化合物含量的
液相色谱分析
鞠福龙 1 ,王佳祥 1 ,孟令云 2 ,杨玲 2
(1.黑龙江省质量监督检测研究院 ,黑龙江哈尔滨 150050;2.哈尔滨市职工医学院 ,黑龙江 哈尔滨 150080)
摘　要:本文建立了同时测定翻白草中齐墩果酸和熊果酸含量的方法———高效液相色谱法 ,色谱柱为
C18(4.6mm×250mm, 5μm),流动相为乙腈∶1.4%磷酸水溶液(72∶28),流速为 1.50mL· min-1 , 检测波长
为 210nm, 柱温 30℃。结果表明 ,齐墩果酸和熊果酸的加样平均回收率分别为 97.30%和 97.71%, RSD分
别为 2.42%和 2.33%。说明本方法适用于检测翻白草中的齐墩果酸和熊果酸。
关键词:翻白草;液相色谱;齐墩果酸;熊果酸
中图分类号:O657.7　　　　　文献标识码:A
AnalysisofcontentoftriterpenecompoundinPotentilaDiscolorBgebyHPLC
JUFu-long1 , WANGJia-xiang1 , MENGLing-yun2 , YANGLing2
(1.QualitySupervisionandTestinginstituteofHeilongjiangProvince, Harbin150050, China;
2.HarbinStafMedicalColege, Harbin150080, China)
Abstract:AdeterminationmethodwasestablishedforoleanolicacidandmalolbyHPLC.Thechromato-
graphiccolumnwasC18(4.6mm×250mm, 5μm), themobilephasewasacetonitrile:1.4% phosphorusacid
(72∶28), theflowratewas1.5mL· min-1 andthedetectionwave-lengthwassetat210nm, thecolumntem-
peraturewas30℃.Theresultsshowedthattheaveragerecoveryofoleanolicacidandmalolwere97.30% and
97.71%.RSDwas2.42% and2.33%.Themethodissuitableforthedeterminationofoleanolicacidandmal-
ol.
Keywords:PotentillaDiscolorBge;HPLC;oleanolicacid;malol
　　翻白草又名鸡腿儿 ,为蔷薇科植物翻白草(Po-
tentilaDiscolorBge)的干燥全草 ,多年生草本 。它
资源丰富 ,遍及全国各地 ,生于丘陵坡地 ,山野草丛
中 。古方 《草木便方 》等均报道它有清热 、凉血解
毒 、止血 、消肿之功能;现代医学研究表明 ,它有抗
菌 、止泻 、增强免疫和降血糖作用 。从翻白草中分
离的成分有没食子酸 、原儿茶酸 、黄酮类化合物和
三萜类化合物等 ,其中三萜类化合物齐墩果酸和熊
果酸具有广泛的药理作用 。为此 ,利用高效液相色
谱法(HPLC法)对翻白草中齐墩果酸和熊果酸含量
进行了测定 。
1　实验部分
1.1　仪器与材料
Waters-600高效液相色谱仪 (美国 Waters公
司);Waters-2487紫外检测器(美国 Waters公司);
N2000色谱工作站(浙江大学);FW80微型高速万
能试样粉碎机(河北省黄骅市新兴电器厂);RE52A
旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);KQ5200超声
波清洗器(昆山市超生仪器有限公司)。
水为超纯水;乙腈为色谱纯;其他试剂均为分
析纯;齐墩果酸和熊果酸(中国药品生物制品检定
所);翻白草样品:1#(哈尔滨)、2#(河北)、3#(山
东)。
1.2　方法
1.2.1　样品处理　将供试样品干燥后粉碎混匀 ,
准确称取 10.000g样品 ,置于 250mL的碘量瓶中 ,
加入 85%乙醇试剂 100mL,静置过夜 ,次日超声波
提取 10min,静止后将上清液倒入 1000mL烧杯中 ,
然后再向碘量瓶中加入 50mL85%乙醇 ,超声波提
取 20min,静止后将上清液倒入先前的 1000mL烧杯
中 ,重复 8次后 ,提取液变得澄清透明 ,将烧杯中的
提取液用布氏漏斗进行抽滤 ,再次润洗烧杯后抽
滤 ,最后将碘量瓶中的提取液残渣抽滤 ,润洗后再
DOI :10.16247/j.cnki.23-1171/tq.2008.07.025
2008年第 7期 鞠福龙等:翻白草中三萜类化合物含量的液相色谱分析
抽滤 ,合并所有抽滤液 ,将合并后的抽滤液浓缩定
容至 250mL容量瓶中。
1.2.2　标准溶液的配制　准确称取标准品齐墩果
酸 0.0526g, 用甲醇溶解并定容到 100mL, 浓度为
526μg· mL-1标准齐墩果酸储备液。准确称取标准
品熊果酸 0.0179g,用甲醇溶解并定容到 100mL,浓
度为 179μg· mL-1标准熊果酸储备液。准确吸取
两种标准贮备溶液配成标准系列 ,见表 1。
表 1　标准溶液浓度与峰面积
齐墩果酸标样浓度 /mg· L-1 0 2.63 5.26 10.52 21.04 42.08
齐墩果酸峰面积(Sec) 0 315047 620094 1220187 2296525 4780748
熊果酸标样浓度 /mg· L-1 0 3.58 7.16 14.32 57.26 114.56
熊果酸峰面积(Sec) 0 72865 158737 273362 1053448 2084896
1.3　色谱测定条件和检测波长
色谱柱为 C18(250mm×4.6mm, 5μm);其流动
相为乙腈∶1.4%磷酸水溶液 =72∶28;流速为 1.
