全 文 ：刁 l
/
时珍 国医国药 20 0 4 年第 巧 卷第 4 期 I lH H l s zE N ME D xeIN E A丙 D M A,l E R xA M E o l c A R E s E A R e H Z o o 4 v ( _ ) 1 . 2 5 N o . 4
令资源开发令
菊三七的组织培养与快速繁殖研究
吴 斌 ` , 吴德康 ` , 陈坚波 “
(1
. 南京中医药大学 ,江苏 南京 2 1 0 0 2 9 ; 2 . 金华职业技术学院医学院 ,浙江 金华 3 2 1 0 0 0)
摘要 : 目的 : 在菊三 七 自然繁殖率低下 的情况 , 探讨利 用 组织 培养方法解决繁殖的 问题 。 方 法 : 不 同 部位 菊三 七外植 体进
行无菌苗的诱导培养 。 结果 : 诱导 率表现为 茎尖> 带腋芽的 茎段 , 而 叶片则 不 能被诱导发 芽 。 结论 : 茎尖是理想 的快速繁
往材料 。 初代培 养过程中 , M S + 6 B A (2 m g / L ) + N A A (0 . 2 m g / L ) 为最佳培养基 ; M S+ N A A (0 . 2 m g I/ ) 为理 想的继代增
殖培养基 ; 12/ M S + I B A (1 . 0 m g 1/ ) + N A A (0 . 1 0 9 / )L 为最佳 的生根培养基 。
关键词 : 菊三 七 ; 组织 培养 ; 快速繁殖
中图分类号 : R S 5 6 7 文献标识码 : A 文章编号 : 10 0 8一 0 8 0 5 ( 2 0 0生) 0 4一 0 2 5 2一 0 1
T i s s u e C u l t u r e a n d R a P id P r o P a g a t i o n o f G y n u ar s e g e t u m
w u B i n
’ ,
w u D e
一
k a n g
l , e H E N J ia n
一
b o
艺
( 1
.
N a n 7 in 君 〔j n iv e ,, s it夕 ` , f 了’ C M , N a n 了in g , J ; a , 29 5 : ` 2 1 0 0 2 9 , C h in a ; 2 . M 尸d ic a l s ` ,h 、 1 o f , J i , Zh “ a V o e、 z , o 。 -
a l a ” d eT
c h , : 0 1叹 ic a l肠 11召 g e , 11, , h 乙` a , Z h e 7 al n g 3 2 1 0 0 0 , C h寿: a )
A b s t r a e t : o b j e
e t iv e : T
o
m
a
k
e i t p o s s : b l
e t h a t G 夕, `u r a s e g e t u m e a n l) e r a p id p r o p a g a t io n . M e t h o d s : T h e d if f e r e n t p a r t s o f
e x p la n t o f G 夕n u ar s e g e t u 阴 w e r e m a d e in d u e e d e u l t u r e . R e s u l t s : I n d u e t l v e r a t e p r e s e n t s s t e m t e r m in a l b u d a u x i l一a r y b u d , b u t
l
e a v e , e a n n o t b
e b u dd
e d o f f
.
C o n e l u s i o n
:
I n t l
l e P r o e e s o o f s u b
e u
lt
u r e , t h e s u b
e 口
l t
u r e e
f f
e e t o f
e u
l t
u r e n l e
d i
u
m M S + N A A
( 0
.
2 m g / L ) i、 t飞、 e b e s t . C u lt u r e , n e d : u m o f r o o t in i t ia t l o n l / ZM S + I B A ( 1 . 0 m g / 1一 ) 十 N A A ( 0 . 1 m g / L ) h a v e t h e b e s t e f-
f
e e t
.
