全 文 ：收稿日期:2014-03-26; 修订日期:2014-06-18
基金项目:国家自然科学基金(No． 81260638) ;
江西省自然科学基金(No． 20132BAB205083)
作者简介:邵 峰(1980-)，男(汉族)，江西九江人，江西中医药大学现代中
药制剂教育部重点实验室讲师，硕士学位，主要从事中药质量评价研究工
作．
* 通讯作者简介:刘荣华(1964-) ，男(汉族) ，江西永兴人，江西中医药大
学现代中药制剂教育部重点实验室教授，博士学位，主要从事中药质量评
价研究工作．
不同产地山里红野山楂中
总黄酮总有机酸含量比较
邵 峰1，谷丽菲1，陈慧娟2，刘荣华1* ，黄慧莲1，江东龙1
(1．江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室，江西 南昌 330004;
2．亳州市人民医院，安徽 亳州 236800)
摘要:目的 比较不同产地山里红、野山楂中总黄酮、总有机酸的含量。方法 采用紫外分光光度法，以芦丁为对照品，检
测波长为 499 nm，测定不同产地山里红、野山楂中的总黄酮含量;采用酸碱滴定法，以酚酞为指示剂，测定不同产地山里
红、野山楂中的总有机酸含量。结果 山里红中总黄酮含量在 2． 93% ～ 6． 39%范围内，其中，以山东省潍坊市临朐县出产
的山里红含量最高;总有机酸在 7． 75% ～ 14． 00%范围内，其中，以山东省淄博市沂源县和河北省承德市兴隆县出产的山
里红含量最高。野山楂中总黄酮含量在 2． 24% ～ 10． 92%范围内，总有机酸含量在 0． 75% ～ 3． 35%范围内，上述两类成
分均以湖北省十堰市出产的野山楂最高。经分析比较，山里红中总黄酮含量明显低于总有机酸，而野山楂则相反。结论
该研究为完善现有的山楂质量评价体系提供参考。
关键词:山里红; 野山楂; 总黄酮; 总有机酸; 含量测定
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2015． 01． 005
中图分类号:Ｒ284． 1 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2015)01-0011-02
The Comparison of Total Flavonoids and Total Organic Acid in Crataegus pinnatifida
Bge． var． major． N． E． Br． and Crataegus cuneata Sieb． et Zucc． in Different Habitats
SHAO Feng1，GU Li-fei1，CHEN Hui-juan2，LIU Ｒong-hua1* ，HUANG Hui-lian1，JIANG Dong-long1
(1． Key Laboratory of Modern Preparation of TCM，Ministry of Education，Jiangxi University of Traditional
Chinese Medicine，Nanchang Jiangxi 330004，China;2． The People ＇s Hospital of Bozhou，Bozhou，Anhui，
236800，China)
Abstract:Objective To compare the contents of total flavonoids，total organic acid in Crataegus pinnatifida Bge． var． major． N．
E． Br． and Crataegus cuneata Sieb． et Zucc． in different habitats． Methods Using lutin as the contrast ，total flavonoids in Cra-
taegus pinnatifida Bge． var． major． N． E． Br． and Crataegus cuneata Sieb． et Zucc． in different habitats was determined by UV －
Vis spectrophotometry at wavelength 499 nm;Using phenolphthalein as indicator，total organic acid in Crataegus pinnatifida Bge．
