全 文 ：China Pharmacy 2015 Vol. 26 No. 3 中国药房 2015年第26卷第3期
参考文献
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（收稿日期：2013-12-27 修回日期：2014-03-06）
（编辑：孙 冰）
Δ基金项目：上海市中医药标准化研究项目（No. ZYSNXD-CC-
BZH）
＊研究员，硕士。研究方向：中药质量标准。电话：0512-
58451790。E-mail ：573960078@qq.com
郁李仁配方颗粒的质量标准研究Δ
晏小云＊（江阴天江药业有限公司，江苏江阴 214434）
中图分类号 R917 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2015）03-0386-03
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2015.03.31
摘 要 目的：建立郁李仁配方颗粒的质量标准。方法：采用薄层色谱（TLC）法对郁李仁配方颗粒中的苦杏仁苷进行定性分析，
采用高效液相色谱（HPLC）法测定制剂中苦杏仁苷的含量。色谱柱为GP-Phenyl，流动相为乙腈-水（10 ∶ 90，V/V），流速为 0.8 ml/
min，检测波长为210 nm，柱温为30℃，进样量为5 μl。结果：苦杏仁苷的TLC图斑点清晰、分离较好，阴性对照无干扰。苦杏仁苷
质量浓度在50.92～611.04 μg/ml范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系（r＝0.999 8）；精密度试验的RSD＜2％，稳定性、重复
性试验的RSD＜3％；平均加样回收率为101.07％，RSD为0.64％（n＝6）。结论：该方法操作简单、灵敏、专属性强、重复性好，可作
为郁李仁配方颗粒的质量控制方法。
关键词 郁李仁配方颗粒；薄层色谱法；高效液相色谱法；苦杏仁苷；质量标准
Quality Standard of Pruni Semen Formula Granules
YAN Xiao-yun（Jiangyin Tianjiang Pharmaceutical Co.，Ltd.，Jiangsu Jiangyin 214434，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish the quality standard of Pruni Semen formula granules. METHODS：Pruni Semen formula
granules were identified by TLC. The content of amygdalin was determined by HPLC. The determination was performed on GP-Phe-
nyl column with mobile phase consisted of acetonitrile-water（10 ∶ 90，V/V）at the flow rate of 0.8 ml/min. The detection wavelength
was set at 210 nm，and column temperature was 30 ℃.The sample size was 5 μl. RESULTS：TLC spots of amygdalin were clear
and well-separated without interference from negative control. The linear range of amygdalin was 50.92-611.04 μg/ml（r＝0.999 8）
with an average recovery of 101.07％（RSD＝0.64％，n＝6）. RSD of precision test was lower than 2％，and RSDs of stability and
reproducibility tests were lower than 3％ . CONCLUSIONS：The method is simple，sensitive，specific and reproducible，and can
be used for the quality control for Semen pruni formula granules．
KEYWORDS Pruni Semen formula granules；TLC；HPLC；Amygdalin；Quality standard
􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙􀤙
郁李仁为蔷薇科植物欧李Prunus humilis Bge.、郁李P. ja-
ponica Thunb.或长柄扁桃P. pedunculata Maxim.的干燥成熟种
子，具有润燥滑肠、下气、利水之功效[1]。郁李仁中含有的苦杏
仁苷为其主要药效成分，是临床常用的祛疲止咳剂和辅助性
抗癌药物[2-4]。为有效控制郁李仁配方颗粒的质量，笔者参考
原国家食品药品监督管理局《中药配方颗粒管理暂行规定》的
相关要求，采用高效液相色谱（HPLC）法对郁李仁配方颗粒的
质量标准进行了研究。
1 材料
1.1 仪器
1260型HPLC仪（美国Agilent公司）；REPROSTAR 3型薄
层自动成像仪（瑞士CAMAG公司）；BS110S型万分之一天平
（德国赛多利斯公司）；十万分之一电子天平（瑞士梅特勒-托利
多公司）；KQ-250B型超声清洗器（昆山市超声仪器有限公
司）；硅胶G薄层板（20 cm×10 cm，青岛海洋化工厂）。
1.2 药品与试剂
郁李仁配方颗粒（江阴天江药业有限公司，批号：1210008、
1207085、1202037、1110100、1107095、1101086、1009031、
1003112、0907216）；苦杏仁苷对照品（中国食品药品检定研
究院，批号：1108020-201305，纯度＞98％）；其余试剂均为分
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析纯。
2 方法与结果
2.1 定性鉴别
取本品 1.0 g，加甲醇 20 ml，超声（功率：300 W，频率：50
kHz）处理20 min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 ml分散，
用水饱和的正丁醇溶液萃取 2次，每次 15 ml，合并萃取液，蒸
干，加 1 ml甲醇使溶解，摇匀，作为供试品溶液。另取苦杏仁