K e y w o r d s : yG
n u r a : e g e t u树 ; T : s s u e c u lt u r e ; R a p id p r o p a g a t l o n
菊三七 G y o ar 、 ge e ut m ( I J o u r . ) M er r . 为菊科土三七属多年
生草本植物 ,全草人药 。 别名土三七 、 破血丹 、 紫三 七等 ,具有治跌
打损伤 、 止痛消肿 、 活血化癖 、 消炎止血 、 抗瘩防癌 、 治妇科诸病 的
功效 , 经济价值高 。 但多年来菊三七被毁 灭性挖取 , 种源稀 少 , 满
足不了市场需求 , 若不采取行之有效 的措施 , 中药资源将难 以实
现可持续发展 。 应用组织培养进行快速繁殖可解决资源紧缺的问
题 。
1 材料与方法
1
.
1 材料 试验材料采自江西省 , 外植体取茎尖 、 带腋芽的茎段
和叶片 , 用淆水冲洗 Z h 后 , 在超净工作台上进行外植体的消毒
处理 。
1
.
2 培养滋 基本 培养为 M S , 按不 同处理方案添 加不同类型 的
植物激素 , 用 。 . I N N a O H t o 1N H CJ _ 调节 p HW F H G O . 5 ~ 6 . 。 ,
在高压灭 菌锅中高温 ( 12 1 C )灭 菌 2 0 m in , 上述培养基均加 3 %
蔗搪 、 1% 琼脂 , 培养室 温度 25 `C 左 右 , 光 照 13 1飞d/ , 光 照强度
2。。01 x 左右 . 移栽基质经过 灭菌消毒处理 , 按 m (珍珠岩 ) ; m (草
炭 ) ; m (菜园土 ) 二 1 : 1 : l 比例混合 。
1
.
3 方法 取茎尖 、茎段 (带芽 ) 和叶为外植体 , 按 下列程序进行
消毒 : 取材~ 自来水粗洗~ 5 %洗衣粉水溶液漂洗 s m in ~ 自来
水冲洗 30 m in ~ 75 %乙醇擦洗 表面 ~ 0 . 1% 升汞溶液中消毒 5
m访~ 2 %次抓酸钠溶液 中消毒 20 m : n ~ 无菌水冲洗 4一 6 次 , 然
后在无菌工作台中将外植体切成 。 . 5~ 1 . 0 c m 长的小段接种于
诱导培养基上 ;将培养出来的愈伤组织切成小块接种于增殖培养
基上 ;最后将形成不定芽 的块 段转移至生根 培养基上 , 以 培育出
完整的小植株 , 以 7 d 为 1 周期 ,观察记 录不 同处理的生长状况 。
2 结果与分析
2
.
1 诱芽培养 分别将不同部位的外植体接种到表 1 各培养基
中 、 发现不同外植体诱导愈伤组织有一定的差异 . 在茎尖 、 茎段和
叶片的愈伤组织诱导中 , 由 3 号培养基的激素浓度配 比诱芽效果
最好 ,该组合下诱导 的愈伤组织出芽率高 ,生 长快 。
裹 1 诱导菊三七不定芽的培 养基配方
序号 基本培养基
6一 B A
(丫 , n g · L 一 ’
IB A
C / m g
·
I 一 l
N A A
C / m只 · l
诱导率
( % )
1 M S 0
.
5 1
.
0 60
2 M S 工
.
0 0 5 55
3 M S 2
.
0 0
.
2 8 ( )
4 N S 1
.
0 ( )
.
1 0
.
1 7 0
5 M S 1
.
0 0
.
1 7 6
菊三 七的茎 尖 、 茎 段和 叶片对 愈伤组 织诱导不 一样 、 在 由 3
号培养基的激素浓度配 比下试验结 果 ( 见表 2) 表明 :愈伤组织 的
诱导及分 化不定芽能力 以 茎尖为最好 , 茎段 次之 , 而叶 片形 成愈
伤组织的能力最差 , 虽经改变多种激素组合来调节叶柄愈伤组织
的出芽率 , 仍只有少数激素组合诱导 出愈伤组织 .
