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火绒草提取物抗氧化活性的研究



全 文 :153※基础研究 食品科学 2010, Vol. 31, No. 03
火绒草提取物抗氧化活性的研究
展 锐,库尔班,苟 萍 *,索菲娅
(新疆大学生命科学与技术学院,新疆 乌鲁木齐 830046)
摘 要:测定火绒草水提物和醇提物中多酚及总黄酮含量,证实水提物和醇提物中含有以黄酮类为主要成分的多酚
类物质。通过测定火绒草提取物的总还原力,超氧阴离子自由基(O 2·)、羟自由基(·O H)清除能力、脂质过氧
化抑制作用、清除亚硝酸盐自由基和亚硝胺阻断率,表明火绒草水提物和醇提物具有较强的还原性和清除·OH 和
O 2·的活性,且醇提物的作用比水提物更有效;对脂质过氧化的抑制率达到 60%以上。火绒草提取物具有较强
的清除亚硝酸钠和阻断亚硝胺合成的能力,水提物对亚硝酸盐最大清除率为 77.7%,醇提物对亚硝胺合成的阻断
率 98 .0%。
关键词:火绒草;自由基;抗氧化活性;亚硝胺阻断
Antioxidant Activity of Extracts from Leontopodium leontopodioides
ZHAN Rui,KURBAN,GOU Ping*,SUOFEIYA
(College of Biological Science and Technology, Xinjiang University, Xinjiang 830046, China)
Abstract :In this study, water and ethanol extracts from Leontopodium leontopodioides were confirmed to be polyphenols,
which was mainly composed of flavonoids. The antioxidant activities of the water and ethanol extracts were evaluated by in vitro
total reducing power, superoxide anion, hydroxyl and sodium nitrite free radical scavenging capacity, lipid peroxidation inhibition,
and nitrosamine synthesis blocking assays. Both the extracts exhibited strong reducing power and scavenging effect against free
radicals. Above 60% inhibition rate against lipid peroxidation was observed in the ethanol extract. Moreover, both the extracts
revealed strong capacity to scavenge sodium nitrite and block nitrosamine synthesis. The maximum scavenging rate of the water
extract against sodium nitrite was 77.7% and the blocking rate of the ethanol extract against nitrosamine synthesis 98%.
Key words:Leontopodium leontopodioides;free radical;antioxidant activity;nitrosamine synthesis blocking
中图分类号:Q949.783.5 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2010)03-0153-07
收稿日期:2009-10-29
作者简介:展锐(1983—),女,硕士研究生,研究方向为生化制药。E-mail:zr19832004@163.com
*通信作者:苟萍(1955—),女,教授,学士,研究方向为生化与分子生物学。E-mail:gou_ping@yahoo.com.cn
火绒草(Leontopodium leontopodioides (Willd))系菊
科火绒草属植物,又叫老头草、薄雪草、老头艾。火
绒草属(Leontopodium R. Br.) 植物约有 56种,主要分布
于亚洲、欧洲和南美洲,寒带、温带、亚热带及热
带均有分布。我国约有 4 1 种,主要分布于东北、西
北、华北及西南地区,特别是青藏高原尤为丰富。其
中有 25种在民间作为药用植物[1]。火绒草多生于草原、
山坡、地埂等处,野生资源极其丰富。火绒草夏、秋
季采割,以地上全草入药。火绒草性寒,味微苦,具
有疏风解表、清热解毒、凉血止血、益肾利水、消
炎利尿等功效。可用来治疗急(慢 )性肾炎、尿道炎、
蛋白尿、血尿等多种肾脏疾病,以及风热感冒、创伤
出血等疾病,并且在欧洲民间用药中用于不正常疼
痛,扁桃体炎、支气管炎、癌症、腹泻、痢疾及