苷对照品适量，加甲醇制成每1 ml含5 mg苦杏仁苷的溶液，作
为对照品溶液。照薄层色谱（TLC）法[2010年版《中国药典》
（一部）附录VIB]试验，吸取上述两种溶液各5 μl，分别点于同
一硅胶G薄层板上，以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水溶液（3 ∶ 8 ∶ 5 ∶ 2，
V/V/V/V）于 10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，
立即喷以 5％香草醛硫酸乙醇试液，于 105℃烘箱中加热 5～
10 min，置于日光下检视。结果，供试品色谱中，在与对照品色
谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。TLC图见图1。
2.2 含量测定
2.2.1 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱：GP-Phenyl（250
mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈-水（10 ∶ 90，V/V）；流速：0.8
ml/min；检测波长：210 nm；柱温：30℃；进样量：5 μl。理论板
数按苦杏仁苷峰计算应不低于3 000；分离度＞1.5。高效液相色
色谱见图2。
2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取苦杏仁苷对照品适量，
加甲醇制成质量浓度为1.018 4 mg/ml的溶液，即得。
2.2.3 供试品溶液的制备 精密称取本品细粉约 0.1 g，置于
具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇溶液25 ml，称定质量，加热回
流提取30 min，放冷，再次精密称定，加稀乙醇溶液补足减失的
质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.2.4 线性关系考察 分别精密吸取“2.2.2”项下对照品溶液
0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 ml于10 ml量瓶中，加甲醇稀释至
刻度。按“2.2.1”项下色谱条件分别进样5 μl，记录峰面积。以
峰面积（y）为纵坐标、质量浓度（x，μg/ml）为横坐标，进行线性
回归，得回归方程为：y＝5.390 6 x+41.788（r＝0.999 8）。结果
表明，苦杏仁苷的质量浓度在50.92～611.04 μg/ml范围内与其
峰面积积分值呈良好线性关系。
2.2.5 精密度试验 精密吸取“2.2.2”项下对照品溶液 3.0 ml
于 10 ml量瓶中，加甲醇定容，按“2.2.1”项下色谱条件连续进
样6次。结果RSD＝0.22％，表明仪器精密度良好。
2.2.6 稳定性试验 取供试品溶液适量，分别于放置 0、2、4、
8、12、24 h时按“2.2.1”项下色谱条件进样测定。结果RSD＝
0.87％，表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。
2.2.7 重复性试验 取郁李仁配方颗粒（批号：1210008）适
量，按“2.2.3”项下方法平行制备 6份供试品溶液，再按“2.2.1”
项下色谱条件进样测定。结果苦杏仁苷的平均质量分数为
4.89％，RSD＝2.08％，表明本方法重复性良好。
2.2.8 加样回收率试验 精密称取已知含量的本品粉末（批
号：1210008）0.05 g，共 6份，分别精密加入苦杏仁苷对照品各
适量，按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.2.1”项下色
谱条件进样测定，记录峰面积，计算加样回收率，结果见表1。
表1 加样回收率试验结果（n＝6）
Tab 1 Results of recovery tests（n＝6）
已知含量，mg
2.429 5
2.477 5
2.482 0
2.504 5
2.512 0
2.416 5
加入量，mg
2.502 5
2.502 5
2.502 5
2.502 5
2.502 5
2.502 5
测得量，mg
4.933 5
5.012 0
5.022 5
5.053 0
5.043 0
4.933 5
加样回收率，％
100.06
101.28
101.52
101.84
101.14
100.58
平均加样回收率，％
101.07
RSD，％
0.64
2.2.9 样品含量测定 取9批郁李仁配方颗粒样品，按“2.2.3”
项下方法制备供试品溶液，测定峰面积，重复2次，计算苦杏仁
苷的质量分数，结果见表 2。根据实验结果，规定本品按干燥
品计算，含苦杏仁苷（C20H27NO11）不得少于1.5％。
表2 样品含量测定结果（n＝2）
Tab 2 Results of content determination of samples（n＝2）
批号
1210008
1207085
1202037
1110100
1107095
质量分数，％
4.86
5.42
5.01
1.72
1.75
批号
1101086
1009031
1003112
0907216
质量分数，％
1.70
1.70
5.86
1.81
3 讨论
预试验中，笔者采用 2010年版《中国药典》（一部）中郁李
仁的TLC鉴别方法：用甲醇超声提取后，将滤液蒸干，再用甲
醇溶解制备供试品溶液，以磷钼酸溶液为显色剂。结果该方
法斑点拖尾严重，分离度差，斑点显色不清晰。而本研究所采
用的方法斑点清晰、分离度好[1，5-6]。
在研究郁李仁配方颗粒的含量测定方法中发现，采用文
献方法或者2010年版《中国药典》苦杏仁苷的含量测定项下的
色谱条件[以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-水
图1 薄层色谱图
1～3.供试品；S.苦杏仁苷对照品
Fig 1 TLC chromatograms
1-3. test sample；S. amygdalin reference control
图2 高效液相色谱图
A.对照品；B.供试品；C.阴性对照；1.苦杏仁苷
Fig 2 HPLC chromatograms
A.control sample；B.test sample；C.negative control；1. amygdalin
70
50
30
10
－100 2 4 6 8 10 12 14 16 18
t，min
A
mA
U
70
50
30
10
－10
mA
U
