全 文 ：［饮片炮制］
川木香煨制前后大鼠在体肠吸收动力学对比研究
高 飞1， 傅超美1， 胡慧玲1* ， 王战国2， 章津铭3， 彭 伟1， 盛菲亚1
(1． 成都中医药大学药学院 中药材标准化教育部重点实验室 中药资源系统研究与开发利用省部共建国家
重点实验室培育基地，四川 成都 611137;2． 四川大学生命科学学院，四川 成都 610041;3． 澳门大学中
华医药研究院，澳门大学中药质量研究国家重点实验室，澳门 999078)
收稿日期:2013-03-27
基金项目:国家自然科学基金青年基金项目 (81001638)
作者简介:高 飞 (1987—) ，男，硕士生，从事中药炮制与制剂学研究。E-mail:feigao207@ yeah． net
摘要:目的 比较分析川木香煨制前后主要药效成分木香烃内酯和去氢木香内酯在大鼠在体十二指肠、空肠、回肠的
吸收动力学差异。方法 建立大鼠原位十二指肠、空肠、回肠吸收灌注模型，利用 HPLC-UV 法测定木香烃内酯、去
氢木香内酯和酚红的量，获取川木香煨制前后主要药效成分在小肠不同肠段的吸收动力学参数。结果 川木香煨制前
后，其主要药效成分木香烃内酯和去氢木香内酯在小肠各个肠段 (十二指肠、空肠、回肠)的吸收没有显著性的差
异;此外，十二指肠段是川木香生品和煨品在小肠部位的最佳吸收肠段。结论 川木香是否煨制与小肠吸收无关。
关键词:川木香;煨制;原位肠吸收;木香烃内酯;去氢木香内酯
中图分类号:Ｒ283 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2013)11-2466-05
doi:10. 3969 / j． issn． 1001-1528. 2013. 11. 035
Effect of processed and crude Vladimiriae Ｒadix on intestine absorption kinetics
in rats
GAO Fei1， FU Chao-mei1， HU Hui-ling1* ， WANG Zhan-guo2， ZHANG Jin-ming3， PENG Wei1，
SHENG Fei-ya1
(1． Pharmacy College，Chengdu University of Traditional Chinese Medicine;Ministry of Education Key Laboratory of Standardization of Chinese Herbal
Medicine;State Key Laboratory Breeding Base of Systematic Ｒesearch，Development and Utilization of Chinese Medicine Ｒesources，Chengdu 611137，Chi-
na;2． College of Life Science，Sichuan University，Chengdu 610041，China;3． Macao Institute of Chinese Medical University;State Key Laboratory of
Quality Ｒesearch Macao University of Traditional Chinese Medicine Macao 999078，China)
ABSTＲACT:AIM To analyze the difference of the main effective components of costunolide and dehydrocos be-
tween the crude and the processed Vladimiriae Ｒadix in absorption kinetics in rat’s duodenum，jejunum，ileum．
METHODS Ｒat’s model for in situ perfusion was established to measure the parameters of absorption kinetics in
intertinal segements by HPLC-UV． ＲESULTS The absorption of costunolide and dehydrocos in the crude and
