全 文 ：野生欧洲李试管苗生根与移栽技术研究
吴玉霞 ,袁海英 ,曹 恒 ,廖康
(新疆农业大学园艺学院 ,乌鲁木齐 830052)
摘 要:对野生欧洲李试管苗进行生根与移栽试验结果表明:欧洲李试管苗生根适宜的培养基配方为 B5+
IBA 0.4(mg/ L)+蔗糖 30 g/ L+琼脂7 g/ L, 培养40 d ,生根率达 80%以上。移栽时用灭过菌而且通气透水性强
的锯末为栽培基质最好 ,移栽成活率达 70%以上。
关键词:野生欧洲李;试管苗;生根;移栽
中图分类号:S662.3;S604 文献标识码:A 文章编号:1001-4330(2009)01-0087-04
Studies on Rooting and Transplanting Techniques of Prunus domestica
WU Yu-xia , YUAN Hai -ying ,CAO Heng ,LIAO Kang
(College of Horticulture , Xinjiang Agricultural University , Urumqi ,830052)
Abstract:In this paper , the factors influencing rooting and transplanting efficiency of wild European plum
(Prunus domestica L.)were studied.The result showed that the optimal rooting medium forwild European plum was
B5 culture medium supplemented with 0.4 mg/L IBA , 20 g/L sucrose and 7 g/L agar.The rooting rate of the
shoots was over 80%after being cultured on this medium for 23 days.The sterilized loose sawdust was most suitable
for transplanting seedlings , and more than 70%seedlings were survived.
Key words:Prunus domestica L.;shoot in vitro;rooting;transplantation
新疆野生欧洲李(Prunus domestica L.),属于蔷薇科(Rosaceae)李属(Prunus)植物 ,是一种珍贵的野
生果树资源。在新疆野生生境下 ,欧洲李多为灌木或小乔木 ,性喜温暖湿润 ,抗性较弱 ,目前仅在新疆伊
犁地区的天山野果林有零星分布。野生欧洲李总酸含量极高 ,适于加工李干和李酱 ,也可药用 ,目前尚
未商业化开发利用。
新疆野生欧洲李是由我国学者林培钧 、施丽于 20世纪 80年代最早发现并报道的 ,它的发现改变了
人们对欧洲李起源于樱桃李和黑刺李天然杂交的传统看法 ,由此为欧洲李直接起源于中亚天山野果林
的野生欧洲李假说提供了直接证据[ 1～ 3] 。因此 ,野生欧洲李在李属植物对研究李属植物起源和李属植
物育种中意义深远 ,在这个意义上讲 ,对其种质资源的妥善保护极为必要 。但作为一个濒危物种 ,野生
欧洲李的生存现状令人堪忧:上世纪 80年代发现的 7个分布点目前仅存 4个分布点有零星分布 ,其余
各点均被砍伐殆尽 ,通过人工繁殖对野生欧洲李进行异位保护已成必然选择[ 1] 。由于野生欧洲李种子
外被坚硬的种壳 ,种皮紧实 ,种子萌芽率低 ,研究尝试通过组织培养手段 ,对其进行无性繁殖。通过对比
观察筛选出利于野生欧洲李组培苗生根的培养基配方和易成活的移栽基质 ,以提高野生欧洲李的组培
效率 。
1 材料与方法
1.1 材 料
研究于 2007年4月 ～ 2008年 4月在新疆农业大学园艺学院植物组织培养室和智能温室中完成。
选择生长发育正常的野生欧洲李的新梢侧芽进行初代 、继代和增殖培养作为试管苗待用 。
1.2 方 法
1.2.1 生根培养基的选择
将外植体接种到基本培养基 B5中 ,待成活后转入增殖培养基(B5+NAA0.2+BA0.5+GA0.2)[ 4] ,
收稿日期:2008-08-10
基金项目:国家自然科学基金项目(30660122);高校博士学科点专项基金项目(20070758001)
作者简介:吴玉霞(1973-),女 ,河南淅川人 ,助理实验师 ,研究方向为植物组织栽培
通讯作者:廖康(1962-),男 ,四川人 ,教授 ,硕士 ,博士生导师 ,研究方向为果树栽培与种质资源 ,(E-mail)Liaokang01@163.com
新疆农业科学 2009 ,46(1):87-90