表 2 不同外植体诱 芽的影 响
外植体 接 种块数 愈伤组织个数 出芽率 ( % ) 不定芽个数
0八1刃ng曰5,J0只Uùb顶芽 5 0 月
茎段
收稿日期 : 2 00 3一 0 8一 l 名 ; 修订 日期 : 2 0 0续一 0 2一 0 7
作者简介 : 吴 斌 (1 97 6一 ) . 男 (汉 族 ) , 浙 江 湖州人 . 现为 南京中医 药大 学
硕士研 究生 , 学士学位 , 主要从事中药质童标准研究工作 .
2
.
2 继代增殖 将诱导 出来的愈伤 组织及 芽丛转到新 的 3 种不
同激素组合的培养基上进行继代培养 , 将初代培养荃的芽丛分离
并切割成 Z c m 的 茎段 , 接种 于 培养 基 M S + N A A O . 2 ; M S 十
6B A O
.
2+ N A A o
.
5 ; M S十 6 B A Z刁一 N A A o . 2 。 接后给予全天光照 ,
室温 2。一 28 C 。 3 d 后基部全部开始膨大 , 1周后腋芽开始萌动 ,
且 萌萦生长很快 。 此项表明 6 B A 在地被菊三七的继代培养中作
用 可 以忽略 , 以认为 M S + N A A o . 2 最佳组 合的继 代增 殖 培养
基 。
2
.
3 生根培养 不同激素组合对其生根状影响较大 (表 3 ) 。 将诱
导成活 的丛 生芽切割成单芽 , 分别转接到表 心各培养基中 (每瓶
接 1 个芽 ) , 3 o d 后 2 号培养基的生根 率最高达 70 % 。
2 5 2
LS I HIZN E H ME D C I IN E AN D MA I
、
E R I A ME D IC ARE S E A2 C R H0 0( 4 V )1
.
N 5 10
.
4时珍 国医国药 2 0 0 4年第 巧 卷第 4期
培养基序号
表 3不 同培养基的生根率比较
接种瓶数 生根瓶数 生根率 ( % )
2 5 5 4 146
26 0 42 70
5 30 2 142
450 2 5 98
表 4生根培 养基配方
序号 鉴本培养纂 I BAC /m g· l一 王 N AC A /m g· I一 1
0 1 .
l /Z MS
l /Z MS
1 /Z MS
l /Z MS
{
.
:
2
.
4移栽定植 芽长到 3一 4c m时 , 切取健壮的植株转到生根培
养基上 , 所有的植株都能 正常生长 , 培养 1 周 后 , 即诱导 出根 , 10
d 后每株 可长 出 3 ~ 5 条根 , 根长达 4 ~ S C m , 再培养一周 , 植株健
壮 , 叶色浓绿 , 然后揭去纸盖练苗 。 轻轻洗去根部培养基 , 移到蛙
石的小盆中 , 盖上塑 料膜及烧杯 , 保持较高的温度 , 10 d 后揭 去
塑料膜及烧杯 , 可移栽到大 田 ,小 苗成活率 9 5 % 。
3 结论
对菊三七不同部位 的外植体进 行诱导 , 在相 同消毒处理下 和
同种培养基 中 , 最佳诱导外植体 为茎尖 , 初代培养过程中以 M S
+ 6 B A (2 m g / L ) + N A A (0
.
2 m g / L ) 为最佳培养基 。 继代增殖使
用 的培养基 M S + N A 八 ( 。 . 2 m g / I ) 为理想的培养基 , l 2/ M S +
BI A ( 1
.