processed samples had no statistical different intestinal segments． Moreover，duodenum was the best part for cost-
unolide and dehydrocos absorption in small intestine． CONCLUSION The reason that processed of crude Vad-
imiriae Ｒadix may not be related to the intestine absorption．
KEY WOＲDS:Vladimiriae Ｒadix;processed;in situ intestinal absorption;costunolide;dehydrocos
川木香属川产道地药材，为中医、藏医、羌
医、蒙医等临床常用药材之一，主要用于消化道疾
病的临床治疗。《中国药典》2010 年版一部川木香
饮片的炮制项下将其分列为 “川木香”和 “煨川
木香”两种［1］，但二者无功能与主治的界定。据
此，课题组前期对川木香煨制前后化学成分变化与
药理作用的相关性进行了初步研究［2-4］。在此基础
上，为进一步探讨川木香煨制的机理，课题组从胃
肠道吸收角度对二者进行了比较，已从川木香煨制
前后的主要药效成分在大鼠胃、小肠、结肠吸收的
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差异性进行了研究，结果表明川木香生品药效成分
在胃和小肠中的吸收速度高于煨品，而煨品中药效
成分在结肠中吸收速度高于生品［5］，此吸收的转
移特性基本符合 《本草必用》中 “生用理气，煨
熟止泻”的传统理论。为了更全面的了解二者在
胃肠道吸收层面的差异性，本实验将研究重心放在
川木香煨制前后其主要药效成分 (木香烃内酯和
去氢木香内酯)在小肠不同肠段 (十二指肠、空
肠、回肠)的吸收差异，通过建立大鼠原位十二
指肠、空肠、回肠吸收灌注模型，获取煨制前后其
主要药效成分在小肠不同肠段的吸收动力学参数，
为二者功效差异的药动学基础及其机制的研究提供
参考。
1 材料
Agilent 1100 高效液相色谱仪包括四元梯度泵
单元、自动脱气单元、自动控温进样单元、VWD
可变波长检测器单元和 Chem Station 色谱工作站等
(Agilent Techologies，美国) ;Votex Genius 3 涡旋
混合仪 (IKA，德国) ;HL—2 型恒流蠕动泵 (上
海青浦沪西仪器厂) ;HH—2 数显恒温水浴锅 (国
华电器有限公司) ;CP225D 和 BS210S 电子天平
(Sartorius，德国) ;KH—300DB 型数控超声仪
(昆山禾创超声仪器有限公司) ;TDL—5 台式高速
离心机 (上海市安亭科技仪器厂) ;WSD—UP—
III—10 精密型纯水机 (成都威思达智能科技有限
公司)。
木香烃内酯 (批号 111524-201107)、去氢木
香内酯 (批号 111525-201105)对照品购于中国药
品生物制品检定所;人工胃液［6］ (取稀盐酸 46
mL，加水定容至 1 000 mL) ;标准 Krebs-Ｒinger 试
液［6］ (称取 NaCl 7. 8 g，KCl 0. 35 g，CaCl2 0. 37
g，NaHCO3 1. 37 g，NaH2PO4 0. 32 g，MgCl2 0. 02
g，葡萄糖 1. 4 g，加水定容至 1 000 mL，简称 K-Ｒ
液) ;酚红 (天津科密欧化学试剂开发中心) ;乌
拉坦 (成都科龙化学试剂厂) ;甲醇为色谱纯 (美
国 Fisher公司) ;甲酸为色谱纯 (成都科龙化学试
剂厂) ，其他试剂均为分析纯。
川木香样品采集于四川省阿坝州茂县雅都乡，
经成都中医药大学中药鉴定教研室卫莹芳教授鉴定
为菊科川木香属植物灰毛川木香 Vladimiria souliei
(Franch．)Ling var． cinerea Ling的干燥根。川木香
煨品按 《中国药典》2010 年版一部 “煨川木香”
项下规定［1］，结合本课题组前期工作基础［7-8］，取
川木香生品药材，加适量的水浸泡，闷润 6 h 后，