Xinjiang Agricultural Sciences
40 d后出现大量增殖苗后待用 。生根培养基配方为 B5附加不同浓度的(0.8 、0.6 、0.4 、0.2)IBA , B5
(NAA 0.4),B5(IBA 0.4+活性炭(1 g/L)),蔗糖浓度 30%,琼脂 0.7%,pH 5.8 , 1月后统计接种数 、生根
数 、总生根数 ,据此计算生根率和平均生根数 。
1.2.2 移栽基质的选择
设计了四个处理的移栽基质 ,分别为园土+蛭石(3∶1)、园土 、蛭石 、锯末 ,移栽在已备好的四个 100
×40(cm)的穴盘里 ,试验中组培苗根长 2 ～ 3 cm时 ,选择苗高 2 ～ 3 cm、茎秆粗壮 、叶片大而绿 、生根质量
好的幼苗进行移栽试验 ,分 4组 ,每组 70株 ,移栽 40 d后测定成活率 。
1.2.3 生根试管苗和移栽苗的培养条件
培养室内温度为 23 ～ 28℃,光照 10 ～ 12 h/d ,光照强度 1 800 ～ 2 000 lx , 空气湿度 85%～ 90%。
1.2.4 炼苗 、洗苗 、移栽及苗期管理
炼苗过程中逐渐松动瓶盖 ,经过 5 ～ 7 d ,彻底揭开瓶盖并注入 0.1 ～ 0.3 cm 高的自来水 ,继续通风
透气 1 d左右 ,完成炼苗阶段。移栽前小心从培养瓶中取出小苗 ,用清水反复冲洗瓶苗根部的培养基 ,
将清洗干净的瓶苗浸入 80%多菌灵 500倍液中 2 s后立即移栽。移栽前把基质浸湿浇透 ,晾干后按株
行距 3×4(cm),深 4 ～ 5 cm的小坑 ,将清洗处理好的试管苗栽入 ,滴水浇苗的基部 ,然后用喷雾器喷水 ,
清洗掉叶面上的基质 ,然后盖膜保湿保温。移栽后 10 d之内保持空气湿度在 90%左右 ,早晚适当通风。
野生欧洲李移栽到穴盘后用塑料薄膜将穴盘整个密封 ,3 d后每天早晚各揭开薄膜一角 1 h ,一周后早晚
通气时间提至 3 h。移栽后尽量减少浇水次数和水量 ,以免引起沤根 。各基质水分的含量的判断通过外
观的观测来衡量 ,锯末 、蛭石水分的含量最宜为用嘴轻轻吹动栽培床面锯末和蛭石不飞散 ,园土是用手
抓一把能够成团松手后又能散开成原型 。
2 结果与分析
2.1 生根培养基的选择
在试验过程中观察到在培养基里只添加 IBA时 ,随着 IBA浓度的增加 ,愈伤组织的增生逐渐加强 ,
但是 IBA 0.6时愈伤组织多而生根量较少 ,且根系多为着生在愈伤组织上 ,不利于日后的移栽成活 。为
模拟黑暗土壤环境在培养基里添加 1 g/L的活性炭 ,生根大幅减少并且根毛细弱。在NAA0.4的对比试
验中 ,发现愈伤组织较多 ,且生根时间迟缓于同浓度的 IBA 一周左右。5个供试配方中 ,最适合野生欧
洲李组培苗的生根培养基为 B5+IBA 0.4 ,在此培养基上试管苗生根快 ,叶绿 ,平均生根数最多 。表 1
表 1 IBA 、NAA浓度对野生欧洲李生根的影响
Table 1 The effect of IBA and NAA concentration on rooting of Prunus domestica
编号
Code
处理
Treatment
接种苗数
No.of seedling
生根苗数
No.of rooted
seedling
生根率(%)
Rooting rate
总根数
No.of total roots
平均根数
No.of mean roots
1 B5+IBA 0.6(mg/ L) 54 44 81.5 84 1.6
2 B5+IBA 0.4(mg/ L) 74 62 83.8 159 2.1
3 B5+IBA 0.2(mg/ L) 53 21 39.6 35 0.7
4 B5+IBA 0.4+活性炭(1g/ L) 47 21 44.7 33 0.7
5 B5+NAA0.4(mg/ L) 49 39 79.6 92 1.9
2.2 不同基质对炼苗成活率的影响
野生欧洲李试管苗在不同基质的移栽情况中以锯末中的成活率最高 ,达到 71.4%,叶片数目多 ,植
株长势旺盛 ,株体健壮 ,成活率显著高于与其它基质(图版 I-1),但生长后期需要喷施 B5营养液 ,因其
叶色较园土基质中的植株发黄 。蛭石中试管苗的成活率达到 37.1%,位居第二 ,植株纤细但新生根多
(图版 I-2)。园土中的成活率达到 35.7%,试管苗在园土中的总体长势不及在锯末中 ,但其根系较长
(图版 I-3)。野生欧洲李试管苗在园土+蛭石(3∶1)基质中的成活率表现最低且长势最差(图版 I-4)。
表2 ,图 1
·88· 新疆农业科学 46卷
表 2 不同基质对炼苗成活率的影响
Table 2 The effect of different media on survival percentage of seeding of Prunus domestica
基质
Media
