全 文 ：北方园艺２０１６（１７）：１０３～１０６ ·生物技术·
第一作者简介：梁伟玲（１９７０－），女，河北邯郸人，实验师，现主要从
事园艺植物组织培养等研究工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｗｌｓｒｘ＠１６３．ｃｏｍ．
基金项目：邯郸市科技局资助项目（１３２７１０１０７１－２）。
收稿日期：２０１６－０４－２９
ＤＯＩ：１０．１１９３７／ｂｆｙｙ．２０１６１７０２４
欧李优系试管苗增殖关键技术研究
梁 伟 玲，卢 彦 琦，陈 翠 果，刘 艳 芬
（河北工程大学 农学院，河北 邯郸０５６０２１）
　　摘　要：以欧李优系试管苗为试材，采用单因素试验设计，研究了不同生长调节物质组合、基
本培养基类型、附加物和蔗糖浓度对试管苗生长状态和增殖效率的影响。结果表明：在 ＭＳ＋
６－ＢＡ　０．５ｍｇ·Ｌ－１＋ＫＴ　０．５ｍｇ·Ｌ－１＋ＩＢＡ　０．０５ｍｇ·Ｌ－１培养基上，附加水解乳蛋白（ＬＨ）
３００ｍｇ·Ｌ－１、蔗糖３５ｇ·Ｌ－１、琼脂５．８ｇ·Ｌ－１，为欧李优系试管苗增殖的最佳培养条件。
关键词：欧李；试管苗；增殖；关键技术
中图分类号：Ｓ　６６２．３０３．６　文献标识码：Ａ　文章编号：１００１－０００９（２０１６）１７－０１０３－０４
　　欧李（Ｐｒｕｎｕｓ　ｈｕｍｉｌｉｓ）属蔷薇科李属落叶小灌木，是
我国特有的第３代小水果。因果实中活性钙元素极为
丰富，商品名又称“中华钙果”［１］。欧李种子繁殖苗变异
大，分株繁殖系数低，扦插繁殖受季节影响不易生根。
利用组织培养是快速繁殖欧李优良苗木的有效方
法［２－７］。欧李组培苗增殖期间，会出现玻璃化［６］、茎尖枯
黄［７］等问题，是制约试管苗生长和快速增殖的关键因
素。现以河北工程大学试验基地欧李优系当年生茎段
为外植体，诱导腋芽形成不定芽丛后，在试管苗增殖期
间，研究不同生长调节物质组合、基本培养基类型、附加
物和蔗糖浓度等方面对试管苗生长状态和增殖系数的
影响，确定其最适的增殖培养条件，以期为欧李优系规
模化快速繁殖提供技术支持。
１　材料与方法
１．１　试验材料
供试材料为河北工程大学实习基地引自河北涉县
山地的欧李优系植株，２０１４年４月取半木质化茎段做外
植体培养的试管苗用于后续试验。
１．２　试验方法
将欧李试管苗丛剪成含３～４个不定芽的芽丛，转接到
各处理培养基，每瓶转接不定芽丛４～５个。４周后观察各
处理的生长状况，统计平均增殖系数。若无特殊说明，每
处理的培养基中均含蔗糖３０ｇ·Ｌ－１、琼脂５．８ｇ·Ｌ－１，
ｐＨ　５．８。培养温度２５℃，培养箱光照强度３　０００ｌｘ。
１．２．１　生长调节物质的筛选　选择ＭＳ为基本培养基，
添加不同浓度６－ＢＡ、ＫＴ和ＩＢＡ进行组合。试验共设
６个处理，每处理接种１０～１２瓶，３次重复。统计各处理
试管苗的增殖系数和生长状况。
１．２．２　基本培养基的筛选　基本培养基分别选用 ＭＳ、
改良ＭＳ（铁盐和ＫＨ２ＰＯ４均增加１／４倍）、Ｂ５，每种基本
培养基均添加６－ＢＡ　０．５ｍｇ·Ｌ－１、ＫＴ　０．５ｍｇ·Ｌ－１、
ＩＢＡ　０．０５ｍｇ·Ｌ－１，每处理接种２２～２５瓶。
１．２．３　附加成分的筛选　在ＭＳ＋６－ＢＡ　０．５ｍｇ·Ｌ－１＋
ＫＴ　０．５ｍｇ·Ｌ－１＋ＩＢＡ　０．０５ｍｇ·Ｌ－１培养基中，分
别添加水解乳蛋白（ＬＨ）１００ｍｇ·Ｌ－１、水解乳蛋白
（ＬＨ）３００ｍｇ·Ｌ－１、马铃薯汁５０ｍｇ·Ｌ－１、马铃薯汁
１００ｍｇ·Ｌ－１、ＡｇＮＯ３２ｍｇ·Ｌ－１、ＡｇＮＯ３５ｍｇ·Ｌ－１，以
不加附加物为对照。每处理接种２２～２５瓶。
１．２．４　光照强度的筛选　在前期试验的基础上，选择
３个光照强度２　５００、３　０００、３　５００ｌｘ，分别全光照和光周
期１６ｈ·ｄ－１，共６个处理，每处理接种２２～２５瓶。
１．２．５　蔗糖浓度的筛选　在ＭＳ＋６－ＢＡ　０．５ｍｇ·Ｌ－１＋
ＫＴ　０．５ｍｇ·Ｌ－１＋ＩＢＡ　０．０５ｍｇ·Ｌ－１＋ＬＨ　３００ｍｇ·Ｌ－１