发热的治疗[1- 2]。
火绒草属植物中含有多种化学成分,迄今从中分离
并获得的化合物有挥发油类、倍半萜类、黄酮类、苯
丙素类和甾体类等化合物。从火绒草中分离出的咖啡
酸、香草酸、原儿茶醛,经药理试验证明,具有抗
炎和增加离体兔心脏冠脉流量的作用,是治疗急、慢
性肾炎的主要有效成分[3]。火绒草中的单体成分苯乙双
胍,具有降血糖作用 [ 4 ]。此外,火绒草多糖具有促进
机体免疫功能的作用。
抗氧化与人类的健康有密切的关系,当人体的抗氧
化出现障碍如自由基的产生、脂质过氧化、抗氧化酶
活力降低等,会导致细胞损伤,引起心脏病、癌症、
衰老等多种疾病。此外,形成亚硝胺的前体物质亚硝酸
盐大量存在于食物中及产生于食物在体内的代谢过程中,
2010, Vol. 31, No. 03 食品科学 ※基础研究154
亚硝胺是很强的致癌物质,因此,阻断亚硝胺合成或消
除亚硝胺的前体是防治癌症产生的有效途径之一[5 ]。天
然植物中的一大类物质为多酚类化合物,如黄酮、原
花青素、有机酸等,其他类物质如维生素类、多糖、
含氮化合物,含硫化合物等不仅具有抗氧化作用,而
且具有阻断亚硝胺合成或清除亚硝酸盐的作用[6-7]。通过
外加抗氧化及阻断亚硝胺形成的植物成分,对于防治疾
病的发生和保持机体健康是十分有益的。国内外对火绒
草提取物的抑菌、抗炎、镇痛和降血糖作用都有一定
研究,但对其抗氧化作用和亚硝胺阻断作用鲜见报道。
本实验通过比较火绒草的水提物和醇提物抗氧化及亚硝
胺阻断作用,为火绒草的开发利用提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 材料、试剂与仪器
火绒草于 7 月下旬采于新疆乌鲁木齐市南山(海拔
1 8 0 0 m ),经本院植物教研室索菲娅副教授鉴定为
Leontopodium leontopodioides (Willd),然后清洗泥土
阴干,粉碎后备用。
NaNO 2、AlCl 3、NaOH、FeSO 4、水杨酸、邻苯
三酚、亚硝酸钠、V C、柠檬酸、H C l、N a 2 H P O 4、
N a 2C O 3、无水乙醇、对氨基苯磺酸、盐酸萘乙二胺、
α-萘胺等试剂均为分析纯;二甲胺,体积分数为 33%;
实验用水均为蒸馏水。
S Z 2 型双配套循环水式多用真空泵、电子天平、
752N 型紫外 -可见分光光度计、减压蒸馏装置、真空
干燥器、超速离心机、超声波清洗仪。
1.2 方法
1.2.1 火绒草提取物的制备
水提物:称取 40g火绒草粉末,加 800mL蒸馏水
浸泡,间隔搅拌 2 4 h 后,过滤,滤液减压浓缩,冻
干成粉末状备用。
醇提物:称取 40g火绒草粉末,加 200mL 95%乙
醇,索氏提取至无色,提取液石油醚反复萃取至无色,
减压浓缩,冻干成粉末状备用。
以VC作阳性对照,其浓度除了清除亚硝酸盐活性
测定为 1%以外,其余浓度均为 1mg/mL。
称取一定量的火绒草水提物、醇提物,定容到
10mg/mL,作为供试液。
1.2.2 总多酚的测定
采用 Folin-Ciocaheu法[8]。根据酚类化合物在碱性
条件下可以将钨钼酸还原,生成蓝色的化合物,颜色
的深浅与酚含量呈正相关,在 760nm波长下测吸光度。
以没食子酸为标准品,测定样品的总多酚含量。
标准曲线的绘制:精密称取干燥至恒重的没食子酸
5.0mg,置于 100mL棕色容量瓶中,用蒸馏水溶解,定
容至刻度,摇匀,即为没食子酸标准溶液。精确吸取
没食子酸标准溶液 0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL和 3.0mL
于棕色容量瓶中,加入蒸馏水稀释至 11mL,同时以蒸
馏水作对照。然后,依次加入 Folin-Ciocalteu试剂 lmL
和 75g/L碳酸钠溶液 8mL,充分混匀后,在室温下静置
1h,于 760nm波长处测定样品吸光度。
样品测定:精确吸取 0.1mL稀释后的溶液于棕色容
量瓶中,依次加入蒸馏水 11mL,Folin-Ciocalteu试剂
lmL,75g/L碳酸钠溶液 8mL,充分混匀后,在室温下
静置 1h,于 760nm波长处测定吸光度。
1.2.3 总黄酮含量的测定[9]
准确称取 105℃干燥至恒重的芦丁标准品 0.030g,用
30%乙醇溶解,定容至100mL,得到质量浓度为0.3mg/mL
的芦丁标准溶液。准确移取 0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、
5.0、6.0mL 芦丁标准溶液于 25mL容量瓶中, 分别加入
0.3mL 5% NaNO2溶液,放至 6min 后,加入 0.3mL 10%
Al(NO3)3 溶液,放至 6min,再加入 4mL 4% NaOH液,
最后用 30%乙醇定容至 25mL,放至 15min。以空白试
剂作参比,测定 510nm波长处的吸光度。以芦丁标准
溶液质量浓度(mg/mL)为横坐标、吸光度为纵坐标绘制
标准曲线,标准曲线方程为: A= 10.351c+ 0.0091,
相关系数 r= 0.9991。
移取 1mL供试液于 25mL 容量瓶中,按“标准曲
线绘制”方法测定 510nm波长处吸光度。由标准曲线
查得供试品中总黄酮的质量浓度,按下式计算总黄酮
含量:

Y×稀释倍数
总黄酮含量 /%=——————× 100

X
式中:X为供试液质量浓度 /(mg/mL);Y为样品中
总黄酮质量浓度 /(mg/mL)。
1.2.4 总还原力的测定[10-12]
取2.5mL供试液于试管中,依次加入2.5mL 0.2mo1/L PBS
缓冲溶液(pH6.6)5mL,1% K3Fe(CN)6溶液,于 50℃中
保温 20min后快速冷却,再加入 2.5mL 10%醋酸溶液,
以 3000r/min的转速离心 10min,取上清液 2.5mL,依
次加入 2.5mL蒸馏水,0.5mL 0.1% FeCl3,充分混匀,
静置 10min后,在 700nm波长处测吸光度(以蒸馏水作参
比溶液),吸光度越高还原力越强。以 VC做阳性对照。
1.2.5 羟自由基(·OH)清除活性的测定
采用 Fenton法[13],H2O2和 Fe2+混合发生 Fenton反
应,生成具有很高反应活性的·O H,·O H 能被水杨
酸有效的捕获,并生成有色物质,但若加入具有清除
作用的物质,便会与水杨酸竞争,有色产物的生成量
155※基础研究 食品科学 2010, Vol. 31, No. 03
减少。向试管中加入不同浓度的火绒草提取物 2mL,依
次加 6mmol/L的 Fe(SO4)溶液 2mL,2.4mmol/L的H2O2溶
液 2mL,摇匀,静置 10min,再加入 6mmol/L的水杨酸
溶液 2mL摇匀,然后 37℃水浴 30min,离心(3000r/min,
10min),取上清液于 500nm波长处测吸光度,以VC做
阳性对照。

Ai-Aj
清除率 /%=(1-—————)× 100

A0
式中:A 0 为空白对照;A i为反应液的吸光度;A j
为不加水杨酸时提取液自身的吸光度。
1.2.6 超氧阴离子自由基(O2·)的清除活性的测定
采用改良的邻苯三酚自氧化法[14],取4.5mL(pH 8.34)
50mmol/L磷酸缓冲液,加 0.5mL蒸馏水,加入 10μL
45mmol/L邻苯三酚溶液,立刻计时并迅速摇匀,然后
在 325nm波长处测定光密度值(OD),1min后记录数据,
每隔 30s 记一次,一直记到第 4min。对照管用 10μL
(10mmol/L)盐酸代替邻苯三酚溶液。
第 4min的OD值 - 第1min的OD值
邻苯三酚自氧化率=———————————————

3
样品清除 O 2·的测定:操作方法同上,加入邻苯
三酚前分别加不同浓度火绒草醇提物、水提物和 0.5mL
VC。计算加样后邻苯三酚自氧化速率,得出对 O2·的
抑制率。