切成 1cm 左右的薄片，低温干燥后，一层草纸一
层川木香，间隔平铺 3 ～ 4 层，120 ℃煨制 2 h，取
出，放凉，即得川木香煨品药材。
Wistar大鼠，雄性，体质量 (200 ± 25)g，由
四川省医学科学院实验动物研究所提供，合格证
号:SCXK (川) 2008-24，实验前未用过任何
药物。
2 方法和结果
2. 1 HPLC测定方法
2. 1. 1 色谱条件及样品处理方法 结合前期工作
基础［5］并根据实验实际情况得优化的色谱条件，
Amethyst C18色谱柱 (250 mm × 4. 6 mm，5 μm) ;
流动相为乙腈 (含 0. 2%甲酸，A)-水 (含 0. 2%
甲酸，B) ，梯度洗脱，0 ～ 8 min (30% A) ，8 ～ 10
min (30% → 75% A) ，10 ～ 20 min (75% A) ，
20 ～ 22 min (75% →30% A) ，22 ～ 28 min (30%
A) ;柱温为 35 ℃;体积流量为 1. 0 mL /min;检测
波长为 220 nm;进样量为 20 μL。
A． 空白肠灌注液 B． 混合对照品溶液 C． 川
木香肠循环溶液 1． 酚红 2． 木香烃内酯
3． 去氢木香内酯
A． blank circumfusion solution B． reference sub-
stances C． the intestinal circumfusion sample of
Vladimiriae Ｒadix before being roasted 1． phenol-
sufonphthalein 2． costunolide 3．
dehydrocostus lactone
图 1 对照品及供试品的 HPLC图谱
Fig. 1 HPLC spectrums
取大鼠原位肠灌注样品溶液 0. 4 mL，置 1. 5
mL塑料离心管中，精密加入甲醇 0. 8 mL稀释，涡
旋混合 2 min (2 000 r /min) ，离心 5 min (12 000
r /min)后，吸取上清液置进样瓶中，进样。
2. 1. 2 专属性考察 取空白肠循环灌注液、混合
对照品溶液、川木香生品小肠灌注液、川木香煨品
小肠灌注液各 0. 4 mL，按 2. 1. 1 项下要求进样分
析。如图 1 所示，空白肠灌注液中的成分不干扰木
香烃内酯、去氢木香内酯及酚红的测定，且供试品
中此 3 种待测成分与其相邻组分的分离度均大于
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1. 5，且峰形尖锐对称，理论塔板数按木香烃内酯
计不小于 6 000，方法专属性良好。
2. 1. 3 标准曲线和线性范围 采用原位灌注的实
验方法考察药物的在体肠吸收时，实验选择肠不吸
收性物质酚红校正药物因水吸收导致的浓度偏差。
分别取酚红及木香烃内酯、去氢木香内酯适量，精
密称定，置 100 mL 棕色量瓶中，用空白 K-Ｒ 溶
液-甲醇 (1 ∶ 2)溶液稀释定容至刻度，摇匀，得
到质量浓度分别为 58. 85、59. 69、109. 37 μg /mL
的贮备溶液。分别精密吸取 3 种贮备液各 8 mL，
置 25 mL 棕色量瓶中，用 K-Ｒ 溶液 ∶ 甲醇(1 ∶ 2)
溶液稀释定容至刻度，摇匀，得混合对照品贮备液
S1;将 S1 依次稀释为原来的 2 倍、2. 5 倍、5 倍、
10 倍、20 倍、50 倍，制得混合对照溶液 S2 ～ S7。
分别精密吸取上述混合对照品溶液 S1 ～ S7，按
2. 1. 1 项 下 要 求 测 定，以 对 照 品 质 量 浓 度
(μg /mL)为横坐标 (X) ，峰面积为纵坐标 (Y) ，
绘制标准曲线，结果见表 1。
表 1 混合对照品标准曲线方程及线性范围
Tab. 1 Standard curve equation and linear range of hybrid
reference substances
成分 标准曲线
相关系数
(r)
线性范围 /
(μg·mL －1)
去氢木香
内酯
Y = 31. 73X + 6. 033 9 0. 999 9 0. 38 ～ 19. 10
木香烃
内酯
Y = 30. 564X － 1. 062 3 0. 999 9 0. 38 ～ 18. 83