培养基中，分别添加蔗糖３０、３５、４０ｇ·Ｌ－１，共３个处理，
每处理接种２５瓶。
１．３　数据分析
试验数据采用ＳＰＳＳ统计软件分析。
２　结果与分析
２．１　生长调节物质的确定
将欧李试管苗转接到含有不同浓度生长调节物质
组合的培养基上，生长状况与增殖系数有明显不同。由
表１可知，处理１和处理２不定芽发生数量少，增殖系数
低。随着６－ＢＡ和ＩＢＡ浓度的提高，增殖系数有显著提
高，但试管苗开始出现玻璃化现象。处理３、４、５、６的增
殖系数均与前２个处理达到差异显著水平，但各处理均
有不同程度玻璃化现象。为保证试管苗有较高增殖系数
３０１
·生物技术· 北方园艺２０１６（１７）：１０３～１０６
同时，玻璃化苗发生较少，选择处理５（即 ＭＳ＋６－ＢＡ
０．５ｍｇ·Ｌ－１＋ＫＴ　０．５ｍｇ·Ｌ－１＋ＩＢＡ　０．０５ｍｇ·Ｌ－１）
作为欧李试管苗增殖期间最适的生长调节物质组合，增
殖系数可达５．３。
　　表１ 欧李试管苗在不同生长调节物组合培养基上的生长状况
　　Ｔａｂｌｅ　１ Ｇｒｏｗｔｈ　ｓｔａｔｕｓ　ｏｆ　Ｐｒｕｎｕｓ　ｈｕｍｉｌｉｓ　ｐｌａｎｔｌｅｔｓ　ｉｎ　ｍｅｄｉｕｍ　ｃｏｍｐｏｓｅｄ　ｏｆ　ｖａｒｉｏｕｓ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅ
培养基
Ｍｅｄｉｕｍ
６－ＢＡ浓度
Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　６－ＢＡ／（ｍｇ·Ｌ－１）
ＫＴ浓度
Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＫＴ／（ｍｇ·Ｌ－１）
ＩＢＡ浓度
Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＩＢＡ／（ｍｇ·Ｌ－１）
生长状况
Ｇｒｏｗｔｈ　ｓｔａｔｕｓ
平均增殖系数
Ａｖｅｒａｇｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔ
１　 ０．５　 ０　 ０．０５ 不定芽较少 ４．１ｂ
２　 ０．５　 ０　 ０．１０ 不定芽少，基部膨大成愈伤组织 ３．４ｃ
３　 １．０　 ０　 ０．０５ 不定芽多，枝叶细弱，玻璃化苗较多 ５．５ａ
４　 １．０　 ０　 ０．１０ 不定芽多，枝叶细弱，玻璃化苗较多 ５．２ａ
５　 ０．５　 ０．５　 ０．０５ 不定芽多，有少量玻璃化苗 ５．３ａ
６　 ０．５　 ０．５　 ０．１０ 不定芽较多，有玻璃化苗 ５．０ａ
２．２　基本培养基的确定
由表２可知，在改良 ＭＳ上试管苗生长势强，叶片
深绿，明显增大，茎尖和叶尖变褐坏死现象明显改善，但
增殖系数明显下降。Ｂ５ 培养基上叶片边缘有不同程度
的向下翻卷，增殖系数也较低。ＭＳ培养基的试管苗长
势虽然相对较弱，但能保持原有的增殖系数。因此，为
了达到快速繁殖的目的，仍选择ＭＳ作为基本培养基，通
过添加其它附加物解决茎尖、叶尖变褐、坏死的问题。
２．３　附加成分的确定
在ＭＳ＋６－ＢＡ　０．５ｍｇ·Ｌ－１＋ＫＴ　０．５ｍｇ·Ｌ－１＋
ＩＢＡ　０．０５ｍｇ·Ｌ－１培养基中，添加不同种类和浓度的附
加物。从表３可以看出，添加ＡｇＮＯ３ 培养基的试管苗
茎尖、叶尖坏死状况均没有明显改善，增殖系数也比对
照低（图１）。添加马铃薯汁的培养基中，试管苗茎尖变
褐坏死状况略有减轻，叶片舒展，但叶片明显变黄绿色，
增殖系数亦有所降低（图２）。添加水解乳蛋白（ＬＨ）的
试管苗增殖系数均比对照有所提高，同时茎尖及叶尖坏
死现象明显减少。因此，最合适的添加物种类及浓度为
水解乳蛋白（ＬＨ）３００ｍｇ·Ｌ－１。
表２ 欧李试管苗在不同基本
培养基上的生长状况
　　Ｔａｂｌｅ　２　Ｇｒｏｗｔｈ　ｓｔａｔｕｓ　ｏｆ　Ｐｒｕｎｕｓ　ｈｕｍｉｌｉｓ　ｐｌａｎｔｌｅｔｓ　ｉｎ
ｖａｒｉｏｕｓ　ｂａｓｉｃ　ｍｅｄｉｕｍ
培养基
Ｍｅｄｉｕｍ
叶片生长状况
Ｇｒｏｗｔｈ
ｓｔａｔｕｓ　ｏｆ
ｌｅａｖｅｓ
每瓶茎尖坏死数量
Ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　ｓｔｅｍ
ａｐｅｘ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｐｅｒ
ｂｏｔｔｌｅ／个
平均增殖
系数
Ａｖｅｒａｇｅ
ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
ｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔ
ＭＳ 叶片、茎尖均有变褐坏死现象 ４．２　 ５．３
改良 ＭＳ 叶片深绿、较大，茎尖坏死较少死现象 １．９　 ２．７
Ｂ５ 叶片、茎尖均有变褐坏死现象，叶片较小 ４．５　 ４．８
　　表３ 欧李试管苗在不同附加物培养基上的生长状况
　　Ｔａｂｌｅ　３ Ｇｒｏｗｔｈ　ｓｔａｔｕｓ　ｏｆ　Ｐｒｕｎｕｓ　ｈｕｍｉｌｉｓ　ｐｌａｎｔｌｅｔｓ　ｉｎ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗｉｔｈ　ｖａｒｉｏｕｓ　ａｄｄｉｔｉｖｅｓ
附加物
Ａｄｄｉｔｉｖｅｓ
生长状况
Ｇｒｏｗｔｈ　ｓｔａｔｕｓ
每瓶茎尖坏死数量
Ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　ｓｔｅｍ　ａｐｅｘ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｐｅｒ　ｂｏｔｔｌｅ／个
平均增殖系数
Ａｖｅｒａｇｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔ
２ｍｇ·Ｌ－１　ＡｇＮＯ３ 茎尖、叶尖坏死现象无改善 ４．０　 ５．２
５ｍｇ·Ｌ－１　ＡｇＮＯ３ 茎尖、叶尖坏死现象无改善 ４．３　 ５．１
５０ｍｇ·Ｌ－１马铃薯汁 叶片黄绿色，茎尖坏死略有改善 ３．２　 ５．０
１００ｍｇ·Ｌ－１马铃薯汁 叶片黄绿色，茎尖坏死改善不明显 ３．５　 ４．８
１００ｍｇ·Ｌ－１　ＬＨ 茎尖坏死及叶尖坏死较少 ２．８　 ５．４
３００ｍｇ·Ｌ－１　ＬＨ 茎尖、叶尖坏死较少 １．６　 ５．７
对照ＣＫ 茎尖、叶尖坏死较多 ４．２　 ５．３
图１　培养基添加ＡｇＮＯ３的试管苗
Ｆｉｇ．１　Ｐｌａｎｔｌｅｔｓ　ｉｎ　ｍｅｄｉｕｍ　ａｄｄｅｄ　ＡｇＮＯ３
图２培养基添加马铃薯汁的试管苗
Ｆｉｇ．２　Ｐｌａｎｔｌｅｔｓ　ｉｎ　ｍｅｄｉｕｍ　ａｄｄｅｄ　ｐｏｔａｔｏ　ｊｕｉｃｅ
４０１
北方园艺２０１６（１７）：１０３～１０６ ·生物技术·
２．４　光照条件的确定
欧李试管苗在不同光照条件下的生长增殖状况见
表４。从光照强度来看，较低的光照强度下，试管苗不定
芽枝叶较弱，玻璃化程度较重。随着光照强度的增强，
枝叶逐渐健壮，玻璃化程度有所减轻。但３　０００ｌｘ与
３　５００ｌｘ光照强度下，试管苗的生长状态和增殖系数均
没有明显差别。从光周期来看，相同的光照条件下，全
光照和光周期１６ｈ·ｄ－１无明显差别。因此，从节约能
源的角度，继代增殖期间，选择３　０００ｌｘ光照强度条件
下，光周期１６ｈ·ｄ－１即可。从每瓶玻璃化枝条的发生
数量来看，仅通过提高光照强度减轻玻璃化的发生是不
可行的。还需要其它因素的进一步改善。
　　表４ 欧李试管苗在不同光照条件下的生长状况
　　Ｔａｂｌｅ　４ Ｇｒｏｗｔｈ　ｓｔａｔｕｓ　ｏｆ　Ｐｒｕｎｕｓ　ｈｕｍｉｌｉｓ　ｐｌａｎｔｌｅｔｓ　ｕｎｄｅｒ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｉｌｕｍｉｎａｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ
光照条件
Ｉｌｕｍｉｎａｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ
生长状况
Ｇｒｏｗｔｈ　ｓｔａｔｕｓ
平均每瓶玻璃化枝条数量
Ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　ｖｉｔｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｂｒａｎｃｈ　ｐｅｒ　ｂｏｔｔｌｅ／个
平均增殖系数
Ａｖｅｒａｇｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔ
２　５００ｌｘ，全光照 不定芽枝叶较弱，玻璃化苗较多 ４．６　 ５．１
２　５００ｌｘ，光周期１６ｈ·ｄ－１ 不定芽枝叶较弱，玻璃化苗较多 ４．５　 ４．９
３　０００ｌｘ，全光照 不定芽枝叶正常，玻璃化苗较少 ３．１　 ５．１
３　０００ｌｘ，光周期１６ｈ·ｄ－１ 不定芽枝叶正常，玻璃化苗较少 ３．０　 ５．２
３　５００ｌｘ，全光照 不定芽枝叶正常，玻璃化苗较少 ３．１　 ５．２
３　５００ｌｘ，光周期１６ｈ·ｄ－１ 不定芽枝叶正常，玻璃化苗较少 ３．２　 ５．３
２．５　蔗糖浓度的确定
从表５可以看出，蔗糖浓度不仅影响试管苗的增殖
系数，也影响试管苗的生长状态和玻璃化程度。其中，
随着蔗糖浓度的提高，玻璃化程度降低，每瓶玻璃化枝
条的数量明显减少，但蔗糖达到４０ｇ·Ｌ－１时，虽然玻璃
化程度最轻，但是此时叶片变成苍绿色，边缘略卷曲，增
殖系数下降（图３）。蔗糖为３５ｇ·Ｌ－１时，玻璃化枝条的
数量明显减少，叶色葱绿舒展，生长健壮，为最适合的蔗
糖浓度，增殖系数可达５．６（图４）。
表５ 欧李试管苗在不同蔗糖浓度
培养基上的生长状况
　　Ｔａｂｌｅ　５　Ｇｒｏｗｔｈ　ｓｔａｔｕｓ　ｏｆ　Ｐｒｕｎｕｓ　ｈｕｍｉｌｉｓ　ｐｌａｎｔｌｅｔｓ　ｉｎ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗｉｔｈ
ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｓｕｃｒｏｓｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
蔗糖浓度
Ｓｕｃｒｏｓｅ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
／（ｇ·Ｌ－１）
生长状况
Ｇｒｏｗｔｈ
ｓｔａｔｕｓ
平均每瓶玻璃化枝条数量
Ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　ｖｉｔｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ
ｂｒａｎｃｈ　ｐｅｒ　ｂｏｔｔｌｅ
／个
平均增殖系数
Ａｖｅｒａｇｅ
ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
ｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔ
３０ 少量叶片卷曲，水浸状 ３．０　 ５．２
３５ 叶片绿色、平展，长势良好 １．８　 ５．６
４０ 叶片苍绿色，不舒展 １．２　 ４．３
图３　培养基蔗糖浓度过高的试管苗
Ｆｉｇ．３　Ｐｌａｎｔｌｅｔｓ　ｉｎ　ｍｅｄｉｕｍ　ａｄｄｅｄ
ｈｉｇｈ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｓｕｃｒｏｓｅ
图４　最佳成分培养基上增殖的试管苗
Ｆｉｇ．４　Ｐｌａｎｔｌｅｔｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｍｅｄｉｕｍ
３　结论与讨论
欧李试管苗增殖的最佳培养基为 ＭＳ＋６－ＢＡ
０．５ｍｇ·Ｌ－１＋ＫＴ　０．５ｍｇ·Ｌ－１＋ＩＢＡ　０．０５ｍｇ·Ｌ－１＋
水解乳蛋白（ＬＨ）３００ｍｇ·Ｌ－１＋蔗糖３５ｇ·Ｌ－１＋琼脂
５．８ｇ·Ｌ－１，光周期１６ｈ·ｄ－１，光照强度３　０００ｌｘ，培养温
度２５℃。在此条件下，试管苗能保持５．６的增殖系数，同