邻苯三酚自氧化率-加样后的自氧化率
抑制率 /%=————————————————× 100

邻苯三酚自氧化率
1.2.7 脂质过氧化的抑制实验[15]
脂质体的制备:称取 20m g 卵磷脂溶入 5m L 的
0.05mol/L(pH7.4)的磷酸缓冲液中,充氮封口,在超声
发生器中超声处理 30min,所得液体为单层小体积脂质
体,置于 0℃条件下保存。
过氧化脂质的测定方法:在 10mL比色管中加入
0.2mL的脂质体液体,加入不同体积的样品溶液或对照
品溶液,混匀,加入 50mmol/L FeSO4溶液 50μL,用
磷酸缓冲液补足 3mL,模型管不加样品溶液,空白管不
加 FeSO4溶液,然后将对照管、模型管和样品管一同置
于 37℃水浴中温育 40min,每 5min振摇一次。温育完
成后,各管加入 10% 三氯乙酸 1.0mL,0.8%硫代巴比
妥酸(TBA)1mL,混匀,置 100℃水浴 15min,冷却后
5000r/min离心 l0min,取上清液在 532nm波长处测定吸
光度,计算样品对脂质体过氧化的抑制率。

A模-A样
抑制率 /%=——————× 100

A模-A空
式中:A 模为模型管吸光度;A 样为样品管吸光度;
A 空为空白管吸光度。
1.2.8 清除亚硝酸盐自由基及亚硝胺阻断率的测定
亚硝酸盐清除率的测定采用盐酸萘乙二胺法[ 1 6 ]:
pH3.0的柠檬酸 -磷酸氢二钠缓冲液2mL,加入样液2mL,
5μg /mL的亚硝酸钠标液1mL 于50mL容量瓶中,在37℃
水浴 1h,取出,立即加入 0.4%对氨基苯磺酸 2mL,混
匀,静置 3~5min,分别加 1.0mL 0.2%盐酸萘乙二胺溶
液,加水至刻度混匀,静置 15min,在 538nm波长处
测定吸光度,平行做 3次求平均值,同时做空白对照实
验 。

A0-A
清除率 /%= —————× 100

A0
式中:A0为未加提取液时NaNO2的吸光度(以试剂
空白溶液为参比溶液);A为加入提取液后NaNO2的吸光
度(以火绒草提取液为参比溶液)。
火绒草提取液对亚硝胺合成阻断率的测定[17]:二甲
胺与亚硝酸钠在模拟人体胃液的条件下 (pH3.0,温度为
37℃),可生成二甲基亚硝胺。当向火绒草提取液中依
次加入二甲胺与亚硝酸钠时,提取液优先同亚硝酸钠作
用,使得二甲胺不能与亚硝酸钠反应,达到阻止亚硝
胺生成的目的。据此可以通过比较相同条件下生成亚硝
胺量的多少反映提取液阻断能力的强弱,生成亚硝胺量
少,提取液的阻断能力强,反之则弱。在紫外灯照射
下,二甲基亚硝胺可分解成二甲基仲胺和亚硝酸根,亚
硝酸根与对氨基苯磺酸重氮化后,再与α- 萘胺偶合生
成红色化合物,用分光光度计测出该化合物的吸光度,
就可知道上述反应液中亚硝胺含量。
吸取不同体积的样品于 25mL比色管中。加入 pH3.0
的柠檬酸 -磷酸氢二钠缓冲液 10mL,1mmol/L的NaNO2
溶液 1.0mL,1mmol/L的二甲胺溶液 1.0mL,用蒸馏水
稀释至刻度,在 37℃下恒温 1h。用移液管吸取 1.0mL
上述溶液加到 1 0 c m 2 培养皿中,加入质量分数 0 . 5 %
Na2CO3溶液 0.5mL,于紫外灯照射 15min。取出后加入
质量分数1%对氨基苯磺酸1.5mL,再加入质量分数0.1%
α-萘胺 1.5mL,蒸馏水 0.5mL,摇匀静置 15min。用分
光光度计在确定的最大吸收波长(525nm)处测吸光度。