var． major． N． E． Br． and Crataegus cuneata Sieb． et Zucc． in different habitats was determined by acid － base titration．
Ｒesults In Crataegus pinnatifida Bge． var． major． N． E． Br．，the contents of total flavonoids was between 2． 93% and 6． 39%，and
the highest content of total flavonoids was from Linqu County，Weifang City，Shandong Province;the contents of total organic acid
was between 7． 75% and 14． 00%，and the highest content of total organic acid was from Yiyuan County，Zibo City，Shandong
Province and Xinglong County，Chengde City，Hebei Province． In Crataegus cuneata Sieb． et Zucc．，the contents of total fla-
vonoids was between 2． 24% and 10． 92%，and the contents of total organic acid was between 0． 75% and 3． 35%，and both of
the highest content were from Shiyan City，Hubei Province． Total flavonoids are obviously higher than the total organic acid con-
tents in Crataegus cuneata Sieb． et Zucc． by comparison，while Crataegus pinnatifida Bge． var． major． N． E． Br． is opposite． Con-
clusion Our research provides reference for quality evaluation system of hawthorn herbs at present．
Key words:Crataegus pinnatifida Bge． var． major． N． E． Br．; Crataegus cuneata Sieb． et Zucc．; Total flavonoids; Total
organic acid; Assay
山楂为蔷微科山楂属植物山里红 Crataegus pinnatifida Bge．
var． major． N． E． Br．、山楂 Crataegus pinnatifida Bge． 或野山楂
Crataegus cuneata Sieb． et Zucc．的干燥成熟果实。前两者主要盛
产于山东、辽宁、河北、河南、山西等地，习称“北山楂”，后者则主
要盛产于湖北、广西、云南，等地，习称“南山楂”。山楂具有消食
健胃、行气散瘀等功效，临床常用于治疗肉食积滞、胃脘胀满、泻
痢腹痛、瘀血经闭等病症［1］。现代药理研究表明，作为山楂中的
两类主要化学成分，黄酮类成分和有机酸类成分分别具有心肌缺
血保护作用和促消化作用［2 ～ 4］。鉴于此，本研究分别采用紫外分
光光度法、酸碱滴定法，对不同产地山里红、野山楂中的总黄酮、
总有机酸进行含量测定，并加以分析比较，以期为完善现有的山
楂质量评价体系提供参考。
1 仪器与试药
1． 1 主要仪器 UV －2550 型紫外 /可见分光光度计(日本岛津公
司) ，Agilent 1260 型高效液相色谱仪(美国，VWD 检测器，1260
·11·
LISHIZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2015 VOL． 26 NO． 1 时珍国医国药 2015 年第 26 卷第 1 期
化学工作站) ，BT25S 型十万分之一电子天平(赛多利斯科学仪