酚红 Y = 35. 29X + 2. 718 4 0. 999 9 0. 70 ～ 35. 00
2. 1. 4 回收率和精密度考察 分别吸取 2. 1. 3 项
中的混合对照品贮备溶液 S1 (木香烃内酯、去氢
木香内酯和酚红的质量浓度分别为 18. 83、19. 10、
35. 00 μg /mL)0. 2 mL、1 mL、2. 5 mL于 10 mL量
瓶中，用空白 K-Ｒ溶液-甲醇 (1 ∶ 2)溶液稀释定
容至刻度，摇匀，制成低、中、高 3 个质量浓度的
供试品溶液，按 2. 1. 1 项下要求测定，以测定浓度
与配制浓度之比计算回收率。结果表明，低、中、
高质量浓度供试品溶液中木香烃内酯、去氢木香内
酯及酚红的平均回收率均在 98. 10%到 101. 10%之
间 (n = 5)。将上述低、中、高质量浓度的供试品
溶液，按 2. 1. 1 项下要求测定，一天内重复进样 5
次，获得供试品的日内 ＲSD均小于 2%;每日测定
1 次，连续测定 3 d，获得供试品的日间 ＲSD 均小
于 2%。
2. 1. 5 样品处理后稳定性考察 按样品处理方法
处理后的肠循环样品，分别于 0、4、8、12、24 h
进样，每次进样量为 20 μL，记录峰面积，结果表
明，24 h 内木香烃内酯、去氢木香内酯和酚红量
均没有出现明显变化，ＲSD 均小于 2% (n = 5) ，
可见经甲醇处理后的肠循环液中各组分在 24 h 内
稳定性良好。
2. 2 川木香煨制前后木香烃内酯和去氢木香内酯
在肠灌注液中的稳定性考察 精密吸取川木香生品
及煨品药液各 2 mL，分别置于 100 mL 棕色量瓶
中，用含酚红的 K-Ｒ 溶液 (1 000 mL K-Ｒ 溶液中
含有 0. 02 g 酚红，下同)稀释定容至刻度，超声
混匀，置 37 ℃水浴中孵育，分别于 0、2 h 取样，
照“2. 2. 1 项样品的处理方法”处理，按上述色谱
条件测定，记录峰面积，代入标准曲线方程计算孵
育液中木香烃内酯、去氢木香内酯和酚红的浓度，
以 2 h浓度与 0 h浓度之比计算剩余百分率，结果
表明 2 h内木香烃内酯和去氢木香内酯在肠灌注液
中没有发生明显变化，ＲSD 均小于 1% (n = 3) ，
表明在 37 ℃条件下，川木香生品和煨品灌注液中
木香烃内酯、去氢木香内酯及酚红的稳定性均较
好，2 h内基本保持稳定。
2. 3 川木香煨制前后木香烃内酯和去氢木香内酯
在大鼠小肠不同肠段的吸收情况考察
2. 3. 1 大鼠肠灌注液的配制 称取煨制前后川木
香粉末各 10 g (过四号筛) ，加入十倍量乙醇浸泡
过夜，超声处理 30 min，滤过;残渣加入十倍量乙
醇超声处理 30 min，滤过;残渣加入十倍量乙醇超
声处理 30 min，滤过，合并 3 次滤液，回收乙醇
后，用乙醇定容至 100 mL;分别精密量取川木香
生品与煨品药液各 2 mL，置 100 mL 棕色量瓶中，
加入含酚红的 K-Ｒ 溶液 95 mL 稀释，超声处理 10
min，放冷后定容至刻度即得。
2. 3. 2 大鼠小肠不同肠段灌注实验法［9-11］ 选取
实验前禁食一夜 (自由饮水) ，体质量 (200 ± 25)
g 的Wistar雄性大鼠 36 只，6 只为一组，分别考察
川木香生品、煨品的十二指肠、回肠、空肠三个吸
收部位。各肠道区的划分方法如下:十二指肠段自
幽门下 1 cm处开始;空肠段自幽门 15 cm处开始;
回肠段自盲肠上行 20 cm处开始，各段均取 10 cm。
腹腔注射 20%的乌拉坦溶液，麻醉后固定。沿腹
中线打开腹腔 (约 2. 5 cm) ，在实验肠段两端各切
一小口，在上端小口处插入直径为 0. 3 cm 的玻璃
管，并用线扎紧。用注射器将 (37 ± 5)℃的生理
盐水缓缓注入肠管，洗去肠管内容物。然后在实验
肠段下端小口处插入玻璃管，并用线扎紧。将肠管
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两端的玻璃管与蠕动泵的胶管连接，形成回路。开
动蠕动泵，以 5 mL /min 体积流量循环 10 min 后，
将体积流量调节为 2. 5 mL /min，立即从装有灌注
液的棕色瓶中取样 0. 4 mL，作为测定零时间药物
浓度和酚红浓度的样品，然后向棕色瓶中补加 0. 4
mL含有酚红的 K-Ｒ液，其后每隔 15 min按同法取