A0-A
阻断率 /%=————× 100

A0
式中:A0为不加提取液时NaNO2的吸光度(以试剂
空白溶液为参比溶液);A为加入提取液后NaNO2的吸光
度(以火绒草提取液为参比溶液)。
2 结果与分析
2.1 总多酚和总黄酮含量测定
2010, Vol. 31, No. 03 食品科学 ※基础研究156
火绒草粉末分别用水和乙醇提取得到水提物和醇提
物,在水提物和醇提物中大多是极性较强的物质。本
实验以没食子酸为标准品,测定火绒草水提物和醇提物
多酚含量。没食子酸标准曲线和火绒草多酚含量测定见
图 1和表 1,火绒草水提物和醇提物的总多酚含量分别
为 8.68%和 11.94%,醇提物的总多酚含量高于水提物。
通过还原力测定可以检测样品是否为良好的电子供
体。还原力强的物质,可以提供更多的电子,其供应
的电子除了可使 Fe3+还原为 Fe2+外,也可参与自由基反
应,使自由基形成稳定的物质。以 VC为参照测定火绒
草水提物和醇提物的总还原力(图 3、4)。总还原力随火
绒草水提物和醇提物质量浓度的增加而升高,且在相同
质量浓度下,醇提物的总还原力高于水提物。火绒草
水提物和醇提物的质量浓度分别为 6.20、4.42mg/mL时
的总还原力相当于 0.5mg/mL VC的总还原力。
样品 吸光度 总多酚质量浓度 /(mg/mL) 总多酚含量 /%
水提物 0.473 0.004340 8.68
醇提物 0.646 0.005968 11.94
表1 火绒草总多酚的含量测定
Table 1 Determination of polyphenols in Leontopodium
leontopodio ides
样品 吸光度 总黄酮质量浓度 /(mg/mL) 总黄酮含量 /%
水提物 0.265 0.0247 6.18
醇提物 0.508 0.0482 12.05
表2 火绒草黄酮含量测定
Table 2 Determination of flavonoids in Leontopodium
leontopodio ides
多酚类化合物主要包括黄酮类等物质,以芦丁为标
准品,测定火绒草水提物和醇提物总黄酮含量。芦丁
标准曲线和火绒草总黄酮含量测定见图 2和表 2,火绒草
水提物和醇提物的总黄酮含量分别为6.18%和12.05%,醇
提物的总黄酮含量大约是水提液的两倍。该结果证实了
火绒草的多酚类物质主要为黄酮类物质。
2.2.2 羟自由基(·OH)清除活性的测定
羟基自由基(·O H )是最活泼、毒性最大的自由
基,它可与活细胞中的任何分子发生反应,引发组织
细胞病变,导致各种疾病发生和加速机体衰老。以 VC
为对照测定火绒草水提物和醇提物对·OH的清除率(图
5、6)。火绒草水提物和醇提物在质量浓度为 0~5mg/mL
时对·O H 的清除率随提取物质量浓度的升高而增加,
醇提物对·OH 的清除率高于水提物。当水提物和醇提
物质量浓度达到 5mg/mL时,清除率 100%。
1.0
0.8
0.6
0.4
0.2
0
y=106.29x+0.0117
R2=0.9993
A
76
0n
m
没食子酸质量浓度 /(mg/mL)
0 0.002 0.004 0.006 0.008
图1 没食子酸标准曲线
Fig.1 Standard curve of gallate
0.8
0.6
0.4
0.2
0
y = 10.351x+0.0091
R2=0.9981
A
51
0n
m
芦丁质量浓度 /(mg/mL)
0 0.02 0.04 0.06 0.08
图2 芦丁标准曲线
Fig.2 Standard curve of rutin
1.4
1.2
1.0
0.8
0.6
0.4
0.2
0
水提物
醇提物
A
70
0n
m
质量浓度 /(mg/mL)
0 2 4 6 8 10
图4 火绒草提取物总还原力的测定
Fig.4 Total reducing power of water and ethanol extracts from
Leontopodium leontopodioides
2.2 火绒草的抗氧化作用
2.2.1 总还原力测定
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
A
70
0n
m
VC质量浓度 /(mg/mL)
0 0.05 0.10 0.15 0.20
图3 VC总还原力的测定
Fig.3 Total reducing power of vitamin C
100
80
60
40
20
0