器(北京)有限公司) ，BT5S型万分之一电子天平(赛多利斯科学
仪器(北京)有限公司) ，N － 1001 型旋转蒸发器(东京理化器械
(株)独资工厂) ，KQ － 300VDB 型双频数控超声清洗器(江苏省
昆山市超声仪器有限公司)。
1． 2 主要试剂与药材 芦丁对照品 (批号:100080 － 200707) ，购
自中国药品生物制品检定所。硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠、无水
乙醇(均为分析纯)均购自国药集团化学试剂有限公司，酚酞(分
析纯)购自上海馨晟试化工科技有限公司，双蒸水(实验室自制)。
山里红药材(产地编号 1 ～ 14) ，野山楂药材(产地编号 15 ～
17) ，见表 1。采集时间为 2012 年 11 月，所有药材经江西中医药
大学刘荣华教授鉴定，保存于江西中医药大学标本馆。
表 1 样品来源
编号 产地 编号 产地
1 山东省潍坊市临朐县 10 河北省迁安市
2 山东省青州市 11 河北省承德市兴隆县
3 山东省昌邑市 12 河北省邢台市清河县
4 山东省淄博市沂源县 13 河南省新乡市新乡县
5 山东省临沂市平邑县 14 山西省运城市绛县
6 山东省临沂市沂水县 15 广西省东兴市
7 山东省临沂市蒙阴县 16 云南省保山市
8 山东省泰安市岱岳区 17 湖北省十堰市
9 辽宁省海城市大桥县
2 方法与结果
2． 1 比色法测定不同产地山里红、野山楂中总黄酮含量［5］
2． 1． 1 药材处理 称取一定量的药材，经粉碎，加入 70%的乙醇
500 ml，在 70℃条件下回流提取 3 次，每次 1 h，经过滤，合并滤
液，减压回收溶剂，得到总提取物。
2． 1． 2 溶液的制备 对照品溶液制备:精密称取芦丁对照品 5
mg，置于 10 ml容量瓶中，用 30 % 乙醇溶解，定容至刻度，得到
浓度为 0． 5 mg·ml －1的母液。
供试品溶液制备:精密称取一定量的总提取物，加 30%乙醇
定容至 50ml容量瓶，得供试品溶液。
2． 1． 3 检测波长的选择 吸取一定量的对照品溶液和供试品溶
液，分别置于 10 ml容量瓶中，依次加入 0． 3 ml 的 5% NaNO2 溶
液，0． 3 ml的 10%Al(NO3)3 溶液，4． 0 ml的 4%NaOH溶液，静置
5 min。最后，加 30%乙醇溶液定容至刻度，超声 30 min，静置。
以相应的试剂作空白，显色后，对照品溶液和供试品溶液分别于
300 ～ 700 nm扫描，结果发现对照品和供试品在 499 nm 处均较
大，因此，确定 499 nm作为检测波长。见图 1。
A． 芦丁对照品 B．山里红(山东省潍坊市临朐县)
C．野山楂(湖北省十堰市)
图 1 对照品与供试品紫外 /可见光谱图
2． 1． 4 标准曲线的绘制 分别精密吸取 0． 4，0． 5，0． 6，0． 7，0． 8
ml芦丁对照品溶液置于 10 ml 容量瓶，依次加入 0． 3 ml 的 5%
NaNO2 溶液，0． 3 ml的 10% Al(NO3)3 溶液，4． 0 ml 的 4% NaOH
溶液，静置 5 min。最后，加 30%乙醇溶液定容至刻度，超声 30
min，静置。用 UV －2550 型 紫外 /可见分光光度计在 499 nm 处
测定对照品溶液的吸光度。对照品溶液浓度与吸光度的线性关
系，得回归方程:Y = 10． 199X + 0． 019 4，Ｒ2 = 0． 9992(Y 为吸光
度，X 为浓度 mg· ml －1) ，以芦丁计在 0． 02008 ～ 0． 04016
mg·ml －1范围内线性关系良好。
2． 1． 5 精密度考察 精密吸取浓度为 0． 5 mg·ml －1的对照品母
液，按照“2． 1． 4”项下方法，在 499nm下，测定吸光度，重复测定 6
次，计算得到 ＲSD为 0． 183%，表明仪器精密度良好。
2． 1． 6 稳定性考察 取同一供试品溶液，按照“2． 1． 4”项下方法，
在 499 nm下，每个隔 15 min测定一次吸光度，连续测定 120 min，
计算得到 ＲSD 为 2． 51%，表明供试品在 120 min内稳定性良好。
2． 1． 7 重复性考察 取同一产地药材 6 份，按“2． 1． 1”项和
“2． 1． 2”项进行制备供试品溶液，分别按照“2． 1． 4”项下方法，在
499 nm下，依次测定其吸光度，计算得到 ＲSD 为 2． 40%，表明重