50mL·min-1;色谱进样量为 20μL;柱温为 30℃;检
测波长为 210nm;检测器灵敏度为 0.2000AUFS[ 2] 。
1.4　标准工作曲线与线性关系
将配制的系列标准溶液 ,在上述色谱条件下进
行测定 ,以浓度为横坐标 ,以峰面积为纵坐标 ,绘制
标准曲线。齐墩果酸线性回归方程为:Y=7385+
112698x, r=0.9997;熊果酸线性回归方程为:Y=
12976+18110x, r=0.9999。
1.5　精密度试验
精密吸取齐墩果酸(10.52μg· mL-1)和熊果
酸(14.32μg· mL-1)对照品溶液 20μL按上述色谱
条件连续进样 6次进行测定 ,齐墩果酸和熊果酸峰
面积积分值的相对标准偏差 RSD=0.89%和 RSD
=0.99%。
1.6　重现性实验
精密称取 1#样品 5份 ,依 1.2.1法制备 ,在上
述色谱条件下分别进行测定 ,测定齐墩果酸结果分
别为 557.19、532.22、550.38、541.23、553.09mg·
kg-1 , RSD=1.84%。测定熊果酸结果分别为 445.
63、436.10、423.69、430.11、435.23mg· kg-1 , RSD
=1.86%。
1.7　稳定性试验
取 1#样品提取溶液 ,每隔 1.5h进样一次 ,共进
样 6次 ,按上述色谱条件分别测定 ,峰面积积分值
的 RSD=0.95%(n=6)。
1.8　加样回收率试验
精确称取翻白草样品(1#)6份各 10.000g置于
碘量瓶中 ,分别精密吸取齐墩果酸和熊果酸标液于
碘量瓶中 ,见表 2,然后按 1.2.1法制备供试液 ,最
终定容至 250mL,按上述色谱条件操作 ,测定齐墩
果酸和熊果酸的回收率结果见表 2。
表 2　齐墩果酸和熊果酸加样回收率测定结果
编
号
添加量齐
/μg
测得量齐
/μg
回收率
/%
RSD
/%
添加量熊
/μg
测得量熊
/μg
回收率
/%
RSD
/%
1
# 2630
2630
2679
2499
101.86
95.02
2238
2238
2134
2195
95.35
98.08
2
# 5260
5260
5106
5086
97.07
96.69 2.42
4475
4475
4295
4311
95.98
96.34 2.33
3
# 7890
7890
7650
7593
96.95
96.23
6712
6712
6803
6659
101.32
99.21
1.9　样品的测定结果
分别精密吸取样品的提取液各 20μL注入液相
色谱仪中 ,依据上述方法测定 ,用标准曲线法计算
样品中齐墩果酸和熊果酸的含量。测定结果见表
3。
表 3　样品的测定结果
编
号
称样量
/g
S齐
(Sec)
X齐
/mg·kg-1
X平均齐
/mg·kg-1
S熊
(Sec)
X熊
/mg· kg-1
X平均熊
/mg·kg-1
1
# 10.022
10.012
2524690
2409465
557.19
532.22 544.70
336502
329268
445.63
436.10 427.08
2
# 10.031
10.011
2339266
2401784
517.28
530.57 523.92
153259
143854
193.56
180.47 187.02
3
# 9.998
10.001
579362
590312
126.91
129.30 128.10
1525756
1672611
2088.74
2290.82 2189.78
2　结论
从测定结果看 , 3种产地的翻白草的样品均含
有齐墩果酸和熊果酸 ,因为地域不同 ,含量各异。 3
种翻白草中齐墩果酸的含量在 128.10 ～ 544.70mg
· kg-1之间 ,以哈尔滨产地的翻白草含量最高 ,熊果
酸的含量在 187.02 ～ 2189.78mg· kg-1 ,以山东产
地的翻白草含量最高 。三萜类化合物的含量在
710.94 ～ 2317.88mg· kg-1 ,以山东产地的翻白草
含量最高 。三萜类化合物中的齐墩果酸和熊果酸
有降血脂的作用 。本实验测定出翻白草中三萜类
化合物齐墩果酸和熊果酸的含量 ,为进一步研究翻
白草的降血脂作用提供了科学依据 。
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