/%
VC质量浓度 /(mg/mL)
0 0.05 0.10 0.15 0.20
图5 VC清除羟自由基活性
Fig.5 Scavenging capacity of vitamin C against hydroxyl free radicals
157※基础研究 食品科学 2010, Vol. 31, No. 03
2.2.3 超氧阴离子自由基(O2·)清除活性的测定
以VC为对照,采用邻苯三酚自氧化法测定火绒草
水提物和醇提物对超氧阴离子自由基(O 2·)的清除活性
(图 7、8)。火绒草水提物质量浓度为 0~7.5mg/mL时对
O2·的清除率具有量效关系,在 7.5mg/mL时对O2·的
清除率达到 1 0 0 %。醇提物显示出很强的清除作用,
2mg/mL的醇提物的清除率为 70.3%,当醇提物的质量浓
度为 4mg/mL时,清除率 100%。当火绒草水提物质量
浓度为 7.5mg/mL、醇提物质量浓度为 4mg/mL 和VC浓
度为 0.4mg/mL时,清除率均达到 100%。
过氧化的抑制作用(图 9、10)。VC在浓度为 0.2~1mg/mL
时,VC对脂质过氧化的抑制率在 77.6%~89%范围。而
火绒草提取物在 2~10mg/mL时,水提物对脂质过氧化
的抑制率在 64.5~91.1%范围,醇提物对脂质过氧化的
抑制率在 84.3%~95.9%范围,它们对脂质过氧化的抑制
无明显的量效关系。
2.2.4 脂质过氧化抑制的测定
以 VC为对照,测定火绒草水提物和醇提物对脂质
2.3 清除亚硝酸盐自由基及亚硝酸铵阻断率的测定
2.3.1 清除亚硝酸盐自由基测定
亚硝胺是一类化学致癌物,它能引起人和动物肝脏
等多种器官的恶性肿瘤。正常情况下,人们直接从食
物中摄人的亚硝胺极少,但亚硝胺的前体物质亚硝酸盐
却大量存在于食物中,亚硝酸盐在人和动物的胃中能合
成亚硝胺。因此,清除体内亚硝酸盐和阻断亚硝胺的
合成是预防癌症发生的一条途径。
100
80
60
40
20
0



/%
水提物
醇提物
质量浓度 /(mg/mL)
0 2 4 6 8 10
图8 火绒草提取物清除超氧阴离子自由基活性
Fig.8 Scavenging capacity of water and ethanol extracts from
Leontopodium leontopodioides against superoxide anion free
radicals
100
80
60
40
20
0



/%
水提物
醇提物
质量浓度 /(mg/mL)
0 2 4 6 8 10
图6 火绒草提取物清除羟自由基活性
Fig.6 Scavenging capacity of water and ethanol extracts from
Leontopodium leontopodioides against hydroxyl free radicals
VC质量浓度 /(mg/mL)
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
100
80
60
40
20
0



/%
图9 VC抑制脂质过氧化能力
Fig.9 Inhibition effect of vitamin C against lipid peroxidation
100
80
60
40
20
0



/%
水提物
醇提物
质量浓度 /(mg/mL)
0 2 4 6 8 10
图10 火绒草提取物抑制脂质过氧化能力
Fig.10 Inhibition effect of water and ethanol extracts from
Leontopodium leontopodioides against lipid peroxidation
VC质量浓度 /(mg/mL)
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
100
80
60
40
20
0



/%
图7 VC清除超氧阴离子自由基活性
Fig.7 Scavenging capacity of vitamin C against superoxide anion
free radicals
VC质量浓度 /(mg/mL)
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
100
80
60
40
20
0