复性良好。
2． 1． 8 加样回收实验 精密称取已知总黄酮含量的同一产地药
材 1． 0 g，共 5 份，按“2． 1． 1”项和“2． 1． 2”项进行制备供试品溶
液，置于 10 mL容量瓶中，分别加入一定量的芦丁对照品，按照
“2． 1． 4”项下方法操作，测定吸光度，计算回收率，结果表明平均
加样回收率为 103． 1%，ＲSD为 2． 34%，表明方法可靠。
2． 2 酸碱滴定法测定不同产地山里红、野山楂中总有机酸含
量［1］ 依据《中国药典》2010 版一部中山楂检测方法:精密称取药
材粉末 1． 0 g，加蒸馏水 100 ml，于室温下浸泡 4 h，时时振摇，经
过滤，得续滤液。精密吸取续滤液 25 ml，加蒸馏水 50 ml，加酚酞
指示剂 2 滴，用浓度为 0． 1 mol·L －1氢氧化钠滴定液滴定，即每
毫升氢氧化钠滴定液(0． 1 mol·L －1)相当于 6． 404 mg 的枸橼
酸。
2． 3 样品含量测定
2． 3． 1 不同产地的山里红、野山楂中总黄酮的含量 分别称取一
定量的不同产地药材粉末，按“2． 1． 1”项和“2． 1． 2”项制备供试
品溶液，测定吸光度，计算药材中总黄酮的含量。结果表明:山里
红中总黄酮含量在 2． 93% ～ 6． 39%范围内，其中，以山东省潍坊
市临朐县出产的山里红含量最高。野山楂中总黄酮含量在
2． 24% ～ 10． 92%范围内，其中，以湖北省十堰市出产的野山楂含
量最高，如表 2 所示。
2． 3． 2 不同产地的山里红、野山楂中总有机酸的含量 分别精
密称取不同产地药材粉末 1． 0 g，在“2． 2”项制备供试品溶
液，进行酸碱滴定，计算药材中总有机酸的含量，结果表明:山
里红中总有机酸含量在 7． 75% ～ 14． 00%范围内，其中，以山
东省淄博市沂源县和河北省承德市兴隆县出产的山里红含量
最高。野山楂中总有机酸含量在 0． 75% ～ 3． 35%，其中，以
湖北省十堰市出产的野山楂含量最高。参照《中国药典》一
部(2010 版)标准［1］，各个产地山里红均合格，且均远高于各
个产地的野山楂，如表 2 所示。
2． 4 不同产地山里红、野山楂中总黄酮、总有机酸相对含量比较
如图 2 所示，山里红中总黄酮含量是总有机酸含量的 0． 36 ～ 0． 74
倍，而野山楂中总黄酮则是总有机酸含量的 2． 5 ～ 4． 0 倍。结果
表明:虽然总黄酮类成分与总有机酸类成分均为山楂中的主要活
性成分，但是因山里红与野山楂品种的不同，使得上述两种山楂
内的总黄酮与总有机酸之间的相对含量存在较大差异。
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时珍国医国药 2015 年第 26 卷第 1 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2015 VOL． 26 NO． 1
表 2 不同产地山里红、野山楂中总黄酮、总有机酸含量测定 %
样品
总黄酮
含量平均值 ＲSD
总有机酸
含量平均值 ＲSD
1．山东省潍坊市临朐县 6． 39 1． 39 12． 30 2． 48
2．山东省青州市 6． 38 2． 06 13． 00 1． 86
3．山东省昌邑市 4． 08 1． 26 9． 80 1． 71
4．山东省淄博市沂源县 5． 04 1． 16 14． 00 1． 76
5．山东省临沂市平邑县 4． 47 1． 03 8． 35 2． 78
6．山东省临沂市沂水县 4． 25 1． 54 10． 90 1． 30
7．山东省临沂市蒙阴县 5． 06 2． 67 9． 35 1． 66
8．山东省泰安市岱岳区 6． 20 2． 87 8． 35 1． 82
9．辽宁省海城市大桥县 5． 32 0． 76 11． 45 0． 98
10．河北省迁安市 6． 24 0． 97 12． 30 1． 00
11．河北省承德市兴隆县 5． 58 1． 53 14． 00 1． 02
12．河北省邢台市清河县 3． 43 0． 61 9． 40 1． 52
13．河南省新乡市新乡县 5． 20 1． 22 10． 85 0． 67
14．山西省运城市绛县 2． 93 1． 38 7． 75 1． 56
15．广西省东兴市 3． 00 2． 38 0． 75 3． 15
16．云南省保山市 2． 24 1． 18 0． 90 3． 08