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18
t，min
B
1
1
70
50
30
10
－10
mA
U
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18
t，min
C
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（12 ∶ 88，V/V）为流动相，检测波长为210 nm]，苦杏仁苷峰与另
一未知峰难以分离；而采用本试验的色谱条件，苦杏仁苷峰与
另一未知峰能达到基线分离，峰形可得到明显改善[1，7-8]。
笔者还比较了超声和回流两种提取方式对苦杏仁苷含量
的影响，结果发现回流提取效率更高，因此本研究选用了回流
提取的方式。此外，笔者还考察了水、30％甲醇、50％甲醇、
70％甲醇、甲醇、30％乙醇、稀乙醇、70％乙醇和乙醇等 9种溶
剂对苦杏仁苷的提取效率，结果发现稀乙醇提取效果最好、苦
杏仁苷的含量最高，因此最终选择稀乙醇为提取溶剂。
综上所述，该方法操作简单、灵敏、专属性强、重复性好，
可作为郁李仁配方颗粒的质量控制方法。
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（收稿日期：2014-07-30 修回日期：2014-10-04）
（编辑：孙 冰）
Δ基金项目：义乌市科研计划项目（No.13-3-28）
＊主管药师。研究方向：药学分析。电话：0577-86699575
#通信作者：讲师，硕士。研究方向：药物新剂型和新制剂的开
发。电话：0577-86699575
RP-HPLC法同时测定自制复方雷帕霉素栓剂中雷帕霉素和他克
莫司的含量Δ
叶丛丛 1＊，傅红兴 2 #，周伟忠 3，吴岚岚 3，廖 丽 2，黄斌炯 2（1.温州市人民医院，浙江温州 325000；2.温州医科大
学药学院，浙江温州 325035；3.义乌市中医医院药剂科，浙江义乌 322000）
中图分类号 R917 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2015）03-0388-03
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2015.03.32
摘 要 目的：建立同时测定自制复方雷帕霉素栓剂中雷帕霉素和他克莫司含量的方法。方法：采用反相高效液相色谱法。色谱
柱为Agilent Eclips XDB-C18，流动相为乙腈-3.3％磷酸溶液（65 ∶ 35，V/V），流速为1.0 ml/min，检测波长为210 nm，柱温为50℃，进
样量为 20 μl。结果：雷帕霉素和他克莫司质量浓度在 8.0～400.0 μg/ml范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系（r＝
0.999 9）；精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤1.18％；平均回收率分别为101.28％、97.99％，RSD分别为 2.99％、1.94％（n＝3）。
结论：该方法操作简便、准确，专属性强、重复性好，可用于自制复方雷帕霉素栓剂中雷帕霉素和他克莫司含量的测定。
关键词 雷帕霉素；他克莫司；栓剂；含量测定；反相高效液相色谱法
Simultaneous Determination of Rapamycin and Tacrolimus in Self-made Compound Rapamycin Suppository
by RP-HPLC
YE Cong-cong1，FU Hong-xing2，ZHOU Wei-zhong3，WU Lan-lan3，LIAO Li2，HUANG Bin-jiong2（1.Wenzhou Peo-
ple’s Hospital，Zhejiang Wenzhou 325000，China；2.School of Pharmacy，Wenzhou Medical College，Zhejiang
Wenzhou 325035，China；3.Dept. of Pharmacy，Yiwu Hospital of TCM，Zhejiang Yiwu 322000，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish the method for the content determination of rapamycin and tacrolimus in self-made Com-
pound rapamycin suppository. METHODS：RP-HPLC method was adopted. The determination was performed on Agilent Eclips
XDB-C18 column with mobile phase consisted of acetonitrile-3.3％ phosphoric acid（65 ∶ 35，V/V）at the flow rate of 1.0 ml/min. The
detection wavelength was set at 210 nm，and column temperature was 50 ℃. Sample size was 20 μl. RESULTS：The linear range
of rapamycin and tacrolimus were 8.0-400.0 μg/ml（r＝0.999 9）. RSDs of precision，stability and reproducibility tests were ≤
1.18％. The average recoveries of rapamycin and tacrolimus were 101.28％（RSD＝2.99％，n＝3）and 97.99％（RSD＝1.94％，n＝
3）separately. CONCLUSIONS：The method is simple，accurate，specific and reproducible，and can be used for the content deter-
mination of rapamycin and tacrolimus in self-made Compound rapamycin suppository.
KEYWORDS Rapamycin；Tacrolimus；Suppository；Content determination；RP-HPLC
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