o m g l/ )
一卜N A A (0 .l m g八矛 )为最佳的生根培养基 。
抽,立八乙qJ月以`
玫瑰花的栽培技术
于崇田 ’ , 王 万胜 2 , 蒋 勇 `
(1
. 山东省药材技工学校 ,山东 泰安 2 7 1 0 0。 ; 2 . 山东省宁津县医药总公司 2 5 3魂。 0)
关键词 : 玫瑰花 ; 繁殖 ; 田 间管理 ; 病 虫 害
中图分类号 : R 5 6 7 文献标识码 : C 文章编号 : 1 0 0 8一 0 8 0 5 ( 2 0 0 4 ) 0 4一 0 2 5 3一 0 1
玫瑰 花又 叫徘 徊 花 、 笔头 花 、 刺玫 花 , 为蔷薇 科 植物玫 瑰 殖 。
R o
a
0 9 “ “ T h o n b 的花蕾人药 。 能行气解郁 , 和血散疲 、 止痛 。 治
疗肝 胃气痛 , 食少呕恶 , 新久风痹 , 吐血 咯血 , 月经不调 , 赤 白带
下 , 痢疾 , 乳痈 , 肿毒 , 跌扑伤痛等症 。 《本草正义 》谓 : “ 玫瑰花 , 香
气最浓 , 清而不浊 ,和 而不猛 . 柔肝醒 胃 , 流气活血 , 宣通 窒滞而绝
无辛温刚燥之弊 , 断推气分药之 中 , 最有捷效而最为驯 良者 . 芳香
之品 , 殆无其匹 ” 。 玫瑰花还是名贵的天然香料 , 利用玫瑰花提取
的挥发油— 玫瑰油 , 现广泛用于食品 , 化妆 , 护肤美容 、饮料 、 卷烟等行业 。 鲜玫瑰花姿容妖媚花香宜人 , 是名贵切花花卉 。
玫瑰花色艳花香 , 适应性强 , 我国中北部地区均可栽 培 。本品
耐寒 、 耐早 , 根系发达 , 有 良好 的保持水土作用 , 在开发西部 中作
为经济效益显著的水土保持植物予以推广 。
1 选地整地
选择阳光充足 , 通风排水 良好 , 地 势高燥平整的砂质壤土为
好 ,不宜选无排灌条件 , 易积水 的洼地 。 选好地后 , 在 10 ~ n 月深
翻地土 25 ~ 3 0 c m ,耙细整平 , 作宽 1 ~ 1 . Z m , 高 10 一 15 c m 的高
畦 。
Z 挤殖
该植物的繁殖方法一般有分株 、压条 、扦插 、 埋根和嫁接五种
方法 , 因嫁接繁殖手续麻烦 , 一般不宜采用 。
2
.
1 分株繁殖 因玫瑰分孽能力很强 , 且每次抽 出新枝后 , 母枝
易枯萎 ,所 以必须将根 际附近的嫩枝及时移植到别处去 , 一方 面
使母枝能旺盛生长 , 另一方面繁育 出新植株 。 具体做法是 , 分株前
一年 , 在母株根际附近施足肥 料和浇水 ,保持土壤疏松湿润 , 促使
根部大量分桑 。 每年 H 一 飞2 月 , 植株落 叶后或翌年 3 月中下旬未
发芽前 , 掘取母枝旁生长 的新株 , 每丛具茎干 2 一 3 枚按行距 5 0
~ 6 0
C m
, 株距 30 一 4 0 。 m 。 连根带土栽于穴 内 。 覆土压紧 , 浇透
水 。 成活后 自地面上 20 ~ 25 c m 处剪枝 。 生长 2 ~ 3 年 即可开花 。
2
.
2 压条繁殖 7一 9 月间 ,选 当年生健壮的新枝 , 先在其旁开沟
或穴 , 将枝条弯曲压人沟或穴 内 , 瞿土压实 , 枝梢露出地 面 。 10 月
下旬或次年春季枝上生长出新根后 与母株分离 , 进行移栽 , 株 、 行
距 同分株繁殖 。
2
.
3 扦插繁殖 早春发芽前剪下生长健壮 , 无病虫害的一年生枝
条 , 然后剪制插穗 。 穗长 10 c m 左右 , 剪时下切 口位 于末 节下约
0
.