/%
图11 VC清除亚硝酸盐能力
Fig.11 Scavenging capacity of vitamin C against sodium nitrite
2010, Vol. 31, No. 03 食品科学 ※基础研究158
以VC为对照,测定火绒草水提物和醇提物对亚硝
酸盐自由基清除率(图 11、12)。在实验浓度范围内,VC
对亚硝酸盐的清除率比较平稳,均保持较高的清除活
性。火绒草水提物清除亚硝酸盐的活性随质量浓度升高而
增加,当水提物质量浓度为 10mg/mL时,清除率达到了
77.7%。火绒草醇提物在 0~2.5mg/mL时,对亚硝酸盐
的清除率逐渐升高,当醇提物质量浓度达到 2.5mg/mL
时,清除率达到最大值为 57.5%,当醇提物质量浓度高
于 2.5mg/mL清除率缓慢下降。
2.3.2 亚硝酸铵阻断率的测定
0.867、1.186、6.860mg/mL。由此可知,它们对亚硝
酸胺的阻断率的强弱次序是VC>火绒草醇提物>火绒草
水提物。
3 讨 论
天然植物中的多酚类物质具有清除机体内自由基、
抗脂质氧化、延缓机体衰老、预防心血管系统疾病、
防癌、抗辐射等生物活性,受到了人们的极大关注。
翁新楚等[18]从700多种天然植物中草药中筛选出数种具有
显著抗氧化活性的物质。Su等[19]对 195种天然植物中草
药进行了抗氧化性能研究,发现其中近半数具有抗氧化
作用,且 22种天然植物乙醇提取物的抗氧化能力强于等
质量的生育酚。通过对火绒草中多酚及黄酮含量测定,
证实火绒草水提物和醇提物中含有多酚类物质,而且此
多酚物质中主要以黄酮类化合物为主。火绒草水提物和
醇提物具有较强的还原性,对·OH 和 O 2·有较强的
清除活性,两种自由基清除活性与其浓度呈现出量效关
系。研究表明黄酮含量和抗氧化性有相同的变化趋
势[20],本实验结果亦证实了火绒草良好的抗氧化能力与
其所含黄酮类物质的含量呈正相关,醇提物中的黄酮含
量高于水提物,其还原力和抗氧化能力均强于水提物。
亚硝胺是一种具有强烈致癌作用的化合物,清除体
内亚硝酸盐和阻断亚硝胺的合成是防癌的有效途径。现
已发现,绿茶、生姜、大蒜、苦瓜等天然植物中具
有清除亚硝酸盐和阻断亚硝胺合成作用[21-25]。火绒草提
取物对亚硝酸盐有较强的清除能力,并能阻断亚硝酸胺
的形成,且阻断率与醇提物和水提物浓度呈正相关。其
中水提物对亚硝酸盐的清除率强于醇提物,最大清除率
为 77.7%,醇提物对亚硝胺合成的阻断率强于水提物,
其阻断率最高为 98.0%。
综上所述,火绒草醇提取物能作为一种抗氧化剂和
防癌剂,清除机体内自由基、抗脂质氧化、延缓机体
衰老、预防心血管系统疾病和癌症的发生。
参考文献:
[1] 新疆植物志编辑委员会. 新疆植物志: 第五卷[M]. 新疆: 新疆科技
卫生出版社, 1999: 59-65.
[2] SCHWAIGER S, CERVELLATI R, SEGER C, et al. Leontopodic
acid: a novel highly substituted gucaric acid derivative from Edelweiss
(Leontopodium alpinum Cass.) and its antioxidative and DNA protecing
properties[J]. Tetrahedron, 2005, 61: 4621-4630.
[3] 武彦文, 高文远, 苏艳芳, 等. 火绒草属植物的化学成分和药理活性
研究进展[J]. 中国中药杂志, 2005, 30(4): 245-248.
[4] 尹秀玲, 王金霞, 龙茹. 火绒草治疗糖尿病的研究与开发[J]. 生物学
杂志, 2000, 17(2): 25; 38.
[5] 许钢, 张虹, 庞洁, 等. 竹叶提取物对亚硝化反应抑制作用的研究[J].
郑州工程学院学报, 2001, 22(1): 69-72.
[6] 刘树兴, 赵芳. 从天然植物中开发抗氧化剂研究进展[J]. 食品研究
100
80
60
40
20
0
水提物
醇提物
质量浓度 /(mg/mL)
0 2 4 6 8 10



/%
图14 火绒草提取物阻断亚硝胺合成活性
Fig.14 Blocking rate of water and ethanol extracts from
Leontopodium leontopodioides against nitrosamine synthesis
VC质量浓度 /(mg/mL)
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
100
80
60
40
20
0



/%
图13 VC阻断亚硝胺合成的活性
Fig.13 Blocking rate of vitamin C against nitrosamine synthesis
100
80
60
40
20
0
水提物
醇提物
质量浓度 /(mg/mL)
0 2 4 6 8 10