样补加酚红液，循环 2 h后，中止实验。
2. 3. 3 川木香生品和煨品在大鼠小肠不同肠段的
吸收情况 按 2. 1. 1 项下要求对每个时间点取得的
样品进行检测，按文献方法［10］计算川木香生品和
煨品中木香烃内酯、去氢木香内酯的吸收速率常数
Ka、吸收半衰期 t1 /2 (h)、每小时吸收百分率
P (%) ，结果见表 2 和表 3。从吸收速率常数看，
川木香生品中木香烃内酯表现为十二指肠 ＞回肠 ＞
空肠，去氢木香内酯表现为十二指肠 ＞回肠、空
肠;川木香煨品中木香烃内酯、去氢木香内酯均表
现为十二指肠 ＞回肠 ＞空肠。经统计分析，川木香
煨制前后主要药效成分在各肠段的吸收速率均无统
计学差异。
表 2 川木香生品主要药效成分在大鼠小肠不同肠段吸收差异性研究结果
Tab. 2 Otherness between the absorption in different small intestine segment of the primacy active constituents of crude
Vladimiriae Ｒadix
肠 段 成 分 Ka /h －1 t1 /2 /h 每小时吸收率 (P) /%
十二指肠 木香烃内酯 0. 70 ± 0. 08 1. 00 ± 0. 10 35. 18 ± 7. 25
回肠 木香烃内酯 0. 56 ± 0. 08a 1. 24 ± 0. 19a 32. 68 ± 3. 57
空肠 木香烃内酯 0. 44 ± 0. 02ab 1. 55 ± 0. 08ab 27. 71 ± 6. 76
十二指肠 去氢木香内酯 0. 81 ± 0. 19 0. 91 ± 0. 30 52. 44 ± 16. 98
回肠 去氢木香内酯 0. 65 ± 0. 07a 1. 07 ± 0. 13 50. 35 ± 4. 44
空肠 去氢木香内酯 0. 55 ± 0. 03a 1. 26 ± 0. 07a 43. 46 ± 3. 01
注:与十二指肠相比，aP ＜ 0. 05;与回肠相比，bP ＜ 0. 05
表 3 川木香煨品主要药效成分在大鼠小肠不同肠段吸收差异性研究结果
Tab. 3 Otherness between the absorption in different small intestine segment of the primacy active constituents of processed
Vladimiriae Ｒadix
肠 段 成 分 Ka /h －1 t1 /2 /h 每小时吸收率 (P) /%
十二指肠 木香烃内酯 0. 71 ± 0. 06 0. 98 ± 0. 08 37. 77 ± 3. 97
回肠 木香烃内酯 0. 61 ± 0. 07a 1. 15 ± 0. 14 36. 75 ± 2. 89
空肠 木香烃内酯 0. 44 ± 0. 02ab 1. 62 ± 0. 24ab 30. 14 ± 3. 256ab
十二指肠 去氢木香内酯 0. 84 ± 0. 10 0. 83 ± 0. 09 58. 67 ± 11. 68
回肠 去氢木香内酯 0. 67 ± 0. 08a 1. 05 ± 0. 13a 50. 77 ± 6. 52
空肠 去氢木香内酯 0. 54 ± 0. 07ab 1. 29 ± 0. 16ab 45. 72 ± 9. 35a
注:与十二指肠相比，aP ＜ 0. 05;与回肠相比，bP ＜ 0. 05
3 讨论
3. 1 吸收特征中包含有部分吸附特性参数 原位
灌注模型是研究药物胃、肠吸收的主要方法之一，
不仅保证了肠道神经以及内分泌输入的完好无损，
同时也保证了血液及淋巴的供应，一般适用于溶解
性好且稳定、无胃肠吸附的药物［11］。课题组前期
的研究表明［12］，川木香主要药效成分木香烃内酯
和去氢木香内酯在小肠中存在吸附特征，故本实验
中川木香生品和煨品药效成分胃肠道吸收动力学特
征中包含了部分吸附特性参数。
3. 2 川木香煨制前后胃肠吸收差异与煨制作用相
关 课题组前期对川木香煨制前后其主要药效成分
木香烃内酯和去氢木香内酯在胃、小肠、结肠中的
吸收情况进行了研究［5］，研究表明川木香生品中
木香烃内酯和去氢木香内酯在胃和小肠中的每小时
吸收百分率较煨品大，而在结肠中煨品的每小时吸
收百分率更大。结合本实验的研究结果，即川木香