5 C m 处斜切 。 在整好的苗 田里按行距 30 c m 开沟 ,在沟 内按株
距 5~ 10 c m 将插穗插人 土中约 23/ 。 再用土压实 , 浇透水 , 保持
湿润 , 约 3 0 d 生根 , 待植株成活后 , 移植大 田 , 株 、 行距 同分株繁
收稿日期 : 2 0 0 3一 10一 0 8 ; 修订 日期 : 2 0 04 一 0 2一 1 8
3 田 间管理
栽植后要 浇透水 , 以利成活 。 生长期进行培土 , 锄草 。 人冬后
进行一次培土 , 一则防冻 , 二则将叉枝扶正 , 对枝条稀疏 的花墩多
培土 , 使其萌发更多的枝条 ;对枝条密集者少培土 ,减少萌条的发
生 。 每年开花后 、 落叶后或春季发芽前剪去病枝 、 虫咬枝及 5 年以
上的衰 老枝 。 保留 2一 3 年的健壮枝 , 如为观赏或绿化 时 , 结合剪
枝进行整形 。
4 追肥
玫瑰 喜肥 , 栽种前要施足基肥 , 第 2 年清 明前后 , 植株萌动
时 ,施 1 次 以 氮肥 为主 的萌 动肥 , 4 月 中 、 下旬 花苞露红时 ,施 一
次开花肥 , 收完花后再施 l 次补养肥 。 人冬时 , 结合培土施一次以
农家肥为主的越冬肥 。 玫瑰 进入盛花期时 , 追施豆饼 7 5 0 k g / la 。
每次施肥后 ,要及时浇水 。
5 病虫害防治
5
.
1 锈病 感病后茎 叶呈 现红色斑点如锈 , 易使叶片脱落 , 影 响
次年开 花 。 防治措施 同黄斑病 。
5
.
2 黄斑病防治法 此病在 早春 花蕾刚形成 时发生 , 在气温 巧
~ 16 C时开始蔓延 , 为害叶柄及花蕾茎部 , 出现一点点黄色 , 以后
花蕾雕落 。 防治措施 :冬季翻地后不打碎土块 , 喷洒波美 5度 的石
硫合剂于地面和植株上 , 早春萌动前后用波美 3 度的石硫合剂再
喷 l 次 , 花蕾 形成时再喷一次浓度稍低 的石硫合剂 , 发现病枝及
时剪下烧毁 。
5
.
3 白粉病防治法 多在夏季高温时发 生 。 病菌浸 染叶 、 茎 、 花
柄 , 早期症状为幼叶扭 曲 , 灰色 , 长 出一层 白色粉末状物 , 严 重时
花少甚至不开花 , 叶 片枯萎而死 亡 。 防治措施 : 喷洒 50 % 可湿 性
托布津 1 0 0 倍 液 , 抽新 叶后 每周喷 1 : 1 : 10 0 波 尔多液 1 次 ,
连续喷 2一 3 次 。
5
.
4 虫害 主要 有金龟子 , 钻心 虫和蓑 蛾 (皮 虫 )发 生时诱杀 、 捕
杀或用杀虫剂如乐果等喷洒 。
6 采收加工
5 ~ 6 月间 , 当花蕾即将 开放 时 , 分批采摘 已 充分膨大 , 但未
开放的花蕾 。 商品俗称 “ 头水花 ’川二水花 ’川三水花 ” 。 采摘时间最
好在太 阳初升 , 露水未干时进行 。 采摘后 , 用文火迅速烘干 。 烘时
将 花摊 成薄层 , 花冠 向下 , 便其最先 干燥 , 然后 翻转烘干其余部
分 , 烘干温度一般控制在 50 C 以下 。 或放在干燥通风处 阴干 , 忌
晒干 , 因晒干者 ,颜色 、 香气均较差 。 一般可产鲜 花 3 0 0 0 ~ 3 75 。
k g / r: a 折干率为 : 为水花 6 0 k g 出 1 5 k g , 其它的 6 7 . 5 ~ 7 5 k g 出
1 5 k g 干货 。
2 5 3