时能较好的控制玻璃化的发生和茎尖、叶尖变褐坏死
现象。
欧李试管苗增殖期间，细胞分裂素类对不定芽的增
殖系数起着关键作用，６－ＢＡ促进不定芽发生的效果明
显。当６－ＢＡ浓度较低时不定芽发生数量少，增殖系数
低。随着６－ＢＡ浓度的提高，增殖系数有显著提高，但试
管苗开始出现玻璃化现象。该试验表明，６－ＢＡ与 ＫＴ
配合使用优于６－ＢＡ单独使用时的效果，既能保证较高
的增殖系数，也能保证试管苗的正常生长。这与庄丽娟
等［４］的报道相一致。６－ＢＡ与 ＫＴ混合使用对于试管苗
增殖的影响有待进一步研究。
增殖期间的欧李试管苗出现了茎尖、叶尖坏死现
象。试验表明，虽然试管苗在ＭＳ、改良ＭＳ和Ｂ５３种基
５０１
·生物技术· 北方园艺２０１６（１７）：１０３～１０６
本培养基和不同生长调节物质组合培养基上的生长状
况有所差异，但均未能抑制此现象的发生。由此说明，
茎尖、叶尖坏死亡是由多种综合因素引起的。以 ＭＳ为
基本培养基，添加合适生长调节物质的前提下，添加合
适浓度的水解乳蛋白对欧李试管苗茎尖、叶尖坏死有一
定的抑制作用。
玻璃化是很多植物离体培养期间出现的生理病变，
与光照强度、环境空气湿度、生长调节物质、培养基渗透
势等多种因素有关［８］。欧李试管苗的玻璃化现象，仅通
过增加光照强度和延长光照时间难以有效控制，通过适
当增加蔗糖浓度，对抑制玻璃化的发生有良好效果。欧
李试管苗玻璃化发生的机理有待进一步研究。
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（Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｈｅｂｅｉ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｎｄａｎ，Ｈｅｂｅｉ　０５６０２１）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｂｙ　ｓｉｎｇｌｅ　ｆａｃｔｏｒ　ｔｅｘｔ，ｔｈｅ　ｅｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｖａｒｉｏｕｓ　ｂａｓｉｃ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ，ｇｒｏｗｔｈ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ，ａｄｄｉｔｉｏｎｓ　ａｎｄ
ｓｕｃｒｏｓｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ｓｔｕｄｉｅｄ　ｏｎ　ｇｒｏｗｔｈ　ｓｔａｔｕｓ　ａｎｄ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　Ｐｒｕｎｕｓ　ｈｕｍｉｌｉｓ　ｆｉｎｅ　ｓｔｒａｉｎｓ　ｉｎｖｉｔｒｏｐｌａｎｔｓ．
Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｍｅｄｉｕｍ　ｏｆ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ＭＳ＋６－ＢＡ　０．５ｍｇ·Ｌ－１＋ＫＴ　０．５ｍｇ·Ｌ－１＋ＩＢＡ
０．０５ｍｇ·Ｌ－１，ａｄｄｉｔｉｏｎａｌ　ＬＨ　３００ｍｇ·Ｌ－１，ｓｕｇａｒ　３５ｇ·Ｌ－１，ａｇａｒ　５．８ｇ·Ｌ－１．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｐｒｕｎｕｓ　ｈｕｍｉｌｉｓ；ｐｌａｎｔｌｅｔｓ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ；ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ；ｋｅｙ　ｔｅｃｈｎｏｌｏ
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