17．湖北省十堰市 10． 92 1． 16 3． 35 2． 73
n =3
1．山东省潍坊市临朐县 2．山东省青州市 3．山东省昌邑市
4．山东省淄博市沂源县 5．山东省临沂市平邑县 6．山东省临沂市沂水县
7．山东省临沂市蒙阴县 8．山东省泰安市岱岳区 9．辽宁省海城市大桥县
10．河北省迁安市 11．河北省承德市兴隆县 12．河北省邢台市清河县
13．河南省新乡市新乡县 14．山西省运城市绛县 15．广西省东兴市
16．云南省保山市 17．湖北省十堰市
图 2 不同产地山里红和野山楂中总黄酮与总有机酸之间相对含量比较
3 讨论
山楂具有消食健胃、行气散瘀，等功效。山里红和野山楂分
别作为北山楂和南山楂常用于中医临床。早期药理研究表明，山
里红对消化系统的小肠推进运动作用强于野山楂，而抗心肌缺血
和降胆固醇作用却明显弱于野山楂［6］。作为山楂中的两类主要
活性成分，总黄酮类成分与总有机酸类成分分别对心血管系统疾
病和消化系统疾病具有良好治疗作用［2 ～ 4］。为此，本研究分别对
不同产地山里红和野山楂中的总黄酮和总有机酸进行含量测定，
结果表明，山里红中的总黄酮含量明显低于总有机酸，而野山楂
中的总黄酮含量则远高于总有机酸含量。鉴于此，笔者认为虽然
山里红与野山楂同属山楂药材，且均含有总黄酮类成分和总有机
酸类成分，但因上述两类成分在山里红和野山楂中相对含量的不
同，使得该两种山楂药材发挥不同的药效作用。因此，从中医临
床用药角度，结合山里红与野山楂各自内在活性成分之间相对含
量的特点，对现有的山楂质量评价体系进行完善，将成为本课题
组今后开展研究工作的重点。
参考文献:
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中国生化药物杂志，2011，32(6) :475．
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比较［J］．中国中药杂志，1994，19(8) :454．
收稿日期:2014-02-16; 修订日期:2014-08-12
基金项目:国家自然科学基金(No． 81160514) ;国家中医药管理局“十二五”中医药重点建设学科(培育学科)“中医药微生态学”项目
作者简介:雷 娜(1985-) ，女(汉族) ，云南昆明人，云南中医学院助理实验员，硕士学位，主要从事中药药理学研究工作．
* 通讯作者简介:林 青(1961-) ，女(汉族) ，云南昆明人，云南中医学院教授，学士学位，主要从事中药药理学研究工作．
云南昭通三种天麻镇痛抗炎作用的比较研究
雷 娜，柳丽松，韩春妮，王维丽，颜汉文，殷 红，林 青*
(云南中医学院，云南 昆明 650000)
摘要:目的 比较云南昭通地区三种天麻变型的镇痛、抗炎作用，为昭通地区天麻的选种种植提供科学依据。方法 采用
热板法和扭体法评价昭通地区三种天麻变型乙醇提取物的镇痛作用;应用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法评价三种天麻变型
提取物的抗炎作用。结果 乌天麻、黄天麻、绿天麻乙醇提取物腹腔注射给药后均能提高热板法致痛小鼠的痛阈值，并能
减少冰醋酸致小鼠扭体的次数，其作用呈剂量依赖性关系。乌天麻、黄天麻高剂量对二甲苯引起的小鼠耳肿胀模型有抑
制作用。结论 在云南三种天麻变型中乌天麻和黄天麻有显著的镇痛、抗炎作用。
关键词:三种天麻; 乙醇提取物: 镇痛; 抗炎
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2015． 01． 006
中图分类号:Ｒ284． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2015)01-0013-03
Effect of Yunnan Zhaotong Three Kinds of Gastrodia elata on Analgesic and Anti － in-
flammatory
LEI Na，LIU Li-song，HAN Chun-ni，WANG Wei-li，YAN Han-wen，YIN Hong，LIN Qing*
·31·
LISHIZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2015 VOL． 26 NO． 1 时珍国医国药 2015 年第 26 卷第 1 期