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垂盆草饮片毛细管电泳法指纹图谱分析
陈 蕾
作者单位:210029 江苏省南京市，江苏省中医院药剂科
【摘要】 目的 建立垂盆草饮片毛细管电泳法 ( HPCE) 指纹图谱分析方法，并对垂盆草及其炮制品的指纹谱进
行比较。方法 色谱分离时采用 HPCE，参照物为异鼠李素成分，对其进行指纹图谱的测定，对测定结果分析采用模糊
聚类法并进行相似度评价。结果 建立 11 个垂盆草饮片 HPCE 指纹图谱以共有峰为特征指纹信息，炙垂盆草较垂盆草
生品色谱峰的重叠率为 74. 1% ; 炮制品色谱图的相似度的计算，以垂盆草生品为基准，炙垂盆草为 0. 796。结论 此
种方法不但可靠而且准确，具有较好的重现性，足以用来衡量垂盆草饮片内在质量评价。
【关键词】 垂盆草; 毛细管电泳法; 指纹图谱
【中图分类号】Ｒ 282 【文献标识码】A 【文章编号】1674 － 3296 (2013)04 － 0096 － 01
垂盆草系景天科植物的干燥以及新鲜的全草［1］。性凉，
味甘、淡。垂盆草的主要成分是氰苷类、黄酮类、糖类成分
等。从药理学角度，垂盆草对炎性渗出具有抑制作用，能够降
低肝细胞的损伤，使肝炎患者血清谷丙转氨酶减少［2 － 3］，因此
临床上主要用于治疗小便不利、湿热黄疸、急慢性肝炎、痈肿
疮疡等疾病。
1 材料与方法
1. 1 材料 超声波清洗器 (KQ － 500E 型) ，pH 计 (pHS －
3C型) ，ＲotavaporＲ － 3 旋转蒸发，G1600 － AX 高效毛细管电
泳仪购自美国 Agilent 公司，自动进样器配惠普化学工作站、
二极管阵列检测器 (DAD)。
缓冲溶液配制以及试剂溶解所用的水均为双蒸馏水，乙
酸、无水乙醇购自南京化学试剂有限公司，盐酸、氢氧化钠购
自上海化学试剂有限公司，甲醇购自国药集团化学试剂有限公
司，硼砂购自南京化学试剂一厂。异鼠李素对照品 (批号
110860 － 200407，购自中国药品生物制品检定所) ;垂盆草提
取物 (自制)。
1. 2 方法
1. 2. 1 电泳条件 毛细管购自 Agilent 科技有限公司;电泳缓
冲液使用 pH 8. 6 的 10%甲醇溶液，组成由 10mmol /L 磷酸二
氢钠，40mmol /L硼砂;采用 20kV分离电压;检测时波长调至
252nm;电泳时保持 20℃毛细管温度。并进行精密度试验、稳
定性试验以及重复性试验。
1. 2. 2 指纹图谱的建立 将供试品溶液分别放入自动进样的
样品管中，按选定的测试条件进行检测。同一上述实验条件
下，测定供试品毛细管电泳法 (HPCE)色谱图。根据不同批
次供试品测定结果所给出的峰数、峰值 (积分值)和峰位
(相对迁移时间)等相关参数，进行分析、比较，制定优化的
指纹图谱。
1. 2. 3 指纹图谱分析
1. 2. 3. 1 共有指纹峰标定 将供试品 HPCE 色谱图进行的比
较和分析，总共标定 11 个共有峰，将这 11 个峰作为指纹图谱
的特征峰，参比对照峰分别求出各共有峰的相对峰面积以及相
比的 α值。
1. 2. 3. 2 指纹图谱的聚类分析 指纹图谱的聚类分析取垂盆
草 HPCE 指纹图谱得到 11 个的共有峰，应用 SPSS软件中的聚
类分析软件 hierarchical cluster analysis 进行，得不同样品垂盆
草的聚类分析图。
2 结果
色谱峰的重叠率选取基准线后，计算出色谱峰的重叠率:
85. 11%、86. 24%、87. 41%、86. 59%、85. 54%、 84. 89%、
85. 46%、86. 87%、84. 77%、85. 46%、85. 93%。经对垂盆
草生品与其炮制品的指纹图谱比较、分析，炙垂盆草较垂盆草
生品色谱峰的重叠率为 74. 1%;炮制品色谱图的相似度的计
算，以垂盆草生品为基准，炙垂盆草为 0. 796。
3 讨论
3. 1 电泳条件的优化 (1)检测波长的选择:波长的检测
采用二极管阵列检测器，将不同波长的色谱图进行比较并记
录。显示色谱图中色谱峰较多的波长是 252nm，且信息丰富。
(2)分离电压和运行温度的选择:在检测过程中电压调整在
16 ～ 25 kV范围内，发现个检测样品组能达到基线且最节省时
间的是在 20kV电压时;对运行温度也进行了 20 ～ 25℃范围内
梯度实验，发现最适宜温度是 20℃，各组分离迁移效果较好，
分析时间也明显缩短。(3)缓冲液体系、缓冲液浓度及 pH值
的选择:本实验最初使用的 3 个缓冲体系分别为:硼砂 －磷酸
二氢钠 －甲醇、硼砂 －磷酸二氢钠以及硼砂。色谱峰峰形、分
离度较好的是硼砂 －磷酸二氢钠 －甲醇的缓冲体系。同时最适
宜的 pH 为 8. 6，缓冲液最适宜浓度为 40mmol /L 硼砂，
10mmol /L磷酸二氢钠 － 10%甲醇。
3. 2 指纹谱分析 指纹谱分析结果显示垂盆草的不同批次样
品既有区别又有相关性。共有指纹峰在色谱图上体现，指纹谱
相似度较好、色谱峰重叠率，然而各峰有不同的面积，不同批
次垂盆草饮片成分含量也不相同。这对垂盆草制剂在质量的评
价有一定意义。
垂盆草生品以及垂盆草炮制品的色谱图比较结果显示，生
垂盆草与炙垂盆草色谱峰的重叠率、共有指纹峰数目等都不相
同。这可作为垂盆草饮片质量控制的一项重要指标。本实验初
步建立垂盆草饮片 HPCE指纹图谱分析方法，并对垂盆草及其
炮制品的指纹谱进行比较。从而促进垂盆草制剂的临床应用。
为垂盆草制剂在质量的评价和控制提供了科学依据。
参考文献
1 Norbaek Ｒ，Aaboer DB． Flavone C － glycoside，phenolic acid，and
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ments ［J］． J Agric Food Chem，2003，51 (3) :809 － 813．
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药杂志，1991，11 (4) :47 － 48．
3 方瑞英，史忠阳 . 原代培养大鼠肝细胞中观察十种中药的抗肝毒
作用 ［J］ . 现代应用药学，1995，12 (1) :5．
(收稿日期:2013 － 01 － 20)
·69· Clinical Ｒational Drug Use，April 2013，Vol. 6 No. 4C
DOI:10.15887/j.cnki.13-1389/r.2013.12.011