/%
图12 火绒草提取物清除亚硝酸盐能力
Fig.12 Scavenging capacity of water and ethanol extracts from
Leontopodium leontopodioides against sodium nitrite
以VC为对照,测定火绒草水提物和醇提物对亚硝
酸铵的阻断率(图 11、12)。随着质量浓度的增加,VC、
火绒草水提物和醇提物对亚硝酸铵阻断率升高,V C、
火绒草醇提物和水提物对亚硝酸胺阻断率的 IC50分别为
159※基础研究 食品科学 2010, Vol. 31, No. 03
与开发, 2007, 28(7): 179-182.
[7] 余华, 汤修琴, 曹丽容. 天然植物成分体外模拟胃液清除亚硝酸钠
及阻断亚硝胺合成的研究[J]. 四川食品与发酵, 2005(2): 7-10.
[8] 曹炜, 索志荣. Folin-Ciocalteu比色法测定蜂蜜中总酚酸的含量[J].
食品与发酵工业, 2003, 29(12): 80-82.
[9] 李海云, 郝再彬, 李文兰, 等. 黄冬梅大孔树脂对鱼腥草总黄酮的吸
附分离及其抗氧化作用研究[J]. 食品研究与开发, 2008, 29(1): 47-
51.
[10] SHON M Y, CHOI S D, KAHNG G G, et al. Antimutagenic antioxidant
and free radical scavenging activity of ethyl acetate ex-tracts fromwhite,
yellowand red onions[J]. Food and Chemical Toxicology, 2004, 42:
659-666.
[11] CHANG Leewen, YEN Wenjye, HUANG Shiowchyn, et al. Antioxi-
dant activity of sesame coat[J].Food Chemistry, 2002, 78: 347-354.
[12] 豆海港, 陈文学, 仇厚援, 等. 花椒提取物抗氧化作用研究[J]. 食品
研究与开发, 2006, 27(7): 14-16.
[13] 杨方美, 王林, 胡秋辉. 鼠尾藻多糖的制备及其抗氧化活性[J]. 食品
科学, 2005, 26(2): 225.
[14] 陈美珍, 余杰, 龙梓洁, 等. 龙须菜多糖抗突变和清除自由基作用的
研究[J]. 食品科学, 2005, 26(7): 219-221.
[15] TSUDA T, WATANABE M, OHSHIMA K, et al. Antioxidant activity
of the anthocyanin pigments cyanidin3-O-β-D-gluco-side andcyanidin
[J]. Agric Food Chem, 1994, 42: 2407-2410.
[16] 严榕, 傅昌年, 周朝辉. 植物乳杆菌对亚硝酸根离子的清除作用[J].
食品工业, 2003(6): 40-41.
[17] 袁毅骅, 陈忻, 陈纯馨, 等. 柚皮提取物对亚硝化反应抑制作用的研
究[J]. 化学世界, 2004(1): 26-28
[18] 翁新楚, 任国谱. 天然抗氧化剂的筛选[J]. 中国粮油学报, 1998, 13
(4): 46-48
[19] SU J D, OSAWA T, NAMIKI M. Screening for antioxidative activity of
crude drugs[J]. Agric Boil Chem, 1986, 50(1): 199-203.
[20] 赵翾, 李红良, 赵琳. 陈皮中抗氧化成分的提取工艺研究[J]. 郑州工
程学院学报, 2003(1): 25-27.
[21] 吴永荣, 王潍洲. 绿茶中阻断亚硝胺合成的有效成分的分离鉴定[J].
卫生研究, 1993, 22(2): 157-161.
[22] 胡道道, 房喻. 生姜对亚硝胺合成的阻断作用初探[J]. 食品科学,
1989, 10(6): 35-38.
[23] 王美岭, 孙怀玉. 大蒜在体外抑制亚硝胺合成的研究[J]. 实用肿瘤
学杂志, 1990, 4(4): 26-29.
[24] 王建国, 曹淑娥. 大蒜在不同时期抑制亚硝胺合成的研究[J]. 营养
学报, 2002, 24(2): 185-186.
[25] 宁正祥, 张永华. 一些果蔬对活性自由基和亚硝酸盐的清除作用[J].
食品与发酵工业, 1992(2): 31-35.