煨制前后，其主要药效成分木香烃内酯和去氢木香
内酯在小肠各个肠段 (十二指肠、空肠、回肠)的
吸收没有显著性的差异，则进一步表明二者在胃肠
道吸收层面的差异仅存在于胃、小肠与结肠之间的
差异，这与“生用理气，煨熟止泻”的中医基础理
论基本契合，同时，这也提示川木香煨制前后其功
效改变可能与主要药效成分胃肠吸收差异性有一定
的相关性，实验结果对指导川木香的临床应用及进
一步探讨川木香煨制作用机理提供了一定的参考。
参考文献:
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盐制对补骨脂中主要化学成分的影响
颜翠萍1，2， 吴 育1，2， 翁泽斌1，2， 陈志鹏1，2， 蔡宝昌1，2， 李伟东1，2*
(1． 南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心，江
苏 南京 210023;2． 南京中医药大学药学院，江苏 南京 210023)
收稿日期:2013-02-26
基金项目:江苏省高校自然科学基金重点项目 (11KJA360001) ;江苏省中药学优势学科开放课题 (2011ZYX2-010)
作者简介:颜翠萍 (1988—) ，女，硕士生，研究方向:中药物质基础及质量标准。Tel:15850583465，E-mail:yan7000@ 126. com
* 通信作者:李伟东 (1969—) ，男，博士，副研究员，硕士生导师，研究方向:中药物质基础及质量标准。E-mail:liweidong0801@
163． com
摘要:目的 建立 HPLC同时测定补骨脂中补骨脂素、异补骨脂素、异补骨脂二氢黄酮、新补骨脂异黄酮、补骨脂二
氢黄酮、补骨脂宁、broussochalcone B、补骨脂定、补骨脂二氢黄酮甲醚、异补骨脂查尔酮、corylifol A、补骨脂查尔
酮和补骨脂酚等 13 种化学成分的方法，比较补骨脂盐制前后主要化学成分量的变化。方法 按照《中国药典》规定
的盐制法对来源不同的 10 批补骨脂生品进行炮制，采用 HPLC法测定补骨脂中 13 种指标性成分，在此基础上，对补
骨脂主要成分进行归类，分析了补骨脂盐制前后各类成分的变化规律。结果 补骨脂盐制后香豆素成分含有量变化不
大，而黄酮类成分和补骨脂酚的量略有上升。结论 补骨脂的盐制机制还需结合药效学试验进行深入研究。
关键词:补骨脂;香豆素;黄酮;单萜酚;HPLC;盐制
中图分类号:Ｒ283 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2013)11-2470-05
doi:10. 3969 / j． issn． 1001-1528. 2013. 11. 036
Chemical compositions of Psoralea corylifolia L． before and after salt-roast pro-
cessing
YAN Cui-ping1，2， WU Yu1，2， WENG Ze-bin1，2， CHEN Zhi-peng1，2， CAI Bao-chang1，2， LI
Wei-dong1，2*
(1 Nanjing University of Chinese Medicine，Jiangsu Provincial Key Laboratory of Chinese Medicine Processing，Engineering Center of State Ministry of Edu-
cation for Standardization of Chinese Medicine Processing，Nanjing 210023，China;2 Pharmacy College of Nanjing University of TCM，Nanjing 210023，
China)
ABSTＲACT:AIM To determine psoralen、isopsoralen、isobavachin、neobavaisoflavone、bavachin、corylin、
0742
2013 年 11 月
第 35 卷 第 11 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
November 2013
Vol． 35 No． 11