平均根长
Mean root length
须根数
No.of hairy roots
成活率(%)
Survival rate
总体生长状况
Whole description
of growth status
园土+蛭石(3∶1)
Garden soil plus vermiculite
7.2 12 32.9 叶片绿 ,生长缓慢
园土
Garden soil
7.2 10 35.7 叶片绿 ,生长缓慢
蛭石
Vermiculite
6.0 15 37.1 株苗纤细 ,须根较少
锯末
Sawdust
8.1 22 71.4 叶片偏黄绿 ,须根较多
图 1 不同基质对野生欧洲李试管苗移栽长势的影响
Fig.1 The effect of different media on growth of tube seedings of Prunus domestica
3 结论与讨论
3.1 讨 论
3.1.1 试管苗不定根的形成是一个复杂的过程 ,其中植物激素起着决定性的作用。在植物组织培养实
践中 ,外源生长素对试管苗生根的诱导作用已得到了广泛的认可[ 5] 。不定根分化的各个阶段对植物激
素的要求不同 ,在根原基形成阶段 ,生长素起着决定性的作用。刘崇琪[ 6]等以与野生欧洲李同属的新疆
野生樱桃李为材料 ,研究了基本培养基 、植物生长调节剂种类 、浓度及配比 、蔗糖浓度等多种因素对茎段
腋芽萌发与生长 、增殖以及叶片不定芽再生的影响 ,认为植物生长调节剂组合 IAA0.4 mg/L+6-BA0.8
mg/L较适合于樱桃李茎段腋芽的萌发与生长培养;ZT 诱导不定芽再生的效果好于 6-BA ,ZT1.5 mg/L
+IBA0.05 mg/L为诱导不定芽再生的最适植物生长调节剂组合;暗培养为叶片不定芽再生的必要条
件;樱桃李不定梢的最佳生根培养基为 1/2MS+IBA0.4 mg/L[ 6] 。研究中 ,野生欧洲李生根培养的效果
受生长素影响较大。培养基中添加 IBA浓度较低时(0 ～ 0.2 mg/L),生根方式为幼苗基部直接生根 ,但
生根率较低 ,平均生根条数也较少 。当添加 IBA浓度较高时(0.6 mg/L)时 ,生根方式多为愈伤组织生
根 ,影响移栽成活率 ,其原因有待进一步研究 。
3.1.2 各处理试管苗栽植后成活率总体均不是很高 ,主要原因为温度 、湿度 、光照等方面均不适宜试管
苗的移栽 ,而且各基质在应用中都有一些缺点与不足 ,营养成分较低 ,营养主要靠后期喷施 ,不同程度存
在着营养供应不足或失调的现象。
3.1.3 蛭石和锯末排水透气性好 ,保温性强 ,试管苗移栽后容易成活;园土的透性比较差 ,而且含水量
高 ,很容易造成苗根的腐烂。所以实验的首要条件是必须控制基质的水分含量。温室内高温多湿是诱
发病害的的重要因子 ,常引起植株的根腐病 ,植株基部长出霉菌 。因此苗期基质的湿度控制也是试管苗
成活的关键措施之一 。锯末颗粒小粘性大 ,即使在水分相对缺乏的情况下也不易发生颗粒松散无结构
·89·1期 吴玉霞等:野生欧洲李试管苗生根与移栽技术研究
的现象 ,基部与根部接触较紧密 ,有利于根系的萌生 ,又因锯末的粘性强保墒性也随之增强。但是锯末
本身缺乏植株生长所需营养 ,后期有必要喷施营养液。
3.2 结 论
综上所述 ,通过实验筛选出适合野生欧洲李的生根培养基为 B5+IBA 0.4(mg/L)+蔗糖30 g/L+琼
脂7 g/L ,培养40 d ,生根率达 80%以上。将繁育的试管苗分别移栽到锯末 、蛭石 、园土+蛭石(3∶1)和园
土这四种基质进行试管苗栽培实验 ,结果证明试管苗在锯末中的成活率最高(达 70%以上),长势最好 ,
只是后期需要喷施营养液 。
参考文献:
[ 1] 林培钧 ,崔乃然.天山野果林资源—伊犁野果林综合研究[M] .北京:中国林业出版社 , 2000:105-130.
[ 2] 林培钧 ,廖明康 ,施丽 ,等.新疆伊犁野生欧洲李 Prunus domestica L.(P .communis Fritsch)的发现与分布(第一报)[ J] .北方果树 , 1986 ,
(1):6-8.
[ 3] 王磊.新疆野山楂 、野欧洲李 、野蔷薇等野生果树资源[ J] .新疆农业科学 ,1990 ,(2):78-80.
[ 4] 耿文娟 ,吴玉霞 ,廖康 ,等.野生欧洲李组织培养研究初报[ G] .乌鲁木齐:新疆园艺学会学术研讨会论文汇编 , 2008:83-86.
[ 5] 庄丽娟 ,苏福才.欧李的组织培养与快速繁殖技术[ J] .内蒙古农业大学学报 ,2005 , 26(1):16-19.
[ 6] 刘崇琪 ,陈学森 ,吴传金 ,等.新疆野生樱桃李(Prunus cerasifera)茎段与叶片培养及其植株再生[ J] .果树学报 , 2008(1):49-53.
·90· 新疆农业科学 46卷